霍亂病原菌檢測(cè)標(biāo)本的

采集方法、運(yùn)輸和保存重慶市南岸CDC：一、標(biāo)本的采集和送檢

（一）標(biāo)本采集和送檢的要求標(biāo)本采集是否規(guī)范，能從很大程度上影響檢驗(yàn)工作的質(zhì)量。標(biāo)本采集應(yīng)由受過專門培訓(xùn)的人員來執(zhí)行，同時(shí)注意生物安全防護(hù)，防止樣品污染、交叉污染和自身感染。標(biāo)本應(yīng)有唯一編號(hào)作為唯一性標(biāo)識(shí)。標(biāo)本在采集后應(yīng)立即放入冷藏箱中，注意勿使標(biāo)本局部冷凍，并盡快送往實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行分離培養(yǎng)。（二）標(biāo)本種類及其采樣方法病人標(biāo)本應(yīng)盡可能采集糞便。根據(jù)調(diào)查需要以及標(biāo)本的可及性，如下標(biāo)本也作為檢材：病人嘔吐物、尸體腸內(nèi)容物、糞便污染衣物及相關(guān)物體表面如地面、水體、食品、水生動(dòng)物、蒼蠅等，但根據(jù)實(shí)際情況，也不限于這些標(biāo)本。標(biāo)本轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基配方見附件3“常用的標(biāo)本保存液和細(xì)菌培養(yǎng)基”。4如病人不能自然排出大便、可使用肛拭或肛門采便管采集。用棉拭子（用于PCR檢測(cè)的標(biāo)本，不要使用棉拭子而應(yīng)使用滅菌人造纖維拭子或塑料棒采集）或肛門采便管先在滅菌生理鹽水中蘸濕后（棉拭子貼管壁擠出多余的液體），由肛門插入直腸內(nèi)3cm～5cm（幼兒約2cm～3cm）處，旋轉(zhuǎn)360°，自肛管內(nèi)壁表面拭取采集。應(yīng)注意棉拭子大小是否適宜、光滑、結(jié)實(shí)且不易脫落。然后立即置于冷藏箱內(nèi)，送往實(shí)驗(yàn)室。肛拭子標(biāo)本如不能在2h內(nèi)送達(dá)實(shí)驗(yàn)室，應(yīng)插入Cary-Blair運(yùn)送培養(yǎng)基運(yùn)送，注意培養(yǎng)基應(yīng)埋住糞便拭子，手接觸的部分在管口折斷棄去。糞便標(biāo)本如果運(yùn)送時(shí)間不超過24h，還可將其放在堿性蛋白胨水中室溫運(yùn)送。標(biāo)本與堿性蛋白胨水的比例為8mL～10mL堿性蛋白胨水可加入1mL～3mL液體便或指甲大小的成形便。過多的糞便量會(huì)降低保存液的pH值。如果沒有合適采便器材以及沒有運(yùn)送培養(yǎng)基時(shí)，可用無菌吸水紙條浸于液體糞便中，然后將吸水紙條密封于塑料袋中，放入冷藏箱中運(yùn)往實(shí)驗(yàn)室。2.病人嘔吐物用無菌壓舌板或棉拭子挑取少量嘔吐物作為檢材，放入滅菌塑料管、自封塑料袋或滅菌帶蓋瓶中，密封。立即置于冷藏箱內(nèi)，送往實(shí)驗(yàn)室.3.水體包括河口水、江河水、溝渠水、池塘水、湖水、井水、港灣海水、鄉(xiāng)鎮(zhèn)自來水廠源水、醫(yī)院污水排放口、下水道排放口、海水產(chǎn)品養(yǎng)殖水、海水產(chǎn)品交易市場(chǎng)的出水口等。需要時(shí)也可采集水體的底泥作為檢材。4.食品針對(duì)不同的可疑食品，采集整體或部分標(biāo)本，帶至實(shí)驗(yàn)室。注意采集過程中不同食品及不同部位不能交叉污染。5.海水產(chǎn)品選取活海水產(chǎn)品或涂抹拭子，置于塑料袋內(nèi)（拭子標(biāo)本可按糞便拭子保存運(yùn)輸方法處置），盡快送往實(shí)驗(yàn)室。如在一箱甲魚中可采取數(shù)只甲魚的體表作為一個(gè)標(biāo)本送檢，這比只做一只甲魚體內(nèi)檢查其陽性檢出機(jī)會(huì)可能更多?；魜y監(jiān)測(cè)時(shí)，海水產(chǎn)品常作為重點(diǎn)采集監(jiān)測(cè)的對(duì)象。注意采集過程中不同食品及不同部位不能交叉污染。6.物體表面標(biāo)本用滅菌棉拭蘸以堿性蛋白胨水涂擦沾染糞便的衣物表面、食物操作臺(tái)、砧板等等相關(guān)物體或懷疑污染物體表面，放入到堿性蛋白胨水中，密封，常溫下運(yùn)往實(shí)驗(yàn)室。7.蒼蠅標(biāo)本在每個(gè)采樣點(diǎn)以10～15只蒼蠅作為一份標(biāo)本放入自封袋或試管中，密封，置于冷藏箱中送實(shí)驗(yàn)室。生物安全的要求霍亂屬于腸道傳染病，對(duì)實(shí)驗(yàn)室操作以及樣品采集等方面的生物安全應(yīng)按照腸道感染細(xì)菌性疾病的通用生物安全要求。另外，霍亂在我國(guó)屬于傳染病法規(guī)定的甲類報(bào)告管理傳染病，在衛(wèi)生部《人間傳染的病原微生物名錄》（2006年）中，霍亂弧菌流行株危害程度為第二類，屬于高致病性微生物級(jí)別（非流行株危害程度為第三類），要求在生物安全I(xiàn)I級(jí)實(shí)驗(yàn)室（BSL-2）操作病原體。運(yùn)輸箱附表2霍