ICS67.050CCS

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CITS團 體 標 準T/CITS271—2025食品中有機化合物高分辨質(zhì)譜篩查方法確認規(guī)范Confirmationspecificationforhighresolutionmassspectrometryscreeningmethodoforganiccompoundsinfood2025-03-14發(fā)布 2025-03-14實施中國檢驗檢測學(xué)會 發(fā)布T/CITS271T/CITS271—2025II目 次前言 II1范圍 12規(guī)范性引用文件 13術(shù)語和定義 14總則 3方法確認參數(shù)的選擇 3代表性樣品的選擇 3代表性目標化合物的選擇 34.4篩查限 4靶向篩查中化合物的定性標準 4非靶向篩查中化合物的定性標準 45定性方法的確認 45.1確認參數(shù) 45.2參數(shù)性能 5實驗室內(nèi)方法確認 5實驗室間方法確認 56半定量方法的確認 56.1確認參數(shù) 56.2參數(shù)性能 5實驗室內(nèi)方法確認 6實驗室間方法確認 6參考文獻 8T/CITS271T/CITS271—2025IIII前 言本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導(dǎo)則第1部分：標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。本文件由中國檢測檢測學(xué)會提出并歸口。本標準起草單位：中國合格評定國家認可中心、中國肉類食品綜合研究中心、中國檢驗檢疫科學(xué)研究院。本標準主要起草人：單耕、宋義運、孫曉辰、孫培琴、李宏、陳輝、郭文萍、趙文濤、王娟強。T/CITS271T/CITS271—2025PAGEPAGE1食品中有機化合物高分辨質(zhì)譜篩查方法確認規(guī)范確認等要求。本文件適用于基于色譜和高分辨質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)的食品中農(nóng)藥殘留、獸藥殘留、污染物、生物毒素、食品添加劑及非法添加物等有機化合物篩查方法的確認。規(guī)范性引用文件（包括所有的修改單適用于本文件。GB5009.295—2023 食品安全國家標準 化學(xué)分析方法驗證通則術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。高分辨質(zhì)譜儀 high-resolutionmassspectrometer，HRMS分辨率大于峰谷處或半峰寬處且質(zhì)量準確性相對偏差不大于5ppm的質(zhì)譜儀。質(zhì)荷比 masstochargeratio，m/z（以相對原子質(zhì)量單位計（以電子電量為單位計m/z。[來源：GB/T6041—2020，定義2.3]質(zhì)量準確性 massaccuracy某種離子的測量質(zhì)荷比與實際（理論）質(zhì)荷比的偏離程度。[來源：GB/T6041—2020，定義2.7]方法確認 methodvalidation實驗室通過試驗，提供客觀有效證據(jù)證明特定檢測方法滿足預(yù)期的用途。[來源：GB/T27417—2017，定義3.1]實驗室內(nèi)方法確認 in-housemethodvalidation在一個實驗室內(nèi)，在合理的時間間隔內(nèi)，用一種方法在預(yù)定條件下對相同或不同測試樣品進行的分析實驗，以證明特定檢測方法滿足預(yù)期的用途。[來源：GB/T27417—2017，定義3.3]實驗室間方法確認 interlaboratorymethodvalidation在兩個或多個實驗室之間實施的方法確認。實驗室依照預(yù)定條件用相同方法對相同樣品的測定，以證明特定檢測方法滿足預(yù)期的用途。[來源：GB/T27417—2017，定義3.4]T/CITS271—T/CITS271—20253.7PAGEPAGE2關(guān)注濃度水平 levelofinterest，LOI對判斷樣品中物質(zhì)或分析物是否符合法規(guī)規(guī)定和要求的有決定性意義的濃度。[來源：GB/T27417—2017，定義3.10]3.8靶向篩查方法 targetedscreeningmethod針對特定目標化合物的篩查方法。3.9非靶向篩查方法 untargetedscreeningmethod不局限于特定目標化合物的篩查方法。3.10方法篩查限 methodscreeninglimit，MSL的濃度水平。3.11陽性結(jié)果 positiveresults在95%的置信度水平和一定的樣本數(shù)量下，樣品中檢出目標化合物的濃度大于等于方法篩查限時的檢測結(jié)果。3.12陰性結(jié)果 negativeresults在95%的置信度水平和一定的樣本數(shù)量下，樣品中未檢出目標化合物或目標化合物的濃度低于方法篩查限時的檢測結(jié)果。3.13假陰性率 falsenegativerate將陽性結(jié)果判斷為陰性的比率（以百分比表示）。[來源：SN/T2775-2023，定義3.7]3.14假陽性率 falsepositiverate將陰性結(jié)果判斷為陽性的比率（以百分比表示）。[來源：SN/T2775-2023，定義3.8]3.15定性方法 qualitativemethod根據(jù)目標化合物特定性質(zhì)鑒定其在樣品中是否存在的分析方法。[來源：GB5009.295—2023，定義2.2]3.16半定量方法 semi-quantitativemethod能夠快速得到目標物的濃度，但精密度和正確度不滿足定量方法要求的分析方法。3.17定量方法 quantitativemethod在滿足規(guī)定的精密度和正確度的條件下，測定目標目標化合物分析物的濃度或量的分析方法。[來源：GB5009.295—2023，定義2.3]3.18定量限 limitofquantitation在滿足規(guī)定的正確度和精密度的條件下，樣品中目標化合物能被測定的最低濃度或量。[來源：GB5009.295—2023，定義2.17]3.19檢出概率 probabilityofdetection，POD在規(guī)定的濃度和置信水平下，分析方法檢出目標化合物的概率.[來源：GB5009.295—2023，定義2.16]T/CITS271T/CITS271—2025PAGEPAGE33.20測定范圍 measurementrange在規(guī)定的正確度和精密度的條件下，方法定量測定樣品中目標化合物最低和最高濃度或量的區(qū)間。[來源：GB5009.295—2023，定義2.8]3.21特異性 specificity分析方法區(qū)分目標化合物和干擾物質(zhì)的能力。[來源：GB5009.295—2023，定義2.5]3.22正確度 trueness在規(guī)定試驗條件下多次測定的平均值與參考量值間的一致程度。[來源：GB5009.295—2023，定義2.9]3.23重復(fù)性 repeatability密度。[來源：GB5009.295—2023，定義2.10]3.24法規(guī)限量 regulatorylimit在食品或農(nóng)產(chǎn)品中法規(guī)允許的有機化合物的最大濃度。3.25確證方法 confirmatorymethod能提供目標化合物全部或者部分信息，依據(jù)這些信息可以明確定性或者定量的方法。[來源：GB/T27417—2017，定義3.7]總則方法確認參數(shù)的選擇定性和半定量方法確認參數(shù)的選擇按照表1執(zhí)行。表1 方法確認參數(shù)的選擇特異性定性方法√√————/√√√√———/—√√實驗室內(nèi)√√√√√√/——實驗室間—√√√√/√——代表性樣品的選擇的食品種類或高風(fēng)險的食品種類。代表性食品的選擇GB5009.295-2023A。類，每個食品子類至少選擇一種代表性食品。選擇一種代表性食品。代表性目標化合物的選擇（個類別至少1個）進行確認，代表性化合物應(yīng)涵蓋不同極性水平、不同酸堿度的化合物。篩查限篩查方法應(yīng)能夠在設(shè)定的方法篩查限濃度水平可靠地檢測到目標化合物并且避免出現(xiàn)假陰性結(jié)果。方法篩查限的設(shè)定如下：1/2。對于沒有法規(guī)限量要求的物質(zhì)，方法篩查限不高于該物質(zhì)確證方法的檢出限，或者方法篩查3靶向篩查中化合物的定性標準靶向篩查中目標化合物的定性標準如表2所示，當判別項符合判定標準時，可判為陽性。表2 靶向篩查中化合物的定性標準判別項判定標準保留時間在相同的檢測條件下，目標化合物與參考標準品的保留時間相對偏差不超過±2.5%；對于保留時間小于2min的快速色譜，保留時間的相對偏差小于5%。響應(yīng)信號強度當信噪比（S/N）適用時，S/N≥3；當S/N不適用時，響應(yīng)信號強度應(yīng)保證目標化合物的檢出概率大于等于95%。質(zhì)量準確性一級質(zhì)譜離子的m/z相對偏差≤5ppm；二級質(zhì)譜子離子的m/z相對偏差≤5ppm；當m/z<200時，其絕對偏差<1mDa。定性離子1個一級質(zhì)譜離子+1個二級質(zhì)譜子離子；或者3個一級質(zhì)譜離子。相對離子豐度比最大相對偏差22物與標準品的相對離子豐度比最大偏差≤40%。注1：定性離子應(yīng)包含目標化合物的全部或部分結(jié)構(gòu)；非靶向篩查中化合物的定性標準非靶向篩查中化合物的定性標準如表3所示，當判別項符合判定標準時，可判為陽性。表3 非靶向篩查中化合物的定性標準判別項判定標準響應(yīng)信號強度當信噪比（S/N）適用時，S/N≥3；當S/N不適用時，響應(yīng)信號強度應(yīng)保證待定性化合物的檢出概率大于等于95%。質(zhì)量準確性一級質(zhì)譜離子的m/z與理論值的相對偏差≤5ppm；二級質(zhì)譜子離子的m/z與理論值的相對偏差≤5ppm；當m/z<200時，其與理論值的絕對偏差<1mDa。同位素峰同位素峰的m/z與理論值相比，應(yīng)符合質(zhì)量準確性要求；同位素離子的離子比率與化合物的理論比率相比，相對偏差不超過20%。定性離子1+13譜圖。相對離子豐度比最大相對偏差22度比與理論值相比，最大偏差≤50%；或者二級質(zhì)譜全掃描質(zhì)譜圖與質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫中的理論質(zhì)譜圖匹配度大于等于80%。定性方法的確認確認參數(shù)定性方法的確認的典型參數(shù)包括特異性、方法篩查限、假陰性率和假陽性率。參數(shù)性能定性方法的參數(shù)性能要求如下：特異性：樣品基質(zhì)和結(jié)構(gòu)類似物不影響定性結(jié)果；4.4；假陰性率≤5%；假陽性率≤15%。實驗室內(nèi)方法確認特異性在代表性樣品中添加一定濃度的有可能干擾目標化合物定性的物質(zhì)，然后進行分析，檢查是否能有效識別這些干擾物質(zhì)。樣品基質(zhì)或結(jié)構(gòu)類似物的響應(yīng)信號在可能干擾目標化合物定性或定量的情況下，不高于目標化合物在方法篩查限濃度水平響應(yīng)信號的30%。篩查限篩查限的設(shè)置見4.4，假陽性率和假陰性率均符合5.2則表明篩查限適用。假陽性率篩查限添加），按照方法要求進行分析。假陽性率計算見式（1）： FP=（1?NT/??）×100% (1)式中：FP——假陽性率；NT——篩查測試結(jié)果為陰性的樣品數(shù)；N——陰性樣品數(shù)；假陰性率樣品的制備同5.3.3，假陰性率計算見式（2）： FN=（1-PT/P）×100% (2)式中：FN——假陰性率；PT——篩查測試結(jié)果為陽性的樣品數(shù)；P——陽性樣品數(shù)。實驗室間方法確認至少選擇3個實驗室進行協(xié)同試驗，每種樣品基質(zhì)制備陰性樣品和陽性樣品（按方法篩查限添加）各20-30個，平均分配給參與協(xié)同試驗的實驗室按照5.3進行試驗和數(shù)據(jù)統(tǒng)計，性能參數(shù)需滿足5.2。半定量方法的確認確認參數(shù)度、再現(xiàn)性精密度。參數(shù)性能半定量方法的參數(shù)性能要求如下：特異性：樣品基質(zhì)和結(jié)構(gòu)類似物不影響定性結(jié)果；4.4；31/2測定范圍：測定范圍應(yīng)覆蓋目標化合物的定量限和關(guān)注濃度。正確度（以回收率表示）：20%～200%。實驗室內(nèi)方法確認特異性方法篩查限濃度水平響應(yīng)信號的10%。篩查限、正確度和重復(fù)性精密度方法篩查限添加），按照方法要求進行分析。性能參數(shù)計算方法見式（3）和式（4）： ??=（??1+??2+?…..+??n）/n (3) ????????=????/×100%································································(4)式中：r——實驗室內(nèi)正確度（以回收率表示）；r1、r2、….rn——第1、第2、 第n個陽性添加樣品的回收率；n——陽性添加樣品的總數(shù)。RSDr——重復(fù)性精密度；SD——陽性添加樣品的篩查測試濃度的標準偏差；——陽性添加樣品的篩查測試平均濃度。定量限對于每種代表性樣品基質(zhì)，采用定量限濃度水平的有證標準物質(zhì)/標準樣品、質(zhì)控樣品或標準添加樣品進行獨立檢測，至少檢測6個平行樣品，并進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析，若在該濃度的測定結(jié)果的正確度和精密度均滿足6.2，則可將該濃度作為方法的定量限。定量限的估算方法包括:10310測定范圍目標化合物，還需驗證法規(guī)限量或者關(guān)注濃度的正確度和精密度，正確度和精密度應(yīng)滿足6.2。于或等于0.99，并具有5個或5個以上數(shù)據(jù)點（不包括0點）。實驗室間方法確認特異性同6.3.1篩查限、正確度和再現(xiàn)性精密度式（6）： ??=（??1+??2+?…..+??n）/n (5) ??????R=????/×100% (6)式中：R——實驗室間正確度（以回收率表示）；R1、R2、…Rn——第1、第2、…第n個陽性添加樣品的回收率；n——陽性添加樣品的總數(shù)。RSDR——重復(fù)性精密度；SD——陽性添加樣品的篩查測試濃度的標