第60頁（共60頁）2025年高考生物復(fù)習(xí)難題速遞之細(xì)胞工程（2025年4月）一．選擇題（共15小題）1．（2025?安陽二模）中國科學(xué)家首次利用嵌合胚胎成功構(gòu)建了高比例胚胎干細(xì)胞的活嵌合體猴，部分過程如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．不能用某種成體干細(xì)胞替代胚胎干細(xì)胞 B．嵌合囊胚發(fā)育至原腸胚期再進(jìn)行胚胎移植 C．胚胎干細(xì)胞的培養(yǎng)液中應(yīng)添加一定量的動(dòng)物血清 D．嵌合體猴的培育為遺傳修飾模型猴的構(gòu)建奠定了基礎(chǔ)2．（2023春?梧州月考）如圖是科學(xué)家采用體細(xì)胞雜交技術(shù)得到了“番茄—馬鈴薯”雜種植株，但該植株并沒有地上結(jié)番茄、地下長馬鈴薯。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A．過程①需使用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁，獲取原生質(zhì)體a和原生質(zhì)體b B．過程②可采用聚乙二醇融合法或者滅活的病毒得到雜種細(xì)胞 C．過程③④⑤⑥過程體現(xiàn)了植物細(xì)胞具有全能性 D．“番茄—馬鈴薯”雜種植株沒達(dá)預(yù)期目標(biāo)與基因無法有序表達(dá)有關(guān)3．（2025?遂寧校級(jí)二模）人絨毛膜促性腺激素（HCG）是女性懷孕后胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞分泌的一種糖蛋白，制備抗HCG單克隆抗體可用于早孕的診斷。如圖是抗HCG單克隆抗體制備流程示意圖，下列敘述正確的是（）A．向小鼠多次注射純化的HCG，并從小鼠的血液中獲得能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞 B．B細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞形成的3種兩兩融合的細(xì)胞均可以在HAT選擇培養(yǎng)基上存活 C．克隆化培養(yǎng)時(shí)，需要對(duì)經(jīng)選擇培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞用無菌水進(jìn)行充分依次等比稀釋 D．可將抗體檢測呈陽性的細(xì)胞在體外大規(guī)模培養(yǎng)，從培養(yǎng)液中獲取大量單克隆抗體4．（2025?安慶二模）異體器官移植是替代器官功能的有效途徑。中國科學(xué)家綜合利用多種現(xiàn)代生物技術(shù)，在豬的體內(nèi)培育出了一個(gè)“人—豬嵌合中期腎”，部分流程如圖所示，圖中數(shù)字表示相關(guān)過程。已知胚胎在未分化前相互連接比較松散，可塑性強(qiáng)。下列相關(guān)敘述正確的是（）A．選擇豬的桑葚胚或原腸胚等早期胚胎導(dǎo)入ipsc成功率更高 B．過程②使用蛋白酶合成促進(jìn)劑激活重構(gòu)胚發(fā)育成早期胚胎 C．利用胚胎分割等有性生殖技術(shù)可以增加人源化中腎的數(shù)量 D．過程④選擇的受體母豬應(yīng)具有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力5．（2025?廣州一模）珍稀中草藥蛇足石杉的有效成分為石杉?jí)A甲，但含量較低。研究人員發(fā)現(xiàn)共生真菌可與植物細(xì)胞共用酶系統(tǒng)，將蛇足石杉細(xì)胞與真菌進(jìn)行共生培養(yǎng)可促進(jìn)石杉?jí)A甲的生成。圖甲、圖乙分別表示共生培養(yǎng)過程中蛇足石杉細(xì)胞數(shù)量及石杉?jí)A甲含量隨時(shí)間的變化。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．利用植物細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)石杉?jí)A甲需將外植體培育到愈傷組織階段 B．將蛇足石杉細(xì)胞與真菌共生培養(yǎng)時(shí)需要適當(dāng)添加植物激素 C．圖甲實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以確定第4天為傳代培養(yǎng)和收集代謝物的最佳時(shí)間 D．圖乙實(shí)驗(yàn)結(jié)果不足以證明共生真菌利用了蛇足石杉細(xì)胞的酶系統(tǒng)6．（2025?湖北開學(xué)）2024年8月，干細(xì)胞生物學(xué)家鄧宏魁教授率先發(fā)明了使用化學(xué)小分子將成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化為CiPSC（化學(xué)誘導(dǎo)多能干細(xì)胞）的方法，并榮獲“生命科學(xué)獎(jiǎng)”，他證明了CiPSC可以成功用于產(chǎn)生具有生育能力的小鼠，并揭示了產(chǎn)生CiPSC的分子途徑。下列有關(guān)說法錯(cuò)誤的是（）A．干細(xì)胞存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中，其中胚胎干細(xì)胞必須從胚胎中獲取 B．制備iPS細(xì)胞可借助載體將特定基因?qū)爰?xì)胞，也可直接將特定蛋白導(dǎo)入細(xì)胞中或用小分子化合物等來誘導(dǎo) C．利用iPS細(xì)胞治療疾病，可以避免免疫排斥反應(yīng)，其應(yīng)用前景優(yōu)于胚胎干細(xì)胞 D．與體細(xì)胞核移植技術(shù)一樣，利用CiPSC細(xì)胞發(fā)育產(chǎn)生具有生育能力的小鼠利用了細(xì)胞的全能性7．（2025?山西開學(xué)）生物技術(shù)與工程中常常用到各種“篩選”手段，下列關(guān)于篩選的敘述，錯(cuò)誤的是（）A．植物體細(xì)胞雜交過程中，原生質(zhì)體融合后獲得的細(xì)胞需進(jìn)行篩選 B．單抗制備過程中，第二次篩選出的細(xì)胞既能無限增殖又能產(chǎn)生特定抗體 C．在胚胎移植過程中篩選原腸胚胎或桑葚胚的胚胎進(jìn)行移植 D．利用以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基可以篩選出尿素分解菌8．（2025?河南開學(xué)）抗體—藥物偶聯(lián)物（ADC）可以將藥物和單克隆抗體結(jié)合，實(shí)現(xiàn)了對(duì)腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷，基本流程如圖。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．先用特定抗原刺激小鼠，再從小鼠的脾臟中分離出B淋巴細(xì)胞 B．②的目的是篩選雜交瘤細(xì)胞，雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行多次克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，篩選出陽性細(xì)胞 C．單克隆抗體能與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合，并可大量制備 D．識(shí)別肺癌細(xì)胞的單克隆抗體a與肺癌藥物b結(jié)合，引起癌細(xì)胞強(qiáng)烈自噬而壞死9．（2025?山東開學(xué)）已知濃度為70%的酒精具有較強(qiáng)的細(xì)胞穿透力，常用于植物組織培養(yǎng)中外植體的消毒處理，但不能達(dá)到徹底滅菌的效果，且易造成細(xì)胞損傷。下列說法錯(cuò)誤的是（）A．莖尖、根尖含病毒較少的原因可能是分生組織還沒有形成維管束，不利于病毒在細(xì)胞間傳播 B．為增強(qiáng)濃度為70%酒精的消毒效果，處理時(shí)間可延長至30min C．利用花藥進(jìn)行植物組織培養(yǎng)獲得的植株不一定是單倍體 D．細(xì)胞分裂素與生長素比例偏高時(shí)可誘導(dǎo)愈傷組織生芽10．（2025?蚌埠模擬）科研人員利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)制備單克隆抗體過程如圖所示。下列相關(guān)敘述正確的是（）A．①過程要多次注射抗原，其目的是刺激小鼠產(chǎn)生更多的抗體 B．與植物體細(xì)胞雜交相比，過程②特有的誘導(dǎo)融合的方法是PEG融合法 C．步驟③篩選出的雜交瘤細(xì)胞既能無限增殖又可以分泌特定抗體 D．步驟④需要克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，從而獲得滿足需要的雜交瘤細(xì)胞11．（2025?遼陽模擬）最新調(diào)查結(jié)果顯示，我國野生大熊貓種群數(shù)量約1864只。由于環(huán)境變化和人類活動(dòng)的影響，現(xiàn)有野生大熊貓棲息地碎片化，我國采取了多種措施對(duì)大熊貓實(shí)施保護(hù)?？蒲腥藛T設(shè)計(jì)如圖所示的繁殖過程繁育、保護(hù)大熊貓。下列相關(guān)說法錯(cuò)誤的是（）A．激素處理的目的是使供體超數(shù)排卵 B．克隆熊貓是無性繁殖，試管熊貓是有性繁殖 C．必須將M中細(xì)胞的細(xì)胞核取出后注入去核的卵細(xì)胞中完成核移植 D．胚胎移植前可通過取樣滋養(yǎng)層細(xì)胞來鑒定性別12．（2025?湖北模擬）單克隆抗體藥物憑借高度特異性，為疾病精準(zhǔn)治療提供靶向利刃，在醫(yī)療等領(lǐng)域發(fā)揮關(guān)鍵作用。受益于其顯著療效，市場需求持續(xù)攀升。2023年，我國單克隆抗體藥物市場規(guī)模約達(dá)1213億元，展現(xiàn)出強(qiáng)勁的增長態(tài)勢(shì)。下列關(guān)于單克隆抗體制備和應(yīng)用的說法錯(cuò)誤的是（）A．“制備雜交瘤細(xì)胞”和“植物體細(xì)胞雜交”中都可能用到聚乙二醇，且作用相同 B．融合后的雜交瘤細(xì)胞可能會(huì)失去無限增殖或產(chǎn)生抗體的能力 C．抗體偶聯(lián)藥物與腫瘤細(xì)胞識(shí)別并進(jìn)入細(xì)胞的過程需要蛋白質(zhì)的參與并消耗能量 D．載有細(xì)胞毒素的單克隆抗體可用來定位診斷腫瘤和心血管畸形等疾病13．（2025?茂名模擬）我國科學(xué)家誘導(dǎo)多能干細(xì)胞制備胰島B細(xì)胞，并移植給1型糖尿病患者，取得了臨床功能性治愈的療效。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．可通過患者體細(xì)胞誘導(dǎo)得到多能干細(xì)胞，避免發(fā)生免疫排斥反應(yīng) B．多能干細(xì)胞在誘導(dǎo)下，發(fā)生基因突變獲得胰島素基因 C．制備的胰島B細(xì)胞在移植前，需檢測在葡萄糖誘導(dǎo)下能否產(chǎn)生胰島素 D．移植的胰島B細(xì)胞中存在凋亡基因，也會(huì)發(fā)生細(xì)胞的編程性死亡14．（2025?陜西、山西、青海、寧夏模擬）正常情況下，腫瘤細(xì)胞會(huì)被人體的免疫系統(tǒng)及時(shí)發(fā)現(xiàn)并清除，但腫瘤細(xì)胞會(huì)發(fā)生免疫逃逸現(xiàn)象，該現(xiàn)象與其表面的PD﹣L1密不可分?？茖W(xué)家利用圖示流程制成抗PD﹣L1的偶聯(lián)藥物（抗PD﹣L1﹣ADC），該藥物既能防止腫瘤細(xì)胞的免疫逃逸，也能靶向殺死腫瘤細(xì)胞。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A．圖示給小鼠注射的特定抗原是腫瘤細(xì)胞上的PD﹣L1 B．圖示①過程誘導(dǎo)細(xì)胞融合的方法都適用于植物細(xì)胞 C．圖示②③過程完成后得到的雜交瘤細(xì)胞都能產(chǎn)生抗體 D．抗PD﹣L1﹣ADC能與腫瘤細(xì)胞結(jié)合，源于其抗體的特異性15．（2025?江蘇模擬）下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞融合和單克隆抗體制備的敘述，錯(cuò)誤的是（）A．滅活的病毒可與細(xì)胞質(zhì)膜發(fā)生作用，從而誘導(dǎo)細(xì)胞融合 B．用特定抗原免疫小鼠后；可從其骨髓中分離出漿細(xì)胞，用于細(xì)胞融合 C．產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞可在小鼠體內(nèi)培養(yǎng)，從腹水中提取抗體 D．單克隆抗體可高度特異性地識(shí)別抗原，從而輔助腫瘤診斷二．解答題（共5小題）16．（2025?宜賓校級(jí)二模）我國科學(xué)家通過培育小鼠孤雌單倍體胚胎干細(xì)胞，成功獲得了“1母親0父親”的雌性小鼠，且能正常生殖產(chǎn)生后代，這在世界上屬首例，其有關(guān)技術(shù)路線如圖。請(qǐng)分析回答：（1）為了獲得更多的卵母細(xì)胞，研究人員需對(duì)母鼠進(jìn)行超數(shù)排卵處理，該過程中用到的動(dòng)物激素是。（2）在第1階段體外構(gòu)建孤雌單倍體胚胎干細(xì)胞時(shí)，應(yīng)將取自囊胚的分散后制成細(xì)胞懸液，置于含有的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)；在第2階段原核形成時(shí)卵母細(xì)胞已完成了減數(shù)分裂，理由是。（3）該研究團(tuán)隊(duì)將精子注入去核的MⅡ期的卵母細(xì)胞，最后培養(yǎng)出孤雄單倍體胚胎干細(xì)胞，這里去掉的“核”是指。（4）印記基因包括父系印記基因和母系印記基因，是可以區(qū)分精子和卵細(xì)胞的基因組。Rasgrf1基因是小鼠細(xì)胞中的父系印記基因，正常情況下來自父本的該基因處于不表達(dá)狀態(tài)。研究發(fā)現(xiàn)，這種不表達(dá)狀態(tài)與基因的某種表觀遺傳調(diào)控相關(guān)。為獲得孤雌生殖的個(gè)體，對(duì)Rasgrf1基因進(jìn)行的最佳處理方式是（填序號(hào)）。①甲基化修飾②去甲基化③敲除④誘導(dǎo)突變17．（2024春?菏澤期中）兩種遠(yuǎn)緣植物的細(xì)胞融合后會(huì)導(dǎo)致一方的染色體被排出。若其中一個(gè)細(xì)胞的染色體在融合前由于某種原因斷裂，形成的染色體片段在細(xì)胞融合后可能不會(huì)被全部排出，未排出的染色體片段可以整合到另一個(gè)細(xì)胞的染色體上而留存在雜種細(xì)胞中。依據(jù)該原理，將普通小麥與耐鹽性強(qiáng)的中間偃麥草進(jìn)行體細(xì)胞雜交獲得了耐鹽小麥新品種，過程如圖所示。（1）過程①用酶處理獲得原生質(zhì)體，獲得耐鹽小麥新品種的原理有。（2）過程②用不同劑量的紫外線照射中間偃麥草原生質(zhì)體的目的是。（3）過程③用化學(xué)法誘導(dǎo)原生質(zhì)體的融合，除PEG融合法外，還有法；若三個(gè)及以上的原生質(zhì)體無法融合，得到原生質(zhì)體的種類有種。（4）將雜種細(xì)胞培養(yǎng)為雜種植株需要用到技術(shù)，得到的雜種植株不一定是我們需要的新品種，為了減少生產(chǎn)成本和工作量，請(qǐng)嘗試提出最佳的篩選的方案。。18．（2025?普陀區(qū)模擬）榴蓮是一種熱帶果樹，主要通過直接引種和植物組織培養(yǎng)兩種方式在海南地區(qū)培育。利用植物植物培養(yǎng)的方式培育榴蓮時(shí)，取植株的頂芽藥物處理，誘導(dǎo)形成圖所示的愈傷組織。為提高愈傷組織的成功率，研究人員嘗試不同的藥物配比處理（見表）。不同配比藥物處理對(duì)愈傷組織形成的影響細(xì)胞分裂素2.4﹣D（mg/L）愈傷組織形成比例（mg/L）0.00.00.20±0.120.10.10.56±0.110.30.30.56±0.110.50.50.89±0.111.01.00.89±0.112.00.67±0.073.00.78±0.14.00.93±0.075.00.22±0.116.00.11±0.11（1）表結(jié)果中，最適合愈傷組織形成的藥物處理組合是，成功誘導(dǎo)出愈傷組織后，需要調(diào)整藥物比例，以促進(jìn)其分裂、分化，繼續(xù)發(fā)育成完整的榴蓮植株。（2）與有性生殖培育相比，上述榴蓮培育方法的優(yōu)勢(shì)體現(xiàn)在。A．容易獲得得脫毒植株B．易保持親本優(yōu)良形狀C．更易體現(xiàn)遺傳多樣性D．不容易受季節(jié)的限制海南保亭縣發(fā)現(xiàn)一株多年以前引種的榴蓮可以開花結(jié)果，為方便后續(xù)引種，需要鑒定該榴蓮的具體品種，僅從形態(tài)學(xué)特征很難區(qū)分其究竟屬于品種A還是品種B，擬采用分子生物學(xué)方法檢測，步驟如下。分別獲取A品種、B品種，以及待測品種的榴蓮嫩葉組織樣品，并提取DNA分子；根據(jù)A、B兩品種的同源基因序列（圖1所示），設(shè)計(jì)PCR引物。其中，引物①的位置已標(biāo)出，引物②與圖1方框中的序列相同：使用凝膠電泳鑒定PCR擴(kuò)增產(chǎn)物，電泳結(jié)果如圖2所示。（3）請(qǐng)?jiān)趫D2中畫出品種A、B榴蓮的樣本所擴(kuò)增產(chǎn)物的大致位置，并根據(jù)結(jié)果判斷待檢測樣品屬于品種（選填：A/B）。有人認(rèn)為“榴蓮易引起體溫升高”，科研發(fā)現(xiàn)榴蓮中含有硫化物DEDS、DPDS。人類腎干細(xì)胞293T不能表達(dá)TRP蛋白（參與體溫調(diào)節(jié)的一種蛋白質(zhì)），研究者提取人類其他細(xì)胞中的TRPmRNA，逆轉(zhuǎn)錄得到DNA，再導(dǎo)入293T細(xì)胞中，以獲得能成功表達(dá)的293T+細(xì)胞系，向293T+細(xì)胞的培養(yǎng)液中加入兩種硫化物，結(jié)果如圖3。（4）上述用293T細(xì)胞系所做的研究，需要運(yùn)用的實(shí)驗(yàn)技術(shù)有。（編號(hào)選填）①細(xì)胞融合②胚胎移植③細(xì)胞核移植④傳代培養(yǎng)⑤原代培養(yǎng)⑥RNA干擾（5）293T細(xì)胞內(nèi)TRP基因不表達(dá)，而獲得的293T+細(xì)胞可以表達(dá)TRP蛋白，對(duì)此現(xiàn)象的解釋不合理的是。A．293T細(xì)胞中的TRP基因高度甲基化B．293T細(xì)胞中的TRP基因所在染色質(zhì)發(fā)生組蛋白修飾C．293T+細(xì)胞中的TRP基因發(fā)生基因突變D．293T+細(xì)胞含有促進(jìn)其表達(dá)的堿基序列（6）請(qǐng)結(jié)合圖3結(jié)果解釋“榴蓮易引起體溫升高”這一說法的科學(xué)性。若要進(jìn)一步檢驗(yàn)該假說，請(qǐng)簡述實(shí)驗(yàn)思路。19．（2025?銅仁市一模）植物在遭受生物或非生物脅迫時(shí)，往往會(huì)積累次生代謝產(chǎn)物來應(yīng)對(duì)外界傷害。紫杉醇是存在于紅豆杉屬植物體內(nèi)的一種次生代謝產(chǎn)物，具有高抗癌活性。研究發(fā)現(xiàn)從紅豆杉愈傷組織細(xì)胞就可以提取紫杉醇?；卮鹣铝袉栴}：（1）在利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)紫杉醇的過程中，最好選擇紅豆杉的（幼嫩莖段/成熟莖段）作為外植體進(jìn)行培養(yǎng)，原因是。（2）在一定激素和營養(yǎng)等條件的誘導(dǎo)下，外植體細(xì)胞會(huì)失去其特有的結(jié)構(gòu)和功能，轉(zhuǎn)變成未分化的細(xì)胞，這個(gè)轉(zhuǎn)變過程稱為。未分化的細(xì)胞進(jìn)而形成愈傷組織，將愈傷組織懸浮培養(yǎng)可獲得紫杉醇。（3）研究人員在利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)紫杉醇的過程中發(fā)現(xiàn)紫杉醇的產(chǎn)量很低。結(jié)合題干信息，提出一種提高紫杉醇產(chǎn)量的措施。目前利用基因工程構(gòu)建穩(wěn)定高產(chǎn)紫杉醇的工程菌研究取得很大進(jìn)展，寫出利用紫杉醇合成酶基因構(gòu)建基因表達(dá)載體的思路。20．（2025?漳州模擬）坦布蘇病毒（TMUV，單鏈RNA病毒）可引起肉鴨嚴(yán)重的神經(jīng)癥狀和蛋鴨產(chǎn)蛋量的急劇下降，研究者將綠色熒光蛋白基因（EGFP）插入坦布蘇病毒的基因組中構(gòu)建報(bào)告病毒，其構(gòu)建的部分流程如圖甲所示?；卮鹣铝袉栴}：（1）利用PCR技術(shù)獲得EGFP﹣2A片段，預(yù)變性是在98℃下進(jìn)行，變性則是在95℃下進(jìn)行，進(jìn)行該操作的目的是。PCR過程中復(fù)性的結(jié)果是。（2）為了，PCR設(shè)計(jì)的引物F和2A﹣R的序列要能分別與①、②互補(bǔ)配對(duì)。2A基因的表達(dá)產(chǎn)物2A蛋白可以通過“核糖體跳躍”斷開位于2A肽尾端甘氨酸和脯氨酸之間的肽鍵，推測在重組DNA中引入2A的目的是。（3）科研人員通過基因工程獲取坦布蘇病毒的prM蛋白（153個(gè)氨基酸構(gòu)成）用于制備單克隆抗體。為了鑒定單克隆抗體識(shí)別prM蛋白的具體區(qū)域，將prM蛋白逐步截短，分別與純化的單克隆抗體反應(yīng)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖乙（“aa”表示氨基酸，“+”表示有反應(yīng)，“﹣”表示無反應(yīng)）。①制備單克隆抗體時(shí)，需用純化的prM蛋白對(duì)小鼠進(jìn)行免疫，其目的是獲得細(xì)胞，并將該細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，對(duì)經(jīng)特定的選擇培養(yǎng)基篩選得到的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行，多次篩選后可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞，再將其注射到小鼠的腹腔內(nèi)增殖并產(chǎn)生抗體。②根據(jù)圖示實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析，該單克隆抗體識(shí)別prM蛋白的區(qū)域大概包含（填“10”“15”或“20”）個(gè)氨基酸殘基。

2025年高考生物復(fù)習(xí)難題速遞之細(xì)胞工程（2025年4月）參考答案與試題解析一．選擇題（共15小題）題號(hào)1234567891011答案BBDDCDCDBDC題號(hào)12131415答案DBBB一．選擇題（共15小題）1．（2025?安陽二模）中國科學(xué)家首次利用嵌合胚胎成功構(gòu)建了高比例胚胎干細(xì)胞的活嵌合體猴，部分過程如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．不能用某種成體干細(xì)胞替代胚胎干細(xì)胞 B．嵌合囊胚發(fā)育至原腸胚期再進(jìn)行胚胎移植 C．胚胎干細(xì)胞的培養(yǎng)液中應(yīng)添加一定量的動(dòng)物血清 D．嵌合體猴的培育為遺傳修飾模型猴的構(gòu)建奠定了基礎(chǔ)【考點(diǎn)】體外受精和胚胎移植；干細(xì)胞的培養(yǎng)及其應(yīng)用．【專題】正推法；胚胎工程；理解能力．【答案】B【分析】胚胎移植一般在桑葚胚或囊胚期進(jìn)行。【解答】解：A、成體干細(xì)胞與胚胎干細(xì)胞功能不同，成體干細(xì)胞分化程度相對(duì)較高，全能性低于胚胎干細(xì)胞，不能替代胚胎干細(xì)胞，A正確；B、胚胎移植一般在桑葚胚或囊胚期進(jìn)行，而不是原腸胚期，原腸胚期細(xì)胞分化程度高，移植后難以正常發(fā)育，B錯(cuò)誤；C、培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞時(shí)，培養(yǎng)液中需添加一定量的動(dòng)物血清，以提供細(xì)胞生長所需的未知營養(yǎng)物質(zhì)，C正確；D、嵌合體猴的培育為構(gòu)建遺傳修飾模型猴奠定了基礎(chǔ)，可用于相關(guān)生物學(xué)研究，D正確。故選：B?！军c(diǎn)評(píng)】本題考查胚胎工程中胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)、胚胎移植等知識(shí)點(diǎn)，意在考查對(duì)胚胎工程相關(guān)技術(shù)原理和操作流程的理解與掌握能力。2．（2023春?梧州月考）如圖是科學(xué)家采用體細(xì)胞雜交技術(shù)得到了“番茄—馬鈴薯”雜種植株，但該植株并沒有地上結(jié)番茄、地下長馬鈴薯。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A．過程①需使用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁，獲取原生質(zhì)體a和原生質(zhì)體b B．過程②可采用聚乙二醇融合法或者滅活的病毒得到雜種細(xì)胞 C．過程③④⑤⑥過程體現(xiàn)了植物細(xì)胞具有全能性 D．“番茄—馬鈴薯”雜種植株沒達(dá)預(yù)期目標(biāo)與基因無法有序表達(dá)有關(guān)【考點(diǎn)】植物體細(xì)胞雜交技術(shù)及應(yīng)用．【專題】模式圖；體溫調(diào)節(jié)、水鹽調(diào)節(jié)與血糖調(diào)節(jié)；理解能力．【答案】B【分析】植物的體細(xì)胞雜交是將不同植物的細(xì)胞通過細(xì)胞融合技術(shù)形成雜種細(xì)胞，進(jìn)而利用植物的組織培養(yǎng)將雜種細(xì)胞培育成多倍體的雜種植株。植物體細(xì)胞雜交依據(jù)的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性和植物細(xì)胞的全能性?！窘獯稹拷猓篈、植物細(xì)胞壁的成分主要是纖維素和果膠，過程①需使用纖維素酶和果膠酶處理細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體，A正確；B、番茄和馬鈴薯的原生質(zhì)體可采用聚乙二醇融合法得到雜種細(xì)胞，滅活的病毒用來融合動(dòng)物細(xì)胞，B錯(cuò)誤；C、過程③④⑤⑥過程從一個(gè)雜種細(xì)胞發(fā)育成了完整的雜種植株，體現(xiàn)植物細(xì)胞的全能性，C正確；D、生物體中基因的作用是相互的，且基因控制相關(guān)性狀，“番茄—馬鈴薯”雜種植株沒達(dá)預(yù)期目標(biāo)與基因無法有序表達(dá)有關(guān)，D正確。故選：B?！军c(diǎn)評(píng)】本題考查植物體細(xì)胞雜交的相關(guān)知識(shí)，意在考查學(xué)生的識(shí)記能力和判斷能力、運(yùn)用所學(xué)知識(shí)綜合分析問題的能力。3．（2025?遂寧校級(jí)二模）人絨毛膜促性腺激素（HCG）是女性懷孕后胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞分泌的一種糖蛋白，制備抗HCG單克隆抗體可用于早孕的診斷。如圖是抗HCG單克隆抗體制備流程示意圖，下列敘述正確的是（）A．向小鼠多次注射純化的HCG，并從小鼠的血液中獲得能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞 B．B細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞形成的3種兩兩融合的細(xì)胞均可以在HAT選擇培養(yǎng)基上存活 C．克隆化培養(yǎng)時(shí)，需要對(duì)經(jīng)選擇培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞用無菌水進(jìn)行充分依次等比稀釋 D．可將抗體檢測呈陽性的細(xì)胞在體外大規(guī)模培養(yǎng)，從培養(yǎng)液中獲取大量單克隆抗體【考點(diǎn)】單克隆抗體及其應(yīng)用．【專題】模式圖；克隆技術(shù)．【答案】D【分析】單克隆抗體的制備（1）制備產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細(xì)胞：向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原，然后從小鼠脾內(nèi)獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞。（2）獲得雜交瘤細(xì)胞。①將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與脾細(xì)胞中形成的B淋巴細(xì)胞融合；②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，該雜種細(xì)胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體。（3）克隆化培養(yǎng)和抗體檢測。（4）將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖。（5）提取單克隆抗體：從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取。【解答】解：A、向小鼠多次注射純化的HCG，并從小鼠的脾臟中分離B淋巴細(xì)胞，從小鼠血液中獲得的抗體可能有多種，不是單克隆抗體，A錯(cuò)誤；B、只有B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合形成的雜交瘤細(xì)胞可以在HAT選擇培養(yǎng)基上存活，相同細(xì)胞融合形成的細(xì)胞不能在HAT選擇培養(yǎng)基上存活，B錯(cuò)誤；C、克隆化培養(yǎng)時(shí)，需要對(duì)經(jīng)選擇培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞用無菌等滲溶液進(jìn)行充分依次等比稀釋，無菌水會(huì)使細(xì)胞吸水漲破，C錯(cuò)誤；D、可將抗體檢測呈陽性的細(xì)胞在體外大規(guī)模培養(yǎng)，從培養(yǎng)液中獲取大量單克隆抗體，D正確。故選：D?！军c(diǎn)評(píng)】本題考查單克隆抗體的制備等相關(guān)知識(shí)，旨在考查考生的理解能力和獲取信息的能力，以及生命觀念、科學(xué)思維的核心素養(yǎng)。4．（2025?安慶二模）異體器官移植是替代器官功能的有效途徑。中國科學(xué)家綜合利用多種現(xiàn)代生物技術(shù)，在豬的體內(nèi)培育出了一個(gè)“人—豬嵌合中期腎”，部分流程如圖所示，圖中數(shù)字表示相關(guān)過程。已知胚胎在未分化前相互連接比較松散，可塑性強(qiáng)。下列相關(guān)敘述正確的是（）A．選擇豬的桑葚胚或原腸胚等早期胚胎導(dǎo)入ipsc成功率更高 B．過程②使用蛋白酶合成促進(jìn)劑激活重構(gòu)胚發(fā)育成早期胚胎 C．利用胚胎分割等有性生殖技術(shù)可以增加人源化中腎的數(shù)量 D．過程④選擇的受體母豬應(yīng)具有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力【考點(diǎn)】體外受精和胚胎移植；胚胎分割技術(shù)．【專題】正推法；胚胎工程；理解能力．【答案】D【分析】（1）胚胎分割技術(shù)：采用機(jī)械方法將早期胚胎切割成2等份、4等份或8等份等，經(jīng)移植獲得同卵雙胎或多胎的技術(shù)。（2）胚胎分割時(shí)應(yīng)選用發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑葚胚或囊胚?！窘獯稹拷猓篈、選擇豬的桑葚胚或囊胚等早期胚胎導(dǎo)入ipsc成功率更高，A錯(cuò)誤；B、過程②是核移植過程，激活重構(gòu)胚發(fā)育成早期胚胎常用的方法是物理或化學(xué)方法，如電刺激、鈣離子載體等，而不是蛋白酶合成促進(jìn)劑，B錯(cuò)誤；C、胚胎分割屬于無性生殖技術(shù)，而不是有性生殖技術(shù)，且圖中未提及利用胚胎分割來增加人源化中腎的數(shù)量，C錯(cuò)誤；D、過程④是胚胎移植，選擇的受體母豬需要具有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力，這樣才能為胚胎發(fā)育提供良好的環(huán)境，D正確。故選：D。【點(diǎn)評(píng)】本題主要考查了胚胎工程的相關(guān)知識(shí)，包括早期胚胎的特點(diǎn)、核移植技術(shù)、胚胎分割技術(shù)以及胚胎移植的受體選擇等內(nèi)容，意在考查學(xué)生對(duì)現(xiàn)代生物技術(shù)在器官移植領(lǐng)域應(yīng)用的理解和掌握程度，以及對(duì)相關(guān)技術(shù)原理和操作的辨析能力。5．（2025?廣州一模）珍稀中草藥蛇足石杉的有效成分為石杉?jí)A甲，但含量較低。研究人員發(fā)現(xiàn)共生真菌可與植物細(xì)胞共用酶系統(tǒng)，將蛇足石杉細(xì)胞與真菌進(jìn)行共生培養(yǎng)可促進(jìn)石杉?jí)A甲的生成。圖甲、圖乙分別表示共生培養(yǎng)過程中蛇足石杉細(xì)胞數(shù)量及石杉?jí)A甲含量隨時(shí)間的變化。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．利用植物細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)石杉?jí)A甲需將外植體培育到愈傷組織階段 B．將蛇足石杉細(xì)胞與真菌共生培養(yǎng)時(shí)需要適當(dāng)添加植物激素 C．圖甲實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以確定第4天為傳代培養(yǎng)和收集代謝物的最佳時(shí)間 D．圖乙實(shí)驗(yàn)結(jié)果不足以證明共生真菌利用了蛇足石杉細(xì)胞的酶系統(tǒng)【考點(diǎn)】植物的組織培養(yǎng)．【答案】C【分析】柱形圖分析：隨著時(shí)間延長，共生培養(yǎng)過程中蛇足石杉細(xì)胞數(shù)量及石杉?jí)A甲含量都表現(xiàn)出先升高后降低的趨勢(shì)?！窘獯稹拷猓篈、蛇足石杉細(xì)胞與真菌進(jìn)行共生培養(yǎng)獲取石杉?jí)A甲，只需將外植體培育到愈傷組織階段，再進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)即可，A正確；B、生長素與細(xì)胞分裂素比值適中時(shí)，促進(jìn)愈傷組織的形成，故在培養(yǎng)基中要適當(dāng)添加植物激素，B正確；C、圖甲實(shí)驗(yàn)結(jié)果只能說明在0、2、4、6天中的第4天蛇足石杉細(xì)胞數(shù)量及石杉?jí)A甲含量最高，但不能確定第4天為傳代培養(yǎng)和收集代謝物的最佳時(shí)間，C錯(cuò)誤；D、圖乙實(shí)驗(yàn)測定的是不同時(shí)間蛇足石杉產(chǎn)生的石杉?jí)A甲的含量，無法證明共生真菌利用了蛇足石杉細(xì)胞的酶系統(tǒng)，D正確。故選：C?！军c(diǎn)評(píng)】本題考查植物組織培養(yǎng)的相關(guān)內(nèi)容，要求學(xué)生能運(yùn)用所學(xué)的知識(shí)正確作答。6．（2025?湖北開學(xué)）2024年8月，干細(xì)胞生物學(xué)家鄧宏魁教授率先發(fā)明了使用化學(xué)小分子將成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化為CiPSC（化學(xué)誘導(dǎo)多能干細(xì)胞）的方法，并榮獲“生命科學(xué)獎(jiǎng)”，他證明了CiPSC可以成功用于產(chǎn)生具有生育能力的小鼠，并揭示了產(chǎn)生CiPSC的分子途徑。下列有關(guān)說法錯(cuò)誤的是（）A．干細(xì)胞存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中，其中胚胎干細(xì)胞必須從胚胎中獲取 B．制備iPS細(xì)胞可借助載體將特定基因?qū)爰?xì)胞，也可直接將特定蛋白導(dǎo)入細(xì)胞中或用小分子化合物等來誘導(dǎo) C．利用iPS細(xì)胞治療疾病，可以避免免疫排斥反應(yīng)，其應(yīng)用前景優(yōu)于胚胎干細(xì)胞 D．與體細(xì)胞核移植技術(shù)一樣，利用CiPSC細(xì)胞發(fā)育產(chǎn)生具有生育能力的小鼠利用了細(xì)胞的全能性【考點(diǎn)】干細(xì)胞的培養(yǎng)及其應(yīng)用；細(xì)胞全能性的原因及應(yīng)用．【專題】正推法；克隆技術(shù)；理解能力．【答案】D【分析】干細(xì)胞可存在于早期胚胎（胚胎干細(xì)胞）、臍帶血和骨髓（成體干細(xì)胞）等多種組織、器官中?！窘獯稹拷猓篈、干細(xì)胞存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中，胚胎干細(xì)胞必須從胚胎獲取，A正確；B、制備CiPSC（化學(xué)誘導(dǎo)多能干細(xì)胞，屬于iPS細(xì)胞），可借助載體將特定基因?qū)爰?xì)胞，也可直接將特定蛋白導(dǎo)入細(xì)胞，或用小分子化合物誘導(dǎo)，B正確；C、利用iPS細(xì)胞治療疾病，因源于自身細(xì)胞誘導(dǎo)，可避免免疫排斥，應(yīng)用前景優(yōu)于胚胎干細(xì)胞，C正確；D、核移植技術(shù)運(yùn)用的是動(dòng)物細(xì)胞核的全能性，D錯(cuò)誤。故選：D?！军c(diǎn)評(píng)】本題考查干細(xì)胞及細(xì)胞全能性等知識(shí)點(diǎn)，意在考查學(xué)生對(duì)相關(guān)概念和技術(shù)的理解與應(yīng)用能力。7．（2025?山西開學(xué)）生物技術(shù)與工程中常常用到各種“篩選”手段，下列關(guān)于篩選的敘述，錯(cuò)誤的是（）A．植物體細(xì)胞雜交過程中，原生質(zhì)體融合后獲得的細(xì)胞需進(jìn)行篩選 B．單抗制備過程中，第二次篩選出的細(xì)胞既能無限增殖又能產(chǎn)生特定抗體 C．在胚胎移植過程中篩選原腸胚胎或桑葚胚的胚胎進(jìn)行移植 D．利用以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基可以篩選出尿素分解菌【考點(diǎn)】植物體細(xì)胞雜交技術(shù)及應(yīng)用；單克隆抗體及其應(yīng)用；體外受精和胚胎移植；選擇培養(yǎng)基．【專題】正推法；植物的組織培養(yǎng)；克隆技術(shù)；理解能力．【答案】C【分析】植物體細(xì)胞雜交技術(shù)：將不同來源的植物體細(xì)胞，在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，并把雜種細(xì)胞培育成新的植物體的技術(shù)。【解答】解：A、植物體細(xì)胞雜交過程中，誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合后，可獲得多種融合細(xì)胞，因此需要對(duì)獲得的細(xì)胞進(jìn)行篩選，A正確；B、單克隆抗體制備過程中，第一次篩選出雜交瘤細(xì)胞，第二次篩選出既能無限增殖又能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，B正確；C、在胚胎移植過程中選擇發(fā)育良好的囊胚或桑葚胚進(jìn)行移植，C錯(cuò)誤；D、以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基上，其他微生物因?yàn)槿鄙俚炊荒苌?，故可以篩選出尿素分解菌，D正確。故選：C?！军c(diǎn)評(píng)】本題主要考查了細(xì)胞工程、胚胎工程、微生物的分離與培養(yǎng)等相關(guān)知識(shí)點(diǎn)，意在考查學(xué)生對(duì)相關(guān)知識(shí)點(diǎn)的理解和熟練應(yīng)用的能力。8．（2025?河南開學(xué)）抗體—藥物偶聯(lián)物（ADC）可以將藥物和單克隆抗體結(jié)合，實(shí)現(xiàn)了對(duì)腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷，基本流程如圖。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．先用特定抗原刺激小鼠，再從小鼠的脾臟中分離出B淋巴細(xì)胞 B．②的目的是篩選雜交瘤細(xì)胞，雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行多次克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，篩選出陽性細(xì)胞 C．單克隆抗體能與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合，并可大量制備 D．識(shí)別肺癌細(xì)胞的單克隆抗體a與肺癌藥物b結(jié)合，引起癌細(xì)胞強(qiáng)烈自噬而壞死【考點(diǎn)】單克隆抗體及其應(yīng)用．【專題】正推法；克隆技術(shù)；理解能力．【答案】D【分析】單克隆抗體的制備（1）制備產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細(xì)胞：向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原，然后從小鼠脾內(nèi)獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞。（2）獲得雜交瘤細(xì)胞。①將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與脾細(xì)胞中形成的B淋巴細(xì)胞融合；②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，該雜種細(xì)胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體。（3）克隆化培養(yǎng)和抗體檢測。（4）將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖。（5）提取單克隆抗體：從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取。【解答】解：A、制備單克隆抗體時(shí)，先以特定抗原刺激小鼠，引發(fā)其免疫反應(yīng)，促使B淋巴細(xì)胞增殖分化，再從小鼠脾臟中分離出B淋巴細(xì)胞，A正確；B、②的目的是篩選雜交瘤細(xì)胞，細(xì)胞融合后有多種細(xì)胞類型，需篩選出雜交瘤細(xì)胞，之后對(duì)其進(jìn)行多次克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，篩選出陽性細(xì)胞，B正確；C、單克隆抗體特異性強(qiáng)、靈敏度高，能與特定抗原特異性結(jié)合，可通過培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞大量制備，C正確；D、由圖可知，是抗體﹣肺癌藥物偶聯(lián)物中的單克隆抗體a識(shí)別肺癌細(xì)胞，將肺癌藥物b帶到肺癌細(xì)胞處，實(shí)現(xiàn)對(duì)腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷，并非單克隆抗體a與肺癌藥物b結(jié)合引起癌細(xì)胞強(qiáng)烈自噬而壞死，D錯(cuò)誤。故選：D。【點(diǎn)評(píng)】本題考查單克隆抗體制備及抗體﹣藥物偶聯(lián)物相關(guān)知識(shí)，意在考查學(xué)生對(duì)免疫相關(guān)技術(shù)及原理的理解與應(yīng)用能力。9．（2025?山東開學(xué)）已知濃度為70%的酒精具有較強(qiáng)的細(xì)胞穿透力，常用于植物組織培養(yǎng)中外植體的消毒處理，但不能達(dá)到徹底滅菌的效果，且易造成細(xì)胞損傷。下列說法錯(cuò)誤的是（）A．莖尖、根尖含病毒較少的原因可能是分生組織還沒有形成維管束，不利于病毒在細(xì)胞間傳播 B．為增強(qiáng)濃度為70%酒精的消毒效果，處理時(shí)間可延長至30min C．利用花藥進(jìn)行植物組織培養(yǎng)獲得的植株不一定是單倍體 D．細(xì)胞分裂素與生長素比例偏高時(shí)可誘導(dǎo)愈傷組織生芽【考點(diǎn)】植物的組織培養(yǎng)．【專題】正推法；植物的組織培養(yǎng)；理解能力．【答案】B【分析】生長素與細(xì)胞分裂素的用量比值高，有利于根的分化，抑制芽的形成；用量比值低，有利于芽的分化，抑制根的形成；用量比值適中，促進(jìn)愈傷組織的形成。【解答】解：A、莖尖和根尖分生組織處維管束尚未形成，不利于病毒傳播，含病毒少，A正確；B、70%酒精易造成細(xì)胞損傷，延長消毒時(shí)間到30min，會(huì)加重細(xì)胞損傷，不利于后續(xù)組織培養(yǎng)，B錯(cuò)誤；C、花藥中除了花粉（可發(fā)育成單倍體），還有花藥壁等體細(xì)胞，利用花藥培養(yǎng)獲得的植株不一定是單倍體，C正確；D、植物組織培養(yǎng)中，細(xì)胞分裂素與生長素比例高時(shí)誘導(dǎo)生芽，比例低時(shí)誘導(dǎo)生根，D正確。故選：B?！军c(diǎn)評(píng)】本題考查植物組織培養(yǎng)的取材、消毒以及激素調(diào)節(jié)等知識(shí)點(diǎn)，意在考查對(duì)植物組織培養(yǎng)技術(shù)原理和操作要點(diǎn)的理解。10．（2025?蚌埠模擬）科研人員利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)制備單克隆抗體過程如圖所示。下列相關(guān)敘述正確的是（）A．①過程要多次注射抗原，其目的是刺激小鼠產(chǎn)生更多的抗體 B．與植物體細(xì)胞雜交相比，過程②特有的誘導(dǎo)融合的方法是PEG融合法 C．步驟③篩選出的雜交瘤細(xì)胞既能無限增殖又可以分泌特定抗體 D．步驟④需要克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，從而獲得滿足需要的雜交瘤細(xì)胞【考點(diǎn)】單克隆抗體及其應(yīng)用．【專題】模式圖；克隆技術(shù)；理解能力．【答案】D【分析】單克隆抗體的制備：用特定的抗原對(duì)小鼠進(jìn)行免疫，并從該小鼠的脾中得到能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞，將多種B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合，利用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選：在該培養(yǎng)基上，未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞都會(huì)死亡，只有融合的雜交瘤細(xì)胞才能生長。對(duì)上述經(jīng)選擇培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選，就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞。將抗體檢測呈陽性的雜交瘤細(xì)胞在體外條件下大規(guī)模培養(yǎng)，或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖。從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取大量的單克隆抗體?！窘獯稹拷猓篈、①過程要多次注射抗原，不是刺激小鼠產(chǎn)生更多的抗體，而是刺激小鼠產(chǎn)生更多的B淋巴細(xì)胞，A錯(cuò)誤；B、與植物體細(xì)胞雜交相比，過程②特有的誘導(dǎo)融合的方法是滅活的病毒誘導(dǎo)，B錯(cuò)誤；C、步驟③篩選出的雜交瘤細(xì)胞既能無限增殖又可以分泌抗體，經(jīng)過④專一抗體檢測獲得既能無限增殖又可以分泌特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，C錯(cuò)誤；D、經(jīng)過③獲得雜交瘤細(xì)胞，通過步驟④克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，從而獲得滿足需要的雜交瘤細(xì)胞，D正確。故選：D。【點(diǎn)評(píng)】本題考查學(xué)生從題中獲取相關(guān)信息，并結(jié)合所學(xué)單克隆抗體的知識(shí)作出正確判斷，屬于識(shí)記和理解層次的內(nèi)容，難度適中。11．（2025?遼陽模擬）最新調(diào)查結(jié)果顯示，我國野生大熊貓種群數(shù)量約1864只。由于環(huán)境變化和人類活動(dòng)的影響，現(xiàn)有野生大熊貓棲息地碎片化，我國采取了多種措施對(duì)大熊貓實(shí)施保護(hù)?？蒲腥藛T設(shè)計(jì)如圖所示的繁殖過程繁育、保護(hù)大熊貓。下列相關(guān)說法錯(cuò)誤的是（）A．激素處理的目的是使供體超數(shù)排卵 B．克隆熊貓是無性繁殖，試管熊貓是有性繁殖 C．必須將M中細(xì)胞的細(xì)胞核取出后注入去核的卵細(xì)胞中完成核移植 D．胚胎移植前可通過取樣滋養(yǎng)層細(xì)胞來鑒定性別【考點(diǎn)】體外受精和胚胎移植；動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)．【專題】正推法；胚胎工程；理解能力．【答案】C【分析】將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體。用核移植的方法得到的動(dòng)物稱為克隆動(dòng)物。原理是動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性?！窘獯稹拷猓篈、在胚胎工程里，對(duì)供體用促性腺激素等激素處理，目的是促使供體超數(shù)排卵，以獲取更多卵母細(xì)胞，A正確；B、克隆熊貓運(yùn)用核移植技術(shù)，未經(jīng)過兩性生殖細(xì)胞結(jié)合，屬于無性繁殖；試管熊貓經(jīng)體外受精形成受精卵，再經(jīng)早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等過程，有兩性生殖細(xì)胞結(jié)合，屬于有性繁殖，B正確；C、核移植時(shí)，是把供體細(xì)胞的細(xì)胞核取出注入去核卵母細(xì)胞完成核移植，并非必須將圖中M細(xì)胞的細(xì)胞核取出，M細(xì)胞含義不明確，C錯(cuò)誤；D、胚胎移植前，可通過取樣滋養(yǎng)層細(xì)胞，利用DNA分析等技術(shù)鑒定胚胎性別，D正確。故選：C。【點(diǎn)評(píng)】本題考查胚胎工程相關(guān)知識(shí)，包括胚胎移植中供體處理、克隆與試管動(dòng)物的生殖方式、核移植操作以及胚胎性別鑒定等，意在考查學(xué)生對(duì)胚胎工程相關(guān)概念和技術(shù)的理解掌握能力。12．（2025?湖北模擬）單克隆抗體藥物憑借高度特異性，為疾病精準(zhǔn)治療提供靶向利刃，在醫(yī)療等領(lǐng)域發(fā)揮關(guān)鍵作用。受益于其顯著療效，市場需求持續(xù)攀升。2023年，我國單克隆抗體藥物市場規(guī)模約達(dá)1213億元，展現(xiàn)出強(qiáng)勁的增長態(tài)勢(shì)。下列關(guān)于單克隆抗體制備和應(yīng)用的說法錯(cuò)誤的是（）A．“制備雜交瘤細(xì)胞”和“植物體細(xì)胞雜交”中都可能用到聚乙二醇，且作用相同 B．融合后的雜交瘤細(xì)胞可能會(huì)失去無限增殖或產(chǎn)生抗體的能力 C．抗體偶聯(lián)藥物與腫瘤細(xì)胞識(shí)別并進(jìn)入細(xì)胞的過程需要蛋白質(zhì)的參與并消耗能量 D．載有細(xì)胞毒素的單克隆抗體可用來定位診斷腫瘤和心血管畸形等疾病【考點(diǎn)】單克隆抗體及其應(yīng)用．【專題】正推法；克隆技術(shù)；理解能力．【答案】D【分析】單克隆抗體能準(zhǔn)確地識(shí)別抗原的細(xì)微差異，與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合，并且可以大量制備，因此被廣泛用作診斷試劑，在多種疾病的診斷和病原體鑒定中發(fā)揮重要的作用?！窘獯稹拷猓篈、“制備雜交瘤細(xì)胞”和“植物體細(xì)胞雜交”中都可能用到聚乙二醇，且作用都是誘導(dǎo)細(xì)胞融合，A正確；B、融合后的雜交瘤細(xì)胞可能會(huì)失去無限增殖或產(chǎn)生抗體的能力，其原因包括融合不成功、細(xì)胞功能異常、培養(yǎng)條件不適宜和遺傳變異，B正確；C、抗體偶聯(lián)藥物為大分子復(fù)合體，以胞吞的方式進(jìn)入細(xì)胞，需要蛋白質(zhì)的參與，并消耗能量，C正確；D、單克隆抗體藥物憑借高度特異性，為疾病精準(zhǔn)治療提供靶向利刃，在醫(yī)療等領(lǐng)域發(fā)揮關(guān)鍵作用，載有細(xì)胞毒素的單克隆抗體可用來治療腫瘤和心血管畸形等疾病，D錯(cuò)誤。故選：D?！军c(diǎn)評(píng)】本題考查學(xué)生從題中獲取相關(guān)信息，并結(jié)合所學(xué)單克隆抗體的知識(shí)作出正確判斷，屬于識(shí)記和理解層次的內(nèi)容，難度適中。13．（2025?茂名模擬）我國科學(xué)家誘導(dǎo)多能干細(xì)胞制備胰島B細(xì)胞，并移植給1型糖尿病患者，取得了臨床功能性治愈的療效。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．可通過患者體細(xì)胞誘導(dǎo)得到多能干細(xì)胞，避免發(fā)生免疫排斥反應(yīng) B．多能干細(xì)胞在誘導(dǎo)下，發(fā)生基因突變獲得胰島素基因 C．制備的胰島B細(xì)胞在移植前，需檢測在葡萄糖誘導(dǎo)下能否產(chǎn)生胰島素 D．移植的胰島B細(xì)胞中存在凋亡基因，也會(huì)發(fā)生細(xì)胞的編程性死亡【考點(diǎn)】干細(xì)胞的培養(yǎng)及其應(yīng)用；血糖平衡調(diào)節(jié)．【專題】正推法；體溫調(diào)節(jié)、水鹽調(diào)節(jié)與血糖調(diào)節(jié)；胚胎工程；理解能力．【答案】B【分析】1、誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞）：通過特定的因子導(dǎo)入和培養(yǎng)條件，可以從人的皮膚等體細(xì)胞出發(fā)，誘導(dǎo)其成為具有無限增殖能力并可分化為人體各種組織臟器的多能干細(xì)胞。2、在正常情況下，胰島B細(xì)胞對(duì)血糖水平的變化非常敏感，能夠根據(jù)血糖水平的高低調(diào)節(jié)胰島素的分泌。當(dāng)血糖水平升高時(shí)，胰島B細(xì)胞會(huì)增加胰島素的分泌，幫助降低血糖水平；反之，當(dāng)血糖水平降低時(shí)，則減少胰島素的分泌，以避免低血糖。3、細(xì)胞凋亡指為維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定，由基因控制的細(xì)胞自主的有序的死亡。細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死不同，細(xì)胞凋亡不是一件被動(dòng)的過程，而是主動(dòng)過程，它涉及一系列基因的激活、表達(dá)以及調(diào)控等的作用，它并不是病理?xiàng)l件下，自體損傷的一種現(xiàn)象，而是為更好地適應(yīng)生存環(huán)境而主動(dòng)爭取的一種死亡過程?！窘獯稹拷猓篈、利用患者體細(xì)胞誘導(dǎo)得到多能干細(xì)胞，由于其遺傳物質(zhì)與患者自身細(xì)胞相同，免疫系統(tǒng)不會(huì)將其識(shí)別為外來異物，因此通過此方法制備胰島B細(xì)胞進(jìn)行移植可以避免發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，A正確；B、多能干細(xì)胞本身就含有胰島素基因，在誘導(dǎo)下是發(fā)生細(xì)胞分化即基因選擇性表達(dá)，產(chǎn)生胰島B細(xì)胞，B錯(cuò)誤；C、制備的胰島B細(xì)胞的功能應(yīng)該是能在葡萄糖誘導(dǎo)下產(chǎn)生胰島素，在移植前需檢測其在葡萄糖誘導(dǎo)下能否產(chǎn)生胰島素，以確保其功能正常，C正確；D、細(xì)胞凋亡是由基因所決定的細(xì)胞自動(dòng)結(jié)束生命的過程，也叫細(xì)胞編程性死亡，移植的胰島B細(xì)胞作為正常細(xì)胞，細(xì)胞內(nèi)存在凋亡基因，也會(huì)發(fā)生細(xì)胞的編程性死亡，D正確。故選：B?！军c(diǎn)評(píng)】本題考查學(xué)生從題中獲取相關(guān)信息，并結(jié)合所學(xué)干細(xì)胞的培養(yǎng)以及血糖平衡調(diào)節(jié)的知識(shí)作出正確判斷，屬于識(shí)記和理解層次的內(nèi)容，難度適中。14．（2025?陜西、山西、青海、寧夏模擬）正常情況下，腫瘤細(xì)胞會(huì)被人體的免疫系統(tǒng)及時(shí)發(fā)現(xiàn)并清除，但腫瘤細(xì)胞會(huì)發(fā)生免疫逃逸現(xiàn)象，該現(xiàn)象與其表面的PD﹣L1密不可分?？茖W(xué)家利用圖示流程制成抗PD﹣L1的偶聯(lián)藥物（抗PD﹣L1﹣ADC），該藥物既能防止腫瘤細(xì)胞的免疫逃逸，也能靶向殺死腫瘤細(xì)胞。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A．圖示給小鼠注射的特定抗原是腫瘤細(xì)胞上的PD﹣L1 B．圖示①過程誘導(dǎo)細(xì)胞融合的方法都適用于植物細(xì)胞 C．圖示②③過程完成后得到的雜交瘤細(xì)胞都能產(chǎn)生抗體 D．抗PD﹣L1﹣ADC能與腫瘤細(xì)胞結(jié)合，源于其抗體的特異性【考點(diǎn)】單克隆抗體及其應(yīng)用．【專題】正推法；克隆技術(shù)；理解能力．【答案】B【分析】單克隆抗體的制備（1）制備產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細(xì)胞：向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原，然后從小鼠脾內(nèi)獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞。（2）獲得雜交瘤細(xì)胞①將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與脾細(xì)胞中形成的B淋巴細(xì)胞融合；②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，該雜種細(xì)胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體。（3）克隆化培養(yǎng)和抗體檢測。（4）將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖。（5）提取單克隆抗體：從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取?！窘獯稹拷猓篈、給小鼠注射特定抗原是腫瘤細(xì)胞上的PD﹣L1，以刺激機(jī)體產(chǎn)生針對(duì)PD﹣L1的免疫反應(yīng)，進(jìn)而獲得相應(yīng)抗體，A正確；B、圖示①過程誘導(dǎo)細(xì)胞融合，動(dòng)物細(xì)胞融合方法有物理法（如電融合法）、化學(xué)法（如聚乙二醇融合法）、生物法（如滅活的病毒誘導(dǎo)法），但植物細(xì)胞融合不能用滅活的病毒誘導(dǎo)法，因病毒只能感染動(dòng)物細(xì)胞，B錯(cuò)誤；C、②③過程完成后篩選得到的雜交瘤細(xì)胞，由骨髓瘤細(xì)胞和能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞融合形成，具有二者特性，都能產(chǎn)生抗體，C正確；D、抗PD﹣L1﹣ADC能與腫瘤細(xì)胞結(jié)合，源于其中抗體的特異性，能特異性識(shí)別腫瘤細(xì)胞表面的PD﹣L1，D正確。故選：B。【點(diǎn)評(píng)】本題考查單克隆抗體制備等相關(guān)知識(shí)，意在考查學(xué)生對(duì)免疫調(diào)節(jié)及單克隆抗體制備流程等知識(shí)的理解與運(yùn)用能力。15．（2025?江蘇模擬）下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞融合和單克隆抗體制備的敘述，錯(cuò)誤的是（）A．滅活的病毒可與細(xì)胞質(zhì)膜發(fā)生作用，從而誘導(dǎo)細(xì)胞融合 B．用特定抗原免疫小鼠后；可從其骨髓中分離出漿細(xì)胞，用于細(xì)胞融合 C．產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞可在小鼠體內(nèi)培養(yǎng)，從腹水中提取抗體 D．單克隆抗體可高度特異性地識(shí)別抗原，從而輔助腫瘤診斷【考點(diǎn)】單克隆抗體及其應(yīng)用；動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)．【專題】正推法；克隆技術(shù)；理解能力．【答案】B【分析】1、單克隆抗體的制備過程：首先用特定抗原注射小鼠體內(nèi)，使其發(fā)生免疫，小鼠體內(nèi)產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細(xì)胞。利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)將B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，在經(jīng)過三次篩選：①篩選能夠產(chǎn)生單一抗體的B淋巴細(xì)胞；②篩選得到雜交瘤細(xì)胞（去掉未雜交的細(xì)胞以及自身融合的細(xì)胞）；③篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群。兩次抗體檢測：專一抗體檢驗(yàn)陽性，獲得能產(chǎn)生特異性抗體、又能大量增殖雜交瘤細(xì)胞，最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中提取單克隆抗體；2、單克隆抗體的特點(diǎn)：特異性強(qiáng)、靈敏度高、并可大量制備?！窘獯稹拷猓篈、某些滅活病毒表面的糖蛋白和一些酶與細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用，使細(xì)胞相互凝聚，細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布，細(xì)胞膜打開從而使細(xì)胞發(fā)生融合，A正確；B、用特定抗原免疫小鼠后；可從其脾臟中分離出B細(xì)胞，用于細(xì)胞融合，B錯(cuò)誤；C、產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞可在體外培養(yǎng)，也可在小鼠體內(nèi)培養(yǎng)，在小鼠的腹水中獲取單克隆抗體，C正確；D、單克隆抗體可高度特異性地識(shí)別抗原，即根據(jù)抗原抗體特異性結(jié)合的原理，從而輔助腫瘤診斷，D正確。故選：B?！军c(diǎn)評(píng)】本題考查學(xué)生從題中獲取相關(guān)信息，并結(jié)合所學(xué)單克隆抗體的知識(shí)作出正確判斷，屬于識(shí)記和理解層次的內(nèi)容，難度適中。二．解答題（共5小題）16．（2025?宜賓校級(jí)二模）我國科學(xué)家通過培育小鼠孤雌單倍體胚胎干細(xì)胞，成功獲得了“1母親0父親”的雌性小鼠，且能正常生殖產(chǎn)生后代，這在世界上屬首例，其有關(guān)技術(shù)路線如圖。請(qǐng)分析回答：（1）為了獲得更多的卵母細(xì)胞，研究人員需對(duì)母鼠進(jìn)行超數(shù)排卵處理，該過程中用到的動(dòng)物激素是促性腺激素。（2）在第1階段體外構(gòu)建孤雌單倍體胚胎干細(xì)胞時(shí)，應(yīng)將取自囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)分散后制成細(xì)胞懸液，置于含有95%空氣和5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)；在第2階段原核形成時(shí)卵母細(xì)胞已完成了減數(shù)分裂，理由是圖中有兩個(gè)極體、雌原核和雄原核。（3）該研究團(tuán)隊(duì)將精子注入去核的MⅡ期的卵母細(xì)胞，最后培養(yǎng)出孤雄單倍體胚胎干細(xì)胞，這里去掉的“核”是指紡錘體﹣染色體復(fù)合物。（4）印記基因包括父系印記基因和母系印記基因，是可以區(qū)分精子和卵細(xì)胞的基因組。Rasgrf1基因是小鼠細(xì)胞中的父系印記基因，正常情況下來自父本的該基因處于不表達(dá)狀態(tài)。研究發(fā)現(xiàn)，這種不表達(dá)狀態(tài)與基因的某種表觀遺傳調(diào)控相關(guān)。為獲得孤雌生殖的個(gè)體，對(duì)Rasgrf1基因進(jìn)行的最佳處理方式是①（填序號(hào)）。①甲基化修飾②去甲基化③敲除④誘導(dǎo)突變【考點(diǎn)】體外受精和胚胎移植；干細(xì)胞的培養(yǎng)及其應(yīng)用．【專題】圖文信息類簡答題；胚胎工程；理解能力．【答案】（1）促性腺激素（2）內(nèi)細(xì)胞團(tuán)95%空氣和5%CO2圖中有兩個(gè)極體、雌原核和雄原核（3）紡錘體﹣染色體復(fù)合物（4）①【分析】分析圖示，圖示是科學(xué)家通過培育小鼠孤雌單倍體胚胎干細(xì)胞，獲得“1母親0父親”的雌性小鼠的過程，共包括兩個(gè)階段，據(jù)此分析作答。【解答】解：（1）超數(shù)排卵是指應(yīng)用外源促性腺激素，誘發(fā)卵巢排出比自然情況下更多的成熟卵子。（2）聚集在胚胎一端的細(xì)胞形成內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，將來發(fā)育為胎兒的各種組織，沿透明帶內(nèi)壁擴(kuò)展和排列的細(xì)胞稱為滋養(yǎng)層細(xì)胞，將來發(fā)育為胎膜和胎盤，所以體外構(gòu)建孤雌單倍體胚胎干細(xì)胞時(shí)，最好取囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞；體外培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞應(yīng)置于含有95%空氣和5%CO2的混合氣體的CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；圖中第2階段，孤雌單倍體胚胎干細(xì)胞入卵后，形成雄原核的同時(shí)，卵子完成減數(shù)分裂Ⅱ，排出第二極體，形成雌原核，第2階段原核形成的圖中有兩個(gè)極體、雌原核和雄原核，說明卵母細(xì)胞已完成了減數(shù)分裂。（3）卵母細(xì)胞中的“核”是紡錘體﹣染色體復(fù)合物。（4）根據(jù)題意，在正常情況下，來自父本的Rasgrf1基因處于不表達(dá)狀態(tài)是由于表觀遺傳調(diào)控，而這種調(diào)控通常是通過甲基化實(shí)現(xiàn)的。在孤雌生殖時(shí)，為了模擬該父系印記基因的不表達(dá)狀態(tài)，對(duì)Rasgrf1基因的最佳處理方式是進(jìn)行甲基化修飾，①正確。故答案為：（1）促性腺激素（2）內(nèi)細(xì)胞團(tuán)95%空氣和5%CO2圖中有兩個(gè)極體、雌原核和雄原核（3）紡錘體﹣染色體復(fù)合物（4）①【點(diǎn)評(píng)】本題考查胚胎工程的相關(guān)知識(shí)，意在考查學(xué)生的識(shí)記能力和判斷能力、運(yùn)用所學(xué)知識(shí)綜合分析問題的能力。17．（2024春?菏澤期中）兩種遠(yuǎn)緣植物的細(xì)胞融合后會(huì)導(dǎo)致一方的染色體被排出。若其中一個(gè)細(xì)胞的染色體在融合前由于某種原因斷裂，形成的染色體片段在細(xì)胞融合后可能不會(huì)被全部排出，未排出的染色體片段可以整合到另一個(gè)細(xì)胞的染色體上而留存在雜種細(xì)胞中。依據(jù)該原理，將普通小麥與耐鹽性強(qiáng)的中間偃麥草進(jìn)行體細(xì)胞雜交獲得了耐鹽小麥新品種，過程如圖所示。（1）過程①用纖維素酶和果膠酶處理獲得原生質(zhì)體，獲得耐鹽小麥新品種的原理有細(xì)胞膜的流動(dòng)性、植物細(xì)胞的全能性、染色體變異。（2）過程②用不同劑量的紫外線照射中間偃麥草原生質(zhì)體的目的是使中間偃麥草的染色體斷裂。（3）過程③用化學(xué)法誘導(dǎo)原生質(zhì)體的融合，除PEG融合法外，還有高Ca2+—高pH融合法；若三個(gè)及以上的原生質(zhì)體無法融合，得到原生質(zhì)體的種類有5種。（4）將雜種細(xì)胞培養(yǎng)為雜種植株需要用到植物組織培養(yǎng)技術(shù)，得到的雜種植株不一定是我們需要的新品種，為了減少生產(chǎn)成本和工作量，請(qǐng)嘗試提出最佳的篩選的方案。在再分化培養(yǎng)基中加入一定濃度的鹽水，篩選耐鹽幼苗?！究键c(diǎn)】植物體細(xì)胞雜交技術(shù)及應(yīng)用．【專題】正推法；體溫調(diào)節(jié)、水鹽調(diào)節(jié)與血糖調(diào)節(jié)；理解能力．【答案】（1）纖維素酶和果膠酶細(xì)胞膜的流動(dòng)性、植物細(xì)胞的全能性、染色體變異（2）使中間偃麥草的染色體斷裂（3）高Ca2+—高pH融合5（4）植物組織培養(yǎng)在再分化培養(yǎng)基中加入一定濃度的鹽水，篩選耐鹽幼苗【分析】過程①需要用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁，獲得具有活性的原生質(zhì)體；過程②用不同劑量的紫外線照射，目的是使中間偃麥草染色體斷裂；人工誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體間的融合的方法有物理法（離心、振動(dòng)、電激等）和化學(xué)法（聚乙二醇）；耐鹽小麥的染色體上整合了中間偃麥草的染色體片段。【解答】解：（1）過程①需要用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁，獲得具有活性的原生質(zhì)體，由于使用了不同劑量的紫外線照射可能引起染色體變異，此外，還有原生質(zhì)體的融合，利用了細(xì)胞膜的流動(dòng)性，雜種細(xì)胞培養(yǎng)獲得了耐鹽的完整植株，因此利用了植物細(xì)胞的全能性，綜上，獲得耐鹽小麥新品種的原理有細(xì)胞膜的流動(dòng)性、植物細(xì)胞的全能性、染色體變異。（2）過程②用不同劑量的紫外線照射中間偃麥草原生質(zhì)體的目的是使中間偃麥草的染色體斷裂。（3）人工誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體間的融合的方法有物理法（離心、振動(dòng)、電激等）和化學(xué)法，除PEG融合法外，還可以用高Ca2+—高pH融合法；若三個(gè)及以上的原生質(zhì)體無法融合，得到原生質(zhì)體的種類有普通小麥﹣中間偃麥草、普通小麥﹣普通小麥、中間偃麥草﹣中間偃麥草兩兩融合、以及未融合的普通小麥和中間偃麥草共5種原生質(zhì)體。（4）將雜種細(xì)胞培養(yǎng)為雜種植株需要用到植物組織培養(yǎng)技術(shù)，得到的雜種植株不一定是我們需要的新品種，為了減少生產(chǎn)成本和工作量，篩選的方案為在再分化培養(yǎng)基中加入一定濃度的鹽水，篩選耐鹽幼苗。故答案為：（1）纖維素酶和果膠酶細(xì)胞膜的流動(dòng)性、植物細(xì)胞的全能性、染色體變異（2）使中間偃麥草的染色體斷裂（3）高Ca2+—高pH融合5（4）植物組織培養(yǎng)在再分化培養(yǎng)基中加入一定濃度的鹽水，篩選耐鹽幼苗【點(diǎn)評(píng)】本題考查植物體細(xì)胞雜交的相關(guān)知識(shí)，意在考查學(xué)生的識(shí)記能力和判斷能力、運(yùn)用所學(xué)知識(shí)綜合分析問題的能力。18．（2025?普陀區(qū)模擬）榴蓮是一種熱帶果樹，主要通過直接引種和植物組織培養(yǎng)兩種方式在海南地區(qū)培育。利用植物植物培養(yǎng)的方式培育榴蓮時(shí)，取植株的頂芽藥物處理，誘導(dǎo)形成圖所示的愈傷組織。為提高愈傷組織的成功率，研究人員嘗試不同的藥物配比處理（見表）。不同配比藥物處理對(duì)愈傷組織形成的影響細(xì)胞分裂素2.4﹣D（mg/L）愈傷組織形成比例（mg/L）0.00.00.20±0.120.10.10.56±0.110.30.30.56±0.110.50.50.89±0.111.01.00.89±0.112.00.67±0.073.00.78±0.14.00.93±0.075.00.22±0.116.00.11±0.11（1）表結(jié)果中，最適合愈傷組織形成的藥物處理組合是1mg/L的細(xì)胞分裂素與4.0mg/L的2.4﹣D，成功誘導(dǎo)出愈傷組織后，需要調(diào)整藥物比例，以促進(jìn)其分裂、分化，繼續(xù)發(fā)育成完整的榴蓮植株。（2）與有性生殖培育相比，上述榴蓮培育方法的優(yōu)勢(shì)體現(xiàn)在ABD。A．容易獲得得脫毒植株B．易保持親本優(yōu)良形狀C．更易體現(xiàn)遺傳多樣性D．不容易受季節(jié)的限制海南保亭縣發(fā)現(xiàn)一株多年以前引種的榴蓮可以開花結(jié)果，為方便后續(xù)引種，需要鑒定該榴蓮的具體品種，僅從形態(tài)學(xué)特征很難區(qū)分其究竟屬于品種A還是品種B，擬采用分子生物學(xué)方法檢測，步驟如下。分別獲取A品種、B品種，以及待測品種的榴蓮嫩葉組織樣品，并提取DNA分子；根據(jù)A、B兩品種的同源基因序列（圖1所示），設(shè)計(jì)PCR引物。其中，引物①的位置已標(biāo)出，引物②與圖1方框中的序列相同：使用凝膠電泳鑒定PCR擴(kuò)增產(chǎn)物，電泳結(jié)果如圖2所示。（3）請(qǐng)?jiān)趫D2中畫出品種A、B榴蓮的樣本所擴(kuò)增產(chǎn)物的大致位置，并根據(jù)結(jié)果判斷待檢測樣品屬于品種B（選填：A/B）。有人認(rèn)為“榴蓮易引起體溫升高”，科研發(fā)現(xiàn)榴蓮中含有硫化物DEDS、DPDS。人類腎干細(xì)胞293T不能表達(dá)TRP蛋白（參與體溫調(diào)節(jié)的一種蛋白質(zhì)），研究者提取人類其他細(xì)胞中的TRPmRNA，逆轉(zhuǎn)錄得到DNA，再導(dǎo)入293T細(xì)胞中，以獲得能成功表達(dá)的293T+細(xì)胞系，向293T+細(xì)胞的培養(yǎng)液中加入兩種硫化物，結(jié)果如圖3。（4）上述用293T細(xì)胞系所做的研究，需要運(yùn)用的實(shí)驗(yàn)技術(shù)有④。（編號(hào)選填）①細(xì)胞融合②胚胎移植③細(xì)胞核移植④傳代培養(yǎng)⑤原代培養(yǎng)⑥RNA干擾（5）293T細(xì)胞內(nèi)TRP基因不表達(dá)，而獲得的293T+細(xì)胞可以表達(dá)TRP蛋白，對(duì)此現(xiàn)象的解釋不合理的是C。A．293T細(xì)胞中的TRP基因高度甲基化B．293T細(xì)胞中的TRP基因所在染色質(zhì)發(fā)生組蛋白修飾C．293T+細(xì)胞中的TRP基因發(fā)生基因突變D．293T+細(xì)胞含有促進(jìn)其表達(dá)的堿基序列（6）請(qǐng)結(jié)合圖3結(jié)果解釋“榴蓮易引起體溫升高”這一說法的科學(xué)性。若要進(jìn)一步檢驗(yàn)該假說，請(qǐng)簡述實(shí)驗(yàn)思路。不完全科學(xué)。根據(jù)圖結(jié)果可知，DEDS的濃度越高，TRP的相對(duì)活性也隨之明顯升高，DPDS也有類似但較弱的作用。所以DEDS等硫化合物可提高TRP活性。又因?yàn)門RP可參與體溫調(diào)控，推測榴蓮中的硫化合物進(jìn)入體內(nèi)，可能引起體溫升高。但缺乏含硫化物與體溫的直接實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。若要進(jìn)一步證明該假說，可以采取如下方案：①給小鼠（或其它合適的動(dòng)物）分組，分別喂服含有不同濃度（包括濃度為0的作為陰性對(duì)照）的DEDS、DPDS的溶液，再合適的時(shí)間檢測體溫，若這些含硫化合物能提高體溫，則支持該假說；②給小鼠（或其它合適的動(dòng)物）分組，分別喂服正常榴蓮果肉及去除DEDS、DPDS的榴蓮果肉，以不服用榴蓮果肉的為陰性對(duì)照組，若喂服去除含硫化合物組動(dòng)物體溫升高幅度顯著低于喂服正常榴蓮果肉組，則支持該假說【考點(diǎn)】植物的組織培養(yǎng)；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件與過程；DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定．【專題】坐標(biāo)曲線圖；模式圖；正推法；植物的組織培養(yǎng)；胚胎工程；理解能力；實(shí)驗(yàn)探究能力．【答案】（1）1mg/L的細(xì)胞分裂素與4.0mg/L的2.4﹣D（2）ABD（3）B（4）④（5）C（6）不完全科學(xué)。根據(jù)圖結(jié)果可知，DEDS的濃度越高，TRP的相對(duì)活性也隨之明顯升高，DPDS也有類似但較弱的作用。所以DEDS等硫化合物可提高TRP活性。又因?yàn)門RP可參與體溫調(diào)控，推測榴蓮中的硫化合物進(jìn)入體內(nèi)，可能引起體溫升高。但缺乏含硫化物與體溫的直接實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。若要進(jìn)一步證明該假說，可以采取如下方案：①給小鼠（或其它合適的動(dòng)物）分組，分別喂服含有不同濃度（包括濃度為0的作為陰性對(duì)照）的DEDS、DPDS的溶液，再合適的時(shí)間檢測體溫，若這些含硫化合物能提高體溫，則支持該假說；②給小鼠（或其它合適的動(dòng)物）分組，分別喂服正常榴蓮果肉及去除DEDS、DPDS的榴蓮果肉，以不服用榴蓮果肉的為陰性對(duì)照組，若喂服去除含硫化合物組動(dòng)物體溫升高幅度顯著低于喂服正常榴蓮果肉組，則支持該假說【分析】1、植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理為植物體細(xì)胞的全能性，即細(xì)胞經(jīng)分裂和分化后仍然具有發(fā)育成完整植株的潛能；培養(yǎng)過程的順序是離體植物器官、組織或細(xì)胞（外植體）脫分化形成愈傷組織，再分化形成根、芽等器官進(jìn)而形成新的植物體。2、由表可知，當(dāng)用1mg/L的細(xì)胞分裂素與4.0mg/L的2.4﹣D處理時(shí)，愈傷組織的形成比例最高，說明該處理最適合愈傷組織的形成?！窘獯稹拷猓海?）由表可知，當(dāng)用1mg/L的細(xì)胞分裂素與4.0mg/L的2.4﹣D處理時(shí)，愈傷組織的形成比例最高，說明該處理最適合愈傷組織的形成。（2）ABD、通過組培獲得完整植株的過程較有性生殖有容易獲得得脫毒植株（通過含病毒較少甚至不含病毒的根尖、莖尖等進(jìn)行培養(yǎng)）、易保持親本優(yōu)良形狀（無性生殖的優(yōu)點(diǎn)之一）、不容易受季節(jié)的限制（實(shí)驗(yàn)室可調(diào)控相應(yīng)的培養(yǎng)條件），ABD正確；C、有性生殖通過基因重組更易體現(xiàn)遺傳多樣性，C錯(cuò)誤。故選：ABD。（3）由圖可知，根據(jù)引物位置，其擴(kuò)增產(chǎn)物含160個(gè)堿基對(duì)，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則可知，擴(kuò)增出的產(chǎn)物屬于品種B，結(jié)合圖2可知，待測樣品含160個(gè)堿基對(duì)，為品種B。擴(kuò)增產(chǎn)物在圖2中產(chǎn)物位置見如圖：（4）上述技術(shù)中涉及細(xì)胞培養(yǎng)，由于已經(jīng)獲得細(xì)胞系，所以涉及細(xì)胞培養(yǎng)中的傳代培養(yǎng)。（5）A、甲基化會(huì)影響基因的表達(dá)，可能293T細(xì)胞中的TRP基因高度甲基化，導(dǎo)致其不表達(dá)，A正確；B、組蛋白修飾會(huì)影響基因的表達(dá)，可能293T細(xì)胞中的TRP基因所在染色質(zhì)發(fā)生組蛋白修飾，導(dǎo)致其不表達(dá)，B正確；C、一般情況下，基因突變后可正常表達(dá)，只是可能表達(dá)產(chǎn)物在結(jié)構(gòu)和功能上有一定差異，293T+細(xì)胞中的TRP基因發(fā)生基因突變后可表達(dá)，C錯(cuò)誤；D、若293T+細(xì)胞含有促進(jìn)其表達(dá)的堿基序列，則其可能正常表達(dá)，而293T細(xì)胞內(nèi)可能不含相應(yīng)的序列而不表達(dá)，D正確。故選：C。（6）根據(jù)圖結(jié)果可知，DEDS的濃度越高，TRP的相對(duì)活性也隨之明顯升高，DPDS也有類似但較弱的作用。所以DEDS等硫化合物可提高TRP活性。又因?yàn)門RP可參與體溫調(diào)控，推測榴蓮中的硫化合物進(jìn)入體內(nèi)，可能引起體溫升高。但由于缺乏含硫化物與體溫的直接實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，不能得出榴蓮易引起體溫升高的結(jié)論，該說法缺乏科學(xué)性。若要進(jìn)一步驗(yàn)證該假說，則需設(shè)計(jì)含硫化物DEDS、DPDS的食物喂服實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，觀察其體溫變化。即可給小鼠（或其它合適的動(dòng)物）分組，分別喂服含有不同濃度（包括濃度為0的作為陰性對(duì)照）的DEDS、DPDS的溶液，再合適的時(shí)間檢測體溫，若這些含硫化合物能提高體溫，則支持該假說；也可給小鼠（或其它合適的動(dòng)物）分組，分別喂服正常榴蓮果肉及去除DEDS、DPDS的榴蓮果肉，以不服用榴蓮果肉的為陰性對(duì)照組，若喂服去除含硫化合物組動(dòng)物體溫升高幅度顯著低于喂服正常榴蓮果肉組，則支持該假說。故答案為：（1）1mg/L的細(xì)胞分裂素與4.0mg/L的2.4﹣D（2）ABD（3）B（4）④（5）C（6）不完全科學(xué)。根據(jù)圖結(jié)果可知，DEDS的濃度越高，TRP的相對(duì)活性也隨之明顯升高，DPDS也有類似但較弱的作用。所以DEDS等硫化合物可提高TRP活性。又因?yàn)門RP可參與體溫調(diào)控，推測榴蓮中的硫化合物進(jìn)入體內(nèi)，可能引起體溫升高。但缺乏含硫化物與體溫的直接實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。若要進(jìn)一步證明該假說，可以采取如下方案：①給小鼠（或其它合適的動(dòng)物）分組，分別喂服含有不同濃度（包括濃度為0的作為陰性對(duì)照）的DEDS、DPDS的溶液，再合適的時(shí)間檢測體溫，若這些含硫化合物能提高體溫，則支持該假說；②給小鼠（或其它合適的動(dòng)物）分組，分別喂服正常榴蓮果肉及去除DEDS、DPDS的榴蓮果肉，以不服用榴蓮果肉的為陰性對(duì)照組，若喂服去除含硫化合物組動(dòng)物體溫升高幅度顯著低于喂服正常榴蓮果肉組，則支持該假說【點(diǎn)評(píng)】本題主要考查植物組織培養(yǎng)的內(nèi)容，要求考生識(shí)記相關(guān)知識(shí)，并結(jié)合所學(xué)知識(shí)準(zhǔn)確答題。19．（2025?銅仁市一模）植物在遭受生物或非生物脅迫時(shí)，往往會(huì)積累次生代謝產(chǎn)物來應(yīng)對(duì)外界傷害。紫杉醇是存在于紅豆杉屬植物體內(nèi)的一種次生代謝產(chǎn)物，具有高抗癌活性。研究發(fā)現(xiàn)從紅豆杉愈傷組織細(xì)胞就可以提取紫杉醇。回答下列問題：（1）在利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)紫杉醇的過程中，最好選擇紅豆杉的幼嫩莖段（幼嫩莖段/成熟莖段）作為外植體進(jìn)行培養(yǎng)，原因是幼嫩莖段細(xì)胞的全能性高于成熟莖段。（2）在一定激素和營養(yǎng)等條件的誘導(dǎo)下，外植體細(xì)胞會(huì)失去其特有的結(jié)構(gòu)和功能，轉(zhuǎn)變成未分化的細(xì)胞，這個(gè)轉(zhuǎn)變過程稱為脫分化。未分化的細(xì)胞進(jìn)而形成愈傷組織，將愈傷組織懸浮培養(yǎng)可獲得紫杉醇。（3）研究人員在利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)紫杉醇的過程中發(fā)現(xiàn)紫杉醇的產(chǎn)量很低。結(jié)合題干信息，提出一種提高紫杉醇產(chǎn)量的措施培養(yǎng)過程中模擬生物或者非生物脅迫環(huán)境。目前利用基因工程構(gòu)建穩(wěn)定高產(chǎn)紫杉醇的工程菌研究取得很大進(jìn)展，寫出利用紫杉醇合成酶基因構(gòu)建基因表達(dá)載體的思路先用一定的限制酶切割載體，使它出現(xiàn)一個(gè)切口，然后用同種限制酶或能產(chǎn)生相同末端的限制酶切割含有紫杉醇合成酶基因的DNA片段，再利用DNA連接酶將目的基因片段拼接到載體的切口處。【考點(diǎn)】植物的組織培養(yǎng)；細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)．【專題】實(shí)驗(yàn)性簡答題；正推反推并用法；植物的組織培養(yǎng)；理解能力；解決問題能力．【答案】（1）幼嫩莖段幼嫩莖段細(xì)胞的全能性高于成熟莖段（2）脫分化（3）培養(yǎng)過程中模擬生物或者非生物脅迫環(huán)境先用一定的限制酶切割載體，使它出現(xiàn)一個(gè)切口，然后用同種限制酶或能產(chǎn)生相同末端的限制酶切割含有紫杉醇合成酶基因的DNA片段，再利用DNA連接酶將目的基因片段拼接到載體的切口處【分析】植物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞具有全能性，其過程為：將離體的植物組織、器官或細(xì)胞經(jīng)過脫分化過程形成愈傷組織，愈傷組織經(jīng)過再分化過程形成胚狀體，進(jìn)一步發(fā)育成為植株?！窘獯稹拷猓海?）在利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)紫杉醇的過程中，最好選擇紅豆杉的幼嫩莖段作為外植體進(jìn)行培養(yǎng)，原因是幼嫩莖段細(xì)胞的全能性高于成熟莖段，分化程度低，更易誘導(dǎo)形成愈傷組織。（2）在一定激素和營養(yǎng)等條件的誘導(dǎo)下，外植體細(xì)胞會(huì)失去其特有的結(jié)構(gòu)和功能，轉(zhuǎn)變成未分化的細(xì)胞，這個(gè)轉(zhuǎn)變過程稱為脫分化。未分化的細(xì)胞進(jìn)而形成愈傷組織，將愈傷組織懸浮培養(yǎng)可獲得紫杉醇。（3）由于題干中提到植物在遭受生物或非生物脅迫時(shí)會(huì)積累次生代謝產(chǎn)物，包括紫杉醇，因此提高紫杉醇產(chǎn)量的一種措施可以是在培養(yǎng)過程中模擬生物或非生物脅迫環(huán)境。目前利用基因工程構(gòu)建穩(wěn)定高產(chǎn)紫杉醇的工程菌研究取得很大進(jìn)展，寫出利用紫杉醇合成酶基因構(gòu)建基因表達(dá)載體的思路為：①選擇合適的載體，如質(zhì)粒；②使用限制性內(nèi)切酶切割載體，產(chǎn)生一個(gè)切口；③用相同的限制性內(nèi)切酶或能產(chǎn)生相同末端的限制性內(nèi)切酶切割含有紫杉醇合成酶基因的DNA片段；④利用DNA連接酶將紫杉醇合成酶基因片段拼接到載體的切口處，形成重組載體；⑤將重組載體導(dǎo)入宿主細(xì)胞，如細(xì)菌，以實(shí)現(xiàn)紫杉醇合成酶基因的表達(dá)。故答案為：（1）幼嫩莖段幼嫩莖段細(xì)胞的全能性高于成熟莖段（2）脫分化（3）培養(yǎng)過程中模擬生物或者非生物脅迫環(huán)境先用一定的限制酶切割載體，使它出現(xiàn)一個(gè)切口，然后用同種限制酶或能產(chǎn)生相同末端的限制酶切割含有紫杉醇合成酶基因的DNA片段，再利用DNA連接酶將目的基因片段拼接到載體的切口處【點(diǎn)評(píng)】本題結(jié)合圖解，考查植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，要求學(xué)生理解植物組織培養(yǎng)的原理、過程、條件及產(chǎn)物，掌握植物組織培養(yǎng)技術(shù)的相關(guān)應(yīng)用，從而結(jié)合題干信息對(duì)本題作出正確解答，意在考查學(xué)生的理解能力和綜合分析能力。20．（2025?漳州模擬）坦布蘇病毒（TMUV，單鏈RNA病毒）可引起肉鴨嚴(yán)重的神經(jīng)癥狀和蛋鴨產(chǎn)蛋量的急劇下降，研究者將綠色熒光蛋白基因（EGFP）插入坦布蘇病毒的基因組中構(gòu)建報(bào)告病毒，其構(gòu)建的部分流程如圖甲所示?；卮鹣铝袉栴}：（1）利用PCR技術(shù)獲得EGFP﹣2A片段，預(yù)變性是在98℃下進(jìn)行，變性則是在95℃下進(jìn)行，進(jìn)行該操作的目的是使DNA分子充分變性。PCR過程中復(fù)性的結(jié)果是兩種引物通過堿基互補(bǔ)配對(duì)與兩條單鏈DNA結(jié)合。（2）為了使EGFP﹣2A片段能正向插入TMUV基因組中，PCR設(shè)計(jì)的引物F和2A﹣R的序列要能分別與①、②互補(bǔ)配對(duì)。2A基因的表達(dá)產(chǎn)物2A蛋白可以通過“核糖體跳躍”斷開位于2A肽尾端甘氨酸和脯氨酸之間的肽鍵，推測在重組DNA中引入2A的目的是將EGFP與TMUV病毒的前體蛋白斷裂成獨(dú)立蛋白。（3）科研人員通過基因工程獲取坦布蘇病毒的prM蛋白（153個(gè)氨基酸構(gòu)成）用于制備單克隆抗體。為了鑒定單克隆抗體識(shí)別prM蛋白的具體區(qū)域，將prM蛋白逐步截短，分別與純化的單克隆抗體反應(yīng)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖乙（“aa”表示氨基酸，“+”表示有反應(yīng)，“﹣”表示無反應(yīng)）。①制備單克隆抗體時(shí)，需用純化的prM蛋白對(duì)小鼠進(jìn)行免疫，其目的是獲得能產(chǎn)生抗prM蛋白（特定）抗體的B淋巴細(xì)胞，并將該細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，對(duì)經(jīng)特定的選擇培養(yǎng)基篩選得到的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，多次篩選后可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞，再將其注射到小鼠的腹腔內(nèi)增殖并產(chǎn)生抗體。②根據(jù)圖示實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析，該單克隆抗體識(shí)別prM蛋白的區(qū)域大概包含15（填“10”“15”或“20”）個(gè)氨基酸殘基?！究键c(diǎn)】單克隆抗體及其應(yīng)用；DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定．【專題】圖文信息類簡答題；PCR技術(shù)；克隆技術(shù)；理解能力．【答案】（1）使DNA分子充分變性兩種引物通過堿基互補(bǔ)配對(duì)與兩條單鏈DNA結(jié)合（2）使EGFP﹣2A片段能正向插入TMUV基因組中將EGFP與TMUV病毒的前體蛋白斷裂成獨(dú)立蛋白（3）能產(chǎn)生抗prM蛋白（特定）抗體的B淋巴克隆化培養(yǎng)和抗體檢測15【分析】PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。其原理為DNA復(fù)制。PCR的前提條件為要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對(duì)引物。PCR的條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、耐高溫DNA聚合酶（TaqDNA聚合酶）。PCR過程：①高溫變性：DNA解旋過程（PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開）；②低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈?！窘獯稹拷猓海?）利用PCR技術(shù)獲得EGFP﹣2A片段，預(yù)變性是在98℃下進(jìn)行，變性則是在95℃下進(jìn)行，進(jìn)行該操作的目的是使DNA分子充分變性，獲得DNA單鏈。PCR過程中復(fù)性的結(jié)果是兩種引物通過堿基互補(bǔ)配對(duì)與兩條單鏈DNA結(jié)合，為后續(xù)子鏈延伸做準(zhǔn)備。（2）為了使EGFP﹣2A片段能正向插入TMUV基因組中，觀察圖甲可發(fā)現(xiàn)EGFP﹣2A片段的左側(cè)插入的部位是①處，EGFP﹣2A片段的右側(cè)插入的部位是TMUV基因的左側(cè)（②處），因此PCR引物的設(shè)計(jì)要求是引物F和2A﹣R的序列要能分別與①、②互補(bǔ)配對(duì)，這樣才能保證EGFP﹣2A片段能正向插入TMUV基因組中；由題意可知，2A蛋白會(huì)使核糖體跳過2A肽尾端，可推測在重組DNA中引入2A的目的是將EGFP與TMUV病毒的前體蛋白斷裂成獨(dú)立蛋白。（3）①制備單克隆抗體時(shí)，需用純化的prM蛋白對(duì)小鼠進(jìn)行免疫，其目的是獲得能產(chǎn)生抗prM蛋白（特定）抗體的B淋巴細(xì)胞，并將該細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，對(duì)經(jīng)特定的選擇培養(yǎng)基篩選得到的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，多次篩選后可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞，再將其注射到小鼠的腹腔內(nèi)增殖并產(chǎn)生抗體，而后從小鼠的腹水中獲取抗體。②實(shí)驗(yàn)操作將prM蛋白逐步截短，仍然能與單克隆抗體反應(yīng)的區(qū)域即為單抗可識(shí)別的具體區(qū)域，結(jié)合圖示可推測40～55aa區(qū)間，含15個(gè)氨基酸殘基，應(yīng)該是單克隆抗體的關(guān)鍵區(qū)域。故答案為：（1）使DNA分子充分變性兩種引物通過堿基互補(bǔ)配對(duì)與兩條單鏈DNA結(jié)合（2）使EGFP﹣2A片段能正向插入TMUV基因組中將EGFP與TMUV病毒的前體蛋白斷裂成獨(dú)立蛋白（3）能產(chǎn)生抗prM蛋白（特定）抗體的B淋巴克隆化培養(yǎng)和抗體檢測15【點(diǎn)評(píng)】本題考查PCR技術(shù)的相關(guān)