1.植物細(xì)胞培養(yǎng)的定義。2.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的定義。3.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件：

①營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)（添加血清等天然成分）

②無(wú)菌無(wú)毒的環(huán)境

③溫度、PH和滲透壓

④氣體環(huán)境（95%的空氣和5%的CO2）課前記憶（課前3分鐘，大聲背誦，立即檢查）第2節(jié)動(dòng)物細(xì)胞工程Part1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)課標(biāo)要求：1.動(dòng)物細(xì)胞工程包括細(xì)胞培養(yǎng)、核移植、細(xì)胞融合和干細(xì)胞的應(yīng)用等技術(shù)2.闡明動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是從動(dòng)物體獲得相關(guān)組織，分?jǐn)?shù)成單個(gè)細(xì)胞后，在適宜的培養(yǎng)條件下讓細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖的過(guò)程。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)學(xué)習(xí)目標(biāo)：1.通過(guò)對(duì)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的學(xué)習(xí)，能夠說(shuō)出動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件及其過(guò)程。

2.通過(guò)對(duì)干細(xì)胞培養(yǎng)及其應(yīng)用的學(xué)習(xí)，能夠說(shuō)出iPS的應(yīng)用前景。高考鏈接

本節(jié)內(nèi)容在高考中考查主要以考察基礎(chǔ)知識(shí)為主，得分率較高。51、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)（基礎(chǔ)）2、動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)3、動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞工程的基本技術(shù)1、概念：從動(dòng)物體中取出相關(guān)的組織，將它分散成單個(gè)細(xì)胞，然后在適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)條件下，讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖的技術(shù)。2、目的：獲得大量細(xì)胞或細(xì)胞產(chǎn)物；不能獲得完整動(dòng)物個(gè)體。3、原理：細(xì)胞增殖（有絲分裂）那么，動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)需要哪些條件呢？動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)一般用液體培養(yǎng)基，也稱為培養(yǎng)液一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件糖類、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素…無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境適宜的溫度、pH和滲透壓適宜的氣體環(huán)境充足的營(yíng)養(yǎng)、穩(wěn)定的內(nèi)環(huán)境將細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)按種類和所需量嚴(yán)格配制而成的培養(yǎng)基培養(yǎng)基的構(gòu)成：合成培養(yǎng)基+血清等天然成分血清含有多種未知的促細(xì)胞生長(zhǎng)因子，保證細(xì)胞能夠順利生長(zhǎng)和增殖8一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件糖類、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素…無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境適宜的溫度、pH和滲透壓適宜的氣體環(huán)境①培養(yǎng)液、培養(yǎng)用具滅菌處理以及在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行操作；②添加抗生素，以防培養(yǎng)過(guò)程中污染；定期更換培養(yǎng)液，以便清除代謝物。①適宜的溫度：哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的溫度多以___________為宜；②適宜的pH：多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞生存的適宜pH為_(kāi)_______；③適宜的滲透壓：維持細(xì)胞正常的形態(tài)和功能。36.5±0.5℃7.2-7.4維持培養(yǎng)液的pH95%空氣

+5%CO2的CO2培養(yǎng)箱O2：細(xì)胞代謝所必需

疑難突破一：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程學(xué)生活動(dòng)：構(gòu)建動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程模型，并思考下列問(wèn)題：（1）培養(yǎng)前用什么方法分散成單個(gè)細(xì)胞？（2）體外培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞有哪些類型？（3）什么是細(xì)胞貼壁？什么是接觸抑制？（4）什么是原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)？（5）為什么要進(jìn)行分瓶培養(yǎng)？怎么處理？（6）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)有什么相同之處與不同之處？動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程模型取動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞懸浮生長(zhǎng)貼壁生長(zhǎng)傳代培養(yǎng)細(xì)胞懸液原代培養(yǎng)細(xì)胞分裂受阻動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的組織、器官。用機(jī)械法或用胰蛋白酶、膠原蛋白酶說(shuō)明細(xì)胞間的物質(zhì)主要是什么成分？用胃蛋白酶行嗎？說(shuō)明細(xì)胞間的物質(zhì)主要是蛋白質(zhì)。胃蛋白酶作用的適宜pH約為2，當(dāng)pH大于6時(shí)，胃蛋白酶就失去活性，多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜pH為7.2~7.4，胃蛋白酶在此環(huán)境中沒(méi)有活性，所以用胃蛋白酶不行。二、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程①懸浮生長(zhǎng)類：②貼壁生長(zhǎng)類：能夠懸浮在培養(yǎng)液中生長(zhǎng)增殖。需要貼附于某些基質(zhì)表面才能生長(zhǎng)增殖。（大多數(shù)細(xì)胞）培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿內(nèi)表面的要求：光滑、無(wú)毒、易于貼附。大多數(shù)細(xì)胞需要貼附于某些基質(zhì)表面才能增殖，這類細(xì)胞往往貼附在培養(yǎng)瓶的瓶壁上，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞貼壁。懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞會(huì)因細(xì)胞密度過(guò)大、有害代謝物積累和培養(yǎng)液中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)缺

乏等因素而分裂受阻；貼壁細(xì)胞在生長(zhǎng)增殖時(shí)，除受上述因素的影響外，還會(huì)發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象。當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞停止分裂增殖的現(xiàn)象。（3）體外培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞類型分裂停止原因（4）分瓶、進(jìn)行傳代培養(yǎng)①收集細(xì)胞懸浮生長(zhǎng)類：直接用離心法收集貼壁生長(zhǎng)類：重新用胰蛋白酶等處理，使之分散成單個(gè)細(xì)胞，然后再用離心法收集②將收集的細(xì)胞制成細(xì)胞懸液，分瓶培養(yǎng)通常將分瓶之前的細(xì)胞培養(yǎng)，即動(dòng)物組織經(jīng)處理后的初次培養(yǎng)。將分瓶后的細(xì)胞培養(yǎng)成為傳代培養(yǎng)?！舅伎肌縿?dòng)物細(xì)胞的整個(gè)培養(yǎng)過(guò)程中可能多次用到胰蛋白酶或膠原蛋白酶？第一次使用的目的是使組織細(xì)胞分散開(kāi)；貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)時(shí)使用的目的是使細(xì)胞從瓶壁上脫離下來(lái)，分散成單個(gè)細(xì)胞，便于分瓶后繼續(xù)培養(yǎng)。原代培養(yǎng)：傳代培養(yǎng)：比較項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)原理培養(yǎng)基性質(zhì)培養(yǎng)基特有成分培養(yǎng)結(jié)果培養(yǎng)目的相同點(diǎn)獲得細(xì)胞或細(xì)胞產(chǎn)物常用固體培養(yǎng)基植物體葡萄糖、動(dòng)物血清常用液體培養(yǎng)基細(xì)胞增殖細(xì)胞的全能性許多細(xì)胞快速繁殖等蔗糖、植物激素1.培養(yǎng)過(guò)程中細(xì)胞都進(jìn)行有絲分裂，不涉及減數(shù)分裂；2.均需無(wú)菌操作，需要適宜的溫度、pH等條件二、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程比較植物組織培養(yǎng)與動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)14三、干細(xì)胞培養(yǎng)及其應(yīng)用1.干細(xì)胞的概念：2.干細(xì)胞的來(lái)源：3.干細(xì)胞的類型：動(dòng)物和人體內(nèi)保留的具有分裂和分化能力的細(xì)胞。在一定的條件下，干細(xì)胞可以分化成其他類型的細(xì)胞。早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中。15早期胚胎中具有分化為成年動(dòng)物體內(nèi)的任何一種類型的細(xì)胞，并進(jìn)一步形成機(jī)體的所有組織和器官甚至個(gè)體的潛能。胚胎干細(xì)胞分布特點(diǎn)應(yīng)用實(shí)例

在體外分化成心肌細(xì)胞、神經(jīng)元細(xì)胞和造血干細(xì)胞等局限性必須從胚胎中獲取，涉及倫理問(wèn)題；因而限制了在醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用。ES細(xì)胞三、干細(xì)胞培養(yǎng)及其應(yīng)用16成體組織或器官內(nèi)造血干細(xì)胞（骨髓、外周血和臍帶血中）神經(jīng)干細(xì)胞（神經(jīng)系統(tǒng)中）精原干細(xì)胞（睪丸中）具有組織特異性，只能分化成特定的細(xì)胞或組織，不具有發(fā)育成完整個(gè)體的能力成體干細(xì)胞分布舉例特點(diǎn)應(yīng)用實(shí)例治療神經(jīng)組織損傷和神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病（如帕金森病、阿爾茨海默病等）治療白血病及一些惡性腫瘤放療或化療后引起的造血系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)功能障礙等疾病造血干細(xì)胞→神經(jīng)干細(xì)胞→治療細(xì)胞損傷造成的疾病三、干細(xì)胞培養(yǎng)及其應(yīng)用17通過(guò)體外誘導(dǎo)小鼠成纖維細(xì)胞得到的類似胚胎干細(xì)胞的一種細(xì)胞①將特定基因或特定蛋白導(dǎo)入細(xì)胞

（成纖維細(xì)胞、已分化的T細(xì)胞、B細(xì)胞）誘導(dǎo)多能干細(xì)胞概念制備方法應(yīng)用優(yōu)點(diǎn)②用小分子化合物誘導(dǎo)形成。①誘導(dǎo)過(guò)程無(wú)須破壞胚胎；②iPS細(xì)胞可以來(lái)源于病人自身的體細(xì)胞，將它移植回病人體內(nèi)后，理論上可以避免免疫排斥反應(yīng)。可治療鐮狀細(xì)胞貧血癥；在治療阿爾茲海默病、心血管疾病等領(lǐng)域的研究也取得了新進(jìn)展iPS細(xì)胞18誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞）多種體細(xì)胞定向誘導(dǎo)分化體外誘導(dǎo)小鼠成纖維細(xì)胞移植取成纖維細(xì)胞等iPS細(xì)胞轉(zhuǎn)入相關(guān)因子細(xì)胞發(fā)生轉(zhuǎn)化分化胰島細(xì)胞神經(jīng)元血細(xì)胞腸上皮細(xì)胞心肌細(xì)胞肝細(xì)胞病人iPS細(xì)胞用于治療人類疾病示意圖iPS細(xì)胞的應(yīng)用前景：臨床治療人類疾病如：白血病、帕金森病、阿而茨海默病等無(wú)菌、無(wú)毒營(yíng)養(yǎng)溫度