2025屆上海楊浦高級中學高三壓軸卷生物試卷注意事項：1．答題前，考生先將自己的姓名、準考證號填寫清楚，將條形碼準確粘貼在考生信息條形碼粘貼區(qū)。2．選擇題必須使用2B鉛筆填涂；非選擇題必須使用0．5毫米黑色字跡的簽字筆書寫，字體工整、筆跡清楚。3．請按照題號順序在各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答，超出答題區(qū)域書寫的答案無效；在草稿紙、試題卷上答題無效。4．保持卡面清潔，不要折疊，不要弄破、弄皺，不準使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．冠狀病毒是一類致病性很強的RNA病毒，這類病毒（）A．能夠利用自身的核糖體合成蛋白質(zhì)B．核酸組成中特有的堿基為胸腺嘧啶C．可用含有碳源、氮源等營養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基培養(yǎng)D．利用宿主細胞的核糖核苷酸及氨基酸等物質(zhì)增殖2．下列有關(guān)“21三體綜合征”的敘述，正確的是A．患者體細胞中含有3個染色體組B．患者也能產(chǎn)生正常的生殖細胞C．父方或母方只有減數(shù)第二次分裂異常時才可能導(dǎo)致子代患病D．高齡產(chǎn)婦產(chǎn)下21三體綜合征患兒的概率并沒有明顯增加3．下列關(guān)于細胞代謝的敘述，正確的是A．蛔蟲在細胞呼吸過程中，釋放能量最多的結(jié)構(gòu)是線粒體內(nèi)膜B．外界溶液濃度大于細胞液濃度時，即使細胞沒有發(fā)生質(zhì)壁分離，也不能判斷是死細胞C．細胞內(nèi)能量通過ATP分子在吸能反應(yīng)和放能反應(yīng)之間循環(huán)流通D．在劇烈運動過程中，肌細胞釋放CO2量/吸收O2量的值將增大4．下列有關(guān)植物激素的說法，正確的是（）A．1931年科學家從人尿中分離出的吲哚乙酸具有生長素效應(yīng)，則吲哚乙酸是植物激素B．1935年科學家從赤霉菌培養(yǎng)基中分離出致使水稻患惡苗病赤霉素，則赤霉素是植物激素C．用乙烯利催熟鳳梨可以做到有計劃地上市，使用的乙烯利是植物激素D．植物體內(nèi)還有一些天然物質(zhì)也在調(diào)節(jié)著生長發(fā)育過程，這些天然物質(zhì)是植物激素5．某單基因遺傳病在某地區(qū)人群中的發(fā)病率為4%，下圖為該遺傳病的一個家系圖，其中已知I－3為純合子，I－1、II－6和II－7因故已不能提取相應(yīng)的遺傳物質(zhì)。則下列判斷正確的是（）A．此遺傳病為伴X染色體隱性遺傳病B．該家系中此遺傳病的正?；蝾l率為80%C．通過比較III－10與Ⅰ－3或Ⅱ－5的線粒體DNA序列可判斷他與該家系的血緣關(guān)系D．II－8與該地區(qū)一個表現(xiàn)型正常的男性結(jié)婚后，生一個患該病女孩的概率是1/246．B淋巴細胞合成抗體移到質(zhì)膜上作抗原受體。下列關(guān)于該過程的敘述，正確的是（）A．氨基酸在游離核糖體中通過脫水縮合形成肽鏈B．完整的肽鏈被膜泡包裹后進入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)囊腔加工C．內(nèi)質(zhì)網(wǎng)向外與質(zhì)膜相連直接將抗體移到質(zhì)膜上D．將抗體移到質(zhì)膜上的過程需要ATP提供能量二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）科研人員用3個相同的透明玻璃容器將生長狀況相似的三株天竺葵分別罩住形成密閉氣室，在其他環(huán)境因素相同且適宜的條件下，探究不同光照強度對植物光合作用強度的影響，利用傳感器定時測定氣室中二氧化碳濃度，繪制了下圖。假設(shè)天竺葵的呼吸作用強度始終不變，據(jù)圖回答下列問題：（1）A組天竺葵葉肉細胞內(nèi)能產(chǎn)生ATP的場所是____________。（2）B組天竺葵葉肉細胞的光合速率____________（填“大于“小于”或“等于”）它的呼吸速率。（3）C組天竺葵的葉肉細胞中氧氣的擴散方向是____________。在0～x1時間范圍內(nèi)，C組天竺葵植株的平均實際光合速率是________________________ppm/s。（4）在此條件下，若想確定完全光照是否是天竺葵生長的最適宜光照強度，請在本實驗的基礎(chǔ)上寫出進一步探究的實驗思路：________________________8．（10分）實驗人員從環(huán)境中分離獲得白腐菌，以白腐菌的菌絲或孢子制得固定化白腐菌凝膠顆粒，圖1為兩種凝膠顆粒各取25個分別處理50mL染料廢水的實驗結(jié)果，圖2為研究不同數(shù)量的凝膠顆粒處理50mL染料廢水的實驗結(jié)果。請據(jù)圖分析回答：（1）從野外采集白腐菌前，先向待采集土壤噴灑適量染料廢水的目的是________。某同學在進行白腐菌分離純化實驗時，可采用平板劃線法或___________。將收集到的菌絲或者孢子加入到適量的海藻酸鈉溶液中混勻，抽取5mL混合液，滴加到CaCl2溶液中，該過程中CaCl2溶液的作用是________。（2）現(xiàn)要處理100L皮革生產(chǎn)過程中產(chǎn)生的染料廢水。為達到最好的凈化效果，從圖2實驗結(jié)果分析，應(yīng)選用________凝膠顆粒，添加________個凝膠顆粒，從圖1分析應(yīng)保持________天以上。（3）在工業(yè)生產(chǎn)中使用固定化白腐菌凝膠顆粒的制作方法是_________。與向染料廢水中直接接種白腐菌相比，在工業(yè)生產(chǎn)中使用固定化白腐菌凝膠顆粒的優(yōu)點主要是________。9．（10分）長跑比賽過程中，需要多個器官、系統(tǒng)相互協(xié)調(diào)，才能順利完成各項生理活動?；卮鹣铝杏嘘P(guān)長跑比賽的問題：（1）運動員進入比賽位置后高度緊張引起腎上腺素分泌量增加，進而引起心率加速，該實例表明神經(jīng)調(diào)節(jié)和激素調(diào)節(jié)之間存在緊密聯(lián)系，可以概括為___________________、________________。（2）長跑比賽過程中消耗的能量以及散失的熱量主要產(chǎn)自細胞的哪一個部位？________。細胞無氧呼吸時產(chǎn)生的大量乳酸進入血漿后并不會引起pH明顯變化，原因是________。（3）運動員長跑運動結(jié)束后面部通紅，出現(xiàn)這種現(xiàn)象的原因是________________________。（4）整個長跑運動過程中，運動員對肝糖原、肌糖原的消耗量都很大。這兩種糖原在相應(yīng)細胞中發(fā)生的主要變化是________________________________。10．（10分）科學家從某細菌中提取抗鹽基因，轉(zhuǎn)入煙草并培育成轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草。下圖是轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草的培育過程，含目的基因的DNA和質(zhì)粒上的箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點。請分析回答下列問題：（1）在該過程中，研究人員首先獲取了抗鹽基因（目的基因），并采用____________技術(shù)對目的基因進行擴增，該技術(shù)擴增目的基因的前提是_________________________，以便根據(jù)這一序列合成引物，同時該技術(shù)必須用_____________酶；然后構(gòu)建基因表達載體，其目的是_________________________。（2）用圖中的質(zhì)粒和目的基因構(gòu)建重組質(zhì)粒，不能使用SmaI酶切割，原因是________________________。（3）圖中⑤、⑥依次表示植物組織培養(yǎng)過程中抗鹽煙草細胞的____________、____________過程。（4）為確定轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草是否培育成功，既要進行分子雜交檢測，又要在個體水平上鑒定，后者具體過程是_____________________________________________________________。11．（15分）在中國的傳說中，醋最早是由“酒圣”杜康之子發(fā)明。杜康的兒子墨塔在一次釀酒時發(fā)酵過頭，直至第21天開缸時，發(fā)現(xiàn)酒液已變酸，但香氣撲鼻，且酸甜可口，于是墨塔便把“廿一日”加一“酉”字，給這種酸水起名為“醋”。請思考回答下列問題：（1）酒是酵母菌發(fā)酵的產(chǎn)物，發(fā)酵初期通入氧氣的目的是________________________________，酒精是在酵母菌細胞的_____________中產(chǎn)生的，我們可以使用____________試劑檢測酒精的產(chǎn)生。（2）墨塔釀的酒變酸是_______菌發(fā)酵的結(jié)果，墨塔釀酒反成醋的原因可能是________________（答出2點即可）。（3）在釀酒的過程中，糖類即使未耗盡，酵母菌的發(fā)酵過程也會停止，原因可能是pH降低和____含量增多；為提升發(fā)酵產(chǎn)量，需要篩選和純化對發(fā)酵環(huán)境耐受性強的酵母菌種，純化過程中最常用的2種微生物接種方法是______________________________________________________________。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、D【解析】

病毒是一類沒有細胞結(jié)構(gòu)的特殊生物，只有蛋白質(zhì)外殼和內(nèi)部的遺傳物質(zhì)構(gòu)成，不能獨立的生活和繁殖，只有寄生在其他生物的活細胞內(nèi)才能生活和繁殖，一旦離開了活細胞，病毒就無法進行生命活動?！驹斀狻緼、病毒無細胞結(jié)構(gòu)，無核糖體，A錯誤；B、冠狀病毒為RNA病毒，不含DNA，無胸腺嘧啶，B錯誤；C、病毒不能用培養(yǎng)基培養(yǎng)，必須寄生到活細胞中，C錯誤；D、病毒能利用宿主細胞的結(jié)構(gòu)和原料，在宿主細胞中增殖，D正確。故選D。2、B【解析】

患者體細胞中含有21號染色體比正常多了1條，A錯誤；理論上該患者能產(chǎn)生正常的生殖細胞，B正確；精子或卵細胞中21號染色體多一條都會導(dǎo)致受精作用后形成21三體的受精卵，所以異常細胞既可來自父方也可來自母方，也可能是減數(shù)第一次分裂異常，C錯誤；高齡孕婦生育21三體綜合征患兒的風險較高，原因是隨著母親年齡的增大，導(dǎo)致卵細胞形成過程中21號染色體發(fā)生不分離的可能性增加，導(dǎo)致卵細胞多了一條21號染色體，D錯誤。故選：B。3、B【解析】

1、原核生物只有核糖體一種細胞器。2、外界溶液濃度大于細胞液濃度，細胞不發(fā)生質(zhì)壁分離，可以判定細胞死活，前提是那個細胞必須要有細胞壁，比如植物細胞。3、ATP含量少，在體內(nèi)可以分解，也可以迅速合成，供給生命活動的能量。4、人體細胞進行有氧呼吸吸收O2，釋放CO2，而進行無氧呼吸產(chǎn)生乳酸?！驹斀狻緼、蛔蟲寄生于人體消化道內(nèi)，沒有線粒體，A錯誤；B、質(zhì)壁分離是植物的原生質(zhì)層和細胞壁發(fā)生分離，細胞沒有發(fā)生質(zhì)壁分離有可能是動物細胞，所以不能判斷細胞死活，B正確；C、能量不能循環(huán)，C錯誤；D、人體細胞無氧呼吸既不吸收O2，也不釋放CO2，所以細胞釋放CO2量/吸收O2量的值將不變，D錯誤。故選B?！军c睛】本題主要考查質(zhì)壁分離實驗以及呼吸作用的知識，理解質(zhì)壁分離的條件，易錯點是D項動物細胞無氧呼吸的過程。4、D【解析】

植物激素：指在植物體內(nèi)合成，從產(chǎn)生部位運輸?shù)阶饔貌课?，并且對植物體的生命活動產(chǎn)生顯著調(diào)節(jié)作用的微量有機物。植物生長調(diào)節(jié)劑：人工合成的対織物的生長發(fā)育有調(diào)節(jié)作用的化學物質(zhì)?！驹斀狻緼、吲哚乙酸是人尿中的化學物質(zhì)，不能說明是植物體內(nèi)產(chǎn)生的，植物體內(nèi)產(chǎn)生的吲哚乙酸才是植物激素，A錯誤；B、赤霉菌產(chǎn)生的赤霉素不屬于植物激素，B錯誤；C、乙烯利不屬于植物激素，是植物生長調(diào)節(jié)劑，C錯誤；D、植物激素是植物體內(nèi)產(chǎn)生的，對植物的生命活動其重要調(diào)節(jié)作用的微量有機物，D正確。故選D。5、D【解析】

該單基因遺傳病在某地區(qū)的發(fā)病率為4%，根據(jù)遺傳平衡定律，在該地區(qū)中致病基因的基因頻率是20%，正?；虻幕蝾l率為80%．【詳解】由題干和題圖信息分析，I－3為純合子，說明是隱性遺傳病，又因為I－1的兒子正常，則該遺傳病是常染色體隱性遺傳病，A錯誤；根據(jù)題意分析，患者的發(fā)病率為4%，則致病基因的頻率為20%，則在該地區(qū)中正常基因頻率為80%，但是該家系的基因頻率不一定是80%，B錯誤；Ⅱ-5是III-10的姑姑，而一個人的線粒體DNA主要來自于母親，因此不能比較III-10與Ⅱ-5的線粒體DNA序列來判斷他與該家系的血緣關(guān)系，C錯誤；假設(shè)該病的致病基因用a表示，Ⅱ-8的基因型為Aa，表現(xiàn)型正常的男性的基因型為AA或Aa，Aa的概率是（2×20%×80%）：（2×20%×80%+80%×80%）=1/3，因此生一個患該病女孩的概率是1/2×1/3×1/4=1/24，D正確。故選D【點睛】遺傳病的判定方法：（1）首先確定顯隱性：①“無中生有為隱性”，“有中生無為顯性”，判斷是顯性還是隱性遺傳病方法，看有無同時正常的雙親生患病的后代，或同時患病的雙親生正常的孩子；②如果患者很多連續(xù)每代都有最可能顯性遺傳，如果患者數(shù)量很少，只有某代或隔代個別有患者即為隱性遺傳。（2）再確定致病基因的位置：①“無中生有為隱性，女兒患病為常隱”，“有中生無為顯性，女兒正常為常顯”；②“母患子必患，女患父必患，男性患者多于女性”，則最可能為“X隱”（女病男必病）；父患女必患，子患母必患，女性患者多于男性”，最可能為“X顯”（男病女必?。?；③“父傳子，子傳孫，子子孫孫無窮盡，無女性患者”，則最可能為“伴Y”（男性全為患者）。6、D【解析】

成熟的B淋巴細胞的受體分子在合成后便移到細胞膜上。成熟的B淋巴細胞在血液中循環(huán)流動。當它的受體分子兩臂遇到相應(yīng)的抗原并將它鎖定在結(jié)合位點后，這個B淋巴細胞便被致敏了，并準備開始分裂。分泌蛋白合成與分泌過程:核糖體合成蛋白質(zhì)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)進行粗加工內(nèi)質(zhì)網(wǎng)“出芽”形成囊泡高爾基體進行再加工形成成熟的蛋白質(zhì)高爾基體“出芽”形成囊泡細胞膜?！驹斀狻緼、核糖體無膜結(jié)構(gòu)，故氨基酸在游離核糖體上通過脫水縮合形成肽鏈，A錯誤；B、完整的肽鏈在核糖體上合成后直接進入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)囊腔加工，B錯誤；C、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)向外與質(zhì)膜相連，向內(nèi)與核外膜相連，抗體的合成和分泌過程經(jīng)過了核糖體的合成，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的初加工和高爾基體的再加工，然后以囊泡的形式將抗體運輸?shù)劫|(zhì)膜上，C錯誤；D、將抗體移到質(zhì)膜上的過程需要消耗ATP提供的能量，D正確。故選D。二、綜合題：本大題共4小題7、細胞質(zhì)基質(zhì)和線粒體大于從葉綠體擴散到線粒體和細胞外（密閉氣室）（y3-y1）/x1進一步探究思路：在30%至完全光照之間，設(shè)置不同梯度的光照強度，其他條件跟本實驗相同，測定氣室中二氧化碳的濃度?！窘馕觥?/p>

分析題圖：圖示探究不同光照強度對密閉氣室中天竺葵光合作用強度的影響，自變量為光照強度，因變量為CO2濃度，對比曲線可知，A組只進行呼吸作用，故CO2濃度上升，B、C組光照，其中B組CO2濃度基本不變，C組CO2濃度顯著下降，說明完全光照條件下天竺葵光合作用速率最強，且30%光照強度下凈光合速率幾乎為0?！驹斀狻浚?）A組在黑暗條件下，天竺葵只進行呼吸作用，其葉肉細胞內(nèi)能產(chǎn)生ATP的場所是細胞質(zhì)基質(zhì)和線粒體。

（2）據(jù)圖可知，B組天竺葵的密閉氣室內(nèi)CO2濃度不變，說明該條件下天竺葵的葉肉細胞光合作用強度和天竺葵植株的呼吸作用強度相同，因此，B組天竺葵葉肉細胞的光合速率大于葉肉細胞的呼吸速率。

（3）C組天竺葵光合作用大于呼吸作用，葉肉細胞中氧氣的擴散方向是從葉綠體擴散到線粒體和細胞外（密閉氣室）；在0～x1時間范圍內(nèi)，A組CO2濃度為y3，說明呼吸作用強度為（y3-y2），而C組CO2濃度為y1，即C組凈光合作用強度為（y2-y1），則C組天竺葵植株的總光合作用強度=凈光合強度+呼吸作用強度=（y2-y1）+（y3-y2）=（y3-y1），因此C組天竺葵的平均實際光合速率是（y3-y1）/x1ppm/s。

（4）在此條件下，若想確定完全光照是否是天竺葵生長的最適宜光照強度，需要進一步設(shè)置光照強度梯度進行實驗，實驗思路如下：在30%光照和完全光照之間，設(shè)置多個梯度的光照強度進行實驗，其他條件與原實驗相同，測定、比較單位時間內(nèi)各密閉氣室的二氧化碳濃度?！军c睛】本題綜合考查光合作用、細胞呼吸的關(guān)系、光照強度對光合作用的影響，分析題圖獲取信息并利用相關(guān)信息結(jié)合所學知識進行分析、計算，解答本題的關(guān)鍵是能正確理解曲線圖，并能根據(jù)圖示信息對植物呼吸作用強度和凈光合作用強度進行判斷。8、使分解染料的白腐菌富集稀釋涂布平板法與海藻酸鈉反應(yīng)形成凝膠球（凝固劑）固定化白腐菌孢子（或孢子）6000010包埋法可以反復(fù)利用【解析】

1、固定化技術(shù)是指將酶或細胞固定于載體上，便于與反應(yīng)物分離,并能可重復(fù)使用，提高生成物的質(zhì)量。固定化酶一般采用化學結(jié)合法，固定化細胞多采用包埋法、物理吸附法（像用海藻酸鈉進行包埋）。2、根據(jù)圖1和圖2顯示可以發(fā)現(xiàn)：應(yīng)選用固定化白腐菌孢子（或孢子）凝膠顆粒脫色率較高。由圖1可知：凈化時間需要保持10天以上，凈化效果較好；根據(jù)圖2顯示：固定化白腐菌孢子的凝膠顆粒處理50mL染料廢水時，固定化白腐菌孢子的凝膠顆粒達到30個時，已達到飽和?！驹斀狻浚?）從野外采集白腐菌前，先向待采集土壤噴灑適量的染料廢水的目的是使分解染料的白腐菌富集。進行白腐菌分離純化實驗時，可采用平板劃線法或稀釋涂布平板法進行。將收集到的菌絲或者孢子加入到適量的海藻酸鈉溶液中混勻，抽取5mL混合液，滴加到CaCl2溶液中，CaCl2溶液的作用是與海藻酸鈉反應(yīng)形成凝膠球（凝固劑）。（2）根據(jù)圖1和圖2顯示可以發(fā)現(xiàn)：應(yīng)選用固定化白腐菌孢子（或孢子）凝膠顆粒脫色率較高，由圖1可知：凈化時間需要保持10天以上。根據(jù)圖2顯示：固定化白腐菌孢子的凝膠顆粒處理50mL染料廢水時，固定化白腐菌孢子的凝膠顆粒達到30個時，已達到飽和，故處理100L廢水，需要添加（100×1000×30）÷50=60000個凝膠顆粒。（3）在工業(yè)生產(chǎn)中使用固定化白腐菌凝膠顆粒的制作方法是包埋法。使用固定化白腐菌凝膠顆粒的優(yōu)點主要是可以反復(fù)利用。【點睛】本題考查微生物的采集和純化以及固定化技術(shù)的知識點，要求學生掌握微生物的分離和純化方法，把握平板劃線法和稀釋涂布平板法的操作，理解固定化酶和固定化細胞技術(shù)的操作過程及其注意事項，能夠正確識圖分析獲取有效信息，判斷出圖中固定化白腐菌孢子（或孢子）凝膠顆粒脫色率較高，且凈化時間需要保持10天以上，凈化效果較好的結(jié)論，這是突破該題的關(guān)鍵。9、激素調(diào)節(jié)受神經(jīng)調(diào)節(jié)的支配（或調(diào)控）激素調(diào)節(jié)可以影響神經(jīng)系統(tǒng)的功能線粒體內(nèi)膜血漿中含有HPO42-、HCO3-等緩沖物質(zhì)為增加散熱，面部皮膚毛細血管舒張，血流量增加肝糖原水解為葡萄糖、肌糖原氧化分解產(chǎn)生乳酸并釋放能量【解析】

目前普遍認為，神經(jīng)——體液——免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)是機體維持穩(wěn)態(tài)的主要調(diào)節(jié)機制。在相關(guān)調(diào)節(jié)中，以神經(jīng)調(diào)節(jié)為主導(dǎo)，激素調(diào)節(jié)受神經(jīng)調(diào)節(jié)的支配；血糖的來源：消化吸收、肝糖原的分解和非糖物質(zhì)的轉(zhuǎn)化；血糖的去路：氧化分解、合成糖原、轉(zhuǎn)化為脂肪等非糖物質(zhì)?！驹斀狻浚?）高度緊張引起腎上腺素分泌量增加，說明激素調(diào)節(jié)受神經(jīng)調(diào)節(jié)的調(diào)控；腎上腺素分泌量增加引起心率加速，表明激素調(diào)節(jié)可以影響神經(jīng)系統(tǒng)的功能。（2）長跑比賽過程中消耗的能量以及散失的熱量主要由有氧呼吸提供，產(chǎn)自線粒體內(nèi)膜。由于血漿中含有HPO42-、HCO3-等緩沖物質(zhì)，乳酸進入血漿后并不會引起pH明顯變化。（3）運動員長跑過程中會產(chǎn)生大量熱量，為增加散熱，皮膚表面毛細血管舒張，血流量增加，面部等皮膚發(fā)紅。（4）肝糖原水解為葡萄糖維持血糖平衡，肌糖原氧化分解產(chǎn)生乳酸并釋放能量，能量供給腿部肌細胞收縮用?！军c睛】著重掌握穩(wěn)態(tài)的調(diào)節(jié)機制、體溫的平衡及調(diào)節(jié)、血糖的平衡及調(diào)節(jié)，熟記基本知識，掌握知識之間的內(nèi)在聯(lián)系，解決實際問題。10、PCR要有一段已知目的基因的核苷酸序列Taq（熱穩(wěn)定DNA聚合酶）使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳給下一代，同時使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用SmaⅠ會破壞質(zhì)粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因脫分化再分化將培育的煙草幼苗栽培于含有一定鹽的土壤中，觀察該煙草植株的生長狀態(tài)【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成；（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等；（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法；（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻浚?）基因工程的第一步是獲取目的基因，該基因工程中目的基因是抗鹽基因，然后采用PCR技術(shù)對目的基因進行擴增，擴增目的基因的前提是要獲得一段已知目的基因核苷酸序列以便合成引物，同時還必須用Taq（熱穩(wěn)定DNA聚合酶）酶；獲得目的基因后，進行基因表達載體的構(gòu)建，以保證目的基因在受體細胞中能穩(wěn)定存在，并且可以遺傳給下一代，同時使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用。（2）圖中的質(zhì)粒和目的基因中SmaⅠ的酶切位點包含在質(zhì)粒的抗性基因和目的基因中，因此在構(gòu)建重組質(zhì)粒時不能使用SmaI酶切割，若選擇該酶會導(dǎo)致質(zhì)粒的抗性基因和外源DNA中的