逆轉(zhuǎn)錄病毒載體技術(shù)職業(yè)教育醫(yī)學(xué)生物技術(shù)專業(yè)教學(xué)課件_第1頁(yè)
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職業(yè)教育醫(yī)學(xué)生物技術(shù)專業(yè)教學(xué)資源庫(kù)逆轉(zhuǎn)錄病毒載體技術(shù)職業(yè)教育醫(yī)學(xué)生物技術(shù)專業(yè)教學(xué)資源庫(kù)

逆轉(zhuǎn)錄病毒載體技術(shù)是指利用逆轉(zhuǎn)錄病毒的長(zhǎng)末端重復(fù)區(qū)域具有轉(zhuǎn)錄啟動(dòng)子活性這一特點(diǎn)，將外源基因連接到LTR下游進(jìn)行重組，再使之包裝成為高滴度病毒顆粒，去直接感染受精卵或微注射入囊胚腔。攜帶外源基因的逆轉(zhuǎn)錄病毒進(jìn)入細(xì)胞后，RNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA，依靠逆轉(zhuǎn)錄病毒的整合酶及其末端特異的核苷酸序列，DNA可以整合到染色體上，從而將其所攜帶的外源基因插入到染色體中。職業(yè)教育醫(yī)學(xué)生物技術(shù)專業(yè)教學(xué)資源庫(kù)此項(xiàng)技術(shù)是培育轉(zhuǎn)基因雞最有效和最成功的方法，并在雞的良種培育及抗病毒感染等方面取得了顯著成效用逆轉(zhuǎn)錄病毒載體技術(shù)生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物優(yōu)點(diǎn)：①整合率高且技術(shù)難度不大。②成本低，無(wú)須昂貴的顯微操作儀器。③無(wú)導(dǎo)入基因的串連環(huán)化現(xiàn)象，可引入單拷貝的基因。職業(yè)教育醫(yī)學(xué)生物技術(shù)專業(yè)教學(xué)資源庫(kù)逆轉(zhuǎn)錄病毒載體技術(shù)有以下缺點(diǎn)：①外源基因難以植入生殖系統(tǒng)，成功率低，產(chǎn)生的動(dòng)物嵌合體比例較大，而且操作比較繁瑣，實(shí)驗(yàn)周期長(zhǎng)。②外源基因的大小受到逆轉(zhuǎn)錄病毒顆粒大小的限制，一般小于10kb。③進(jìn)一步的分析證實(shí)，該方法易產(chǎn)生基因沉默現(xiàn)象。

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