第1課時(shí)

微生物的培養(yǎng)和利用一輪復(fù)習(xí)

發(fā)酵工程考點(diǎn)一

微生物的培養(yǎng)需要適宜條件一、發(fā)酵工程與微生物1.發(fā)酵工程：是采用______________手段，利用微生物的某些__________，為人類生產(chǎn)有用的產(chǎn)品，或直接利用微生物的工作過程。2.微生物：是人們對所有__________、____________的生物的統(tǒng)稱?，F(xiàn)代工程技術(shù)特定功能形體微小肉眼不可見生理學(xué)上的”發(fā)酵”含義：細(xì)胞的厭氧呼吸工業(yè)上的”發(fā)酵”含義：是指人們利用微生物，在適宜的條件下，將原料通過微生物的代謝轉(zhuǎn)化為人類所需要的產(chǎn)物。2）現(xiàn)代發(fā)酵工程：1）傳統(tǒng)發(fā)酵：釀酒、釀醋、釀醬油利用基因改造的酵母菌生產(chǎn)青蒿素前體、人胰島素二、培養(yǎng)基為目標(biāo)微生物提供適宜的生長環(huán)境1.培養(yǎng)基定義：人們?yōu)闈M足微生物__________或積累__________的需求而配制的混合養(yǎng)料。2.培養(yǎng)基成分：水、________、氮源和______，某些需要__________（特定的維生素、________、嘌呤和嘧啶等有機(jī)化合物）。生長繁殖代謝產(chǎn)物無機(jī)鹽碳源生長因子氨基酸成分作用主要來源碳源氮源N2，NH3，銨鹽，硝酸鹽，尿素，牛肉膏，蛋白胨無機(jī)鹽NaCl、CaCl2水作為溶劑生長因子有特殊需求，調(diào)節(jié)促生長自養(yǎng)微生物異養(yǎng)微生物固氮菌硝化細(xì)菌①能量來源②合成有機(jī)物①影響微生物吸水能力②影響微生物代謝及生長①合成含N化合物，如蛋白質(zhì)、核酸②提供能量無機(jī)碳(CO2)或有機(jī)碳(糖類)特定維生素，氨基酸，嘌呤和嘧啶（堿基）二、培養(yǎng)基為目標(biāo)微生物提供適宜的生長環(huán)境1.培養(yǎng)基定義：人們?yōu)闈M足微生物__________或積累__________的需求而配制的混合養(yǎng)料。2.培養(yǎng)基成分：水、________、氮源和______，某些需要__________（特定的維生素、________、嘌呤和嘧啶等有機(jī)化合物）。生長繁殖代謝產(chǎn)物無機(jī)鹽碳源生長因子氨基酸3.培養(yǎng)基的理化性質(zhì)

喜素中性偏堿中性偏酸厭氧微生物？加液體石蠟5.培養(yǎng)基具體案例（1）細(xì)菌培養(yǎng)基：常用蛋白胨和____________等來配制。（2）霉菌培養(yǎng)基：一般用可溶性淀粉加無機(jī)物配制或用添加______的豆芽汁來配制。酵母提取物蔗糖細(xì)菌喜葷（蛋白質(zhì)：較高的有機(jī)氮）霉菌喜素（糖類）可溶性淀粉+無機(jī)物細(xì)菌偏堿（中性偏堿）霉菌偏酸（中性偏酸）4.培養(yǎng)基的分類液體微生物的運(yùn)動活菌計(jì)數(shù)天然合成抑制或阻止鑒別選擇培養(yǎng)基+青霉素具有抗青霉素能力的菌落三、滅菌和無菌操作技術(shù)可以排除非目標(biāo)微生物的干擾（1）目的：獲得______的微生物培養(yǎng)物。（2）關(guān)鍵：防止______污染。純凈雜菌：條件強(qiáng)烈，能殺死微生物繁殖體和芽孢等全部微生物。：條件較溫和，能殺死微生物的繁殖體，但不能殺死芽孢等全部微生物。如：煮沸消毒、酒精消毒、巴氏消毒法如：灼燒滅菌法、干熱滅菌法、高壓蒸汽滅菌法、過濾滅菌法消毒滅菌三、滅菌和無菌操作技術(shù)可以排除非目標(biāo)微生物的干擾

較溫和

（4）滅菌①定義：采用強(qiáng)烈的物理、化學(xué)方法殺滅物體表面以及內(nèi)部的一切微生物的方法，包括有些菌產(chǎn)生的______結(jié)構(gòu)。②舉例：高壓蒸汽滅菌法、過濾除菌、灼燒滅菌。芽孢類型適用范圍操作方法消毒方法煮沸消毒日常生活煮沸

巴氏消毒不耐高溫的液體煮或

煮

化學(xué)藥劑消毒生物活體、水源等擦拭等，如用酒精擦拭雙手；用氯氣消毒水源滅菌方法灼燒滅菌接種工具、接種時(shí)容易被污染的試管口或瓶口等直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒類型適用范圍操作方法滅菌方法干熱滅菌耐高溫、需要保持干燥的物品，如玻璃器皿等物品放入干熱滅菌箱,溫度設(shè)定為

,此溫度范圍內(nèi)加熱

可達(dá)到滅菌的目的高壓蒸汽滅菌培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿等，生產(chǎn)和實(shí)驗(yàn)室常用高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)，

壓力，，

玻璃砂漏斗過濾除菌遇高溫會分解的物質(zhì)將溶液倒入滅菌過的

玻璃砂漏斗，獲得的濾液為無菌溶液紫外線房間、儀器設(shè)備紫外線照射

（5）防止雜菌污染的操作①操作在________火焰旁進(jìn)行。②棉塞拔出后不能放在超凈臺消毒過后的臺面上。③打開培養(yǎng)皿的皿蓋的正確操作是____________。④操作中超凈臺需一直打開________。⑤接種前后接種環(huán)都需要______滅菌。酒精燈打開一條縫過濾風(fēng)灼燒考點(diǎn)二

純凈的目標(biāo)微生物可通過分離和純化獲得一、采用劃線或涂布的接種方法能夠?qū)崿F(xiàn)對目標(biāo)微生物的分離和純化1.接種：微生物進(jìn)入培養(yǎng)基質(zhì)的過程，包括__________和__________。2.________：在固體培養(yǎng)基上通過接種、培養(yǎng)獲得的由一個(gè)細(xì)胞分裂形成的、肉眼可見的、有一定形態(tài)構(gòu)造的子細(xì)胞集團(tuán)。自然接種人為接種單菌落平板劃線法稀釋涂布平板法(1)原理：(2)工具：(3)劃線方式：接種環(huán)劃線的過程中，菌液被逐漸分散，最終出現(xiàn)單個(gè)細(xì)菌，形成單菌落。連續(xù)平行劃線、扇形劃線、多次連續(xù)平行劃線接種環(huán)平板劃線法:第1區(qū)劃線接種環(huán)滅菌第2區(qū)劃線接種環(huán)滅菌第3區(qū)劃線接種環(huán)滅菌接種環(huán)滅菌12345多次連續(xù)平行劃線法思考：若完成圖示操作，共做了五次劃線，接種環(huán)灼燒滅菌了幾次？平板劃線操作中三種灼燒的目的不同:1.蘸取菌液前灼燒2.每次劃線前灼燒3.劃線操作結(jié)束后灼燒注意不要?jiǎng)澠婆囵B(yǎng)基：①一旦劃破，會造成劃線不均勻，難以達(dá)到分離單菌落的目的；②二是存留在劃破處的單個(gè)細(xì)胞會沿著劃破處生長，會形成一個(gè)條狀的菌落。每次實(shí)驗(yàn)：劃3個(gè)平板（重復(fù)實(shí)驗(yàn)）1個(gè)不接種（空白對照）將平板倒置，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)：

防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，影響菌落形成，造成污染。灼燒后需冷卻，避免高溫燙死菌種3.平板劃線法操作中的相關(guān)問題項(xiàng)目第一次灼燒之后每次劃線前灼燒劃線結(jié)束后灼燒目的避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物殺死上次劃線結(jié)束后殘留在接種環(huán)上的菌種殺死接種環(huán)上殘留的菌種,避免其污染環(huán)境或感染操作者注意事項(xiàng)（1）在灼燒接種環(huán)后,要待其冷卻后才能伸入菌液,以免接種環(huán)溫度太高殺死菌種；（2）第二次及以后的劃線要從上一次劃線的末端開始；（3）劃線時(shí)用力大小要適當(dāng),防止用力過大劃破培養(yǎng)基4.平板劃線法與稀釋涂布平板法的比較平板劃線法稀釋涂布平板法不同點(diǎn)操作工具接種環(huán)________操作步驟通常用________蘸取液體培養(yǎng)物或挑取固體表面的微生物后，在固體培養(yǎng)基表面進(jìn)行連續(xù)平行劃線、__________或其他形式的劃線。若劃線4次，則接種環(huán)需要灼燒___次，后一次劃線必須從前一次劃線的______開始通常需要先將菌液進(jìn)行___________，并在培養(yǎng)皿側(cè)面或底面做好標(biāo)記后，將稀釋度不同的菌液各取

，加在固體培養(yǎng)基表面，然后用涂布器將菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基平面上進(jìn)行培養(yǎng)涂布器接種環(huán)扇形劃線5末端

梯度稀釋平板劃線法稀釋涂布平板法不同點(diǎn)稀釋方法不斷______接種環(huán)并連續(xù)劃線用________處理操作難度簡單復(fù)雜操作效果好更好操作作用最重要：菌種純化；次要：____________最重要：篩選微生物、計(jì)數(shù)；次要：菌種純化相同點(diǎn)都能獲得單菌落灼燒無菌水篩選微生物稀釋涂布平板法a.原理：用無菌水將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，在適當(dāng)?shù)南♂尪认?，可培養(yǎng)得到相互分開的單菌落。b.過程：稀釋菌液涂布培養(yǎng)

用移液管吸取1ml細(xì)菌培養(yǎng)液加入另一個(gè)盛有9ml無菌水的試管中，混合均勻，以此制成10-1的稀釋液，依次方法得到10-5~10-7稀釋液。b.過程：稀釋菌液涂布培養(yǎng)

用移液管吸取1ml細(xì)菌培養(yǎng)液加入另一個(gè)盛有9ml無菌水的試管中，混合均勻，以此制成10-1的稀釋液，依次方法得到10-5~10-7稀釋液。

在培養(yǎng)皿側(cè)面或底面做好標(biāo)記后,用移液管取0.1ml稀釋度不同的菌液，加在培養(yǎng)皿的固體培養(yǎng)基上。再將涂布器放在酒精燈火焰上灼燒，待涂布器冷卻后，在酒精燈旁打開培養(yǎng)皿，將菌液涂布到整個(gè)平面上。b.過程：稀釋菌液涂布培養(yǎng)

用移液管吸取1ml細(xì)菌培養(yǎng)液加入另一個(gè)盛有9ml無菌水的試管中，混合均勻，以此制成10-1倍的稀釋液，依次方法得到10-5~10-7倍稀釋液。

在培養(yǎng)皿側(cè)面或底面做好標(biāo)記后,用移液管取0.1ml稀釋度不同的菌液，加在培養(yǎng)皿的固體培養(yǎng)基上。再將涂布器放在酒精燈火焰上灼燒，待涂布器冷卻后，在酒精燈旁打開培養(yǎng)皿，將菌液涂布到整個(gè)平面上。將培養(yǎng)皿倒置，在37℃恒溫箱中培養(yǎng)24~48h。4.平板劃線法與稀釋涂布平板法的比較平板劃線法稀釋涂布平板法不同點(diǎn)操作工具接種環(huán)________操作步驟通常用________蘸取液體培養(yǎng)物或挑取固體表面的微生物后，在固體培養(yǎng)基表面進(jìn)行連續(xù)平行劃線、__________或其他形式的劃線。若劃線4次，則接種環(huán)需要灼燒___次，后一次劃線必須從前一次劃線的______開始通常需要先將菌液進(jìn)行___________，并在培養(yǎng)皿側(cè)面或底面做好標(biāo)記后，將稀釋度不同的菌液各取

，加在固體培養(yǎng)基表面，然后用涂布器將菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基平面上進(jìn)行培養(yǎng)涂布器接種環(huán)扇形劃線5末端

梯度稀釋平板劃線法稀釋涂布平板法不同點(diǎn)稀釋方法不斷______接種環(huán)并連續(xù)劃線用________處理操作難度簡單復(fù)雜操作效果好更好操作作用最重要：菌種純化；次要：____________最重要：篩選微生物、計(jì)數(shù)；次要：菌種純化相同點(diǎn)都能獲得單菌落灼燒無菌水篩選微生物續(xù)表一、如何分離得到微生物成分？二、如何測定微生物數(shù)量？1.平板劃線法2.稀釋涂布平板法1.稀釋涂布平板法2.顯微鏡計(jì)數(shù)法（需用到血細(xì)胞計(jì)數(shù)板）無法計(jì)數(shù)1591720無法計(jì)數(shù)1411310無法計(jì)數(shù)15011319ml無菌水加入0.1ml稀釋液分離、計(jì)數(shù)微生物——稀釋涂布平板法例：將1g土樣加到盛有99ml無菌水的三角瓶中，如圖進(jìn)行稀釋，每個(gè)稀釋度涂布三個(gè)平板，根據(jù)結(jié)果計(jì)算1g土樣中菌的數(shù)量？注意：1.分離得到單菌落一般以培養(yǎng)皿中有20個(gè)以內(nèi)菌落為宜。2.計(jì)算微生物數(shù)量一般以培養(yǎng)皿中有30~300個(gè)菌落為宜。無法計(jì)數(shù)1591720無法計(jì)數(shù)1411310無法計(jì)數(shù)15011319ml無菌水加入0.1ml稀釋液分離、計(jì)數(shù)微生物——稀釋涂布平板法例：將1g土樣加到盛有99ml無菌水的三角瓶中，如圖進(jìn)行稀釋，每個(gè)稀釋度涂布三個(gè)平板，根據(jù)結(jié)果計(jì)算1g土樣中菌的數(shù)量？（159+141+150）÷3÷0.1×105=1.5×108個(gè)/g每g樣品中的菌落數(shù)＝(C÷V)×MC代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)；V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積(mL)；M代表稀釋倍數(shù)5.稀釋涂布平板法和顯微鏡計(jì)數(shù)法可測定微生物的數(shù)量項(xiàng)目稀釋涂布平板法顯微鏡計(jì)數(shù)法原理當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長的一個(gè)______來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。通過統(tǒng)計(jì)平板上的______數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌利用______________，在顯微鏡下計(jì)算一定體積的樣品中微生物的數(shù)量計(jì)數(shù)數(shù)據(jù)培養(yǎng)基上菌落數(shù)菌體本身特點(diǎn)計(jì)數(shù)的是活菌死菌、活菌都計(jì)算在內(nèi)菌落菌落血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)算公式每毫升原液含菌數(shù)

___________________________________________每毫升原液含菌數(shù)

__________________________________________

1.每個(gè)血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的正中央有2個(gè)計(jì)數(shù)區(qū)，任選一個(gè)區(qū)。每個(gè)計(jì)數(shù)區(qū)分9個(gè)大方格，中央為紅細(xì)胞計(jì)數(shù)區(qū)，4個(gè)角為白細(xì)胞計(jì)數(shù)區(qū)。2.中間的紅細(xì)胞計(jì)數(shù)區(qū)共25個(gè)中方格，每個(gè)中方格又分為16個(gè)小方格，紅細(xì)胞計(jì)數(shù)區(qū)內(nèi)共400個(gè)小方格（黑點(diǎn)）。上下玻璃間距0.1mm計(jì)數(shù)區(qū)計(jì)數(shù)區(qū)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)區(qū)V紅=1mm*1mm*0.1mm16中*25小顯微鏡計(jì)數(shù)法換算為一個(gè)大方格（0.lmm3）稀釋液中的菌株數(shù)顯微鏡直接計(jì)數(shù)法主要用具顯微鏡、血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)依據(jù)菌株本身優(yōu)點(diǎn)計(jì)數(shù)方便、操作簡單缺點(diǎn)死菌活菌都計(jì)算在內(nèi)計(jì)算公式1ml原液含菌株數(shù)=每小格平均菌株數(shù)×400×10×1000×稀釋倍數(shù)微生物的數(shù)量測定換算1mm3稀釋液中的菌株數(shù)換算1ml稀釋液中的菌株數(shù)換算1ml原液中的菌株數(shù)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)區(qū)由25×16=400個(gè)小方格組成，容納液體的總體積為0.1mm3?，F(xiàn)將1mL酵母菌樣品加99mL無菌水稀釋，用無菌吸管吸取少許搖勻的酵母菌懸液滴在蓋玻片邊緣，使其自行滲入計(jì)數(shù)區(qū)，并用濾紙吸去多余菌液?，F(xiàn)觀察到圖中所示a、b、c、d、e5個(gè)中方格內(nèi)共有酵母菌44個(gè)，則上述1mL酵母菌樣品中約有菌體(

)5.稀釋涂布平板法和顯微鏡計(jì)數(shù)法可測定微生物的數(shù)量項(xiàng)目稀釋涂布平板法顯微鏡計(jì)數(shù)法原理當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長的一個(gè)______來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。通過統(tǒng)計(jì)平板上的______數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌利用______________，在顯微鏡下計(jì)算一定體積的樣品中微生物的數(shù)量計(jì)數(shù)數(shù)據(jù)培養(yǎng)基上菌落數(shù)菌體本身特點(diǎn)計(jì)數(shù)的是活菌死菌、活菌都計(jì)算在內(nèi)菌落菌落血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)算公式每毫升原液含菌數(shù)

___________________________________________每毫升原液含菌數(shù)

__________________________________________

二、活動：接種、培養(yǎng)并分離酵母菌1.目的要求（1）用__________法或稀釋涂布平板法接種酵母菌。（2）用______培養(yǎng)基大量擴(kuò)增酵母菌。平板劃線液體2.方法步驟底部灼燒滅菌培養(yǎng)容器內(nèi)壁上稀釋中央不接種菌液斜面3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析（1）培養(yǎng)未接種的培養(yǎng)基的目的是檢查培養(yǎng)基制備是否合格。未接種的培養(yǎng)基表面若有菌落生長，則說明培養(yǎng)基被污染，應(yīng)該重新制備；若無菌落生長，則說明未被污染。（2）在接種酵母菌的固體培養(yǎng)基上可觀察到獨(dú)立的菌落，這些菌落在顏色、形狀和大小上相似，酵母菌菌落一般表面光滑，多呈乳白色。（3）若在固體培養(yǎng)基中觀察到不同形態(tài)的菌落，原因可能是菌液不純，或在實(shí)驗(yàn)操作過程中被雜菌污染。土壤有“微生物的天然培養(yǎng)基”之稱。如圖是某同學(xué)分離和培養(yǎng)土壤中微生物的部分操作步驟和實(shí)驗(yàn)結(jié)果示意圖?；卮鹣铝袉栴}：（1）利用固體培養(yǎng)基培養(yǎng)土壤中的微生物時(shí)，除考慮各種營養(yǎng)條件外，還需要控制的培養(yǎng)條件有________________（至少寫出兩點(diǎn)）等。接種前應(yīng)該先檢測固體培養(yǎng)基是否被污染，檢測的具體方法是__________________________________________________________________________。

將未接種的培養(yǎng)基在適宜的環(huán)境中放置一段時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生

C

在酒精燈的火焰旁劃線（3）實(shí)驗(yàn)室利用平板劃線法來分離樣品中的目的菌時(shí)，每次劃線之前都要對接種環(huán)進(jìn)行滅菌，目的是________________________。在第二次及以后劃線時(shí)，總是從上一次劃線的末端開始劃線，這樣做的目的是________________________________________________________________。殺滅接種環(huán)上殘留的菌種

使菌種的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐漸減少，最終能夠得到單菌落考點(diǎn)三

調(diào)整培養(yǎng)基的配方和培養(yǎng)方式可有目的地培養(yǎng)某種微生物1.選擇培養(yǎng)基的概念：在培養(yǎng)基中添加（或減去）某種__________，使得只有某些______的微生物能夠生長，______微生物均不能生長。2.選擇培養(yǎng)基的作用：從混雜的微生物群體中__________出所需種類的目標(biāo)微生物，也可以從已知種類的混雜的細(xì)胞群體中篩選出特定的細(xì)胞?；瘜W(xué)成分特定其他快速篩選3.幾種選擇培養(yǎng)基的舉例特性主要用途設(shè)計(jì)原理加入青霉素分離酵母菌等真菌或有抗性的細(xì)菌青霉素能抑制非抗性細(xì)菌生長，對真菌無作用不加______分離固氮微生物固氮微生物能利用空氣中的氮?dú)獠患觃_____分離自養(yǎng)型微生物自養(yǎng)型微生物能利用無機(jī)碳源氮源碳源4.活動：能分解尿素的微生物的分離與計(jì)數(shù)（1）實(shí)驗(yàn)原理唯一脲酶酚紅紅尿素中性堿性氨

（2）方法步驟

底部移液器由大到小0.1酒精燈火焰均勻恒溫培養(yǎng)箱實(shí)驗(yàn)結(jié)果：LB培養(yǎng)基尿素培養(yǎng)基第2課時(shí)

傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)及發(fā)酵工程一輪復(fù)習(xí)

發(fā)酵工程考點(diǎn)一

某些食品、飲料及調(diào)味品是運(yùn)用傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)生產(chǎn)的1.傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)與發(fā)酵工程比較傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)發(fā)酵工程概念自然接種和______培養(yǎng)條件下，利用______微生物來釀造自己喜愛的風(fēng)味食品、飲料和調(diào)味品現(xiàn)代發(fā)酵工業(yè)大多是采用好氧、液體、深層、分批及單一__________的方式組合進(jìn)行的實(shí)例利用霉菌、酵母菌和______菌等制作醬油、糯米酒、泡菜等啤酒、青霉素乃至胰島素等藥物的工業(yè)化生產(chǎn)混菌有益純種發(fā)酵乳酸2.發(fā)酵食品的不同風(fēng)味由多種因素造成（1）不同微生物或同種微生物在不同環(huán)境條件下進(jìn)行的__________所形成的代謝產(chǎn)物不同，制成的發(fā)酵食品的______也就不同。（2）不同的微生物、不同的菌株能夠分泌的____種類不同，分解大分子有機(jī)物后形成的產(chǎn)物也就不同。（3）菌株______________會造成發(fā)酵產(chǎn)品的風(fēng)味不同。（4）__________也影響發(fā)酵食品的風(fēng)味。代謝活動風(fēng)味酶遺傳上的差異混菌發(fā)酵3.活動：體驗(yàn)傳統(tǒng)發(fā)酵——利用酵母菌、醋酸菌制作果酒和果醋（1）制作原理與發(fā)酵條件果酒制作果醋制作菌種酵母菌醋酸菌菌種來源______________上的野生型酵母菌變酸的酒表面的菌膜附著在葡萄皮果酒制作果醋制作發(fā)酵過程有氧條件下，酵母菌通過__________大量繁殖：

______________；無氧條件下，酵母菌通過__________產(chǎn)生酒精：

________________氧氣充足時(shí)：

________________溫度一般酒精發(fā)酵為____

溫度比酒精發(fā)酵稍高需氧呼吸

厭氧呼吸

25氣體前期：______，后期：________需要____________需氧不需氧充足的氧氣（2）制作步驟吸管的短臂凡士林洗凈

25溫暖4.活動：體驗(yàn)傳統(tǒng)發(fā)酵——利用乳酸菌發(fā)酵制作泡菜（1）原理：泡菜是利用附生在蔬菜表面的____________、短乳桿菌和明串珠菌等發(fā)酵制成的。植物乳桿菌1）在無氧條件下，乳酸菌將葡萄糖分解為乳酸，醇和酯等?？捎糜谌橹破返陌l(fā)酵、泡菜的腌制等。2）反應(yīng)簡式：C6H12O6→→→2C3H6O3（乳酸）＋能量。

冷開水水

發(fā)酵時(shí)期乳酸菌乳酸發(fā)酵初期少（有氧氣,乳酸菌的活動受到抑制）少發(fā)酵中期最多（乳酸抑制其他菌活動）積累增多,

下降發(fā)酵后期減少（乳酸積累,

下降,抑制其增殖）繼續(xù)增多,

繼續(xù)下降曲線模型泡菜腌制過程中，乳酸菌、乳酸和亞硝酸鹽的變化考點(diǎn)二

發(fā)酵工程的工業(yè)化生產(chǎn)1.發(fā)酵工程的基本過程擴(kuò)大培養(yǎng)擴(kuò)大培養(yǎng)滅菌溫度溶解氧沉淀萃取提純加工層析結(jié)晶4.分離或提純發(fā)酵產(chǎn)品是工業(yè)發(fā)酵制取產(chǎn)品必經(jīng)的步驟（1）發(fā)酵產(chǎn)品是菌體本身,采用______、______等方法分離。（2）發(fā)酵產(chǎn)品是微生物的代謝產(chǎn)物,采用__________、__________、__________等方法提取。過濾沉淀真空發(fā)酵吸附發(fā)酵萃取發(fā)酵真空發(fā)酵是對發(fā)酵灌減壓，使易揮發(fā)的發(fā)酵產(chǎn)物從發(fā)酵液中分離出來的技術(shù)（例：酒精---蒸餾）吸附發(fā)酵在發(fā)酵過程中加入對發(fā)酵產(chǎn)物具有特異性或非特異性吸附作用的吸附劑，從而使發(fā)酵產(chǎn)物從發(fā)酵液中分離出來的技術(shù)。（例：離子交換樹脂分離乳酸、醋酸）萃取發(fā)酵：當(dāng)兩種水溶性高分子聚合物在同一水溶液中各自達(dá)到一定濃度后，會互不相溶形成兩相系統(tǒng)（例：雙水相萃取a-淀粉酶，同時(shí)分離淀粉酶）2.選育高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)的菌種是發(fā)酵工業(yè)的前提條件（1）應(yīng)選擇______的菌種，使菌種的發(fā)酵產(chǎn)物中，需要的產(chǎn)物多，不需要的產(chǎn)物少。（2）培養(yǎng)基來源____________，被轉(zhuǎn)化的效率____。（3）菌種發(fā)酵產(chǎn)物易于______。（4）菌種對環(huán)境______明顯或潛在的危害。（5）菌種的__________和生產(chǎn)能力穩(wěn)定。高產(chǎn)充足且廉價(jià)高分離沒有遺傳特性3.發(fā)酵過程中的注意事項(xiàng)（1）要得到符合要求的菌種，需要篩選并不斷地選育或__________，以保持菌種健壯旺盛的生命力。（2）將菌種__________才能滿足大規(guī)模生產(chǎn)的需要。（3）對