GB7300.202—2019維生素D?油substanceshavingsimilareffect—VitaminD?oilyform國家市場監(jiān)督管理總局國家標準化管理委員會IGB7300.202—2019本部分為GB7300的第202部分。本部分按照GB/T1.1—2009給出的規(guī)則起草。本部分由中華人民共和國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部提出并歸口。本部分起草單位：中國農(nóng)業(yè)科學院農(nóng)業(yè)質(zhì)量標準與檢測技術(shù)研究所[國家飼料質(zhì)量監(jiān)督檢驗中心1GB7300.202—2019飼料添加劑第2部分：維生素及類維生素維生素D?油GB7300的本部分規(guī)定了飼料添加劑維生素D?油的要求、試驗方法、檢驗規(guī)則及標簽、包裝、運輸、貯存和保質(zhì)期。本部分適用于以羊毛脂膽固醇為起始原料經(jīng)化學合成的維生素D?樹脂油，溶于植物油中，并配以適量的抗氧化劑制得的飼料添加劑維生素D?油。2規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T601化學試劑標準滴定溶液的制備GB/T602化學試劑雜質(zhì)測定用標準溶液的制備GB/T603化學試劑試驗方法中所用制劑及制品的制備GB5009.227食品安全國家標準食品中過氧化值的測定GB5009.229—2016食品安全國家標準食品中酸價的測定GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法GB10648飼料標簽GB/T13079—2006飼料中總砷的測定3化學名稱、分子式、相對分子質(zhì)量和結(jié)構(gòu)式相對分子質(zhì)量：384.65(以C??H4O計，按2016年國際相對原子質(zhì)量表計算)結(jié)構(gòu)式：4.1產(chǎn)品規(guī)格不低于100萬IU/g,一個國際單位維生素D?相當于0.025μg。2GB7300.202—20194.2外觀和性狀技術(shù)指標應(yīng)符合表1規(guī)定。指標含量(以C?,H?O計，占標示量的百分數(shù))/%95.0～110酸值/(mg/g)過氧化值/(mmol/kg)重金屬(以Pb計)/(mg/kg)砷/(mg/kg)5試驗方法用水符合GB/T6682中一級用水規(guī)定，試劑和溶液的制備應(yīng)符合GB/T601、GB/T602和GB/T6035.1.4環(huán)己烷。5.1.5無水乙醇。5.1.7維生素D?對照品：≥98.0%。勻。該標準貯備溶液濃度為40000IU/mL,在-18℃~-20℃冰箱中保存，有效期12個月。5.1.9維生素D?標準工作溶液：準確吸取維生素D。標準貯備溶液(5.1.8)適量于50mL棕色容量瓶中，加溶劑(正相色譜用正己烷，反相色譜用無水乙醇)稀釋成濃度分別為100IU/mL、200IU/mL、800IU/mL、2000IU/mL、8000IU/mL的標準工作溶液a,在-18℃~-20℃冰箱中保存，有效期3個月。5.2.2超聲波水浴。GB7300.202—20195.4.1制備含量相當于400IU/mL顯示在(267±1)nm處呈現(xiàn)最大吸收峰。法測定，試樣溶液中維生素D?的色譜峰保留時間與標準工作溶液a(5.1.9)色譜峰保留時間一致。維生5.5維生素D?含量的測定試樣中維生素D?經(jīng)適量溶劑(正相色譜用正己烷，反相色譜用無水乙醇)溶解后，用液相色譜測的響應(yīng)值應(yīng)在工作曲線范圍內(nèi)。試樣中維生素D?的總量包括色譜峰中能檢測到的維生素D?的量以及由于溫度因素而轉(zhuǎn)化成預維生素D?的量。流動相：正己烷十正戊醇=996+4。流動相：甲醇十水=950+50。34GB7300.202—20195.5.2.3預維生素D?校正因子的測定準確移取1.00mL維生素D?標準貯備溶液(5.1.8)至100mL的三角瓶中，加入5.00mL正己烷(反相用無水乙醇)、10mg2,6-二叔丁基對甲酚(BHT),于90℃水浴中回流45min,取出冷卻，用正己烷(反相用無水乙醇)轉(zhuǎn)移至50mL棕色容量瓶中，稀釋定容至刻度，搖勻，得到標準工作溶液b。將標準工作溶液b按上述色譜條件進樣分析，至少做五個平行測定，得維生素D?峰面積的平均值A(chǔ)*和預維生素D?峰面積的平均值A(chǔ)pc,同樣將標準工作溶液a(5.1.9)直接進樣，得維生素D?峰面積A和預維生素D?峰面積Apre,預維生素D?校正因子f按式(1)計算：f=(A—A*)/(Apre—Apre)…(1)式中：A——標準工作溶液a中維生素D?峰面積；A*——標準工作溶液b中維生素D?峰面積的平均值；Apre——標準工作溶液b中預維生素D?峰面積的平均值；Apre——標準工作溶液a中預維生素D?峰面積。5.5.2.4定量測定按照色譜條件，維生素D?標準工作溶液及試樣溶液用液相色譜測定，得到色譜峰面積響應(yīng)值，用外標法定量。5.5.3結(jié)果計算試樣中維生素D?(C?,H?O)含量X?[國際單位每克(IU/g)],按式(2)計算：式中：……………f——預維生素D?校正因子；Aspre——試液中預維生素D?峰面積；A,——試液中維生素D?峰面積；V——試液稀釋倍數(shù)；C———維生素D?標準工作溶液a的濃度，單位為國際單位每毫升(IU/mL);m——試樣質(zhì)量，單位為克(g);Apre——標準工作溶液a中預維生素D?峰面積；A——標準工作溶液a中維生素D?峰面積。試樣中維生素D?(C7H?O)含量X?相當于標示量的質(zhì)量百分數(shù)X?按式(3)計算：……結(jié)果用平行測定的算術(shù)平均值表示，保留三位有效數(shù)字。5.5.4重復性在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果與其算術(shù)平均值的差值不大于這兩個測定值算術(shù)平均值的2.0%。5.6酸值的測定稱取試樣1.0g(精確至0.0001g),按照GB5009.229—2016第三法規(guī)定執(zhí)行。5GB7300.202—2019稱取試樣2.0g～5.0g(精確至0.0001g),按照GB5009.227規(guī)定執(zhí)行。5.8重金屬的測定5.8.1.4鉛標準溶液：1000μg/mL,稱取硝酸鉛0.1599g,置1000mL量瓶中，加硝酸5mL與水5.8.1.5氨水溶液(10%):取氨水40mL,加水適量使成100mL,搖勻(按GB/T603制備)。5.8.1.7鹽酸溶液IV:取鹽酸18mL,加水適量使成100mL,搖勻。5.8.1.8硫化鈉溶液：取硫化鈉100g,加水使溶解成1000mL。酸溶液IV(5.8.1.7)或氨水溶液(5.8.1.5)準確調(diào)節(jié)pH值至3.5(電位計指示),用水稀釋至100mL,另取制備試樣溶液的試劑硫酸(5.8.1.1)0.5mL～1水15mL,滴加氨水溶液(5.8.1.5)至對酚酞指示液(5.8.1.10)顯微紅色，加醋酸鹽緩沖液(5.8.1.9)6GB7300.202—20195.9砷的測定稱取試樣2.5g(精確到0.001g),按照GB/T13079—2006中第5章測定，樣品前處理按照GB/T13079—2006中5.4.1.3規(guī)定執(zhí)行。6檢驗規(guī)則將所取樣品充分混勻。型式檢驗項目為第4章的全部技術(shù)指標。產(chǎn)品正常生產(chǎn)時，每半年至少進行一次型式檢驗，但有下a)新產(chǎn)品投產(chǎn)時；d)出廠檢驗結(jié)果與上次型式檢驗結(jié)果有較大差異時；e)飼料管理部門提出進行型式檢驗要求時。6.5.1所檢項目檢測結(jié)果均與本部分規(guī)定指標一致判定為合格產(chǎn)品。按GB10648執(zhí)行，還應(yīng)注明有毒標記，并在使用說明中注明本品不能直接添加到飼料中7.2包裝本品采用內(nèi)襯環(huán)氧樹脂鐵桶或適當材料的避光密閉容器包裝。7GB7300.202—2019混運。貯存在通風、干燥、無污染、無有害物質(zhì)的地方，密閉、避光，開封的樣品應(yīng)盡快用完，開封后充氮保存。7.5保質(zhì)期符合規(guī)定的包裝、運輸和貯存條件下，保質(zhì)期為12個月。8GB7300.202—2019(資料性附錄)維生素D?色譜圖A.1維生素D?標準溶液正相色譜圖見圖A.1?！鮀AlD1B,Sig=254.16Ref=360.100(201308\DEFLC2013-08-2114-56-50\004-0101.D)圖A.1維生素D?標準溶液(濃度為400IU/mL)正相色譜圖A.2預維生素D?與維生素D?標準溶液正相色譜圖見圖A.2。圖A.2預維生素D?與