…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁(yè)，總=sectionpages22頁(yè)第=page11頁(yè)，總=sectionpages11頁(yè)2024年滬教版選擇性必修3生物下冊(cè)階段測(cè)試試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共6題，共12分)1、甲；乙、丙是三種微生物；下表I、Ⅱ、Ⅲ是用來(lái)培養(yǎng)微生物的三種培養(yǎng)基。甲、乙、丙都能在Ⅲ中正常生長(zhǎng)繁殖；甲能在I中正常生長(zhǎng)繁殖，而乙和丙都不能；乙能在Ⅱ中正常生長(zhǎng)繁殖，甲、丙都不能。下列說(shuō)法正確的是（）

。

粉狀硫。

10g

K2HPO4

4g

FeS04

0.5g

蔗糖。

10g

(NH4)2S04

0.4g

H20

100ml

MgS04

9.25g

CaCl2

0.5g

I

+

+

+

+

+

+

+

Ⅱ

+

+

+

+

+

+

+

Ⅲ

+

+

+

+

+

+

+

+

A.甲、乙、丙都是異養(yǎng)微生物B.甲、乙都是自養(yǎng)微生物，丙是異養(yǎng)微生物C.甲是異養(yǎng)微生物，乙是固氮微生物，丙是自養(yǎng)微生物D.甲是固氮微生物，乙是自養(yǎng)微生物，丙是異養(yǎng)微生物2、土壤農(nóng)桿菌含有一個(gè)大型的Ti質(zhì)粒（如下圖所示）；在侵染植物細(xì)胞的過(guò)程中，其中的T-DNA片段轉(zhuǎn)入植物的基因組。若想用基因工程并通過(guò)土壤農(nóng)桿菌向某種植物中導(dǎo)入抗旱基因，以下分析不合理的是（）

A.若用Ti質(zhì)粒作為抗旱基因的載體，目的基因的插入位置應(yīng)該在T-DNA片段內(nèi)，且要保證復(fù)制起始點(diǎn)和用于轉(zhuǎn)移T-DNA的基因片段不被破壞B.將重組Ti質(zhì)粒導(dǎo)入土壤農(nóng)桿菌中時(shí)，可以用Ca2+處理細(xì)菌C.用含有重組Ti質(zhì)粒的土壤農(nóng)桿菌去感染植物細(xì)胞，可以通過(guò)植物組織培養(yǎng)成具有抗旱基因的植物D.若能夠在植物細(xì)胞中檢測(cè)到抗旱目的基因，則說(shuō)明該基因工程項(xiàng)目獲得成功3、下列有關(guān)基因工程的敘述正確的是（）A.限制酶只存在于原核生物中，只能識(shí)別DNA分子的特定核苷酸序列B.只有同種限制酶切割的末端才能連接，不同限制酶切割的末端不能連接C.基因工程中，直接利用天然質(zhì)粒上的標(biāo)記基因進(jìn)行檢測(cè)目的基因是否表達(dá)D.動(dòng)植物病毒也可以作為基因工程的載體4、下列關(guān)于生物武器的說(shuō)法，錯(cuò)誤的是（）A.生物武器包括致病菌類，病毒類，生化毒劑類等B.利用炭疽桿菌制成的生物武器，具有傳染性強(qiáng)，死亡率高的特點(diǎn)C.中美兩國(guó)發(fā)布聯(lián)合聲明，重申在一般情況下不發(fā)展、不生產(chǎn)、不儲(chǔ)存生物武器D.徹底銷毀生物武器是世界上大多數(shù)國(guó)家的共識(shí)5、下表為培養(yǎng)某種微生物的培養(yǎng)基配方下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）。成分NaNO3K2HPO4KClMgSO4·7H2OFeSO4（CH2O）H2O青霉素含量3g1g0．5g0．5g0．01g30g1L0．1萬(wàn)單位

A.依物理性質(zhì)劃分，該培養(yǎng)基屬于液體培養(yǎng)基B.依用途劃分，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基C.培養(yǎng)基中的唯一碳源是（CH2O），唯一氮源是NaNO3D.若用該培養(yǎng)基培養(yǎng)分解纖維素細(xì)菌則應(yīng)除去（CH2O），僅添加纖維素就可以6、據(jù)下圖分析；下列有關(guān)基因工程的說(shuō)法不正確的是（）

A.能夠檢測(cè)到標(biāo)記基因表達(dá)產(chǎn)物的受體細(xì)胞中，也一定會(huì)有目的基因的表達(dá)產(chǎn)物B.限制酶、DNA連接酶的作用部位都是磷酸二酯鍵C.與啟動(dòng)子結(jié)合的應(yīng)該是RNA聚合酶D.為防止目的基因與質(zhì)粒任意結(jié)合而影響基因的表達(dá)，應(yīng)用限制酶Ⅰ、Ⅱ同時(shí)切割二者評(píng)卷人得分二、多選題(共8題，共16分)7、如表為不同動(dòng)物受精卵發(fā)育成胚胎進(jìn)入子宮的時(shí)間（小時(shí)）；依據(jù)題表分析正確的是（）

。動(dòng)物種類2細(xì)胞4細(xì)胞8細(xì)胞16細(xì)胞桑葚胚進(jìn)入子宮時(shí)受精卵的發(fā)育天數(shù)和發(fā)育階段小鼠24～3838～5050～6060～7068～803牛27～4244～6546～9096～120120～1444～5馬2430～3650～607298～1066A.小鼠胚胎進(jìn)入子宮時(shí)的發(fā)育程度比牛的高B.體外馬胚胎移植到子宮時(shí)選擇16細(xì)胞階段C.受精卵發(fā)育的階段順序?yàn)?-4-8-16-桑葚胚D.2-4-8-16細(xì)胞發(fā)育階段進(jìn)行的是有絲分裂8、運(yùn)用細(xì)胞工程技術(shù)獲得單克隆抗體時(shí)，必要的操作是（）A.對(duì)小動(dòng)物注射特定抗原B.融合并篩選雜交瘤細(xì)胞C.原代培養(yǎng)效應(yīng)B細(xì)胞D.將胰蛋白酶注入小動(dòng)物腹腔9、下列關(guān)于植物組織培養(yǎng)及其應(yīng)用的說(shuō)法中，正確的是（）A.植物體體內(nèi)具完整細(xì)胞結(jié)構(gòu)的活細(xì)胞均可作為組織培養(yǎng)的外植體B.不同培養(yǎng)階段的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素的比例應(yīng)不同C.單倍體育種和轉(zhuǎn)基因植物的培育需要利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)D.利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)可實(shí)現(xiàn)某些重要細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)10、驅(qū)蚊草含有香茅醛，能散發(fā)出一種特殊的檸檬型香氣，從而達(dá)到驅(qū)蚊且對(duì)人體無(wú)害的效果。驅(qū)蚊草是把天竺葵的原生質(zhì)體和香茅草的原生質(zhì)體進(jìn)行誘導(dǎo)融合培育而成的。下列關(guān)于驅(qū)蚊草培育的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.驅(qū)蚊草的培育屬于細(xì)胞工程育種，優(yōu)點(diǎn)是克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙B.驅(qū)蚊草培育過(guò)程要用到纖維素酶、果膠酶、PEG等試劑或電刺激等方法C.驅(qū)蚊草培育過(guò)程不同于植物組織培養(yǎng)，無(wú)細(xì)胞脫分化和再分化的過(guò)程D.驅(qū)蚊草培育利用了植物體細(xì)胞雜交技術(shù)，育種原理是基因突變11、下圖表示動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的基本流程。有關(guān)敘述正確的是（）

A.在C瓶中進(jìn)行的細(xì)胞培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)B.培養(yǎng)瓶D可以通過(guò)松蓋處理滿足細(xì)胞培養(yǎng)的氣體環(huán)境需要C.培養(yǎng)瓶D無(wú)需放置在CO2培養(yǎng)箱中，但需要保持恒溫D.D瓶細(xì)胞出現(xiàn)接觸抑制時(shí)，用胰蛋白酶處理，再用離心法收集細(xì)胞分瓶培養(yǎng)12、熔噴布是口罩生產(chǎn)的重要原料；主要成分是聚丙烯，其易降解程度是評(píng)價(jià)口罩合格性的重要指標(biāo)之一。某研究小組從土壤中分離出高效降解聚丙烯的細(xì)菌，部分流程如圖所示。下列說(shuō)法正確的是（）

A.②中的選擇培養(yǎng)基以聚丙烯為唯一碳源B.步驟③所用的接種工具是接種環(huán)C.在配制步驟②、③的培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)先調(diào)pH后高壓蒸汽滅菌D.對(duì)③中平板上的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)，可以計(jì)算出土壤浸出液中細(xì)菌的濃度13、大腸桿菌經(jīng)溶菌酶和洗滌劑處理后，擬核DNA就會(huì)纏繞在細(xì)胞壁碎片上，靜置一段時(shí)間，質(zhì)粒分布在上清液中，利用上述原理可初步獲得質(zhì)粒DNA。用三種限制酶處理提取的產(chǎn)物，電泳結(jié)果如圖所示。下列關(guān)于質(zhì)粒的粗提取和鑒定的敘述正確的是（）

A.提取DNA時(shí)可加入酒精，使溶于酒精的蛋白質(zhì)等物質(zhì)溶解B.將提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液后；可用二苯胺試劑進(jìn)行鑒定C.電泳鑒定DNA利用了DNA在電場(chǎng)中會(huì)向著它所帶電荷相反的電極移動(dòng)的原理D.根據(jù)電泳結(jié)果，質(zhì)粒上一定沒(méi)有限制酶Ⅰ和Ⅱ的切割位點(diǎn)，而有限制酶Ⅲ的切割位點(diǎn)14、相較于其他模型動(dòng)物（如小鼠和大鼠），兔的免疫系統(tǒng)可對(duì)更廣泛的抗原產(chǎn)生應(yīng)答且其較大的脾臟可產(chǎn)生更多抗體。除此之外，兔的單克隆抗體具有天然多樣性、高親和力和特異性、全新的表位識(shí)別、易于人源化（已成為將外源抗體轉(zhuǎn)化為有效安全的治療藥物的重要方式）等優(yōu)勢(shì)。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.利用人源化兔單克隆抗體進(jìn)行治療時(shí)，機(jī)體將會(huì)發(fā)生細(xì)胞免疫B.給兔子注射抗原后，兔子體內(nèi)的抗體只有很少一部分是單克隆抗體C.利用選擇培養(yǎng)基篩選的雜交瘤細(xì)胞具有能迅速大量增殖的能力D.體外培養(yǎng)特異性雜交瘤細(xì)胞時(shí)，需要給予95％的氧氣和5％的CO2評(píng)卷人得分三、填空題(共6題，共12分)15、______——“分子手術(shù)刀”16、轉(zhuǎn)化的概念：是______進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持______的過(guò)程。17、獲取目的基因的方法______、______、______18、請(qǐng)回答有關(guān)植物細(xì)胞工程的問(wèn)題：

（1）在植物中，一些分化的細(xì)胞，經(jīng)過(guò)________的誘導(dǎo)，可以脫分化失去其__________而轉(zhuǎn)變成未分化細(xì)胞。

（2）胡蘿卜的組織培養(yǎng)中，將接種后的胡蘿卜組織塊，放在恒溫_________（填：“光照”或“黑暗”）條件下培養(yǎng)。一段時(shí)間后，將生長(zhǎng)良好的愈傷組織轉(zhuǎn)接到_________培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)。

（3）在植物組織培養(yǎng)過(guò)程中，由于培養(yǎng)細(xì)胞一直處于不斷的分生狀態(tài)，因此容易受到__________的影響而產(chǎn)生突變。為篩選出具有抗鹽性狀的突變體，需將種子播種在含_____的培養(yǎng)基上，獲得所需個(gè)體。19、科學(xué)家采用定點(diǎn)誘變的方法構(gòu)建T4溶菌酶的新蛋白質(zhì)，發(fā)現(xiàn)其中一種新蛋白質(zhì)的第9和第164位氨基酸殘基被轉(zhuǎn)換為半胱氨酸殘基，并形成一個(gè)二硫鍵。這種新蛋白質(zhì)的熱穩(wěn)定性會(huì)有什么變化？這項(xiàng)技術(shù)的要點(diǎn)是什么？_________20、近年來(lái)，克隆技術(shù)的發(fā)展取得了巨大突破?在日常生活中，我們遇到過(guò)與克隆技術(shù)有關(guān)的問(wèn)題嗎？_____。評(píng)卷人得分四、實(shí)驗(yàn)題(共3題，共27分)21、學(xué)校開(kāi)展以“利用傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)制作食品”為主題的相關(guān)活動(dòng)。小余同學(xué)興致勃勃地回家；發(fā)現(xiàn)冰箱中可用的原材料有草莓；豆腐、白蘿卜、牛奶等。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)一般是指直接利用原材料中天然存在或前一次發(fā)酵保存下來(lái)的發(fā)酵物中的______進(jìn)行發(fā)酵；制作食品的技術(shù)。

（2）小余同學(xué)將草莓洗凈、切塊，裝入瓶中。加入原漿醋（經(jīng)糧食直接釀制，不經(jīng)勾兌）少許、白糖兩勺，置于保溫箱中，每隔一段時(shí)間擰開(kāi)瓶蓋換氣，兩周后得到草莓醋。小余同學(xué)加入原漿醋的目的是接種更多的______，加入糖并經(jīng)常開(kāi)蓋換氣的目的是保證______都充足。保溫箱溫度應(yīng)保持在______℃。

（3）小余同學(xué)還打算制作一些腐乳和蘿卜泡菜給住宿生作早餐。從豆腐到腐乳，多種微生物參與了豆腐的發(fā)酵，其中起主要作用的是_______，屬于______（填“真核”或“原核”）生物。豆腐中的成分也會(huì)發(fā)生一定的變化，其中蛋白質(zhì)被分解成______，脂肪被分解成______；用白蘿卜制作泡菜的過(guò)程中，能達(dá)到縮短腌制時(shí)間的操作有______（填下面的序號(hào)）。

①將白蘿卜切成小塊②用沸水短時(shí)間處理白蘿卜塊。

③添加陳泡菜汁④向容器中通入無(wú)菌空氣。

（4）小余同學(xué)欲從泡菜汁中分離制作酸奶的乳酸菌，首先對(duì)陳泡菜汁進(jìn)行過(guò)濾，然后取濾液用無(wú)菌水進(jìn)行充分______，再用涂布器接種到特定的______培養(yǎng)基中進(jìn)行初步篩選。22、豆豉是中國(guó)傳統(tǒng)特色發(fā)酵豆制品調(diào)味料。豆豉以黑豆或黃豆為主要原料；利用毛霉；曲霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶的作用，經(jīng)復(fù)雜工序制作而成。程序如下：黑豆→篩選→洗滌→浸泡→瀝干→蒸煮→冷卻→接種→制曲→洗豉→浸→拌鹽→發(fā)酵→晾干→成品（干豆豉）。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）蒸煮目的是_________，冷卻后再接種的原因是_____________。

（2）觀察發(fā)現(xiàn)發(fā)酵容器中上層豆類的發(fā)酵效果比底層的好，說(shuō)明該菌是________。

（3）制作過(guò)程中要加入適量的鹽，鹽能______________；避免變質(zhì)。

（4）從黑豆到豆豉。它的成分會(huì)發(fā)生一定的變化。其中最顯著的變化是________。

（5）豆豉制作過(guò)程中用到的菌種與課本上_________________________制作的菌種最接近，從細(xì)胞結(jié)構(gòu)看，它們屬于___________生物。23、嗜熱土壤芽孢桿菌產(chǎn)生的β-萄糖苷酶(BglB)是一種耐熱纖維素酶。為使其在工業(yè)生產(chǎn)中更好地應(yīng)用；開(kāi)展了以下實(shí)驗(yàn)。如圖為質(zhì)粒限制酶酶切圖譜，如表為幾種限制酶的識(shí)別序列及酶切位點(diǎn)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

(1)通常情況下，獲得的目的基因需要進(jìn)行擴(kuò)增，最簡(jiǎn)便的方法是_________技術(shù)。

(2)分析上圖，可選擇_______和_______兩種不同的限制酶切割質(zhì)粒，以防止質(zhì)粒自身環(huán)化。質(zhì)粒被切割后，可用_______將其與目的基因連接。在動(dòng)物基因工程中將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞時(shí)通常的方法是_______。

(3)大腸桿菌不能降解纖維素，但轉(zhuǎn)入上述建構(gòu)好的表達(dá)載體后則獲得了降解纖維素的能力，這是因?yàn)開(kāi)______。

(4)蛋白質(zhì)工程是二代基因工程，它的基本途徑是從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→_______→_______→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列。評(píng)卷人得分五、綜合題(共3題，共24分)24、λ噬菌體有極強(qiáng)的侵染能力；并能在細(xì)菌中快速地進(jìn)行DNA的復(fù)制，最終導(dǎo)致細(xì)菌破裂（稱為溶菌狀態(tài)），或者整合到細(xì)菌基因組中潛伏起來(lái)，不產(chǎn)生子代噬菌體（稱為溶原狀態(tài)）。在轉(zhuǎn)基因技術(shù)中常用λ噬菌體構(gòu)建基因克隆載體，使其在受體細(xì)菌中大量擴(kuò)增外源DNA，進(jìn)而構(gòu)建基因文庫(kù)，相關(guān)操作如下圖，請(qǐng)分析回答相關(guān)問(wèn)題：

（1）組裝噬菌體時(shí)，可被噬菌體蛋白質(zhì)包裝的DNA長(zhǎng)度約為36～51kb，則λgt10載體可插入的外源DNA的長(zhǎng)度范圍為_(kāi)___________________。

（2）λ噬菌體的溶菌狀態(tài)；溶原狀態(tài)各有用途?，F(xiàn)有一種imm434基因；該基因編碼一種阻止λ噬菌體進(jìn)入溶菌狀態(tài)的阻遏物。但如果直接插入該基因，會(huì)使載體過(guò)大而超過(guò)噬菌體蛋白質(zhì)的包裝能力，需要?jiǎng)h除λ噬菌體原有的一些序列。據(jù)圖分析下列問(wèn)題：

①如果需要獲得大量含目的基因的噬菌體，應(yīng)當(dāng)使λ噬菌體處于________狀態(tài)，相應(yīng)的改造措施是刪除λ噬菌體DNA中的________（填“左臂”“中部”或“右臂”）；

②如果需要目的基因在細(xì)菌中大量克隆，應(yīng)當(dāng)使λ噬菌體處于________狀態(tài)，相應(yīng)的改造措施是__________________________________________。25、自生固氮菌是土壤中能獨(dú)立固定空氣中N2的細(xì)菌；將玉米種子用自身固氮菌拌種后播種，可顯著提高產(chǎn)量并降低化肥的使用量?？蒲腥藛T進(jìn)行了土壤中自生固氮菌的分離和固氮能力測(cè)定的研究，部分實(shí)驗(yàn)流程如下圖。請(qǐng)回答：

(1)步驟③將土壤懸浮液稀釋了____________倍，步驟④所用的接種工具是____________。

(2)下表為兩種培養(yǎng)基的配方，步驟④應(yīng)選其中的____________培養(yǎng)基，并加入瓊脂后進(jìn)行高壓蒸汽滅菌、倒平板。純化培養(yǎng)時(shí)，需同時(shí)進(jìn)行未接種培養(yǎng)基的培養(yǎng)，目的是_______。

Ashby培養(yǎng)基：甘露醇（C6H14O6）10g，KH2PO40．2g，MgSO4·7H2O0．2g，NaCl0．2g，K2SO40．3g，CaCO35g；蒸餾水1000mL。

LB培養(yǎng)基：蛋白胨1g；酵母提取物5g，NaCl5g，蒸餾水1000mL，pH7．0-7．2

(3)將純化的固氮菌置于完全培養(yǎng)液中擴(kuò)大培養(yǎng)48小時(shí)；經(jīng)離心后收集下層細(xì)胞并轉(zhuǎn)移至特定培養(yǎng)基中進(jìn)行固氮能力的測(cè)定，篩選出固氮能力最強(qiáng)的菌種CM12為進(jìn)一步鑒定其固氮，科研人員選用發(fā)芽一致的玉米種子進(jìn)行3組盆栽實(shí)驗(yàn)，30d后測(cè)定土壤微生物有機(jī)氮含量，結(jié)果如下圖。

CK：對(duì)照處理組。

N：尿素處理組（每盆土壤中50mL有全營(yíng)養(yǎng)液：成份為在1000mL無(wú)氮植物營(yíng)養(yǎng)液中加入0．12g尿素）

CM12：自生固氮菌CM12處理組（每盆土壤澆50mL接種自身固氮菌的無(wú)氮植物營(yíng)養(yǎng)液）

①對(duì)照組（CK）的處理為_(kāi)___________。

②實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：____________

③自生固氮菌較共生固氮菌（如根瘤菌）的應(yīng)用范圍更廣，原因是____________。26、人β防御素（由H基因編碼）是一種抗菌肽；科研人員欲利用酵母對(duì)其進(jìn)行生產(chǎn)。

(1)獲得H基因的序列信息后，可以其cDNA為模板通過(guò)_____方法獲得該基因。

(2)由于人β防御素會(huì)損傷酵母細(xì)胞；組成型表達(dá)（持續(xù)表達(dá)）H的酵母菌最大種群數(shù)量偏低，限制了最終產(chǎn)量?？蒲腥藛T在酵母菌基因組DNA中插入Р和S基因，使質(zhì)粒上H基因的表達(dá)受到紅光控制。紅光調(diào)控H基因表達(dá)的原理如圖1所示。

P和S基因應(yīng)為_(kāi)____（填“組成型表達(dá)”或“紅光誘導(dǎo)表達(dá)”）。

(3)發(fā)酵后菌體和產(chǎn)物分離是發(fā)酵工藝的基本環(huán)節(jié)。定位于細(xì)胞表面的F蛋白可使酵母細(xì)胞彼此結(jié)合；進(jìn)而沉淀在發(fā)酵罐底部?？蒲腥藛T引入藍(lán)光激活系統(tǒng)（圖2），在酵母菌基因組中插入了2個(gè)E基因，使F基因的表達(dá)受到藍(lán)光控制（圖3）。

圖3中兩個(gè)E基因作用分別是_____。

(4)工程菌泄露到環(huán)境中可能引發(fā)環(huán)境問(wèn)題?？蒲腥藛T利用兩種阻遏蛋白基因（T和L）和調(diào)控元件；使酵母細(xì)胞在紅光和藍(lán)光同時(shí)照射時(shí)才激活致死基因N的表達(dá)，進(jìn)而誘導(dǎo)工程菌死亡（圖4）。

圖4中①②應(yīng)選用的啟動(dòng)子為：①_____，②_____。

A．JubB．ACTC．CYC

圖4中③④處結(jié)合的阻遏蛋白為：③_____，④_____。

a、T蛋白b；L蛋白。

(5)寫(xiě)出利用該工程菌發(fā)酵生產(chǎn)人β防御素的步驟。_____參考答案一、選擇題(共6題，共12分)1、D【分析】【分析】

根據(jù)表格分析；甲能在Ⅰ中正常生長(zhǎng)繁殖，而乙和丙都不能，而Ⅰ培養(yǎng)基缺氮，說(shuō)明甲能夠自身固氮，屬于固氮微生物；乙能在Ⅱ中正常生長(zhǎng)繁殖，而甲和丙都不能，Ⅱ培養(yǎng)基中沒(méi)有有機(jī)碳源，說(shuō)明乙能夠合成有機(jī)物，屬于自養(yǎng)微生物；而丙不能在Ⅰ培養(yǎng)基，說(shuō)明不能固氮；又不能在Ⅱ培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，說(shuō)明不能合成有機(jī)物，只能在Ⅲ培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，說(shuō)明屬于異養(yǎng)微生物。

【詳解】

根據(jù)以上分析已知，乙屬于自養(yǎng)微生物，A錯(cuò)誤；甲能夠在Ⅰ中正常生長(zhǎng)繁殖，但是不能在Ⅱ培養(yǎng)基中生長(zhǎng)繁殖，說(shuō)明其為異養(yǎng)微生物，B錯(cuò)誤；根據(jù)以上分析已知，丙屬于異養(yǎng)微生物，C錯(cuò)誤；根據(jù)以上分析已知，甲是固氮微生物，乙是自養(yǎng)微生物，丙是異養(yǎng)微生物，D正確。2、D【分析】【分析】

農(nóng)桿菌的特點(diǎn)是易感染雙子葉植物和裸子植物；對(duì)單子葉植物沒(méi)有感染力。農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并整合到受體細(xì)胞的染色體上。農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化過(guò)程：目的基因插入Ti質(zhì)粒的T-DNA→農(nóng)桿菌→導(dǎo)入植物細(xì)胞→目的基因整合到植物細(xì)胞染色體上→目的基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達(dá)。

【詳解】

A；土壤農(nóng)桿菌含有一個(gè)大型的Ti質(zhì)粒；在侵染植物細(xì)胞的過(guò)程中，其中的T-DNA片段可轉(zhuǎn)入植物的基因組，所以若用Ti質(zhì)粒作為抗旱基因的載體時(shí)，目的基因的插入位置應(yīng)該在T-DNA片段內(nèi)，且要保證復(fù)制起始點(diǎn)和用于轉(zhuǎn)移T-DNA的基因片段不被破壞，A正確；

B、將目的基因?qū)爰?xì)菌時(shí)，需要用Ca2+處理細(xì)菌；使其成為易于吸收周圍環(huán)境中DNA分子的感受態(tài)，B正確；

C；用含有重組Ti質(zhì)粒的土壤農(nóng)桿菌去感染植物細(xì)胞；使其具有抗旱基因，然后再通過(guò)植物組織培養(yǎng)技術(shù)將受體細(xì)胞培養(yǎng)成具有抗旱基因的植物，C正確；

D；能夠在植物細(xì)胞中檢測(cè)到抗旱目的基因；只能說(shuō)明目的基因?qū)氤晒Γ荒苷f(shuō)明該基因成功表達(dá)，即不能說(shuō)明該基因工程項(xiàng)目獲得成功，D錯(cuò)誤。

故選D。

【點(diǎn)睛】

本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生的識(shí)記能力和理解所學(xué)知識(shí)要點(diǎn)，把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系的能力；能從題文提取有效信息，并結(jié)合所學(xué)知識(shí)，對(duì)生物學(xué)問(wèn)題作出準(zhǔn)確判斷的能力。3、D【分析】【分析】

基因工程的工具：（1）限制酶：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列；并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。（2）DNA連接酶：連接的是兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵。（3）運(yùn)載體：常用的運(yùn)載體：質(zhì)粒；噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒。

【詳解】

A；限制酶大多來(lái)自于原核生物；只能識(shí)別DNA分子的特定核苷酸序列，A錯(cuò)誤；

B；不同限制酶切割的粘性末端相同也能連接；B錯(cuò)誤；

C；天然的質(zhì)粒不能直接作為載體；基因工程中用到的質(zhì)粒都是在天然質(zhì)粒的基礎(chǔ)上進(jìn)行過(guò)人工改造的；檢測(cè)目的基因是否表達(dá)出蛋白質(zhì)，可采用抗原一抗體雜交法，C錯(cuò)誤；

D；動(dòng)植物病毒也可以作為基因工程的載體；D正確。

故選D。4、C【分析】【分析】

生物武器種類：包括致病菌；病毒、生化毒劑；以及經(jīng)過(guò)基因重組的致病菌等。把這些病原體直接或者通過(guò)食物、生活必需品等散布到敵方，可以對(duì)軍隊(duì)和平民造成大規(guī)模殺傷后果。生物武器的特點(diǎn)：1、單位面積效應(yīng)大；2、有特定的傷害對(duì)象；3、具有傳染性；4、危害時(shí)間久；5、不易被發(fā)現(xiàn)和鑒定；6、使用者本身易受傷害；7、生物武器造價(jià)低，技術(shù)難度不大，隱秘性強(qiáng)，可以在任何地方研制和生產(chǎn)。

【詳解】

A；生物武器種類包括致病菌、病毒、生化毒劑；以及經(jīng)過(guò)基因重組的致病菌等，A正確；

B；利用炭疽桿菌制成的生物武器；具有傳染性強(qiáng)，死亡率高的特點(diǎn)，B正確；

C；1998年6月；中美兩國(guó)發(fā)布聯(lián)合聲明，重申在任何情況下不發(fā)展、不生產(chǎn)、不儲(chǔ)存生物武器，并反對(duì)生物武器及其技術(shù)和設(shè)備的擴(kuò)散，C錯(cuò)誤；

D；世界上愛(ài)好和平的人們是占多數(shù)的；徹底銷毀生物武器是世界上大多數(shù)國(guó)家的共識(shí)，D正確。

故選C。5、D【分析】【分析】

微生物的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)主要包括碳源；氮源、水和無(wú)機(jī)鹽等；有些微生物還需要特殊的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，如維生素、生長(zhǎng)因子等；培養(yǎng)基中含有瓊脂的一般為固體培養(yǎng)基；選擇培養(yǎng)基是指通過(guò)培養(yǎng)混合的微生物，僅得到或篩選出所需要的微生物，而其他不需要的種類在這種培養(yǎng)基上是不能生存的。

【詳解】

A、該培養(yǎng)基配方中沒(méi)有凝固劑瓊脂，依物理性質(zhì)劃分，該培養(yǎng)基屬于液體培養(yǎng)基，A正確；

B、該培養(yǎng)基配方中含有青霉素，依用途劃分，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基，B正確；

C、培養(yǎng)基中的唯一碳源是（CH2O），唯一氮源是NaNO3，C正確；

D、細(xì)菌對(duì)青霉素敏感，含青霉素的培養(yǎng)基不能培養(yǎng)細(xì)菌，因此用該培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌，則應(yīng)除去（CH2O）和青霉素，再添加纖維素，D錯(cuò)誤。

故選D。

【點(diǎn)睛】

本題主要考查培養(yǎng)基的相關(guān)知識(shí)，意在強(qiáng)化先是對(duì)培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的組成成分、培養(yǎng)基的分類等的識(shí)記、理解與掌握。6、A【分析】【分析】

基因表達(dá)載體的構(gòu)建：

1；過(guò)程：用限制酶切割目的基因和運(yùn)載體；再用DNA連接酶將目的基因和運(yùn)載體連接形成重組DNA分子。

2；目的：使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并且可以遺傳給下一代并表達(dá)和發(fā)揮作用。

3；基因表達(dá)載體的組成：目的基因+啟動(dòng)子+終止子+標(biāo)記基因。（1）啟動(dòng)子在基因的首段；它是RNA聚合酶的結(jié)合位點(diǎn)，能控制著轉(zhuǎn)錄的開(kāi)始；（2）終止子在基因的尾端，它控制著轉(zhuǎn)錄的結(jié)束；（3）標(biāo)記基因便于目的基因的鑒定和篩選。

【詳解】

A；重組DNA分子上的抗性基因（標(biāo)記基因）可用于目的基因的檢測(cè)與鑒定；但即使存在目的基因也不一定表達(dá)了相關(guān)產(chǎn)物，A錯(cuò)誤；

B；限制酶、DNA連接酶的作用部位都是磷酸二酯鍵；前者是切割磷酸二酯鍵，后者是連接磷酸二酯鍵，B正確；

C；啟動(dòng)子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段；是RNA聚合酶的結(jié)合位點(diǎn)，能啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄過(guò)程，C正確；

D；限制酶Ⅰ和酶Ⅱ識(shí)別的核苷酸序列不同；所以用限制酶Ⅰ和酶Ⅱ同時(shí)切割目的基因和質(zhì)?？煞乐苟呷我饨Y(jié)合，D正確。

故選A。二、多選題(共8題，共16分)7、A:C:D【分析】【分析】

分析表格：不同動(dòng)物胚胎發(fā)育的時(shí)間及進(jìn)入子宮的時(shí)間不同；小鼠在胚胎發(fā)育3天進(jìn)入子宮，牛在胚胎發(fā)育4-5天進(jìn)入子宮，馬在胚胎發(fā)育6天進(jìn)入子宮。

【詳解】

A；小鼠胚胎在發(fā)育3天進(jìn)入子宮；此時(shí)處于桑椹胚時(shí)期，牛在胚胎發(fā)育4-5天進(jìn)入子宮，此時(shí)處于16細(xì)胞時(shí)期，故小鼠胚胎進(jìn)入子宮時(shí)的發(fā)育程度比牛的高，A正確；

B；馬在胚胎發(fā)育6天進(jìn)入子宮；此時(shí)大概處于囊胚期，故體外馬胚胎移植到子宮時(shí)選擇囊胚期，B錯(cuò)誤；

C；由表格信息可知；受精卵發(fā)育的階段順序?yàn)?-4-8-16-桑椹胚-囊胚期，C正確；

D；2-4-8-16細(xì)胞發(fā)育階段進(jìn)行的是有絲分裂；不改變遺傳物質(zhì)，D正確。

故選ACD。8、A:B【分析】【分析】

在制備單克隆抗體的過(guò)程中；需要先對(duì)小鼠進(jìn)行特定抗原免疫，使機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)的漿細(xì)胞；在誘導(dǎo)細(xì)胞融合時(shí)，除了異種細(xì)胞融合外，還有同種細(xì)胞融合，因此需要在培養(yǎng)基中篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞；效應(yīng)B細(xì)胞不能分裂；在獲得能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞時(shí)，可以將其注入小鼠腹腔中，以備獲得大量的單克隆抗體。

【詳解】

A；在制備單克隆抗體的過(guò)程中；需要先對(duì)小鼠進(jìn)行特定抗原免疫，使機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)的漿細(xì)胞，A正確；

B；在誘導(dǎo)細(xì)胞融合時(shí)；除了異種細(xì)胞融合外，還有同種細(xì)胞融合，因此需要在培養(yǎng)基中篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞，B正確；

C；效應(yīng)B細(xì)胞不能分裂；C錯(cuò)誤；

D；在獲得能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞時(shí)；可以將其注入小鼠腹腔中，以備獲得大量的單克隆抗體，而不需要將胰蛋白酶注入小動(dòng)物腹腔，D錯(cuò)誤。

故選AB。9、A:B:C:D【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)：1；過(guò)程：離體的植物組織；器官或細(xì)胞（外植體）脫分化形成愈傷組織，再分化產(chǎn)生胚狀體，最好發(fā)育成植株（新植體）。決定植物脫分化和再分化的關(guān)鍵因素是植物激素的種類和比例，特別是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的協(xié)同作用在組織培養(yǎng)過(guò)程中非常重要。

2；原理：植物細(xì)胞的全能性。

3；應(yīng)用：植物繁殖的新途徑（快速繁殖優(yōu)良品種、作物脫毒、人工種子）、作物新品種的培育（單倍體育種和突變體的利用）、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。

【詳解】

A；用于培養(yǎng)的植物細(xì)胞必須具有完整的細(xì)胞核；以保證有全套的遺傳信息，因此植物體體內(nèi)具完整細(xì)胞結(jié)構(gòu)的活細(xì)胞均可作為組織培養(yǎng)的外植體，A正確；

B；脫分化過(guò)程和再分化過(guò)程所需的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素的比例應(yīng)不同；如生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素用量比值適中時(shí)，促進(jìn)愈傷組織的形成；生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素用量比值低時(shí)，有利于芽的形成；生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素用量比值高時(shí)，有利于根的形成，B正確；

C；單倍體育種和轉(zhuǎn)基因植物的培育都要經(jīng)歷細(xì)胞到植株的過(guò)程；因此都需要用到植物組織培養(yǎng)技術(shù)，C正確；

D；利用某些細(xì)胞能產(chǎn)生特定的產(chǎn)物；通過(guò)組織培養(yǎng)使細(xì)胞數(shù)量增加，進(jìn)而增加產(chǎn)量，實(shí)現(xiàn)工廠化生產(chǎn)，D正確。

故選ABCD。

【點(diǎn)睛】10、C:D【分析】【分析】

植物的體細(xì)胞雜交是將不同植物的細(xì)胞通過(guò)細(xì)胞融合技術(shù)形成雜種細(xì)胞；進(jìn)而利用植物的組織培養(yǎng)將雜種細(xì)胞培育成多倍體的雜種植株。在進(jìn)行植物體細(xì)胞雜交時(shí)需要使用纖維素酶和果膠酶去掉植物細(xì)胞的細(xì)胞壁，使用化學(xué)方法（聚乙二醇）或物理方法誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，不能用滅活的病毒誘導(dǎo)。可根據(jù)植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離和復(fù)原鑒定雜種細(xì)胞是否再生細(xì)胞壁，從而確定原生質(zhì)體融合是否完成。植物體細(xì)胞雜交的意義：在克服遠(yuǎn)源雜交不親和的障礙；培育作物新品種方面所取得的重大突破。

【詳解】

A；驅(qū)蚊草是把天竺葵的原生質(zhì)體和香茅草的原生質(zhì)體進(jìn)行誘導(dǎo)融合培育而成的；采用了植物體細(xì)胞雜交技術(shù)，屬于細(xì)胞工程育種，其優(yōu)點(diǎn)是能克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，A正確；

B；要獲得天竺葵的原生質(zhì)體和香茅草的原生質(zhì)體；需要采用酶解法（纖維素酶、果膠酶），誘導(dǎo)天竺葵的原生質(zhì)體和香茅草的原生質(zhì)體的融合可采用化學(xué)法（PEG等試劑）或物理法（電刺激等），B正確；

C；驅(qū)蚊草培育過(guò)程不同于植物組織培養(yǎng)；但需要采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，因此有細(xì)胞脫分化和再分化的過(guò)程，C錯(cuò)誤；

D；驅(qū)蚊草培育利用了植物體細(xì)胞雜交技術(shù)；育種原理是染色體數(shù)目變異，D錯(cuò)誤。

故選CD。11、A:B:D【分析】【分析】

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程：取動(dòng)物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個(gè)細(xì)胞；制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

【詳解】

A；將動(dòng)物組織分散為單個(gè)細(xì)胞制成細(xì)胞懸液中進(jìn)行的第一次培養(yǎng)為原代培養(yǎng)；因此在C瓶中進(jìn)行的細(xì)胞培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)，A正確；

BC、進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣和5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)，以滿足細(xì)胞培養(yǎng)的氣體環(huán)境需要，其中氧氣是細(xì)胞呼吸必需的，CO2是為了維持培養(yǎng)液的pH；B正確；C錯(cuò)誤；

D；D瓶細(xì)胞出現(xiàn)接觸抑制時(shí)；應(yīng)用胰蛋白酶處理使其分散為單個(gè)細(xì)胞，再用離心法收集細(xì)胞分瓶以進(jìn)行傳代培養(yǎng)，D正確。

故選ABD。12、A:C【分析】【分析】

微生物常見(jiàn)的接種的方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在劃線的開(kāi)始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

【詳解】

A；根據(jù)題意；熔噴布是口罩生產(chǎn)的重要原料，主要成分是聚丙烯，本實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖呛Y選出可以高效降解一次性口罩的細(xì)菌，②中的選擇培養(yǎng)基要以聚丙烯為唯一碳源，A正確；

B；步驟③接種方法為稀釋涂布平板法；接種工具為涂布器，B錯(cuò)誤；

C；在配制步驟②、③的培養(yǎng)基時(shí)；為避免雜菌污染，應(yīng)先調(diào)pH值后再進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，C正確；

D；對(duì)③中平板上的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)；可以計(jì)算出土壤浸出液中細(xì)高效降解聚丙烯的細(xì)菌的濃度，D錯(cuò)誤。

故選AC。13、A:B:C【分析】【分析】

DNA的粗提取和鑒定：利用DNA不溶于酒精；某些蛋白質(zhì)溶于酒精，以及DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，可以將DNA與蛋白質(zhì)分離開(kāi)；在一定溫度下，DNA遇二苯胺試劑會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色，因此二苯胺試劑可以作為鑒定DNA的試劑。

【詳解】

A；DNA在冷酒精中溶解度很低；提取DNA時(shí)可加入酒精，是為了讓DNA析出，蛋白質(zhì)等物質(zhì)溶解，A正確；

B；將提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液后；可用二苯胺試劑在沸水條件進(jìn)行鑒定，DNA遇二苯胺試劑會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色，B正確；

C；DNA帶負(fù)電；電泳鑒定DNA利用了DNA在電場(chǎng)中會(huì)向著它所帶電荷相反的電極移動(dòng)的原理，C正確；

D；因?yàn)橘|(zhì)粒的本質(zhì)是環(huán)狀的DNA；限制酶Ⅰ和Ⅱ處理后電泳只有一條條帶，可能是該質(zhì)粒上有一個(gè)切割位點(diǎn)，也可能沒(méi)有切割位點(diǎn)，D錯(cuò)誤。

故選ABC。14、A:B:D【分析】【分析】

單克隆抗體的制備（1）單克隆抗體制備的原理包括：①免疫原理：B淋巴細(xì)胞能產(chǎn)生特異性抗體。②細(xì)胞融合原理：利用病毒對(duì)宿主細(xì)胞的穿透性使B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合。③動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)：對(duì)雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行體內(nèi)；體外培養(yǎng)。（2）單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)；之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

【詳解】

A；抗體參與的是體液免疫；A錯(cuò)誤；

B；單克隆抗體是由特異性雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的；B錯(cuò)誤；

C；雜交瘤細(xì)胞具有能迅速大量增殖的能力；C正確；

D、體外培養(yǎng)特異性雜交瘤細(xì)胞時(shí)，需要給予95％的空氣和5％的CO2，D錯(cuò)誤。

故選ABD。三、填空題(共6題，共12分)15、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】目的基因穩(wěn)定和表達(dá)17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】基因文庫(kù)人工合成PCR技術(shù)18、略

【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)的條件：①細(xì)胞離體和適宜的外界條件（如適宜溫度；適時(shí)的光照、pH和無(wú)菌環(huán)境等）；②一定的營(yíng)養(yǎng)（無(wú)機(jī)、有機(jī)成分）和植物激素（生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素）。決定植物脫分化和再分化的關(guān)鍵因素是植物激素的種類和比例；特別是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的協(xié)同作用在組織培養(yǎng)過(guò)程中非常重要，被稱為“激素杠桿”。

【詳解】

（1）在植物中；一些分化的細(xì)胞，經(jīng)過(guò)激素的誘導(dǎo)，可以脫分化失去其特有的結(jié)構(gòu)和功能而轉(zhuǎn)變成未分化細(xì)胞。

（2）胡蘿卜的組織培養(yǎng)中；將接種后的胡蘿卜組織塊，放在恒溫黑暗條件下培養(yǎng)。一段時(shí)間后，將生長(zhǎng)良好的愈傷組織轉(zhuǎn)接到分化培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)。

（3）在植物組織培養(yǎng)過(guò)程中；由于培養(yǎng)細(xì)胞一直處于不斷的分生狀態(tài)，因此容易受到培養(yǎng)條件和外界壓力的影響而產(chǎn)生突變。為篩選出具有抗鹽性狀的突變體，需將種子播種在含一定濃度的鹽的培養(yǎng)基上，獲得所需個(gè)體。

【點(diǎn)睛】

本題考查植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記植物組織培養(yǎng)的過(guò)程、原理及條件，掌握植物組織培養(yǎng)技術(shù)的相關(guān)應(yīng)用，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確分析，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查?！窘馕觥竣?激素②.特有的結(jié)構(gòu)和功能③.黑暗④.分化⑤.培養(yǎng)條件和外界壓力⑥.一定濃度的鹽19、略

【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)形成二硫鍵，使蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)更加穩(wěn)定，因此T4溶菌酶的熱穩(wěn)定性會(huì)提高。這項(xiàng)技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程技術(shù)，其步驟為從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需的蛋白質(zhì)?！窘馕觥繒?huì)提高T4溶菌酶的耐熱性。這項(xiàng)技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程技術(shù)，該技術(shù)的要點(diǎn)是從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需的蛋白質(zhì)。20、略

【分析】【詳解】

在日常生活中；我們遇到過(guò)的與克隆技術(shù)有關(guān)的問(wèn)題有：

①瀕臨滅絕動(dòng)物的克?。嚎寺】梢哉葹l危的國(guó)家保護(hù)動(dòng)物以及植物；我們可運(yùn)用克隆，復(fù)制瀕臨滅絕的生物，讓其不至于在我們的生活中消失；

②農(nóng)業(yè)克隆：應(yīng)用于農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域；通過(guò)轉(zhuǎn)基因的方式，增加糧食的畝產(chǎn)量，提高土地的單位出產(chǎn)量；

③細(xì)胞克隆替代或者修復(fù)人體細(xì)胞問(wèn)題；比如胚胎干細(xì)胞；

④畜牧業(yè)克隆：應(yīng)用于畜牧業(yè)，提升優(yōu)良品種群體基數(shù)，縮短畜牧育種年限。【解析】有，比如：①瀕臨滅絕動(dòng)物的克?。虎谵r(nóng)業(yè)克?。簯?yīng)用于農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域，通過(guò)轉(zhuǎn)基因的方式，增加糧食的畝產(chǎn)量，提高土地的單位出產(chǎn)量；③細(xì)胞克隆替代或者修復(fù)人體細(xì)胞問(wèn)題，比如胚胎干細(xì)胞；④畜牧業(yè)克隆：應(yīng)用于畜牧業(yè)，提升優(yōu)良品種群體基數(shù)，縮短畜牧育種年限。四、實(shí)驗(yàn)題(共3題，共27分)21、略

【分析】【分析】

醋酸菌是好氧性細(xì)菌；當(dāng)缺少糖源和有氧條件下，可將乙醇（酒精）氧化成醋酸；當(dāng)氧氣；糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸。當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿?。腐乳的制作利用的微生物主要是毛霉，多種微生物參與了豆腐的發(fā)酵，如青霉、酵母、曲霉、毛霉等，其中起主要作用的是毛霉，毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸，這些小分子物質(zhì)有利于人體的消化和吸收。

【詳解】

（1）傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)一般是指直接利用原材料中天然存在或前一次發(fā)酵保存下來(lái)的發(fā)酵物中的微生物進(jìn)行發(fā)酵；制作食品的技術(shù)；一般不需要嚴(yán)格滅菌。

（2）原漿醋中含有發(fā)酵產(chǎn)生醋酸的醋酸菌；加入原漿醋的目的是接種更多的醋酸菌，加入糖并經(jīng)常開(kāi)蓋換氣的目的是保證糖源；氧氣都充足，當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸。醋酸菌適宜的發(fā)酵溫度為30~35℃，故保溫箱溫度應(yīng)保持在30~35℃。

（3）腐乳的制作利用的微生物主要是毛霉；毛霉屬于真核生物，毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸，這些小分子物質(zhì)有利于人體的消化和吸收。①將白蘿卜切成小塊可以擴(kuò)大白蘿卜與腌料的接觸面積，縮短腌制時(shí)間，①正確；②用沸水短時(shí)處理，可抑制某些微生物的繁殖，提高泡菜品質(zhì)，也可縮短腌制時(shí)間，②正確；③泡菜汁中含有一定量的發(fā)酵菌種，所以在腌制過(guò)程中，加入一些已經(jīng)腌制過(guò)泡菜汁可縮短腌制時(shí)間，③正確；④泡菜制作所需菌種為乳酸菌，制作過(guò)程中應(yīng)保持無(wú)氧環(huán)境，向容器中通入無(wú)菌空氣不利于腌制，④錯(cuò)誤；綜上分析，①②③操作能達(dá)到縮短腌制時(shí)間。

（4）從泡菜汁中可分離制作酸奶的乳酸菌；首先對(duì)經(jīng)多次發(fā)酵的泡菜汁進(jìn)行過(guò)濾，然后取濾液用無(wú)菌水進(jìn)行稀釋，再用涂布分離的方法在特定的熱選擇培養(yǎng)基中進(jìn)行初步篩選乳酸菌。

【點(diǎn)睛】

本題考查傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用，意在考查考生對(duì)發(fā)酵原理、發(fā)酵過(guò)程的識(shí)記和應(yīng)用能力。【解析】微生物醋酸菌糖源、氧氣30~35毛霉真核小分子肽和氨基酸甘油和脂肪酸①②③稀釋選擇22、略

【分析】豆豉的制作原理與腐乳的制作類似：起主要作用的是真菌中的毛霉；適宜溫度為15℃～18℃；毛霉能夠產(chǎn)生蛋白酶和脂肪酶，將蛋白質(zhì)和脂肪分別水解成小分子的肽和氨基酸；甘油和脂肪酸。

【詳解】

（1）黃豆煮熟的目的主要破壞黃豆內(nèi)部結(jié)構(gòu)；使蛋白質(zhì)變性，淀粉達(dá)到糊化程度，易于水解，同時(shí)可起到滅菌的作用，冷卻后再接種的原因是防止高溫殺死菌種；

（2）發(fā)酵裝置的上層含氧量比較高；發(fā)酵裝置內(nèi)上層黃豆的發(fā)酵效果比底層好，說(shuō)明該發(fā)酵菌是需氧菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型；

（3）鹽能抑制微生物生長(zhǎng)所以制作豆豉過(guò)程中要加入適量的鹽；避免變質(zhì)；

（4）大豆到豆豉的過(guò)程中；主要利用毛霉；曲霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶的作用，所以其中最顯著的變化是蛋白質(zhì)被蛋白酶分解成小分子肽和氨基酸；

（5）腐乳的制作過(guò)程也是利用了毛霉；曲霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶的作用；毛霉、曲霉等微生物都是真核生物。

【點(diǎn)睛】

本題考查了豆豉制作的相關(guān)知識(shí)，要求考生能夠識(shí)記豆豉制作的原理；能夠利用酶的專一性解答蛋白酶和脂肪酶作用的產(chǎn)物是解答本題的關(guān)鍵?！窘馕觥科茐拇蠖箖?nèi)部分子結(jié)構(gòu)，使蛋白質(zhì)適度變性，淀粉達(dá)到糊化程度，易于水解，同時(shí)可起到滅菌的作用防止高溫殺死菌種好氧菌抑制微生物生長(zhǎng)蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)變成氨基酸和肽。腐乳真核23、略

【分析】【分析】

1；基因工程的基本操作過(guò)程主要包括四個(gè)步驟：目的基因的獲??；基因表達(dá)載體的構(gòu)建；將目的基因?qū)耸荏w細(xì)胞；目的基因的檢測(cè)與鑒定。（1）目的基因的獲取方法目的基因的獲取方法主要有從自然界已有的物種中分離出來(lái)（如鳥(niǎo)槍法從基因文庫(kù)或cDNA文庫(kù)中獲?。?、人工合成（常用的方法有化學(xué)合成法和反轉(zhuǎn)錄法）、PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因。（2）構(gòu)建基因表達(dá)載體；需分別用限制酶切割目的基因和質(zhì)粒，用限制酶切割質(zhì)粒時(shí)，選擇的限制酶不可以破壞質(zhì)粒上的標(biāo)記基因和復(fù)制原點(diǎn)、啟動(dòng)子、終止子等必須的結(jié)構(gòu)。用DNA連接酶連接，構(gòu)成重組質(zhì)粒。（3）將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞常用顯微注射法：將含有目的基因的表達(dá)載體提純→從雌性動(dòng)物體內(nèi)取出卵（可在體外受精，也可在體內(nèi)受精）→采用顯微注射儀進(jìn)行顯微注射→將注射了目的基因的受精卵經(jīng)胚胎早期培養(yǎng)一段時(shí)間后，移植到雌性動(dòng)物的輸卵管或子宮內(nèi)，使其發(fā)育成為具有新性狀的動(dòng)物。

2；蛋白質(zhì)工程的基本途徑是從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列。

【詳解】

（1）獲取目的基因的方法主要有三種；最簡(jiǎn)便的是PCR技術(shù)。

（2）用限制酶切割質(zhì)粒時(shí)；選擇的限制酶不可以破壞質(zhì)粒上的標(biāo)記基因和復(fù)制原點(diǎn)；啟動(dòng)子、終止子等必須的結(jié)構(gòu)，由圖可知可選用NdeⅠ、BamHⅠ兩種限制酶切割質(zhì)粒。用DNA連接酶將切割后的質(zhì)粒與目的基因連接。在動(dòng)物基因工程中將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞時(shí)通常的方法是顯微注射法。

（3）上述建構(gòu)好的表達(dá)載體含有能夠表達(dá)β-萄糖苷酶(BglB)的基因；轉(zhuǎn)基因大腸桿菌能夠分泌出有活性的β-萄糖苷酶，所以能夠降解纖維素。

（4）蛋白質(zhì)工程的基本途徑是從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列?！窘馕觥?1)PCR

(2)NdeⅠBamHⅠDNA連接酶顯微注射法。

(3)轉(zhuǎn)基因的大腸桿菌分泌出有活性的BglB酶。

(4)設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列五、綜合題(共3題，共24分)24、略

【分析】【分析】

噬菌體屬于病毒；病毒的繁殖過(guò)程為：吸附→注入→合成→組裝→釋放等五個(gè)步驟。在吸附過(guò)程中，DNA分子注入細(xì)菌體內(nèi)，而蛋白質(zhì)外殼留在外面。

【詳解】

（1）人工改造后的λgt10載體的長(zhǎng)度是43.4kb，而可被噬菌體蛋白質(zhì)包裝的DNA長(zhǎng)度約為36～51kb，因此λgt10載體可插入的外源DNA的最大長(zhǎng)度是51－43.4＝7.6kb，故長(zhǎng)度范圍為0～7.6kb。

（2）如果需要獲得大量含目的基因的噬菌體；應(yīng)當(dāng)使λ噬菌體處于溶菌狀態(tài)，則應(yīng)刪除λ噬菌體的DNA中含控制溶原生長(zhǎng)的序列，即中部；如果需要目的基因在細(xì)菌中大量克隆，應(yīng)當(dāng)使λ噬菌體處于溶原狀態(tài)，則應(yīng)刪除λ噬菌體的DNA中含編碼蛋白質(zhì)外殼序列，即刪除λ噬菌體DNA中的左臂，并插入imm434基因。

【點(diǎn)睛】

本題綜合考查基因工程和DNA是主要