單元三抗生素類藥物的發(fā)酵生產(chǎn)項(xiàng)目四鏈霉素的發(fā)酵生產(chǎn)

任務(wù)二鏈霉素的發(fā)酵生產(chǎn)（一）種子制備1.斜面孢子培養(yǎng)碳源：葡萄糖氮源：蛋白胨，豌豆浸汁等原始斜面質(zhì)量要求：菌落分布均勻，密度適中，顏色潔白，單菌落豐滿由原始斜面的豐滿單菌落接種至子斜面上，長(zhǎng)成后即得生產(chǎn)斜面，應(yīng)為白色豐滿的梅花型或饅頭型，背面為淡棕色色素，排除各種雜型菌落。（二）種子制備2.搖瓶種子培養(yǎng)生產(chǎn)斜面的菌落接種到搖瓶培養(yǎng)基中，經(jīng)過(guò)培養(yǎng)即得搖瓶種子。搖瓶種子（母瓶）可以直接接種子罐，也可以先擴(kuò)大培養(yǎng)，用培養(yǎng)所得的子瓶接種。搖瓶培養(yǎng)基的成分為黃豆餅粉，葡萄糖，硫酸銨，碳酸鈣等種子質(zhì)量檢查指標(biāo)：菌絲階段特征，發(fā)酵單位，菌絲粘度或濃度，糖氮代謝，種子液色澤和無(wú)雜菌檢查。2.種子罐擴(kuò)大培養(yǎng)種子罐培養(yǎng)為2～3級(jí)，接種量一般都為10％，在種子培養(yǎng)過(guò)程中必須嚴(yán)格控制好罐溫、通氣攪拌和泡沫控制，以保證菌絲生長(zhǎng)良好，得到合格的種子。（三）發(fā)酵工藝控制1.鏈霉素的發(fā)酵培養(yǎng)基

葡萄糖、黃豆餅粉、硫酸銨、玉米漿、磷酸鹽和碳酸鈣等（鏈霉素的發(fā)酵需要在高的氧傳遞水平和適當(dāng)?shù)牡蜔o(wú)機(jī)磷酸鹽濃度下進(jìn)行）其中葡萄糖是鏈霉素發(fā)酵的最適碳源，一般葡萄糖的用量在2%～14%之間，但在孢子基礎(chǔ)培養(yǎng)基時(shí)，以5%～8%為好，補(bǔ)料后，總量在10％以上。也可使用葡萄糖結(jié)晶母液和工業(yè)葡萄糖代替結(jié)晶葡萄糖。鏈霉素發(fā)酵使用的氮源，有機(jī)氮源包括黃豆餅粉、玉米漿、蠶蛹粉、酵母粉和麩質(zhì)水，其中以黃豆餅粉為最佳，其他可作為輔助氮源。無(wú)機(jī)氮源以硫酸銨和尿素為最常用，采用有機(jī)氮源時(shí)，必須注意其品種、來(lái)源、質(zhì)量等無(wú)機(jī)元素中的磷頗為重要，在工業(yè)生產(chǎn)中，一般采用葡萄糖為碳源，配以較低濃度的磷酸鹽來(lái)配備培養(yǎng)基。CaCO3可以調(diào)節(jié)發(fā)酵液中的pH值和中和灰色鏈霉素代謝過(guò)程中產(chǎn)生的有機(jī)酸。需注意的是Fe2+濃度超過(guò)60μg/ml以上就產(chǎn)生毒性，顯著影響鏈霉素的產(chǎn)量，而對(duì)菌絲體生長(zhǎng)影響較小，2.鏈霉素發(fā)酵條件及中間控制要點(diǎn)溶氧的影響及控制溫度的影響及控制pH值的影響及控制中間補(bǔ)料控制溶氧是灰色鏈霉菌高度需氧菌，臨界溶氧濃度約為10-5mol/L，溶氧在此值以上，細(xì)胞的攝氧率達(dá)到最大限度，也能保證有較高的發(fā)酵單位。溫度：灰色鏈霉菌對(duì)溫度敏感，發(fā)酵溫度以28.5℃左右為宜pH控制在6.0-7.5之間中間補(bǔ)料為延長(zhǎng)發(fā)酵周期，提高產(chǎn)量，鏈霉素發(fā)酵采用中間補(bǔ)碳、氮源補(bǔ)料量按補(bǔ)入后，糖含量為5%計(jì)算，但放罐時(shí)殘?zhí)菨舛茸詈玫陀?%，以有利于后續(xù)的提取精制。補(bǔ)硫酸銨和氨水的控制指標(biāo)，是以培養(yǎng)基的pH值和氨基氮的含量高低為準(zhǔn)。pH值在7.5以下時(shí)，加入氨水發(fā)