1T/XXXXXXX—XXXX氧化型低密度脂蛋白檢測試劑盒（免疫比濁法）本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了氧化型低密度脂蛋白檢測試劑盒（免疫比濁法）及其配套使用的校準(zhǔn)品、質(zhì)控品的術(shù)語與定義、技術(shù)要求、試驗(yàn)方法、標(biāo)識、標(biāo)簽和使用說明書、包裝、運(yùn)輸和貯存等。本標(biāo)準(zhǔn)適用于氧化型低密度脂蛋白定量檢測試劑盒（免疫比濁法）及其配套使用的校準(zhǔn)品、質(zhì)控品。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T191包裝儲運(yùn)圖示標(biāo)志GB/T21415體外診斷醫(yī)療器械生物樣品中量的測量校準(zhǔn)品和控制物質(zhì)賦值的計(jì)量學(xué)溯源性GB/T29791.2體外診斷醫(yī)療器械制造商提供的信息（標(biāo)示）第2部分：專業(yè)用體外診斷試劑3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1免疫比濁法Immuneturbidity在反應(yīng)液中，抗體和抗原形成復(fù)合物而形成沉淀，使得濁度增加。當(dāng)光通過反應(yīng)液時(shí)，一些光被樣品散射，一些光被樣品吸收，其余透射過樣品，測量樣品對光吸收的方法為免疫比濁法。3.2氧化型低密度脂蛋白Oxidizedlow-densitylipoprotein氧化型低密度脂蛋白（OxidizedLow-DensityLipoprotein，OxLDL）是低密度脂蛋白（Low-DensityLipoprotein，LDL）在體內(nèi)多種復(fù)雜因素作用下發(fā)生氧化修飾形成的。LDL轉(zhuǎn)化為oxLDL是發(fā)生和促進(jìn)動脈粥樣硬化（atherosclerotic，AS）的關(guān)鍵生理環(huán)節(jié)。4技術(shù)要求4.1氧化型低密度脂蛋白檢測試劑盒（免疫比濁法）的技術(shù)要求4.1.1外觀試劑盒各組分應(yīng)齊全、完整，液體無滲漏；包裝標(biāo)簽文字符號應(yīng)清晰。4.1.2裝量裝量體積應(yīng)不少于標(biāo)示體積。4.1.3精密度4.1.3.1重復(fù)性在線性區(qū)間范圍內(nèi)，選擇2個(gè)不同濃度的控制物質(zhì)，所得結(jié)果的變異系數(shù)（CV）應(yīng)不大于10.00%。T/XXXXXXX—XXXX24.1.3.2批間差用3個(gè)批次產(chǎn)品分別檢測同一濃度的控制物質(zhì)，3個(gè)批次產(chǎn)品的相對極差（R）應(yīng)不大于15.00%。4.1.4正確度取濃度為50.00U/L具有溯源性的企業(yè)參考品進(jìn)行測試，其測試結(jié)果的相對偏差應(yīng)在±15.00%范圍內(nèi)。4.1.5線性試劑盒線性在[15.00,120.00]U/L區(qū)間內(nèi)。a)線性相關(guān)系數(shù)（r）應(yīng)不小于0.980。b)在[50.00,120.00]U/L區(qū)間內(nèi)，各濃度點(diǎn)相對偏差應(yīng)不超過±15.00%。c)在[15.00,50.00)U/L區(qū)間內(nèi)，各濃度點(diǎn)絕對偏差應(yīng)不超過±7.50U/L。4.1.6分析靈敏度測試30.00U/L質(zhì)控品時(shí)，吸光度值差值(△A）應(yīng)不小于0.010。4.1.7空白限用空白樣本加入試劑測試時(shí)，結(jié)果應(yīng)不大于8.00U/L。4.2氧化型低密度脂蛋白校準(zhǔn)品技術(shù)要求4.2.1外觀校準(zhǔn)品的外包裝應(yīng)完整、標(biāo)簽標(biāo)識清晰。校準(zhǔn)品應(yīng)為白色或淡黃色固體，復(fù)溶后為無色透明或淡黃色液體。4.2.2水分含量水分含量應(yīng)不大于5.00%。4.2.3正確度經(jīng)校準(zhǔn)品校準(zhǔn)的測試系統(tǒng)檢測由高一級測量程序定值的企業(yè)參考品，其檢測結(jié)果的En絕對值≤1。4.2.4均勻性4.2.4.1瓶內(nèi)均勻性：校準(zhǔn)品瓶內(nèi)變異系數(shù)CV瓶內(nèi)應(yīng)不大于10.00%4.2.4.2瓶間均勻性：校準(zhǔn)品瓶間變異系數(shù)CV瓶間應(yīng)不大于15.00%。4.3氧化型低密度脂蛋白質(zhì)控品技術(shù)要求4.3.1外觀質(zhì)控品的外包裝應(yīng)完整、標(biāo)簽標(biāo)識清晰。質(zhì)控品應(yīng)為白色或淡黃色固體，復(fù)溶后為無色透明液體或淡黃色液體。4.3.2水分含量水分含量應(yīng)不大于5.00%。4.3.3預(yù)期結(jié)果檢測結(jié)果均應(yīng)在靶值范圍內(nèi)。4.3.4均勻性CV瓶間(%)≤10.00%。5檢驗(yàn)方法T/XXXXXXX—XXXX35.1氧化型低密度脂蛋白檢測試劑盒（免疫比濁法）的檢驗(yàn)方法5.1.1外觀在自然光下目視檢查，結(jié)果應(yīng)符合4.1.1的要求。5.1.2裝量使用通用量具測量試劑各組分體積，結(jié)果應(yīng)符合4.1.2的要求。5.1.3精密度5.1.3.1重復(fù)性取50.00U/L和80.00U/L質(zhì)控品，用同一批次試劑盒進(jìn)行檢測，各重復(fù)檢測10次，計(jì)算10次濃度測量結(jié)果的平均值（x-）和標(biāo)準(zhǔn)差（s），根據(jù)公式(1)計(jì)算變異系數(shù)（CV），結(jié)果應(yīng)符合4.1.3.1的要求。公式（1）5.1.3.2批間差用3個(gè)批次試劑盒分別檢測同一份50.00U/L質(zhì)控品，每批次檢測3次，分別計(jì)算每批次3次濃和最小值（x-min），根據(jù)公式（3）計(jì)算相對極差（R），結(jié)果應(yīng)符合4.1.3.2要求。5.1.4正確度取濃度為50.00U/L具有溯源性的企業(yè)參考品，用試劑盒進(jìn)行測試，重復(fù)測試3次，測試結(jié)果記為Xi，按公式（4）計(jì)算相對偏差（B）。如果3次結(jié)果都符合4.1.4的要求，即判為合格。如果大于等于2次的結(jié)果不符合，即判為不合格。如果有1次結(jié)果不符合要求，則應(yīng)重新連續(xù)測試20次，并分別按照公式計(jì)算相對偏差，如果大于等于19次測試的結(jié)果符合4.1.4的要求，則準(zhǔn)確度符合4.1.4的要求。公式（4）式中:T——企業(yè)參考品的標(biāo)定濃度。5.1.5線性用接近線性區(qū)間下限的低濃度企業(yè)參考稀釋接近線性區(qū)間上限的高濃度企業(yè)參考品，混合成5個(gè)稀釋濃度，用試劑盒測試以上制備樣本，每個(gè)稀釋濃度測試3次。分別求出每個(gè)稀釋濃度檢測結(jié)果的均值。以稀釋濃度為橫坐標(biāo)，檢測結(jié)果均值為縱坐標(biāo)繪制散點(diǎn)圖并求出線性回歸方程。計(jì)算線性回歸方程的相關(guān)系數(shù)（r），結(jié)果應(yīng)符合4.1.5a）的要求。計(jì)算各稀釋濃度測試結(jié)果與稀釋濃度的相對偏差或絕對偏差，結(jié)果應(yīng)滿足4.1.5b）、c）的要求。5.1.6分析靈敏度取30.00U/L質(zhì)控品，按試劑盒規(guī)定參數(shù)進(jìn)行測試，測試的吸光度值差值(ΔA結(jié)果應(yīng)符合4.1.6的要求。5.1.7空白限用試劑盒測試生理鹽水（或純水），重復(fù)測試20次，記錄20次測試結(jié)果的平均值（M）和標(biāo)準(zhǔn)差（SD），計(jì)算M+2SD，結(jié)果應(yīng)符合4.1.7的要求。45.2氧化型低密度脂蛋白校準(zhǔn)品檢驗(yàn)方法5.2.1外觀取本品1盒，在自然光下目視檢測及復(fù)溶后應(yīng)符合4.2.1的要求。5.2.2水分含量取本品1盒，使用微量水分測定儀進(jìn)行水分含量測試，測試結(jié)果應(yīng)滿足4.2.2的要求。5.2.3正確度取本品1盒，復(fù)溶后對配套試劑盒和儀器進(jìn)行校準(zhǔn)。校準(zhǔn)成功后，檢測由高一級測量程序定值的企業(yè)參考品3次，計(jì)算3次檢測結(jié)果的平均值（Xlab），并按下列公式（5）計(jì)算En絕對值，結(jié)果應(yīng)符合產(chǎn)品4.2.3的要求。公式（5）公式（5）式中：Xlab——測量結(jié)果平均值；Xref——測量物標(biāo)示值；Uref——測量物標(biāo)示值不確定度；Ulab——測量不確定度。5.2.4均勻性按照下列方法進(jìn)行均勻性檢驗(yàn)。隨機(jī)抽取同批號的最小包裝單元的校準(zhǔn)品15盒并隨機(jī)編號1-15，復(fù)溶后用配套的試劑和儀器進(jìn)行檢測，每包裝單元下每個(gè)水平按下列順序測試3次。按公式（6）—公式（15）算瓶內(nèi)變異系數(shù)（CV瓶內(nèi)，%）和瓶間變異系數(shù)（CV瓶間，%），結(jié)果應(yīng)符合4.2.4的要求。測試順序：1、3、5、7、9、11、13、15、2、4、6、8、10、12、14、15、14、13、12、11、10、9、8、7、6、5、4、3、2、1、2、4、6、8、10、12、14、1、3、5、7、9、11、13、15。公式（6）公式（7）公式（8）公式（9）公式（10）公式（11）公式（12）公式（13）T/XXXXXXX—XXXX5公式（14）公式（15）公式中：SS——方差MS——均方；F——檢驗(yàn)值ni——第i瓶的測試次數(shù)；n0——有效測試次數(shù)sbb——瓶間標(biāo)準(zhǔn)差sr——瓶內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)差xi——測試結(jié)果xij——第i瓶第j次測量結(jié)果x-——總平均值當(dāng)F≤1時(shí)，以瓶內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)差代替瓶間標(biāo)準(zhǔn)差即；當(dāng)1≤F≤10時(shí)，需分別計(jì)算瓶內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)差和瓶間標(biāo)準(zhǔn)差；當(dāng)F＞10時(shí)，校準(zhǔn)品瓶間均勻性較差，不符合4.2.4的要求。5.3氧化型低密度脂蛋白質(zhì)控品檢驗(yàn)方法5.3.1外觀取本品1盒，在自然光下目視檢測及復(fù)溶后應(yīng)符合4.3.1的要求。5.3.2水分含量取本品1盒，使用微量水分測定儀進(jìn)行水分含量測試，測試結(jié)果應(yīng)滿足4.3.2的要求。5.3.3預(yù)期結(jié)果取本品1盒，復(fù)溶后用配套試劑盒和儀器進(jìn)行檢測3次，每次結(jié)果均應(yīng)符合4.3.3的要求。5.3.4均勻性取同批號的最小包裝單元的質(zhì)控品10盒，隨機(jī)編號1-10。復(fù)溶后用配套的試劑和儀器進(jìn)行檢測，每個(gè)包裝單元分別測試3次，按下列順序進(jìn)行測試1、3、5、7、9、2、4、6、8、10、10、9、8、7、6、5、4、3、2、1、2、4、6、8、10、1、3、5、7、9，按公式（16）-公式（24）計(jì)算瓶間變異系數(shù)（CV瓶間，%結(jié)果應(yīng)符合4.3.4均勻性的要求。公式（16）公式（17）公式（18）T/XXXXXXX—XXXX6公式（19）公式（20）公式（21）公式（22）公式（23）公式（24）公式中：SS總和、SS瓶間、SS瓶內(nèi)——方差；MS瓶間、MS瓶內(nèi)——均方；F——檢驗(yàn)值；ni——第i瓶的測試次數(shù)；n0——有效測試次數(shù)；sbb——瓶間標(biāo)準(zhǔn)差；r——瓶內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)差；xi——測試結(jié)果；xij——第i瓶第j次測量結(jié)果；當(dāng)F≤1時(shí)，認(rèn)為檢驗(yàn)結(jié)果顯示瓶間均勻性良好，以sr代替sbb計(jì)算CV瓶間，結(jié)果應(yīng)符合4.3.4均勻性要ν1為瓶內(nèi)自由度（樣品數(shù)-1），ν2瓶間自由度（檢測總次數(shù)-樣品數(shù)），即ν1=9，ν2=20，查表得F0.05（9，20）=2.39】時(shí)，認(rèn)為檢驗(yàn)結(jié)果顯示瓶間均勻性良好，計(jì)算CV瓶間，結(jié)果應(yīng)符合4.3.4均勻性要求；當(dāng)F＞F0.05(ν1，ν2），sbb≤0.3δ時(shí)，認(rèn)為瓶間均勻性良好，計(jì)算CV瓶間，結(jié)果應(yīng)符合4.3.4均勻性要求。當(dāng)F＞F0.05(ν1，ν2），sbb＞0.3δ時(shí)，認(rèn)為瓶間均勻性較差，無需計(jì)算CV瓶間，結(jié)果不符合4.3.4均勻性要6標(biāo)識、標(biāo)簽和使用說明書應(yīng)符合GB/T29791.2的相關(guān)規(guī)定。7包裝、運(yùn)輸和貯存T/XXXXXXX—XXXX77.1包裝包裝儲運(yùn)圖示標(biāo)志應(yīng)符合GB/T191的規(guī)定。包裝容器應(yīng)保證密封性良好，完整，無泄漏，無破損。7.2運(yùn)輸試劑盒應(yīng)按生產(chǎn)企業(yè)的要求運(yùn)輸。在運(yùn)輸過程中，應(yīng)輕搬運(yùn)、輕裝卸，應(yīng)防潮，應(yīng)防曬，應(yīng)防雨雪浸淋，防止重物堆壓試劑。7.3貯存試劑盒應(yīng)在生產(chǎn)企業(yè)說明書中規(guī)定條件下貯存。T/XXXXXXX—XXXX8參考文獻(xiàn)[1]GB/T21415-2008體外診斷醫(yī)療器械生物樣品中量的測量校準(zhǔn)品和控制物質(zhì)賦值的計(jì)量學(xué)溯源性[2]GB/T29791.2-2013體外診斷醫(yī)療器械制造商提供的信息（標(biāo)示）