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1.2.1微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用討論:應(yīng)該先對(duì)制作用具和原料進(jìn)行滅菌處理,再接種純的菌種,并控制發(fā)酵條件,避免雜菌進(jìn)入。從社會(huì)中來(lái)1.什么是微生物?P9相關(guān)信息2.前提/重要基礎(chǔ):3.基本要求:(1)提供微生物生長(zhǎng)繁殖所需營(yíng)養(yǎng)和環(huán)境條件(2)確保其它微生物無(wú)法混入(3)并將需要的微生物分離出來(lái)培養(yǎng)基無(wú)菌技術(shù)純化培養(yǎng)高壓蒸汽滅菌鍋一、微生物的培養(yǎng)技術(shù)(一)培養(yǎng)基的配制1.培養(yǎng)基?用途?2.培養(yǎng)基的種類(lèi)?3.培養(yǎng)基的必備營(yíng)養(yǎng)成分?4.舉例說(shuō)明如何滿足不同微生物的特殊需求。閱讀教材P9-10完成以下問(wèn)題:
需求→營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)按物理性質(zhì)分為:+凝固劑
(如瓊脂)1.概念:
2.用途:3.類(lèi)型:(一)培養(yǎng)基的配制液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基4.培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成:組分含量提供的主要營(yíng)養(yǎng)牛肉膏5g
蛋白胨10gNaCl5gH2O定容至1000ml某種常見(jiàn)的細(xì)菌培養(yǎng)基——1000ml牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成碳源P10相關(guān)信息氮源維生素磷酸鹽無(wú)機(jī)鹽水④厭氧微生物:①乳酸桿菌:②霉菌:③細(xì)菌:維生素酸性中性或弱堿性無(wú)氧思考:所有微生物是否都可以用培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)?病毒獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的關(guān)鍵是:防止雜菌污染。(二)無(wú)
菌
技
術(shù)操作的空間、操作者的衣著和手培養(yǎng)微生物的器皿、接種用具和培養(yǎng)基消毒滅菌①煮沸消毒法P10相關(guān)信息:
生物消毒法②巴氏消毒法③化學(xué)藥物消毒法④紫外線消毒①濕熱滅菌法培養(yǎng)基等②干熱滅菌法玻璃器皿金屬器具③灼燒滅菌法接種工具充分燃燒層1.培養(yǎng)物:3.純培養(yǎng):2.純培養(yǎng)物:培養(yǎng)基內(nèi),特定種類(lèi)微生物群體。由單一個(gè)體繁殖所獲得的微生物群體。獲得純培養(yǎng)物的過(guò)程。(三)微生物的純培養(yǎng)【探究
實(shí)踐】酵母菌的純培養(yǎng)
菌落:原理:微生物群分散或稀釋單個(gè)細(xì)胞單個(gè)菌落繁殖念珠菌顯色培養(yǎng)基大腸桿菌培養(yǎng)基酵母菌培養(yǎng)基金黃色葡萄球菌和枯草桿菌培養(yǎng)基單菌落:概念:一般是由單個(gè)微生物繁殖形成的純培養(yǎng)物。鑒別菌種:菌落的大小、形狀、顏色、透明度、光澤度等是鑒定菌種的重要依據(jù)。方法:平板劃線法和稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法平板劃線法P19稱(chēng)切過(guò)濾加葡萄糖、瓊脂定容實(shí)驗(yàn)方法步驟:配制培養(yǎng)基1.制備培養(yǎng)基配制培養(yǎng)基滅菌分裝,塞包扎、勒緊滅菌培養(yǎng)皿滅菌實(shí)驗(yàn)方法步驟:1.制備培養(yǎng)基冷卻到50℃左右酒精燈火焰附近配制培養(yǎng)基防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基滅菌倒平板不能完全打開(kāi),以免雜菌污染防止皿蓋上冷凝水落入培養(yǎng)基造成污染。實(shí)驗(yàn)方法步驟:1.制備培養(yǎng)基1拔2過(guò)3倒4冷卻、倒置如果需要調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH,應(yīng)該在定容完成后,滅菌之前進(jìn)行操作。1.培養(yǎng)基pH要適宜,調(diào)pH是在滅菌前還是滅菌后?思考2.怎么確定所倒平板未被雜菌污染?將所倒平板放入37℃的恒溫箱中培養(yǎng)12h~24,觀察是否有菌落存在以確定是否被污染或滅菌是否徹底。3.丙→乙→甲→丁連續(xù)劃線、逐步稀釋實(shí)驗(yàn)方法步驟:2.接種和分離酵母菌平板劃線法1燒2冷卻、拔3過(guò)2取5過(guò)、塞7劃、重復(fù)6劃、蓋第1次劃線灼燒接種環(huán)滅菌第2次劃線灼燒接種環(huán)滅菌第3次劃線灼燒接種環(huán)滅菌灼燒接種環(huán)滅菌12345①取一次,連續(xù)劃線多次;②上一末端始,首尾不相接;③每次劃線前、劃線操作結(jié)束后灼燒接種環(huán);平板劃線法注意事項(xiàng)酵母菌數(shù)隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少,最終得到由單細(xì)胞繁殖而來(lái)的菌落。殺死原有微生物殺死殘留菌種,使下一次劃線的菌種直接來(lái)源上次劃線的末端,從而使每次劃線時(shí)菌種數(shù)目逐漸減少,直至得到單個(gè)細(xì)胞。殺死殘留菌種,避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。接種后的平板一個(gè)未接種的平板倒置,(空白對(duì)照)實(shí)驗(yàn)方法步驟:3.培養(yǎng)酵母菌酵母菌的純培養(yǎng)2.接種和分離酵母菌1.制備培養(yǎng)基3.培養(yǎng)酵母菌①配制培養(yǎng)基(馬鈴薯、葡萄糖、瓊脂、水)②滅菌③倒平板(在
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