ICS65.020.01DB22B21吉林省地方標(biāo)準(zhǔn)DB22/T2620—2017雜交大豆三系原種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程Technicalregulationforfoundationseedproductionofthree-linesinhybridsoybean吉林省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布DB22/T2620—2017前言本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1-2009給出的規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)由吉林省農(nóng)業(yè)委員會提出并歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：吉林省農(nóng)業(yè)科學(xué)院。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：彭寶、趙麗梅、張井勇、張春寶、張偉龍、閆昊、張偉、趙鑫。IDB22/T2620—2017雜交大豆三系原種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了雜交大豆三系原種生產(chǎn)技術(shù)、生產(chǎn)方法、保持系原種生產(chǎn)、不育系原種生產(chǎn)和恢復(fù)系原種生產(chǎn)。本標(biāo)準(zhǔn)適用于雜交大豆“質(zhì)-核互作型”雄性不育系、保持系、恢復(fù)系原種生產(chǎn)。規(guī)范性引用文件2下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T3543.2農(nóng)作物種子檢驗規(guī)程GB4404.2糧食作物種子第2部分：豆類NY/T1299農(nóng)作物品種區(qū)域試驗技術(shù)規(guī)程大豆DB22/T2209雜交大豆種子DB22/T2209界定的以及下列術(shù)語和定義適用于本文件。為了便于使用，以下重復(fù)列出了DB22/T2209雌蕊正常而雄蕊花粉敗育，自交不能結(jié)實，雄性不育性受細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核不育基因共同控制的大豆品種（系），用A表示。三系種子繁殖seedreproductionofthree-lineparents利用三系繁殖種子的過程，保持系給不育系授粉繁殖不育系種子，保持系、恢復(fù)系自交繁殖保持系和恢復(fù)系種子。1DB22/T2620—20173.6三系原種生產(chǎn)foundationseedproductionofthree-lineparents在防雜保純的基礎(chǔ)上，保持不育系的不育性、保持系的保持力、恢復(fù)系的恢復(fù)度等遺傳特性，繁殖達(dá)到原種標(biāo)準(zhǔn)的三系種子的過程。3.7選種圃selectionnurseryofindividualplants用于單株選擇和不育系回交的圃場3.8株行圃plant-rownursery選種圃入選單株種成株行的圃場。3.9株系圃plant-linenursery株行圃入選株行每個株行種植成一個小區(qū)，形成一個株系的圃場。3.10株系種子seedsofselectedline入選株系的種子。3.11育種家種子breederseeds由育種家生產(chǎn)的、具備本品種特征特性、純度達(dá)到100%的種子。3.12原種種子foundationseeds用育種家種子繁殖得到的第一代至第三代種子或按原種生產(chǎn)技術(shù)操作規(guī)程生產(chǎn)得到的達(dá)到原種標(biāo)準(zhǔn)的種子。4.1基地選擇應(yīng)選擇隔離條件優(yōu)越、無檢疫性病蟲害、土壤肥力中等、地力均勻一致、排灌方便的田塊，并符合下列要求：a)不育系原種生產(chǎn)基地選擇干旱少雨（開花期降雨量小于100mm），有灌溉條件、野生傳粉昆蟲豐富的地區(qū)；a)不育系在小面積內(nèi)采用網(wǎng)室隔離，大面積自然條件下種子生產(chǎn)空間隔離距離1000m以上，采用人工釋放蜜蜂傳粉空間隔離距離3000m以上；4.3入選材料選擇原則以田間選擇為主，結(jié)合室內(nèi)考種綜合評定。2DB22/T2620—20175保持系原種生產(chǎn)5.1選種圃5.1.1種子來源保持系原種。5.1.2田間設(shè)計單株株距10cm，行距60cm，根據(jù)需種量確定種植面積，田間管理同大田。5.1.3選擇依據(jù)當(dāng)選單株下列性狀應(yīng)符合原品系特征特性：a)株型、葉型、莢型、粒型、結(jié)莢習(xí)性、生育期；b)下胚軸顏色、花色、茸毛色、粒色、臍色。5.1.4選擇時期和數(shù)量5.1.4.1田間階段全生育期分4次逐級選擇：a)苗期：以下胚軸顏色、葉型為主，初選400～500株，予以標(biāo)記；b)花期：以花的顏色為主，選留300～400株；c)鼓粒期：以抗病性、茸毛色進(jìn)行選擇，選留200～300株；d)成熟期：以株型、莢型、結(jié)莢習(xí)性、茸毛色、生育期、結(jié)實率為主，定選200株。對定選的200株進(jìn)行考種，考查株高、節(jié)數(shù)、有效莢數(shù)、有效分枝、單株粒數(shù)、百粒重、粒色、粒型、臍色、完全粒率等，綜合評選出100株。將當(dāng)選的單株單收、單脫、編號登記、單儲。各單株取60粒種子，每個單株種成株行，按編號順序排列，不設(shè)重復(fù)，每隔15個編號設(shè)一個對照，對照為同保持系育種家種子。2粒點播，株距15cm，行距60cm，區(qū)間走道100cm。3DB22/T2620—20175.3.1種子來源上季當(dāng)選的株行種子。5.3.2田間設(shè)計按株行編號順序排列，每個株行種子種成5行，每隔10個編號設(shè)一個對照，對照為同保持系育種家種子。5.3.3觀察記載和選擇方法同5.1.3/5.1.4，每個株系定點10株觀察記載，各生育階段觀察記載群體表現(xiàn)型和田間雜株，凡出現(xiàn)有異型株的株系，淘汰全系。5.3.4測保鑒定開花期對當(dāng)選株系選取3株與對應(yīng)不育系原種（另圃種植）測交，收獲不育系結(jié)實的種子作測保鑒定（鑒定花粉不育度和隔離自交結(jié)實率）。5.3.5綜合評選通過田間觀測和室內(nèi)考種，綜合評選優(yōu)良株系，當(dāng)選率50%，當(dāng)選株系種子單收單儲，結(jié)合測保鑒定結(jié)果，淘汰保持力低于99%的株行，混合成為株系種。5.4原種圃上季當(dāng)選的混合株系種子，在隔離條件下，進(jìn)行種植，管理同大田。應(yīng)根據(jù)GB/T3543.2進(jìn)行鑒定和檢測，符合GB4404.2要求的種子即為原種。不育系與保持系同期播種，相間種植，行比為1∶1，行距為60cm，株距為40cm，每穴2株，花期以該不育系原有的不育性、異交率為選擇依據(jù)，其他性狀與對應(yīng)保持系相同，見5.1.3.始花期對初選合格單株逐株掛牌鏡檢，選留花粉敗育率達(dá)到高不育以上或者完全不育的單株。參見4DB22/T2620—2017選擇步驟同5.1.4，再根據(jù)鏡檢復(fù)選，田間選擇數(shù)量不少于200株，決選不少于50株。6.1.6種子收儲將入選的單株單獨收獲、脫粒、編號登記和儲藏。6.2株行圃6.2.1種子來源不育系使用上季當(dāng)選的不育系單株種子，測交保持系使用與不育系成對測交的保持系種子。6.2.2田間設(shè)計同6.1.26.2.3觀察記載及選擇方法同5.1.3，每株均掛牌觀察，在當(dāng)選的株行中，取樣10株進(jìn)行室內(nèi)考種，考查單株粒數(shù)、異交結(jié)實率、百粒重。6.2.4育性選擇及育性檢驗同6.1.4，育性檢驗發(fā)現(xiàn)異型株并已經(jīng)散粉，全株行立即淘汰。6.2.5株行決選授粉結(jié)束后，立即割除保持系；成熟時當(dāng)選株行分別單收、單脫、編號登記、單曬、單儲。同時收獲同世代配套單繁的保持系種子。保持系與不育系同期播種，行比1∶1，每個株行種植1個小網(wǎng)棚，行距60cm，株距40cm，花期放蜂。6.3.3.1觀察記載同5.1.3，分株系取樣鏡檢花粉。記載繁殖區(qū)和性狀鑒定區(qū)的田間純度，調(diào)查記載5DB22/T2620—20176.3.3.2去雜應(yīng)在繁殖區(qū)及時拔除可育的單株，發(fā)現(xiàn)有變異株的株系，全株系淘汰。6.3.4結(jié)實率調(diào)查與測產(chǎn)繁殖區(qū)各株系取10株調(diào)查結(jié)實率，并測產(chǎn)；隔離區(qū)調(diào)查全部植株的自交結(jié)實率。6.3.5綜合選擇根據(jù)觀察記載、目測、鏡檢、隔離自交結(jié)實率、田間測產(chǎn)情況，綜合評選優(yōu)系，當(dāng)選率50%。6.3.6收獲授粉結(jié)束后，立即割除保持系，成熟后混收當(dāng)選株系種子，即為株系種。同時收獲同世代配套單繁的保持系種子。6.4原種圃6.4.1種子來源使用6.3.6的收獲的不育系和保持系種子。6.4.2田間種植6.4.2.1網(wǎng)室隔離保持系與不育系1:1種植，行距60cm，株距40cm，花期放蜂，嚴(yán)格除雜。6.4.2.2大田隔離保持系與不育系按1:2種植，保持系株行距同大田，嚴(yán)格除雜。6.5原種選定授粉結(jié)束后立即割除保持系，應(yīng)根據(jù)GB/T3543進(jìn)行鑒定和檢測，符合GB4404.2要求的種子混合收獲定為不育系原種。雜種優(yōu)勢和恢復(fù)力鑒定開花期對當(dāng)選株行選取3個單株與所配組合的不育系原種測交，收獲不育系結(jié)實的真雜交種子，下季種植鑒定雜種優(yōu)勢，綜合評選出典型性好，恢復(fù)度不低于對照、恢復(fù)株率100%的株系，株行當(dāng)選率30%～50%，株系當(dāng)選率50%～70%。7.4株行、株系圃觀察記載項目、標(biāo)準(zhǔn)、方法7.5原種選定6DB22/T2620—2017當(dāng)選株系混合為株系種，根據(jù)需要繁殖原種。應(yīng)根據(jù)GB/T3543進(jìn)行鑒定和檢測，符合GB4404.2要求的種子定為恢復(fù)系原種。7DB22/T2620—2017AA附錄A（規(guī)范性附錄）雜交大豆三系原種生產(chǎn)田間記載項目與方法A.1田間檔案記載應(yīng)符合NY/T1299的規(guī)定。A.2主要生育性狀同A.1。A.3主要形態(tài)特征特性同A.1。A.4花粉A.4.1花粉鏡檢不育系始花期每株取主莖上、中、下3個未開花，用70%的酒精溶液固定，然后取出花藥置于0.56%的碘-碘化鉀液的載玻片上，搗碎花藥擠出花粉，使花粉均勻分布，在160倍顯微鏡下進(jìn)行全視野觀察后，再選3個有代表性視野計數(shù)各類花粉的數(shù)量，凡染色花粉較多的植株復(fù)檢一次。為防止人為誤差，要求同一品種材料由同一個人完成花粉鏡檢，并保持操作的一致性。根據(jù)在顯微鏡下觀察花粉能染上色的為可育花粉，染不上色的為敗育花粉?；ǚ劢?jīng)碘