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第3節(jié)基因工程的應(yīng)用任務(wù)一:分析資料,概述基因工程在農(nóng)牧業(yè)方面的應(yīng)用【資料】Bt毒蛋白基因:當(dāng)Bt抗蟲蛋白被分解為多肽后,多肽與害蟲腸上皮細(xì)胞的特異性受體結(jié)合,導(dǎo)致細(xì)胞膜穿孔,最后造成害蟲死亡。
蛋白酶抑制劑基因:阻斷或降低蛋白酶的活性,使害蟲不能正常消化食物,還會(huì)引起厭食反應(yīng)。
淀粉酶抑制劑基因:產(chǎn)生的抑制劑可與害蟲消化道內(nèi)的淀粉酶結(jié)合。
植物凝集素基因:可與害蟲腸道黏膜上的某些物質(zhì)結(jié)合,影響害蟲對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收和利用。思考1:
(1)如何獲得抗蟲植物?
從某些生物中分離出抗蟲基因?qū)胱魑?,使之具有抗蟲性狀(2)有哪些類型的抗蟲基因?(3)轉(zhuǎn)基因抗蟲植物有何優(yōu)點(diǎn)?1.方法:2.主要?dú)⑾x基因:從某些生物中分離出
導(dǎo)入作物,使之具有抗蟲性狀。①Bt毒蛋白基因③淀粉酶抑制劑基因②蛋白酶抑制劑基因④植物凝集素基因抗蟲基因(一)轉(zhuǎn)基因抗蟲植物一、基因工程在農(nóng)牧業(yè)方面的應(yīng)用3.
成果:轉(zhuǎn)基因抗蟲棉花、玉米、大豆、水稻和馬鈴薯等。4.
優(yōu)點(diǎn):①減少因化學(xué)農(nóng)藥的使用而造成的環(huán)境污染和對(duì)人類健康的損害、②降低生產(chǎn)成本、提高產(chǎn)量?!举Y料】把病毒外殼蛋白基因(CP基因)導(dǎo)入植物體內(nèi),植物表達(dá)的CP蛋白與入侵病毒的外殼蛋白競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合病毒RNA,形成非感染性病毒顆粒(無功能外殼包裹),可阻斷病毒組裝和傳播。
導(dǎo)入的病毒CP基因轉(zhuǎn)錄為mRNA后,被植物RNA沉默系統(tǒng)識(shí)別為“外源核酸”,進(jìn)而誘導(dǎo)產(chǎn)生小干擾RNA(siRNA)。siRNA與植物體內(nèi)的RNA誘導(dǎo)沉默復(fù)合體結(jié)合,特異性切割病毒RNA的同源序列(包括入侵病毒的基因組RNA或mRNA),從而抑制病毒復(fù)制。思考2:(1)植物抗病的原理?(2)如何獲得抗病植物?
將來源于某些病毒、真菌等的抗病基因?qū)胫参镏?,培育出轉(zhuǎn)基因抗病植物。病毒外殼蛋白基因(CP基因)病毒的復(fù)制酶基因抗病毒基因幾丁質(zhì)酶基因抗毒素合成基因抗真菌基因2.方法:3.抗病基因?qū)碓从谀承?/p>
等的抗病基因?qū)胫参镏?,培育出轉(zhuǎn)基因抗病植物。病毒、真菌1.成果:轉(zhuǎn)基因抗病毒甜椒、番木瓜和煙草等。(二)轉(zhuǎn)基因抗病植物一、基因工程在農(nóng)牧業(yè)方面的應(yīng)用【資料】雜草常常危害農(nóng)業(yè)生產(chǎn),而大多數(shù)除草劑不僅能殺死田間雜草,還會(huì)損傷作物,導(dǎo)致作物減產(chǎn)。思考3:(1)
如何解決這一問題?
(2)簡(jiǎn)述轉(zhuǎn)基因植物操作的具體過程?(3)此過程中應(yīng)用了哪些技術(shù)?
降解或抵抗除草劑的基因Ti質(zhì)粒重組Ti質(zhì)粒農(nóng)桿菌作物細(xì)胞抗除草劑作物基因工程、植物組織培養(yǎng)技術(shù)。1.方法:2.成果:將
的基因?qū)胱魑?,可以培育出抗除草劑的作物品種。轉(zhuǎn)基因抗除草劑玉米、大豆、油菜和甜菜等。降解或抵抗某種除草劑(三)轉(zhuǎn)基因抗除草劑植物一、基因工程在農(nóng)牧業(yè)方面的應(yīng)用2.改良植物的
價(jià)值【資料】將某種必需氨基酸含量多的蛋白質(zhì)編碼基因?qū)胫参镏?,可以提高這種氨基酸的含量??茖W(xué)家培育的某種轉(zhuǎn)基因玉米中賴氨酸含量比對(duì)照提高30%。
我國(guó)科學(xué)家成功地將與植物花青素代謝相關(guān)的基因?qū)氚珷颗V?,使它呈現(xiàn)出自然界沒有的顏色變異,大大提高了它的觀賞價(jià)值。思考4:
轉(zhuǎn)基因技術(shù)在改良植物品質(zhì)方面有何貢獻(xiàn)?
1.改良植物的
價(jià)值營(yíng)養(yǎng)觀賞(四)改良植物的品質(zhì)一、基因工程在農(nóng)牧業(yè)方面的應(yīng)用超級(jí)小鼠普通轉(zhuǎn)基因【資料】在同等養(yǎng)殖條件下,轉(zhuǎn)基因鯉魚的生長(zhǎng)速率比非轉(zhuǎn)基因鯉魚提高了42%~115%。思考5:
如何用轉(zhuǎn)基因技術(shù)提高動(dòng)物的生長(zhǎng)速率?1.方法:外源生長(zhǎng)激素基因2.成果:轉(zhuǎn)基因鯉魚比正常鯉魚生長(zhǎng)快42%-115%(五)提高動(dòng)物的生長(zhǎng)速率一、基因工程在農(nóng)牧業(yè)方面的應(yīng)用【資料】有些人由于乳糖酶分泌少,不能完全消化牛奶中的乳糖,食用牛奶后會(huì)出現(xiàn)腹瀉等不適癥狀,這稱為乳糖不耐受。思考6:
如何讓乳糖不耐受患者也能飲用牛奶?1.方法:導(dǎo)入腸乳糖酶基因2.成果:轉(zhuǎn)基因牛分泌的乳汁中,乳糖的含量大大降低,而其他營(yíng)養(yǎng)成分不受影響(六)改善畜產(chǎn)品的品質(zhì)一、基因工程在農(nóng)牧業(yè)方面的應(yīng)用思考7:
(1)簡(jiǎn)述轉(zhuǎn)基因動(dòng)物培育過程?(2)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的制備用到的技術(shù)主要有?基因工程、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植任務(wù)二:分析資料,概述基因工程在醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域方面的應(yīng)用思考8:(1)干擾素的化學(xué)本質(zhì)?(2)干擾素的作用機(jī)理?(3)傳統(tǒng)生產(chǎn)干擾素的方法?(4)
如何解決傳統(tǒng)生產(chǎn)干擾素產(chǎn)量低這一問題?【資料】干擾素是人體或動(dòng)物受到病毒侵染后產(chǎn)生的一種細(xì)胞因子,是一種具有干擾病毒復(fù)制作用的糖蛋白,在臨床上被廣泛用于治療病毒感染性疾病、乳腺癌、淋巴癌、多發(fā)骨髓瘤和某些白血病等。傳統(tǒng)生產(chǎn)方法:從人血液中白細(xì)胞提取,每300L血液只能提取1mg干擾素。干擾素基因質(zhì)粒重組質(zhì)粒大腸桿菌或酵母菌可大量生產(chǎn)干擾素的大腸桿菌或酵母菌構(gòu)建導(dǎo)入培養(yǎng)糖蛋白干擾病毒復(fù)制從人血液中的白細(xì)胞內(nèi)提取【資料】胰島素是治療糖尿病的特效藥物。傳統(tǒng)生產(chǎn)胰島素的方法是從豬、牛等動(dòng)物的胰腺中提取。曾經(jīng)生產(chǎn)供一位糖尿病病人使用一年的胰島素,需要上千頭牛,生產(chǎn)的成本非常高。
1978年,科學(xué)家將編碼人胰島素的基因?qū)氪竽c桿菌細(xì)胞中,使大腸桿菌表達(dá)重組人胰島素。我國(guó)擁有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的基因工程藥物——重組人胰島素已經(jīng)研制成功并得到廣泛應(yīng)用。思考9:
(1)可否用酵母菌生產(chǎn)人的生長(zhǎng)激素?(2)與大腸桿菌相比,用酵母菌生產(chǎn)人的生長(zhǎng)激素有什么優(yōu)勢(shì)?酵母菌為真核生物,有生物膜系統(tǒng),可通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體對(duì)產(chǎn)生的生長(zhǎng)激素進(jìn)行加工和修飾,從而產(chǎn)生有活性的胰島素。大腸桿菌酵母菌二、基因工程在醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域的應(yīng)用我國(guó)生產(chǎn)的重組人干擾素、血小板生成素、促紅細(xì)胞生成素和粒細(xì)胞集落刺激因子等基因工程藥物均已投放市場(chǎng)。細(xì)胞因子、抗體、疫苗和激素等1.常見藥物類型:2.應(yīng)用:可以用來預(yù)防和治療人類腫瘤、心血管疾病、傳染病、糖尿病和類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等;3.實(shí)例:(一)對(duì)微生物或動(dòng)植物的細(xì)胞進(jìn)行基因改造生產(chǎn)藥物(3)藥用蛋白基因存在于轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的哪些細(xì)胞中?【資料】利用乳腺生物反應(yīng)器獲得轉(zhuǎn)基因藥物(2)為什么將藥用蛋白基因與乳腺中特異表達(dá)的基因的啟動(dòng)子等調(diào)控元件重組在一起?(1)乳腺生物反應(yīng)器指的是轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的乳腺嗎?讓藥用蛋白基因只在乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)幾乎所有細(xì)胞不是,乳腺生物反應(yīng)器指的就是這個(gè)轉(zhuǎn)基因生物(4)與工廠化生產(chǎn)藥用蛋白相比,用動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)藥用蛋白的優(yōu)越之處有哪些?思考10:(5)培育過程中為什么用受精卵?如果用體細(xì)胞需要使用哪種技術(shù)才能繼續(xù)發(fā)育為轉(zhuǎn)基因動(dòng)物??jī)?yōu)點(diǎn):產(chǎn)量高;成本低;產(chǎn)品質(zhì)量好,易提取。目前已經(jīng)在牛、山羊等動(dòng)物的乳腺生物反應(yīng)器中,獲得了抗凝血酶、血清白蛋白、生長(zhǎng)激素和α-抗胰蛋白酶等重要醫(yī)藥產(chǎn)品(二)讓轉(zhuǎn)基因哺乳動(dòng)物批量生產(chǎn)藥物1.實(shí)例:乳腺生物反應(yīng)器(乳房生物反應(yīng)器)2.培育過程:3.應(yīng)用:藥用蛋白基因乳腺中特異表達(dá)的基因的啟動(dòng)子等調(diào)控元件基因表達(dá)載體受精卵泌乳期分泌乳汁轉(zhuǎn)基因動(dòng)物藥物蛋白顯微注射發(fā)育二、基因工程在醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域的應(yīng)用【資料】2022年1月7日,馬里蘭大學(xué)進(jìn)行了世界首例活人成功植入基因編輯豬心臟的手術(shù)。醫(yī)生用一只1歲大、240磅重的小豬心臟替換了Dave原本的心臟。2022年3月8日,大衛(wèi)·貝內(nèi)特因病情惡化而不幸去世,這顆豬心臟讓他延長(zhǎng)了2個(gè)月壽命。思考11:
(1)其它動(dòng)物器官移植到人體內(nèi),面臨最大的問題是什么?(2)用豬的器官有何優(yōu)點(diǎn)?(3)怎么從根本上消除免疫排斥現(xiàn)象?①豬的內(nèi)臟構(gòu)造、大小、血管分布與人相似;②豬體內(nèi)隱藏的致病基因遠(yuǎn)遠(yuǎn)少于靈長(zhǎng)類動(dòng)物。(三)用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物作為器官移植的供體移植無免疫排斥的轉(zhuǎn)基因豬的器官抑制抗原決定基因表達(dá)或除去抗原決定基因在器官供體基因組中導(dǎo)入某種調(diào)節(jié)因子二、基因工程在醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域的應(yīng)用在器官供體的基因組中導(dǎo)入
,以抑制
的表達(dá),或設(shè)法除去
,再結(jié)合
,培育出不會(huì)引起免疫排斥反應(yīng)的轉(zhuǎn)基因克隆豬器官。某種調(diào)節(jié)因子抗原決定基因抗原決定基因克隆技術(shù)目的基因基因敲除二、基因工程在醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域的應(yīng)用任務(wù)三:歸納基因工程在食品工業(yè)方面和環(huán)保領(lǐng)域的應(yīng)用三、基因工程在食品工業(yè)方面的應(yīng)用(1)概念:用基因工程的方法,使外源基因得到高效表達(dá)的菌類?;蚬こ虡?gòu)建基因工程菌工業(yè)發(fā)酵批量生產(chǎn)1.基因工程菌(2)步驟:(3)應(yīng)用:利用基因工程菌,除了可以生產(chǎn)藥物,還能生產(chǎn)食品工業(yè)用酶、氨基酸和維生素等(4)實(shí)例1:生產(chǎn)氨基酸
阿斯巴甜是一種普遍使用的甜味劑,主要由天冬氨酸和苯丙氨酸形成,這兩種氨基酸就可以通過基因工程實(shí)現(xiàn)大規(guī)模生產(chǎn)。實(shí)例2:生產(chǎn)淀粉酶、脂酶基因工程獲得的工業(yè)用酶的純度更高,生產(chǎn)成本顯著降低,生產(chǎn)效率較高。①應(yīng)用:②制備方法:加工轉(zhuǎn)化糖漿需要淀粉酶,加工烘烤食物要用到脂酶構(gòu)建基因工程菌,然后用發(fā)酵技術(shù)大量生產(chǎn)③優(yōu)點(diǎn):奶酪凝乳酶奶中的蛋白質(zhì)(凝聚固化)將
導(dǎo)入大腸桿菌、黑曲霉或酵母菌的基因組中,再通過
批量生產(chǎn)凝乳酶。②基因工程制備方法:①傳統(tǒng)制備方法:殺死未斷奶的小牛,將其第四胃的黏膜取出來提取。實(shí)例3:生產(chǎn)凝乳酶編碼牛凝乳酶的基因工業(yè)發(fā)酵【資料】通過基因工程手段(如基因文庫)獲取目標(biāo)生物的特異性核酸片段,經(jīng)克隆、擴(kuò)增后制備成單鏈DNA探針,并標(biāo)記放射性同位素、熒光基團(tuán)等示蹤劑。DNA探針能十分靈敏地檢測(cè)環(huán)境中的病毒、細(xì)菌等。
【資料】基因工程將能分解三種烴類的假單孢桿菌的基因都轉(zhuǎn)移到能分解另一種烴類的假單孢桿菌內(nèi),創(chuàng)造出了能同時(shí)分解四種烴類的“超級(jí)細(xì)菌”?!俺?jí)細(xì)菌”降解泄漏的原油有的還能吞食轉(zhuǎn)化汞、鎘等重金屬,分解DDT等毒害物質(zhì)。思考12:(1)DNA探針檢測(cè)病毒細(xì)菌的原理?(2)基因工程在環(huán)保領(lǐng)域有何應(yīng)用?探針目的基因堿基互補(bǔ)配對(duì)原則1.經(jīng)過基因改造的微生物來生產(chǎn)能源2.利用“超級(jí)細(xì)菌”處理環(huán)境污染3.環(huán)境監(jiān)測(cè)四、基因工程在環(huán)保領(lǐng)域方面的運(yùn)用轉(zhuǎn)基因抗蟲植物基因工程的應(yīng)用農(nóng)牧業(yè)方面醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域轉(zhuǎn)基因抗病植物轉(zhuǎn)基因抗除草劑植物改善畜產(chǎn)品的品質(zhì)提高動(dòng)物的生長(zhǎng)速率改良植物的品質(zhì)利用哺乳動(dòng)物批量生產(chǎn)藥物:乳腺生物反應(yīng)器建立移植器官工廠食品工業(yè)方面利用基因工程菌生產(chǎn)食品工業(yè)用酶、氨基酸、維生素利用微生物或動(dòng)植物細(xì)胞生產(chǎn)藥物【拓展應(yīng)用】(1)下面是探究“轉(zhuǎn)入外源EPSP合酶基因能否使矮牽??共莞黍v”的流程,請(qǐng)補(bǔ)充完整。①用
等處理含有目的基因的DNA片段和T質(zhì)粒,構(gòu)建重組Ti質(zhì)粒;②將重組Ti質(zhì)粒轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌中;③利用含有重組Ti質(zhì)粒的農(nóng)桿菌侵染
細(xì)胞,再通過培育得到轉(zhuǎn)基因植株;④用草甘瞬同時(shí)噴酒轉(zhuǎn)基因植株和對(duì)照組植株。限制酶和DNA連接酶矮牽牛
結(jié)果:對(duì)照組植株死亡,轉(zhuǎn)基因植株存活,但也受到了影響。結(jié)論:
。轉(zhuǎn)基因矮牽牛對(duì)草甘膦產(chǎn)生了一定的抗性1.除草劑的有效成分草甘麟能夠?qū)R坏匾种艵PSP合酶的活性,從而使植物體內(nèi)多種代謝途徑受到影響而導(dǎo)致植物死亡。草甘
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