微生物室管理制度1、微生物檢驗(yàn)流程

現(xiàn)場(chǎng)無菌取樣↓無菌室無菌操作↓樣品均質(zhì)↓樣液稀釋↓樣品接種↓恒溫培養(yǎng)↓結(jié)果觀察↓依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行判斷↓報(bào)告結(jié)果2、微檢室清洗工藝及操作規(guī)程2.1無菌操作前的準(zhǔn)備工作：2.1.1每次無菌操作結(jié)束后，將用過的吸管、培養(yǎng)皿等物品拿出微檢室，并用75%酒精擦拭操作臺(tái)桌面及周圍。2.1.2每周用75%酒精或0.25%新潔爾滅擦拭微檢室（緩沖間）四周墻壁。地面及室內(nèi)其它物品。2.1.3隨時(shí)清理室內(nèi)物品及培養(yǎng)皿、吸管、三角瓶等，超過一周未使用的，須重新進(jìn)行嚴(yán)格滅菌。

2.1.4定期清洗工作服、工作鞋、工作帽、口罩等。2.1.5每天做空氣捕捉培養(yǎng)檢驗(yàn)，掌握室內(nèi)無菌情況，確定空間是否需要徹底消毒殺菌。2.1.6根據(jù)空間微生物檢測(cè)結(jié)果，若每個(gè)平皿內(nèi)菌落不超過4個(gè)，則可以認(rèn)為無菌程度良好；若菌落數(shù)很多，則應(yīng)對(duì)無菌室用甲醛熏蒸徹底消毒（配制35～40%的甲醛液，其使用量為每立方米空間2ml）。2.1.7培養(yǎng)基的配制：在培養(yǎng)基配置前，首先要了解培養(yǎng)基的用途、成分，各成分在培養(yǎng)基中的作用原理，是否能承受加熱滅菌，需要調(diào)整的PH值等，然后再著手配置。培養(yǎng)基的制備按下述順序進(jìn)行：配料→溶解→調(diào)整PH值→過濾→加瓊脂熔化→定容→分裝→包扎→滅菌。2.1.8玻璃器皿滅菌程序：為保證實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性，微生物檢驗(yàn)所需的試管、三角瓶、移液管和培養(yǎng)皿等，除與其他實(shí)驗(yàn)室要求一樣需洗刷干凈外，還需要滅菌即通過殺滅所有微生物的營養(yǎng)細(xì)胞和芽孢，使其永遠(yuǎn)失去生命力。玻璃器皿的洗滌、滅菌程序如下：（1）新玻璃儀器使用前必須用2%鹽酸浸泡。（2）用洗衣粉水或洗滌靈浸泡（熱水煮沸）→清水沖洗→烘干→包扎→滅菌（3）通常使用150℃、3小時(shí)，160℃、2小時(shí)，或170℃、1小時(shí)干熱滅菌法。

注意：（1）干熱滅菌的溫度不能超過180℃，對(duì)帶有棉花塞、紙包的器皿，溫度宜采用150℃、3小時(shí)的滅菌法，溫度不宜過高，不要緊貼烘箱器壁，以免棉花塞、紙發(fā)脆、焦化，甚至著火。（2）滅菌操作時(shí)，必須等恒溫后再離人，滅菌完畢后或溫度升溫過程中，須在60度以下才能打開箱門。（3）如果不慎烘箱冒煙，應(yīng)立即切斷電源，切忌打開箱門，以免高溫下棉花等遇見空氣后即燃燒，釀成火災(zāi)。2.1.9每班對(duì)微檢室（包括緩沖間）利用打開紫外燈滅菌30分鐘。2.2無菌操作要點(diǎn)：2.2.1用75%酒精或0.25%新潔爾滅溶液擦手；2.2.2操作過程不離開酒精燈無菌區(qū)；2.2.3換下的棉塞不得亂放；2.2.4接種工具，使用前必須經(jīng)火焰灼燒滅菌；2.2.5操作要準(zhǔn)確、迅速；2.2.6接種工具使用后，必須經(jīng)火焰灼燒滅菌后，才能放到桌上；2.2.7所有使用過的器皿均須嚴(yán)格滅菌。3.微生物檢驗(yàn)室衛(wèi)生管理制度

3.1衛(wèi)生管理區(qū)域包括（1）微生物檢驗(yàn)室（2）緩沖間（3）培菌室（4）檢菌室3.2衛(wèi)生管理內(nèi)容1、人員：

（1）微生物檢驗(yàn)人員必須持有健康證（2）必須正確穿戴好勞動(dòng)保護(hù)具，保持工作服整潔。（3）不得留長指甲（指甲長度不得超過手指），不涂指甲油，不帶戒指、耳環(huán)，不穿裙子、高跟鞋，不許穿短褲、拖鞋工作，不準(zhǔn)赤膊，不準(zhǔn)酒后上崗，微生物檢驗(yàn)室、緩沖間、培菌室、檢菌室內(nèi)禁止吸煙。2、設(shè)備：（1）操作臺(tái)、紫外燈、照明燈、培養(yǎng)箱、冰箱、滅菌鍋、干燥箱等要保證完好，外表面無灰塵、無銹蝕、無霉菌、無污跡、無油污、無泄漏、保持干凈。（2）設(shè)備下面及周圍無積塵、無雜物、無積水、保持清潔。（3）閑置的設(shè)備、封存的設(shè)備及附件、膠管等，應(yīng)劃定專放區(qū)存放（或設(shè)置專用間），要求擺放整齊定期保養(yǎng)、清潔，保持干凈，無霉菌，報(bào)廢設(shè)備不得留在工作現(xiàn)場(chǎng)。（4）備品、備件存放在專用備品庫，分類定置整齊擺放，并作好標(biāo)識(shí)。3、用具：（1）所有用具定置擺放整齊，保持清潔，干凈，無污漬，無銹蝕，使用前后清洗干凈。（2）記錄清晰干凈，整潔，無污漬。3.3要求達(dá)到的標(biāo)準(zhǔn)及注意事項(xiàng)：1.應(yīng)每天徹底擦拭一次地面，每周用75%酒精擦拭緩沖間、微檢室的桌面及存放物品；

2.緩沖間、無菌室安裝紫外燈，每天使用前后用紫外燈照射殺菌30分鐘，且須間隔30分鐘后方可進(jìn)入；3.操作人員進(jìn)入無菌室前，應(yīng)在緩沖間穿好專用的工作服、工作鞋、工作帽、口罩，工作服、工作鞋、工作帽、口罩應(yīng)放在無菌室緩沖間，工作前經(jīng)紫外燈殺菌后使用，只準(zhǔn)在無菌室內(nèi)專用，不準(zhǔn)穿到其他地方去，并定期洗換和消毒滅菌；4.操作人員進(jìn)入無菌室前應(yīng)先用肥皂洗凈手，在接種前，先用75%酒精擦拭手、操作臺(tái)面、待接種樣品的外壁，點(diǎn)燃酒精燈，在火焰附近進(jìn)行接種操作；5.進(jìn)行接種所用的吸管、平皿、培養(yǎng)基等必須經(jīng)消毒滅菌，金屬用品應(yīng)高壓鍋滅菌；6.從包裝取出吸管時(shí)，吸管尖部不能觸及外露部位，使用吸管接種于試管平皿時(shí)，吸管尖不得觸及試管和平皿；7.接種樣品轉(zhuǎn)種細(xì)菌必須在酒精燈前操作，接種細(xì)菌或樣品時(shí)，吸管從包裝中取出后都通過火焰滅菌；8.接種環(huán)或接種針每次使用前后，必須通過火焰灼燒全部金屬絲，直到金屬絲燒紅為止，要燒到環(huán)和針與桿的連接處，待冷卻后方可接種培養(yǎng)物，以免將待檢的細(xì)菌殺死，影響結(jié)果的準(zhǔn)確性；9.完成無菌操作后，要及時(shí)將用過的物品帶出微檢室，并將操作臺(tái)面等物品用75%酒精擦拭后待用，已報(bào)結(jié)果的培養(yǎng)皿、試管等要及時(shí)清洗，必要時(shí)放入消毒容器內(nèi)用水煮沸后再清洗；10.工作完畢，兩手應(yīng)用肥皂和水沖洗干凈，必要時(shí)