云杉雜交制種操作技術(shù)規(guī)程2020-09-28實(shí)施2020-09-28實(shí)施甘肅省市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布I 12規(guī)范性引用文件 13術(shù)語(yǔ)和定義 14親本選擇登記 15花粉采集 16花粉調(diào)制 27花粉的保存 2 29隔離套袋 310授粉操作 311解袋 412雜交球果采收 413雜交種子調(diào)制 414檔案管理 4附錄A(資料性附錄)云杉雜交制種父本登記表 6附錄B(資料性附錄)云杉雜交制種母本登記表 7附錄C(資料性附錄)云杉雜交制種登記表 8附錄D(資料性附錄)云杉雜交登記表 9附錄E(規(guī)范性附錄)花粉活力間接測(cè)定方法 本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1-2009給出的規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)由甘肅省林業(yè)和草原局提出歸口，并監(jiān)督執(zhí)行。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：甘肅省小隴山林業(yè)實(shí)驗(yàn)局林業(yè)科學(xué)研究所、中國(guó)林業(yè)科學(xué)研究院林業(yè)研究所、甘肅省次生林培育重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：胡勐鴻、趙文英、馬建偉、楊燕萍、王軍輝、歐陽(yáng)芳群、安三平、劉小紅。1本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了云杉屬(Picea)樹(shù)種種間、種內(nèi)按照制種目的親本選擇確定、花粉采集和調(diào)制、花粉活力測(cè)定、授粉操作、雜交種子的采收和調(diào)制、檔案管理等技術(shù)內(nèi)容。本標(biāo)準(zhǔn)適用于正常開(kāi)花結(jié)實(shí)年齡(樹(shù)齡>20年)云杉屬樹(shù)種種間、種內(nèi)采用人工雜交獲取種子的方法。2規(guī)范性引用文件下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T10016林木種子貯藏GB/T16619林木采種技術(shù)LY/T2289林木種苗生產(chǎn)經(jīng)營(yíng)檔案LY/T2290林木種苗標(biāo)簽3術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。授粉隔離袋用具有防水性材料制作的將將雌球花與外源花粉隔離的袋子。套袋使用授粉隔離袋將母本枝條上進(jìn)行人工雜交授粉的雌球花與外援花粉隔離的操作方法。當(dāng)授粉隔離袋內(nèi)雌球花授粉形成幼果后將隔離袋從枝條上解除的方法。4親本選擇登記根據(jù)云杉制種目的(抗逆性、觀賞性、速生性、材質(zhì)性狀等)選擇具有目標(biāo)性狀的雜交親本后，調(diào)查登記親本的地理位置、環(huán)境因子、生長(zhǎng)性狀、形態(tài)特征、抗逆性等。填寫(xiě)《云杉花粉采集母樹(shù)登記表》 (參附錄A)、《云杉雜交母本登記表》(參附錄B)。5花粉采集26花粉調(diào)制充分干燥的花粉，裝入棕色或者白色廣口瓶，貼花粉標(biāo)簽，瓶口涂抹凡士38.2.2間接測(cè)定采用培養(yǎng)基法或染色法。方法參見(jiàn)附錄E。9隔離套袋9.1材料和規(guī)格花粉隔離袋使用防水牛皮紙或者無(wú)紡布縫制，規(guī)格為40cm×20cm,其中一面中間縫有40cm×8cm的塑料透光膜。9.2套袋時(shí)間觀察母本雌雄球花芽迅速膨大，芽鱗開(kāi)裂，雌雄球花能明顯區(qū)分開(kāi)，且母本雄球花未散粉前套袋。9.3套袋方法9.3.1套袋枝條的選擇選擇母本樹(shù)冠外圍雌球花比較集中、光照充足的中上部枝條。套袋前將需要套進(jìn)袋內(nèi)部分枝條上的雄球花務(wù)必摘除干凈，對(duì)影響套袋部分枝條做適當(dāng)修剪，修剪強(qiáng)度以不影響枝條生長(zhǎng)、結(jié)實(shí)為宜。9.3.3套袋操作套袋時(shí)一只手充分張開(kāi)袋口，另一只手將需要套進(jìn)袋內(nèi)的枝條捏緊后輕輕送入袋內(nèi)，枝條套進(jìn)袋內(nèi)1/2～2/3為宜，枝條在袋內(nèi)舒展不擁擠有足夠的生長(zhǎng)空間為宜，并順著枝條在袋口墊一圈棉花后用細(xì)鐵絲、麻繩或者塑料繩等將袋口扎緊，并在袋口處掛上標(biāo)簽，并填寫(xiě)附錄C雜交試驗(yàn)登記表。10授粉操作10.1授粉時(shí)期觀察袋內(nèi)雌球花鱗片外翻、下垂、整個(gè)雌球花呈蜂窩狀時(shí)是進(jìn)行授粉的最佳時(shí)期，單株可授期3d~4d。授粉時(shí)間選在太陽(yáng)升起，霧氣散盡后進(jìn)行授粉。10.2授粉方法使用毛筆授粉時(shí)，在筆桿和盛花粉的器皿上，貼上使用花粉的名稱(chēng)或編號(hào)。授粉時(shí)用刀片在授粉袋距離袋內(nèi)雌球花最近處開(kāi)一小孔，然后用毛筆從盛花粉的器皿蘸取相應(yīng)花粉輕輕彈或涂于雌球花上，當(dāng)袋內(nèi)雌球花全部涂抹后，用透明膠帶將小孔立即封住，填寫(xiě)附錄C雜交登記表后。10.2.2醫(yī)用注射器授粉4注射花粉，從透光膜觀察袋內(nèi)有花粉漂浮為宜。然后拔出注射器，授粉后觀察，雌球花鱗片不關(guān)閉時(shí)，于授粉當(dāng)日或者次日補(bǔ)充授粉1次；補(bǔ)充解袋時(shí)間根據(jù)當(dāng)?shù)貧夂驐l件而定。一般授粉7d～10d后開(kāi)始解球果采收后，分別雜交組合調(diào)制。不同雜交組合球果間隔離晾曬、種子脫離、親本定位圖、調(diào)查資料、附錄A、附錄B、附錄C、附錄D等紙質(zhì)材料和圖片影像資料保存按照LY/T2289執(zhí)行。GANSlOT6(資料性附錄)云杉雜交制種父本登記表樹(shù)種：調(diào)查時(shí)間：調(diào)查人：樹(shù)號(hào)地點(diǎn)目標(biāo)性狀標(biāo)標(biāo)冠幅其他海拔坡度其他l23123123112345678978(資料性附錄)云杉雜交制種母本登記表樹(shù)種地點(diǎn)目標(biāo)性狀標(biāo)(X)標(biāo)(Y)1231231231123456789圖B.1云杉雜交制種母本登記表樣式9樹(shù)種：樹(shù)號(hào)：地點(diǎn)：套袋時(shí)間：授粉人：授粉天氣：球果采收時(shí)間：袋內(nèi)花授粉時(shí)間形成球果數(shù)敗育雌球花收獲球果數(shù)12319283456789(資料性附錄)云杉雜交登記表收獲種子數(shù)量重發(fā)芽勢(shì)圖D.1云杉雜交登記表樣式(規(guī)范性附錄)花粉活力間接測(cè)定方法花粉活力間接測(cè)定方法如表E.1所示：表E.1花粉活力間接測(cè)定方法將含有蔗糖