醫(yī)學(xué)微生物學(xué)病毒的增殖演講人：日期:目錄CONTENTS01病毒復(fù)制周期02病毒與宿主相互作用03病毒增殖檢測方法04抗病毒治療策略05特殊病毒增殖模式06病毒研究技術(shù)進展01病毒復(fù)制周期吸附與侵入宿主細胞01病毒吸附病毒通過表面蛋白與宿主細胞受體結(jié)合，實現(xiàn)定位與吸附。02侵入方式病毒通過胞吞、膜融合等方式將核酸注入宿主細胞，完成侵入過程。生物合成階段利用宿主細胞酶和原料，病毒核酸進行復(fù)制。病毒核酸復(fù)制病毒核酸編碼的蛋白通過宿主細胞表達系統(tǒng)合成。病毒蛋白合成0102病毒組裝與釋放病毒核酸與蛋白在宿主細胞內(nèi)特定區(qū)域組裝成完整病毒顆粒。病毒組裝病毒通過破壞宿主細胞或利用細胞途徑釋放到細胞外，繼續(xù)感染其他細胞。病毒釋放02病毒與宿主相互作用宿主細胞受體識別病毒通過特異性受體與宿主細胞表面的受體結(jié)合，如SARS-CoV-2通過ACE2受體進入人體細胞。特異性受體受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用受體結(jié)構(gòu)變化一些病毒通過受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用進入宿主細胞，如流感病毒通過HA受體進入呼吸道上皮細胞。病毒與受體結(jié)合后，會引起受體結(jié)構(gòu)變化，從而觸發(fā)病毒進入細胞的機制。病毒基因表達調(diào)控病毒基因組的激活病毒進入宿主細胞后，需要激活自身的基因組進行復(fù)制和轉(zhuǎn)錄。宿主細胞機制的利用病毒蛋白的調(diào)控病毒會利用宿主細胞的機制來調(diào)控自身基因的表達，如利用宿主細胞的RNA聚合酶進行病毒RNA的合成。病毒基因表達過程中，會產(chǎn)生一些病毒蛋白來調(diào)控病毒復(fù)制和轉(zhuǎn)錄的進程，如逆轉(zhuǎn)錄酶、蛋白酶等。123宿主免疫逃逸機制免疫逃逸的后果病毒逃逸宿主免疫系統(tǒng)的攻擊后，會導(dǎo)致病毒在體內(nèi)持續(xù)感染、擴散，甚至引發(fā)免疫病理反應(yīng)。03病毒會通過各種策略來逃逸宿主免疫系統(tǒng)的攻擊，如變異病毒表面抗原、抑制宿主免疫應(yīng)答等。02病毒逃逸策略宿主免疫系統(tǒng)的識別病毒在感染宿主細胞后，會被宿主免疫系統(tǒng)識別為外來入侵物質(zhì)。0103病毒增殖檢測方法細胞培養(yǎng)技術(shù)細胞培養(yǎng)技術(shù)是檢測病毒增殖的常用方法之一，通過在細胞培養(yǎng)物中加入病毒，觀察病毒在細胞內(nèi)的增殖情況，從而判斷病毒的感染能力和增殖能力。細胞培養(yǎng)技術(shù)概述細胞培養(yǎng)技術(shù)包括原代細胞培養(yǎng)、傳代細胞培養(yǎng)、細胞系和克隆株的培養(yǎng)等，可根據(jù)病毒的特性和實驗需求選擇適當(dāng)?shù)募毎囵B(yǎng)方法。細胞培養(yǎng)方法在細胞培養(yǎng)過程中，可通過觀察細胞病變情況來判斷病毒的增殖情況，如細胞形態(tài)變化、細胞壞死、細胞融合等現(xiàn)象。細胞病變觀察分子生物學(xué)檢測技術(shù)是通過檢測病毒的核酸或蛋白質(zhì)來判定病毒增殖的方法，具有高度的特異性和敏感性。分子生物學(xué)檢測分子生物學(xué)檢測技術(shù)概述PCR技術(shù)是分子生物學(xué)檢測中常用的技術(shù)之一，通過特定的引物擴增病毒核酸，從而檢測病毒的增殖情況。PCR技術(shù)實時熒光定量PCR技術(shù)可實時監(jiān)測病毒核酸的擴增情況，對病毒增殖進行定量分析。實時熒光定量PCR血清學(xué)診斷指標(biāo)血清學(xué)診斷指標(biāo)是通過檢測血清中的病毒特異性抗體來判斷病毒增殖的方法，具有操作簡單、檢測速度快等優(yōu)點。血清學(xué)診斷指標(biāo)概述IgM抗體檢測IgG抗體檢測IgM抗體是機體感染病毒后最早產(chǎn)生的抗體，可用于早期診斷和病毒感染的篩查。IgG抗體是機體在病毒感染后期產(chǎn)生的抗體，可持續(xù)存在數(shù)年，常用于病毒既往感染的檢測和血清流行病學(xué)調(diào)查。04抗病毒治療策略阻斷病毒吸附藥物干擾病毒吸附過程通過干擾病毒吸附過程中的某些環(huán)節(jié)，使病毒無法完成吸附。03通過阻斷病毒表面蛋白的功能，使病毒無法與宿主細胞受體結(jié)合。02阻斷病毒表面蛋白功能阻斷病毒與宿主受體結(jié)合通過阻斷病毒與宿主細胞受體結(jié)合，阻止病毒進入細胞。01核酸復(fù)制抑制劑通過抑制病毒DNA的合成，阻止病毒復(fù)制。抑制病毒DNA合成通過抑制病毒RNA的合成，阻止病毒復(fù)制。抑制病毒RNA合成通過抑制病毒逆轉(zhuǎn)錄酶的活性，阻止病毒復(fù)制。抑制病毒逆轉(zhuǎn)錄酶活性病毒蛋白酶靶向治療抑制病毒蛋白酶活性通過抑制病毒蛋白酶的活性，阻止病毒復(fù)制。阻斷病毒蛋白酶合成藥物與病毒蛋白酶結(jié)合通過阻斷病毒蛋白酶的合成，阻止病毒復(fù)制。通過藥物與病毒蛋白酶結(jié)合，使其失去活性，從而阻止病毒復(fù)制。12305特殊病毒增殖模式潛伏感染機制潛伏感染的定義指病毒在顯性或隱性感染后，病毒基因存在于細胞內(nèi)，但不產(chǎn)生病毒顆粒，不引起宿主細胞的病變。01潛伏感染的部位潛伏感染主要發(fā)生在一些特定的組織或細胞中，如神經(jīng)節(jié)、三叉神經(jīng)節(jié)、背根神經(jīng)節(jié)等。02潛伏感染的激活當(dāng)宿主的免疫功能降低時，潛伏的病毒可被激活，引起顯性感染或復(fù)發(fā)。03指病毒基因組整合到宿主細胞基因組中，隨宿主細胞基因復(fù)制而復(fù)制，這種復(fù)制方式稱為整合型病毒復(fù)制。整合型病毒復(fù)制整合型病毒復(fù)制的定義整合型病毒復(fù)制具有穩(wěn)定性，病毒基因組可隨宿主細胞基因組一起復(fù)制和傳遞，不易被清除。整合型病毒復(fù)制的特點常見的整合型病毒有逆轉(zhuǎn)錄病毒，如HIV等。整合型病毒復(fù)制的實例缺陷病毒增殖特點缺陷病毒的定義指病毒基因組或基因產(chǎn)物存在缺陷，不能獨立完成病毒復(fù)制周期的病毒。缺陷病毒的增殖方式缺陷病毒必須依賴其他完整病毒的輔助才能完成病毒復(fù)制，這種增殖方式稱為依賴缺陷性增殖。缺陷病毒的類型缺陷病毒包括基因組缺陷病毒和基因產(chǎn)物缺陷病毒兩種類型。基因組缺陷病毒是指病毒基因組不完整或發(fā)生突變，不能完成病毒復(fù)制；基因產(chǎn)物缺陷病毒是指病毒基因組能完整復(fù)制，但病毒基因表達產(chǎn)物存在缺陷，不能完成病毒包裝。缺陷病毒的應(yīng)用缺陷病毒在基因治療和疫苗制備等方面具有潛在的應(yīng)用價值。06病毒研究技術(shù)進展冷凍電鏡結(jié)構(gòu)解析通過快速冷凍樣品，減少冰晶形成，保持病毒顆粒的天然狀態(tài)，利用電子顯微鏡觀察病毒結(jié)構(gòu)。冷凍電鏡技術(shù)原理揭示了病毒表面蛋白的精細結(jié)構(gòu)和病毒與宿主細胞的相互作用機制。冷凍電鏡在病毒學(xué)中的應(yīng)用如SARS-CoV-2（新冠病毒）的S蛋白與ACE2受體的結(jié)合機制。代表性成果通過獲取病毒的基因組序列，利用遺傳工程技術(shù)構(gòu)建病毒的感染性克隆，從而研究病毒的基因功能和致病機制。反向遺傳學(xué)系統(tǒng)反向遺傳學(xué)原理用于研究病毒的基因功能、制備疫苗和抗病毒藥物、以及病毒毒力的評估。反向遺傳學(xué)在病毒學(xué)中的應(yīng)用如流感病毒的反向遺傳學(xué)系統(tǒng)，為疫苗研發(fā)和抗病毒藥物篩選提供了有力工具。代表性成果單細胞感染追蹤技術(shù)單細胞感染追蹤原理通過標(biāo)記病毒或宿主細胞，實時監(jiān)測病毒在單個細