AbMole詳解MG132：泛素化和蛋白酶體研究的“幕后英雄”在細(xì)胞內(nèi)，蛋白質(zhì)的降解是一個復(fù)雜而精細(xì)的調(diào)控過程，它對于維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定、調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長、分化以及信號傳導(dǎo)等眾多生理過程起著至關(guān)重要的作用。而蛋白酶體作為細(xì)胞內(nèi)主要的蛋白質(zhì)降解機器，其功能的正常與否直接關(guān)系到細(xì)胞的健康狀態(tài)。MG132（AbMole，M1902），作為一種經(jīng)典的蛋白酶體抑制劑，憑借其高活性和廣泛的應(yīng)用前景，成為了眾多科研人員在蛋白質(zhì)降解研究領(lǐng)域不可或缺的工具。作用機制蛋白酶體是一種多亞基組成的大分子復(fù)合物，主要負(fù)責(zé)降解被泛素標(biāo)記的蛋白質(zhì)。在正常生理條件下，細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)首先被泛素分子標(biāo)記，形成多聚泛素鏈，然后被26S蛋白酶體識別并降解。MG132（AbMole，M1902）的醛基能夠與蛋白酶體β亞基的蘇氨酸（Thr）殘基發(fā)生共價結(jié)合，從而抑制蛋白酶體的蛋白水解活性。這種抑制作用阻斷了泛素化蛋白質(zhì)的降解并誘導(dǎo)蛋白累積，進(jìn)而引發(fā)細(xì)胞內(nèi)一系列應(yīng)激反應(yīng)，包括激活未折疊蛋白反應(yīng)（unfoldedproteinresponse，UPR）、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激（endoplasmicreticulumstress，ERS）等。圖1.蛋白酶體活化和帶有泛素化標(biāo)記的蛋白降解示意圖ADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[1]應(yīng)用領(lǐng)域蛋白質(zhì)穩(wěn)定性及泛素化的研究MG132（AbMole，M1902）在研究蛋白質(zhì)穩(wěn)定性方面有著廣泛的應(yīng)用。通過使用MG132抑制蛋白酶體的活性，研究人員可以觀察到蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)的積累情況，從而判斷這些蛋白質(zhì)是否通過蛋白酶體途徑降解，以及它們的降解速率如何。例如，在研究某些短壽命的轉(zhuǎn)錄因子時，MG132可以幫助研究人員確定這些轉(zhuǎn)錄因子的半衰期，以及它們在細(xì)胞內(nèi)的動態(tài)變化過程，這對于理解基因表達(dá)的調(diào)控機制具有重要意義ADDINEN.CITE<EndNote><Cite><Author>Bianchi</Author><Year>2018</Year><RecNum>176</RecNum><DisplayText><styleface="superscript">[2]</style></DisplayText><record><rec-number>176</rec-number><foreign-keys><keyapp="EN"db-id="f2td9w00a22awteprfrp9vaup9d9zwa9tdfr"timestamp="1747621361">176</key></foreign-keys><ref-typename="JournalArticle">17</ref-type><contributors><authors><author>Bianchi,M.</author><author>Crinelli,R.</author><author>Arbore,V.</author><author>Magnani,M.</author></authors></contributors><auth-address>DepartmentofBiomolecularSciences,BiochemistryandMolecularBiologySectionUniversityofUrbino'CarloBo'Italy.</auth-address><titles><title>InductionofubiquitinC(UBC)genetranscriptionismediatedbyHSF1:roleofproteotoxicandoxidativestress</title><secondary-title>FEBSOpenBio</secondary-title><alt-title>FEBSopenbio</alt-title></titles><periodical><full-title>FEBSOpenBio</full-title><abbr-1>FEBSopenbio</abbr-1></periodical><alt-periodical><full-title>FEBSOpenBio</full-title><abbr-1>FEBSopenbio</abbr-1></alt-periodical><pages>1471-1485</pages><volume>8</volume><number>9</number><edition>2018/09/07</edition><keywords><keyword>Hsf1</keyword><keyword>Nrf2</keyword><keyword>UBCgene</keyword><keyword>proteostasis</keyword><keyword>stressresponse</keyword><keyword>ubiquitinupregulation</keyword></keywords><dates><year>2018</year><pub-dates><date>Sep</date></pub-dates></dates><isbn>2211-5463(Print) 2211-5463</isbn><accession-num>30186748</accession-num><urls></urls><custom2>PMC6120222</custom2><electronic-resource-num>10.1002/2211-5463.12484</electronic-resource-num><remote-database-provider>NLM</remote-database-provider><language>eng</language></record></Cite></EndNote>[2]。泛素化是很多通路研究中的重要環(huán)節(jié)，但是泛素化后的蛋白一般在短時間內(nèi)會被快速降解，而MG132（AbMole，M1902）可以“凍結(jié)”這一動態(tài)過程，使研究人員能夠觀察到某一時刻細(xì)胞內(nèi)的泛素化狀態(tài)。在MG132處理后，細(xì)胞被裂解，提取的蛋白質(zhì)可用于免疫沉淀或Westernblot分析，以檢測特定蛋白的泛素化水平。信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的研究蛋白酶體在許多信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中發(fā)揮著關(guān)鍵功能，MG132（AbMole，M1902）可以用于研究信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中蛋白質(zhì)的降解和穩(wěn)定性變化，從而揭示信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的調(diào)控機制。例如，在研究NF-κB信號通路時，MG132可以阻止IκB（NF-κB的抑制因子）的降解，這有助于研究NF-κB信號通路的調(diào)控機制ADDINEN.CITE<EndNote><Cite><Author>Nakajima</Author><Year>2011</Year><RecNum>177</RecNum><DisplayText><styleface="superscript">[3]</style></DisplayText><record><rec-number>177</rec-number><foreign-keys><keyapp="EN"db-id="f2td9w00a22awteprfrp9vaup9d9zwa9tdfr"timestamp="1747621590">177</key></foreign-keys><ref-typename="JournalArticle">17</ref-type><contributors><authors><author>Nakajima,S.</author><author>Kato,H.</author><author>Takahashi,S.</author><author>Johno,H.</author><author>Kitamura,M.</author></authors></contributors><auth-address>DepartmentofMolecularSignaling,InterdisciplinaryGraduateSchoolofMedicineandEngineering,UniversityofYamanashi,Chuo,Yamanashi,Japan.</auth-address><titles><title>InhibitionofNF-κBbyMG132throughERstress-mediatedinductionofLAPandLIP</title><secondary-title>FEBSLett</secondary-title><alt-title>FEBSletters</alt-title></titles><periodical><full-title>FEBSLett</full-title><abbr-1>FEBSletters</abbr-1></periodical><alt-periodical><full-title>FEBSLett</full-title><abbr-1>FEBSletters</abbr-1></alt-periodical><pages>2249-54</pages><volume>585</volume><number>14</number><edition>2011/06/02</edition><keywords><keyword>Animals</keyword><keyword>CCAAT-Enhancer-BindingProtein-beta/genetics/*metabolism</keyword><keyword>CellLine</keyword><keyword>CysteineProteinaseInhibitors/*pharmacology</keyword><keyword>EndoplasmicReticulum/*metabolism</keyword><keyword>Leupeptins/metabolism/*pharmacology</keyword><keyword>NF-kappaB/*antagonists&inhibitors/metabolism</keyword><keyword>Rats</keyword><keyword>*Stress,Physiological</keyword><keyword>*TranscriptionalActivation</keyword><keyword>UnfoldedProteinResponse</keyword></keywords><dates><year>2011</year><pub-dates><date>Jul21</date></pub-dates></dates><isbn>0014-5793</isbn><accession-num>21627972</accession-num><urls></urls><electronic-resource-num>10.1016/j.febslet.2011.05.047</electronic-resource-num><remote-database-provider>NLM</remote-database-provider><language>eng</language></record></Cite></EndNote>[3]。此外，MG132還可以用于研究其他多條信號通路，如Wnt、Hedgehog等，為理解細(xì)胞如何感知和響應(yīng)外界信號提供了重要的工具。疾病發(fā)生機制的研究蛋白酶體功能的異常與多種疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，如神經(jīng)退行性疾病、癌癥、自身免疫性疾病等。MG132（AbMole，M1902）作為一種蛋白酶體抑制劑，可用于研究這些疾病的發(fā)病機制。例如，在神經(jīng)退行性疾病如阿爾茨海默?。ˋlzheimer’sdisease）和帕金森?。≒arkinson’sdisease）中，蛋白酶體功能障礙導(dǎo)致錯誤折疊蛋白的積累，進(jìn)而引發(fā)細(xì)胞毒性作用。使用MG132可以模擬蛋白酶體功能障礙的情況，幫助研究這些疾病中蛋白質(zhì)的異常積累以及細(xì)胞的應(yīng)激反應(yīng)機制ADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[4]。在癌癥研究中，MG132可以用于研究腫瘤細(xì)胞中蛋白酶體活性的變化以及對腫瘤細(xì)胞增殖、凋亡和侵襲等過程的影響，為開發(fā)新的癌癥治療策略提供理論依據(jù)ADDINEN.CITE<EndNote><Cite><Author>Kapoor</Author><Year>2013</Year><RecNum>181</RecNum><DisplayText><styleface="superscript">[5]</style></DisplayText><record><rec-number>181</rec-number><foreign-keys><keyapp="EN"db-id="f2td9w00a22awteprfrp9vaup9d9zwa9tdfr"timestamp="1747622130">181</key></foreign-keys><ref-typename="JournalArticle">17</ref-type><contributors><authors><author>Kapoor,S.</author></authors></contributors><titles><title>MG132anditsemerginganti-neoplasticeffects</title><secondary-title>DNARepair(Amst)</secondary-title><alt-title>DNArepair</alt-title></titles><periodical><full-title>DNARepair(Amst)</full-title><abbr-1>DNArepair</abbr-1></periodical><alt-periodical><full-title>DNARepair(Amst)</full-title><abbr-1>DNArepair</abbr-1></alt-periodical><pages>161</pages><volume>12</volume><number>3</number><edition>2013/01/08</edition><keywords><keyword>DNA-DirectedDNAPolymerase/*metabolism</keyword><keyword>Humans</keyword><keyword>Polyubiquitin/*metabolism</keyword><keyword>ProteasomeEndopeptidaseComplex/*metabolism</keyword><keyword>Proteolysis/*radiationeffects</keyword><keyword>Proto-OncogeneProteinsc-mdm2/*metabolism</keyword><keyword>Ubiquitination/*radiationeffects</keyword><keyword>UltravioletRays/*adverseeffects</keyword></keywords><dates><year>2013</year><pub-dates><date>Mar1</date></pub-dates></dates><isbn>1568-7856</isbn><accession-num>23291402</accession-num><urls></urls><electronic-resource-num>10.1016/j.dnarep.2012.12.003</electronic-resource-num><remote-database-provider>NLM</remote-database-provider><language>eng</language></record></Cite></EndNote>[5]。案例詳解Autophagy.2024Oct;20(10):2255-2274長鏈非編碼RNA（lncRNA）的異常表達(dá)與滋養(yǎng)層細(xì)胞功能障礙和異常早期胚胎丟失的發(fā)生有關(guān)?？蒲腥藛T在上述文章中，發(fā)現(xiàn)了一種新的lncRNA，即lnc-HZ12，在早期胚胎丟失組中存在異常高表達(dá)的現(xiàn)象。Lnc-HZ12抑制BBC3伴侶介導(dǎo)的自噬（CMA）降解，促進(jìn)滋養(yǎng)層細(xì)胞凋亡。在探究lnc-HZ12對BBC3的調(diào)控機制實驗中，研究人員使用來自AbMole的MG132（AbMole，M1902）、Chloroquine（CQ，AbMole，M9559）、Ammoniumchloride（AbMole，M9929）處理lnc-HZ12過表達(dá)或沉默的Swan71細(xì)胞，最終成功證明了lnc-HZ12通過自噬-溶酶體途徑降解BBC3蛋白。圖2.Lnc-HZ12suppressedCMAdegradationofBBC3ADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[6].CellDeathDiffer.2023Oct;30(10):2213-2230Myc的過表達(dá)與腫瘤形成高度相關(guān)，但直接靶向c-Myc目前來說仍有較大挑戰(zhàn)。因此發(fā)現(xiàn)參與c-Myc失調(diào)的關(guān)鍵因素對于開發(fā)c-Myc的潛在間接靶點具有重要意義。科研人員在上述文章中檢測到一組與c-Myc相互作用的長鏈非編碼RNA（lncRNA）。其中，lncRNABCAN-AS1被確定為具有最高的相關(guān)性。其機制如下：

帶有m6A修飾的BCAN-AS1可以充當(dāng)支架，與c-Myc和SNIP1一起形成三元復(fù)合物，從而阻斷S期激酶相關(guān)蛋白2（SKP2）介導(dǎo)的c-Myc泛素化和降解。在實驗中，科研人員通過AbMole提供的MG132（AbMole，M1902）處理BCAN-AS1敲低或?qū)φ誔DAC、SW1990細(xì)胞，以研究c-Myc泛素化的變化。圖3.BCAN-AS1介導(dǎo)SNIP1與c-Myc結(jié)合的增加，并防止SKP2降解c-Myc參考文獻(xiàn)ADDINEN.REFLIST[1] COLLINSGA,GOLDBERGAL.TheLogicofthe26S