高中生物專(zhuān)題練習(xí)試題——微生物的培養(yǎng)技術(shù)和應(yīng)用含答案解析

一、單選題

1.不同的微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需求各不相同。下列有關(guān)一種以CO2為唯一碳源的自養(yǎng)微生物營(yíng)養(yǎng)的描述中，不正確的是（）

A.氮源物質(zhì)為該微生物提供必要的氮元素

B.碳源物質(zhì)也是該微生物的能源物質(zhì)

C.無(wú)機(jī)鹽是該微生物不可缺少的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)

D.為制成固體培養(yǎng)基往往需要加入瓊脂作為凝固劑

【答案】B

【解析】

培養(yǎng)基的組成成分包括碳源、氮源，水、無(wú)機(jī)鹽，有的還有生長(zhǎng)因子，以C02為唯一碳源的培養(yǎng)基培養(yǎng)自養(yǎng)微生物，培養(yǎng)基中

還必鄉(xiāng)反提供氮源、水、無(wú)機(jī)鹽.

【詳解】

A、氮源物質(zhì)為該微生物提供必要的氮素，A正確；

B、該碳源是二氧化碳，屬于無(wú)機(jī)物，不能作為微生物的能源物質(zhì)，B錯(cuò)誤；

C、無(wú)機(jī)鹽是該微生物不可缺少的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，C正確；

D、瓊脂的作用是在固體及半固體培養(yǎng)基中充當(dāng)凝固劑，D正確。

姆B。

2.微生物培養(yǎng)過(guò)程中，要十分市視無(wú)菌操作，現(xiàn)代生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的許多方面也要進(jìn)行無(wú)菌操作，防止雜菌污染，請(qǐng)分析下列操

作，錯(cuò)誤的是（）

①干熱滅菌可以殺死微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞和部分芽胞

②無(wú)菌繁殖脫毒苗時(shí)，植物的外植體要進(jìn)行消毒

③加入培養(yǎng)基中的指示劑和染料不需要滅菌

④涂布平板時(shí)所用的涂布器需酒精浸泡后灼燒滅菌

⑤培養(yǎng)基要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌

⑥家庭制作葡萄酒時(shí)要將容器和葡萄進(jìn)行滅菌

A.毓）⑤B.②?C.①?⑥D(zhuǎn).④⑥

【答案】C

【解析】

1.無(wú)菌技術(shù)的主要內(nèi)容：

①對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手，進(jìn)行清潔和消毒：

②將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進(jìn)行滅菌：

③為避免周?chē)h(huán)境中微生物的污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行；

④實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周?chē)奈锲废嘟佑|。

2.常用的滅菌方法主要有灼燒滅菌、高壓蒸汽滅菌和干熱滅菌等。

①灼燒滅菌：將微生物的接種工具，如接種環(huán)、接種針或其他金屬工具，直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，可以迅速?gòu)氐椎?/p>

滅菌，此外，在接種過(guò)程中，試管口或瓶口等容易被污染的部位，也nJ■以通過(guò)火焰燃燒來(lái)滅菌：

②干熱滅菌：能耐高溫的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培養(yǎng)恥）和金屬用具等，可以采用這種方法滅菌；

③高壓蒸汽火苗：將滅菌物品放置在盛有適量水的高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)，為達(dá)到良好的滅苗效果，一般在壓力為lOOkPa,溫度為

121℃的條件下，維持15?30min.

【詳解】

①煮沸消毒可以殺死微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞和部分芽抱，而滅菌能殺滅環(huán)境中一切微生物，包括抱子和芽抱，①錯(cuò)誤：

②無(wú)菌繁殖脫毒苗時(shí)，植物的外植體要進(jìn)行消毒，②正確；

③指示劑和染料可能混有微生物，因此加入培養(yǎng)基中的指示劑和染料也需要滅菌，③錯(cuò)誤：

④涂布平板時(shí)所用的涂布器需酒精浸泡后灼燒滅菌，④正確：

⑤培養(yǎng)基要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，⑤正確：

⑥家庭制作葡萄酒時(shí)，要將容器進(jìn)行滅菌，但是葡萄不能滅菌，因?yàn)榘l(fā)酹用的酹母菌來(lái)自于葡萄，⑥錯(cuò)誤。

故選c.

3.如圖為實(shí)臉空培養(yǎng)和純化大腸桿菌過(guò)程中的部分操作步驟，下列說(shuō)法不正確的是（）

①②③④

A.步驟（T倒平板操作時(shí)，倒好后應(yīng)立即將其倒過(guò)來(lái)放置

B.①②③步驟操作時(shí)需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行

C.操作③到④的過(guò)程中，每次接種前后都需要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行灼燒處理

D.用接種環(huán)在平板上劃線(xiàn)時(shí)注意不能將培養(yǎng)基劃破

【答案】A

【解析】

分析圖形：①是倒平板，②是用接種環(huán)沾取菌液，③是進(jìn)行平板劃線(xiàn)，④是培養(yǎng)。

【詳解】

A、①步驟表示倒平板，冷卻后將其倒過(guò)來(lái)放置，A錯(cuò)誤；

B、①②③步驟操作時(shí)需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行，防止被雜菌污染，B正確；

C、朗環(huán)在每次接種前和接種結(jié)束后都要通過(guò)灼燒來(lái)滅菌，防止造成污染，C正確；

D、生接種環(huán)在平板上劃線(xiàn)時(shí)注意不能將培養(yǎng)基劃破，D正確。

故選A。

4.下列有關(guān)土壤中微生物的分離與計(jì)數(shù)的說(shuō)法，錯(cuò)誤的是（）

A.土壤中各類(lèi)微生物的數(shù)量不同，為獲得不同類(lèi)型的微生物要按不同的稀釋倍數(shù)進(jìn)行分離

B.測(cè)定土壤中細(xì)菌的總量和測(cè)定土壤中能分解尿素的細(xì)菌的數(shù)量，選用的稀釋范圍不同

C.可根據(jù)菌落的特征，區(qū)分不同的微生物

D.牛肉膏蛋白豚培養(yǎng)基的菌落數(shù)目明顯小于選擇培養(yǎng)基的數(shù)目，說(shuō)明選擇培養(yǎng)基已篩選出一些細(xì)菌菌落

【答案】D

【解析】

從土壤中篩選目的微生物的流程一般為：土壤取樣一樣品的稀釋T將稀釋液涂布到以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基

上一挑選能生長(zhǎng)的菌落T鑒定。當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中

的一個(gè)活菌。通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)來(lái)推測(cè)樣品中大約含有的活菌數(shù)。通常選取菌落數(shù)在30-300的平板

進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。

【詳解】

A、土壤中各種微生物數(shù)量不同，細(xì)菌大約為70%~90%,其次是放線(xiàn)菌，真菌最少，故不同類(lèi)型微生物，要

按不同稀釋倍數(shù)進(jìn)行，A正確；

B、測(cè)定土壤中細(xì)菌的總量和測(cè)定土壤中能分解尿素的細(xì)菌的數(shù)量，需要選用的稀釋范圍不同，B正確；

C、一般來(lái)說(shuō)，可根據(jù)菌落的形狀、大小、顏色等特征區(qū)分不同的微生物，C正確；

D、驗(yàn)證選擇培養(yǎng)基是否具有選擇作用，需設(shè)立牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基作為對(duì)照，若后者上的菌落數(shù)明顯大于前

者，說(shuō)明前者具有篩選作用，D錯(cuò)誤。

故選D.

5.某一種細(xì)菌菌株需要從環(huán)境中攝取現(xiàn)成的亮氨酸才能夠生長(zhǎng)，此菌株對(duì)鏈霉素感。實(shí)驗(yàn)者用誘變劑處理此菌株，想篩選出表

中列出的細(xì)菌菌株類(lèi)型。根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?，選用的培養(yǎng)基類(lèi)型是（）

注:L--亮氨酸s一?鏈霉素“+”表示加入表示不加入

選篩選出不需要亮氨酸的菌株應(yīng)使用篩選出抗鏈霉素的菌株應(yīng)使用篩選出不需要亮氨酸、抗鏈穹素的菌株應(yīng)使

項(xiàng)的培養(yǎng)基的培養(yǎng)基用的培養(yǎng)基

AL+?S+L-,S-L+,S-

BL-,S+L+,S+L-.S-

CL-,S-L+,S+L-,S+

DL+,S-L-,S-L+,S+

A.AB.BC.CD.D

【答案】c

【解析】

選擇培養(yǎng)基是指允許特定種類(lèi)的微生物生長(zhǎng)，同時(shí)抑制或阻止其他種類(lèi)的微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基。據(jù)此根據(jù)解選的目的，在培養(yǎng)基

中添加或去除特定物質(zhì)，便可得到所需菌種。

【詳解】

根據(jù)題目要求，篩選出不需要亮氨酸的菌株，即在沒(méi)有亮氨酸的培養(yǎng)基上能夠生長(zhǎng)，應(yīng)使用的培養(yǎng)基為L(zhǎng)?、S可加可不加；篩選

出抗鏈霉素的菌株應(yīng)使用的培養(yǎng)基為S+、L可加可不加，篩選出不需要亮氨酸、抗鏈霉素的菌株應(yīng)用的培養(yǎng)基L-、S+,ABD

錯(cuò)誤，C正確.

雌C。

6.解脂菌能利用分泌的脂肪酶將脂肪分解成甘油和脂肪酸并吸收利用。脂肪陵會(huì)使醇溶青瓊脂平板變?yōu)樯钏{(lán)色,將不靠直接吸

收脂肪的甲，乙兩種菌分別等量接種在醇溶青瓊脂平板上培養(yǎng)。甲菌菌落周?chē)尸F(xiàn)深藍(lán)色，乙菌菌落周?chē)蛔兩?，下列說(shuō)法錯(cuò)誤

的是（）

A.甲菌屬于解脂菌

B.實(shí)驗(yàn)中所用培養(yǎng)基以脂肪為唯一碳源

C.可將兩種菌分別接種在同一平板的不同區(qū)域進(jìn)行對(duì)比

D.該平板可用來(lái)比較解脂菌分泌脂肪酶的能力

【答案】B

【解析】

選擇培養(yǎng)基：根據(jù)某種微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求或其對(duì)某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基使混合菌樣中的劣勢(shì)菌變成優(yōu)勢(shì)

菌，從而提高該菌的篩選率。

鑒別培養(yǎng)基：依據(jù)微生物產(chǎn)生的某種代謝產(chǎn)物與培養(yǎng)基中特定試劑或化學(xué)藥品反應(yīng)，產(chǎn)生明顯的特征變化而設(shè)計(jì).

【詳解】

A、根據(jù)題干信息"甲菌菌落周?chē)尸F(xiàn)深藍(lán)色”，說(shuō)明甲可以分泌脂肪酶將脂肪分解成甘油和脂肪酸，脂肪酸會(huì)使醇溶青瓊脂平

板變?yōu)樯钏{(lán)色，因此甲菌屬于解脂菌，A正確；

B、乙菌落周?chē)鷽](méi)有出現(xiàn)深藍(lán)色，說(shuō)明乙菌落不能產(chǎn)生脂肪酶，不能^用脂肪為其供能，但乙菌落也可以在培養(yǎng)基上生存，說(shuō)明

該培養(yǎng)基不是以脂肪為唯一碳源，B錯(cuò)誤；

C、可將兩種菌分別接種在同一平板的不同區(qū)域進(jìn)行對(duì)比，更加直觀，C正確；

D、可以利用該平板來(lái)比較解脂菌分泌脂肪酶的能力，觀察指標(biāo)可以是菌落周?chē)钏{(lán)色圈的大小，D正確。

故選B。

7.人體皮膚表面存在著多種微生物，某同學(xué)擬從中分離出葡萄球菌。卜述操作不正確的是（）

A.對(duì)配制的培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌

B.使用無(wú)菌棉拭子從皮膚表面取樣

C.用取樣后的棉拭子在固體培養(yǎng)基卜.涂布

D.觀察菌落的形態(tài)和顏色等進(jìn)行初步判斷

【答案】C

【解析】

實(shí)驗(yàn)室常用的消毒和滅菌方法的比較：

1、消毒：煮沸消毒法（一般物品）、巴氏消毒法（一些不耐高溫的液體，如牛奶）、化學(xué)藥劑消毒法（如用酒精擦拭雙手，用

氨氣消毒水源等）、紫外線(xiàn)消毒法（接種室、操作臺(tái)）；

2、滅菌：灼燒滅菌（接種工具）、干熱滅菌（玻璃器皿、金屬用具）、高壓蒸汽滅菌（培養(yǎng)基及容器）。

【詳解】

A、為避免雜菌污染干擾，需對(duì)配制的培格基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，A正確；

B,葡萄球菌需從人體皮膚的微生物中分離，為避免雜菌污染，故需要使用無(wú)菌棉拭子從皮膚表面取樣，B正確；

C、用取樣后的棉拭子浸出液在固體培養(yǎng)卷上涂布，c錯(cuò)誤；

D、根據(jù)微生物在固體平板培養(yǎng)基表面形成的菌落的形狀、大小、隆起程度和顏色等特征進(jìn)行鑒別，D正確。

故選C。

8.為純化菌種，在鑒別培養(yǎng)基上劃線(xiàn)接和纖維素降解細(xì)菌，培養(yǎng)結(jié)果如圖所示。下列敘述正確的是（）

A.倒平板后需間歇晃動(dòng)，以保證表面平整

B.圖中1、II區(qū)的細(xì)菌數(shù)量均太多，應(yīng)從III區(qū)挑取單菌落

C.該實(shí)驗(yàn)結(jié)果因單菌落太多，不能達(dá)到菌種純化的目的

D.菌落周?chē)睦w維素被降解后，可被剛果紅染成紅色

【答案】B

【解析】

分析平板結(jié)果可知，采用的接種方法為平板劃線(xiàn)法，且劃線(xiàn)順序是I區(qū)、1［區(qū)、H1區(qū)，可以看到1H區(qū)中出現(xiàn)了單菌落。

【詳解】

A、倒平板后無(wú)需晃動(dòng)，A錯(cuò)誤；

B、I區(qū)、II區(qū)沒(méi)有出現(xiàn)單菌落，說(shuō)明細(xì)菌數(shù)量太多，故應(yīng)從III區(qū)挑取單菌落，B正確：

C、出現(xiàn)單菌落即達(dá)到了菌種純化的目的，C錯(cuò)誤：

D、剛果紅是?種染料，它可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成紅色復(fù)合物，但并不和水解

后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)，D錯(cuò)誤。

故選

9.微生物的純培養(yǎng)既需要適宜的培養(yǎng)基，又要防止雜菌污染，下列相關(guān)敘述正確的是（）

A.培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度越高，對(duì)微生物的生長(zhǎng)越有利

B.水是培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成成分

C.微生物的純培養(yǎng)物就是不含有代謝廢物的微生物培養(yǎng)物

D.微生物的純培養(yǎng)包括配制培養(yǎng)基、接種、分離和培養(yǎng)等步躲

【答案】B

【解析】

培養(yǎng)基是人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)；根據(jù)物理性質(zhì)分為固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)

基，培養(yǎng)基中一般含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽，其中碳源和氮源常采用蛋白陳和牛肉膏，因?yàn)樗鼈儊?lái)源于動(dòng)物原料，含有糖、

維生素和有機(jī)氮等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。另外，培養(yǎng)基還需要滿(mǎn)足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和氧氣的要求。例如，培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)

需要在培養(yǎng)基中添加維生素,培養(yǎng)霉菌時(shí)需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性，培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需將pH調(diào)至中性或微堿性，培養(yǎng)厭氧微生物

時(shí)則需要提供無(wú)氧的條件。

【詳解】

A、培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度過(guò)高會(huì)導(dǎo)致微生物出現(xiàn)失水過(guò)多，甚至出現(xiàn)死亡的現(xiàn)象，對(duì)生長(zhǎng)不利，A錯(cuò)誤；

B、培養(yǎng)基中一般含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽，水也是培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成成分，B正確；

C、微生物的純培養(yǎng)物是不含雜菌的微生物，而不是不含有代謝廢物，C錯(cuò)誤；

D、轆物的純培養(yǎng)包括配制培養(yǎng)基、滅菌、接種、分離和培養(yǎng)等步驟，D錯(cuò)誤。

10.下列有關(guān)傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的操作，不正確的是（）

A.制作果酒M，先將葡萄沖洗后，再除去枝梗

B.制作泡菜時(shí)，泡菜鹽水入壇前應(yīng)煮沸冷卻，壇蓋邊沿的水槽中注滿(mǎn)水

C.制作腐乳時(shí)，加鹽腌制可使豆腐塊變硬且能抑制雜菌生長(zhǎng)

D.制作酸奶時(shí)應(yīng)保證有氧環(huán)境以提高酸奶的酸度

【答案】D

【解析】

1、泡菜制作的實(shí)驗(yàn)原理：（1）乳酸菌在無(wú)氧條件下，將糖分解為乳酸。（2）利用乳酸菌制作泡菜的過(guò)程中會(huì)引起亞硝酸鹽的

含量的變化。溫度過(guò)高,食鹽用量不足10%.腌制時(shí)間過(guò)短，容易造成細(xì)菌大量繁殖，亞硝酸鹽含量增加。一段在腌制10天

后，亞硝酸鹽的含量開(kāi)始下降。

2、參與果酒制作的微生物是酵母菌，其圻陳代謝類(lèi)型為異養(yǎng)兼性厭氧型。果酒制作的原理：（1）在有氧條件下，反應(yīng)式如

下：QH12O6+6H2O+6O216co2+12^0+能量；（2）在無(wú)氧條件下，反應(yīng)式如下：C6Hl2。652co2+2C2HsOH+能量。

3、參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類(lèi)型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理：當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄

汁中的葡萄糖分解成醋酸。當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷?/p>

4、參與腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陳代謝類(lèi)型是異養(yǎng)需氧型.腐乳制作的原理：毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中

的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪分解成甘油和脂肪酸。

【詳解】

A、制作果酒時(shí)，先將葡萄沖洗后，再除去枝梗，防止污染，A正確；

B、泡菜鹽水入壇前應(yīng)煮沸冷卻，避免高溫殺死菌種（乳酸菌），壇蓋邊沿的水槽中注滿(mǎn)水，以制造無(wú)氧環(huán)境，B正確；

C、在腐乳的制作中，加鹽腌制的目的是析出豆腐中的水分,使豆腐塊變硬，并可以抑制雜菌的生長(zhǎng)，C正確；

D、制作酸奶時(shí)應(yīng)保證無(wú)氧環(huán)境進(jìn)行乳酸發(fā)酵，以提高酸奶的酸度，D錯(cuò)誤。

故選D。

11.微生物的純培養(yǎng)包括配制培養(yǎng)基、滅菌、接種、分離和培養(yǎng)等步驟。下列關(guān)于酵母菌的純培養(yǎng)的敘述錯(cuò)誤的是（）

A.采用平板劃線(xiàn)法和稀釋涂布平板法均可分離酵母菌

B.可用濕熱滅菌法對(duì)培養(yǎng)酵母菌的馬鈴磐瓊脂培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌

C.通過(guò)接種環(huán)連續(xù)能取菌液在固體培養(yǎng)基表面劃線(xiàn)的操作，可將菌種逐步稀釋

D.完成平板劃線(xiàn)后，待菌液被培養(yǎng)基吸收，將接種后的平板（和?個(gè)未接種的平板）倒置培養(yǎng)

【答案】C

【解析】

微生物常見(jiàn)的接種的方法：

①平板劃線(xiàn)法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線(xiàn)，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線(xiàn)的開(kāi)始部分，微生物往往連在一

起生長(zhǎng)，隨著線(xiàn)的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落；

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面,經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

【詳解】

A、對(duì)于微生物進(jìn)行分離的方法有平板劃線(xiàn)法和稀釋涂布平板法，故采用平板劃線(xiàn)法和稀釋涂布平板法均可分離酵母菌，A正

確；

B、可用濕熱滅菌法（通常是高壓蒸汽滅菌法）對(duì)培養(yǎng)酵母菌的馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，B正確；

C、通過(guò)接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線(xiàn)的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面，該過(guò)程中只顛一次菌液，C

顆；

D、完成平板劃線(xiàn)后，待菌液被培養(yǎng)基吸收，將接種后的平板（和一個(gè)未接種的平板）倒置培養(yǎng)，放恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，D

正確。

搬Q

12.下列格.關(guān)微生物培養(yǎng)的敘述，正確的是（）

A.涂布接種時(shí)，需將涂布器沾酒精后在酒精燈外焰上引燃，冷卻后再使用

B.純化培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)皿應(yīng)倒置放在恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)的搖床上培養(yǎng)

C.分離計(jì)數(shù)時(shí)，可用稀釋涂布平板法對(duì)需計(jì)數(shù)的微生物進(jìn)行分離

D.觀察菌落時(shí)，應(yīng)將培養(yǎng)皿蓋章掉以利于看清菌落的形態(tài)特征

【答案】C

【解析】

微生物純化的原理：在培養(yǎng)基上將細(xì)菌牖舉或分散成單個(gè)細(xì)胞，使其長(zhǎng)成單個(gè)菌落，這個(gè)菌落就是一個(gè)純化的組菌菌落。

【詳解】

A、涂布接種時(shí)，將涂布器末端浸在盛有酒精的燒杯中，取出時(shí),要讓多余的酒精在燒杯中滴盡，然后將沾有;酣的涂布器在內(nèi)

焰上引燃，A錯(cuò)誤；

B、純化培養(yǎng)時(shí)，不能用搖床培養(yǎng)，B錯(cuò)誤；

C、可以用稀釋涂布平板法對(duì)微生物進(jìn)行分離計(jì)數(shù)，C正確；

D、觀察菌落時(shí)，不能拿掉培養(yǎng)皿,容易雜菌污染，D錯(cuò)誤。

蠅C.

13.MIC是指藥敏試驗(yàn)中某種抗生素對(duì)測(cè)試菌的最低抑制濃度。某研究小組籽含有相同濃度抗生素I-IV的四個(gè)大小相同的紙片

分別貼在長(zhǎng)滿(mǎn)測(cè)試菌的瓊脂平板上進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，以了解病原微生物對(duì)四種抗生素的敏感程度，下圖所示為實(shí)驗(yàn)結(jié)果。相關(guān)敘述

正確的是（）

含抗菌藥物的紙片

抑窗圈中的菌落

A.培養(yǎng)基中的瓊脂可以為測(cè)試菌提供碳源

B.實(shí)驗(yàn)中可以通過(guò)抑菌圈的大小來(lái)判定抗生.素的抑菌效果

C.抑菌圈中離紙片越近的菌落對(duì)抗生素IV的抗性越強(qiáng)

D.抑菌圈中出現(xiàn)菌落的原因可能是抗生素使病原菌產(chǎn)生耐藥性基因突變

【答案】B

【解析】

圖中使用相同濃度抗生素I~W的四個(gè)大小相同的紙片，可以通過(guò)抑菌圈的大小來(lái)判定抗生素的抑菌效果，其中抑菌效果最好的

是儂素M

【詳解】

A、培養(yǎng)基中的瓊脂是凝固劑，不能為測(cè)試菌提供碳源，A錯(cuò)誤；

B、由題干信息可知，圖中是相同濃度（不同）抗生素I~IV的四個(gè)大小相同的紙片，抑菌圈越大，抗生素的抑菌效果越好。故

可以通過(guò)抑菌圈的大小來(lái)判定抗生素的抑菌效果，B正確；

C、宙嗝圈中出現(xiàn)的菌落均是對(duì)該種抗生素具有抗性的菌株，但無(wú)法通過(guò)題圖信息來(lái)判斷它們之間抗性的強(qiáng)弱，若要判斷它們

之間抗性的強(qiáng)弱環(huán)需講一步實(shí)驗(yàn)才能確定，C錯(cuò)誤；

D、抗生素對(duì)病原菌具有選擇作用，變異具有不定向性，抗生素不能誘導(dǎo)病原菌產(chǎn)生耐藥性基因突變，D錯(cuò)誤。

故選B。

14.下圖為實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)和純化大腸桿菌過(guò)程中的部分操作步驟，下列說(shuō)法正確的是（）

A.步驟①后需將培養(yǎng)基滅菌并調(diào)節(jié)pH

B.步驟①?③操作時(shí)需要在酒精燈火焰附近進(jìn)行

C.步驟③到④的過(guò)程中，接種環(huán)共灼燒處理了5次

D.圖中步驟①結(jié)束后需倒置平板，④結(jié)束后不需要

【答案】B

【解析】

1、由圖可知，①是倒平板，②是用接種環(huán)沾取菌液，③是進(jìn)行平板劃線(xiàn),④是培養(yǎng).

2、制備牛肉育蛋白豚固體培養(yǎng)基的基本過(guò)程為計(jì)算、稱(chēng)量、溶化、調(diào)pH、滅菌、倒平板五個(gè)步驟。

【詳解】

A、①步驟表示倒平板，倒平板的培養(yǎng)基需要先調(diào)節(jié)pH后滅菌，A錯(cuò)誤；

B、①②③步驟操作時(shí)需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行，防止被雜菌污染，B正確；

C、闞環(huán)在每次接種前和接種結(jié)束后都要通過(guò)灼燒來(lái)滅菌，所以完成步驟④中5次劃線(xiàn)操作前都要灼燒滅菌，接種結(jié)束后還需

灼燒滅菌1次，防止造成污染，由此可見(jiàn)，完成步驟④共需灼燒接種環(huán)6次，C5窗吳；

D、步驟④操作結(jié)束后需在培養(yǎng)皿的底上做好標(biāo)記并倒置后放入培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)，D錯(cuò)誤。

血B。

15.某研究小組從牛的瘤胃中采集樣本，進(jìn)行分解尿素的微生物的分離與計(jì)數(shù)。實(shí)驗(yàn)基本步驟如下。將1mL瘤胃樣液稀釋1000

倍，在3個(gè)平板上用涂布法分別接入0.1mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板的菌落數(shù)分別為49、47和45。下列敘述不正確的

是（）

配制培養(yǎng)基一反菌、倒平板卜庭一斑-觀察、統(tǒng)計(jì)

A.牛的揄胃中采集樣本之后，若要擴(kuò)大培養(yǎng)，擴(kuò)大培養(yǎng)的培養(yǎng)基中不能加瓊脂

B.配制的培養(yǎng)基從用途看屬于?選擇培養(yǎng)基

C.對(duì)尿素溶液進(jìn)行滅菌不能用高壓蒸汽滅菌

D.每升痛胃樣液中分解尿素的微生物活菌數(shù)為4.7X107

【答案】D

【解析】

細(xì)菌分解在尿素的過(guò)程中合成眼酶，眼酶將尿素分解成氨,會(huì)使培養(yǎng)基堿性增強(qiáng)，PH升高，所以可以用檢測(cè)pH的變化的方法

來(lái)判斷尿素是否被分解，可在培養(yǎng)基中力叭酚紅指示劑，尿素被分解后產(chǎn)生氨，PH升高，指示劑變紅。

【詳解】

A、牛的瘤胃中采集樣本之后，若要擴(kuò)大培養(yǎng)，擴(kuò)大培養(yǎng)的培養(yǎng)基中不能加瓊脂，即需要采用液體培養(yǎng)基，因?yàn)樵谝后w培養(yǎng)基中

營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用效率更高，A正確；

B、藏目的是篩選分解尿素的微生物,應(yīng)該以尿素作為唯一氮源，該過(guò)程配制的培養(yǎng)基從用途看屬于選擇培養(yǎng)基，B正確；

C、對(duì)尿素溶液進(jìn)行滅菌不能用高壓蒸汽滅菌，否則會(huì)導(dǎo)致尿素分解，C正確；

D、根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果可計(jì)算出每升瘤胃樣液中分解尿素的微生物活菌數(shù)為（49+47+45）^3^0.1x1000x1000=4.7x10^,D錯(cuò)

誤。

娟D。

16.下圖為分離以尿素為氮源的微生物的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，下列敘述正確的姑＜）

①稀釋度10”②稀釋度1皖③稀釋度1L④稀程度10<

A.圖中采用平板劃線(xiàn)法接種

B.圖中①和②表示尿素培養(yǎng)基長(zhǎng)出的菌落

C.圖中③④培養(yǎng)基中菌落生長(zhǎng)代謝時(shí)，會(huì)釋放COz

D.實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，自然界中能合成瞰幽的微生物比例較高

【答案】C

【解析】

1、選擇培養(yǎng)基選擇分解尿素的微生物的原理：培養(yǎng)基的氮源為尿素，只有能合成眠酶的微生物才能分解尿素，以尿素作為氨

源。促乏腺酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生長(zhǎng)發(fā)育繁殖，而受到抑制，所以用此培養(yǎng)基就能夠選擇出分解尿素

的微生物.

2、微生物常見(jiàn)的接種的方法（1）平板劃線(xiàn)法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線(xiàn)，在恒溫箱里培養(yǎng)。在

線(xiàn)的開(kāi)始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線(xiàn)的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落.（2）稀釋涂布平板法：將

待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

【詳解】

A、根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，圖中采用的接種方法為稀釋涂布平板法，A錯(cuò)誤；

B、圖中①和②的菌落的特征可知，①稀釋度為10-6的菌落數(shù)明顯多于②稀釋度為10-7時(shí)的菌落數(shù)，很可能是曰于雜菌污染導(dǎo)

致結(jié)果的出現(xiàn)，而不是分離出以尿素為氮源的微生物，B錯(cuò)誤；

C、③④已經(jīng)分離出單個(gè)細(xì)菌繁殖而來(lái)的尿素分解菌的菌落，尿素分解菌含有眠酶，能夠催化尿素分解成氨、二氧化碳和水，C

正確；

D、根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，無(wú)法判斷自然界中能合成服酶的微生物比例較高，D錯(cuò)誤。

蠅C.

二、多選題

17.羥基脂肪酸酯（PHA）是由嗜鹽細(xì)菌合成的一種胞內(nèi)聚酯，它具有類(lèi)似于合成塑料的理化特性，且廢棄后易被生物降解，可

用于制造無(wú)污染的“綠色塑料”?？茖W(xué)家從某咸水湖中尋找生產(chǎn)PHA菌種的流程圖如卜；卜列敘述正確的是（）

①取湖水一②接種在培養(yǎng)基上一③培養(yǎng)一④挑取單菌落，分別擴(kuò)大培養(yǎng)一⑤檢測(cè)菌體的數(shù)目和PHA的產(chǎn)量一⑥獲得目標(biāo)菌株

A.步驟④中擴(kuò)大培養(yǎng)采取的接種方法為平板劃線(xiàn)法

B.步驟②要用稀釋涂布平板法接種到含PHA的選擇培養(yǎng)基上

C.步驟⑤所獲數(shù)據(jù)，可用于計(jì)算單一菌體產(chǎn)生PHA的效率

D.步驟③的培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，長(zhǎng)出的單菌落不一定能合成PHA

【答案】CD

【解析】

篩選分離目的微生物的一般步驟是：樣品取樣、選擇培養(yǎng)、梯度稀釋、涂布培養(yǎng)和篩選菌株，篩選分離生產(chǎn)PHA的菌種需要用

稀釋涂布平板法或平板劃線(xiàn)法接種分離。其中稀釋涂布平板法可用于微生物計(jì)數(shù)。

【詳解】

A、步驟④為擴(kuò)大培養(yǎng)，培養(yǎng)后⑤為檢測(cè)菌體數(shù)目，說(shuō)明步驟④中擴(kuò)大培養(yǎng)采取的接種方法為稀釋涂布平板法，平板劃線(xiàn)法不能

用于讓數(shù)，A錯(cuò)誤；

B、咸水湖中鹽度較高，欲從某咸水湖中尋找生產(chǎn)PHA菌種，則步驟②可用稀釋涂布平板法接種到含鹽量較高的選擇培養(yǎng)基

上，以篩選耐鹽的菌體，B錯(cuò)誤；

C、步驟⑤檢測(cè)菌體的數(shù)目和PHA的產(chǎn)量，該數(shù)據(jù)可用千講一步計(jì)算單一菌體產(chǎn)生PHA的效率，C正確；

D、步驟③培養(yǎng)后可形成菌落，故培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，由于②中的選擇培養(yǎng)基是篩選的耐鹽的菌體，所以③中長(zhǎng)出的單菌落不

一定能合成PHA,D正確。

故選CD.

18.產(chǎn)脂肪酶細(xì)菌可用于含油廢水的處理。科研人員采用射線(xiàn)照射從土壤中分離的菌株，反身篩選后獲得產(chǎn)脂肪酶能力較高的苗

株，具體流程如圖。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

A.步驟①取土壤樣品滅菌后溶于無(wú)菌水中制成菌懸液

B.步驟②的固體平板是以脂肪作為唯一碳源的培養(yǎng)基

C.步驟②射線(xiàn)照射可引起細(xì)菌基因突變或染色體變異

D.步驟③透明圈越大的菌落，其脂肪酶活性一定越高

【答案】ACD

【解析】

1、碳源的類(lèi)型包括無(wú)機(jī)碳源和無(wú)機(jī)碳源。前者有包括C02、NaHCC>3等；后者包括糖類(lèi)、脂肪酸、花生餅松、石油等。

2、破源的作用：①構(gòu)成生物體細(xì)胞的物質(zhì)和一些代謝產(chǎn)物；②既是碳源又是能源（有機(jī)碳源）。

【詳解】

A、土壤樣品中包含目的菌株，進(jìn)行滅菌會(huì)殺死所有微生物包括要培養(yǎng)的目的菌株，所以不可以進(jìn)行滅菌處理，A錯(cuò)誤；

B、要篩選可以產(chǎn)生fl旨肪酶的細(xì)菌,步驟②的固體平板應(yīng)是以脂肪作為唯一碳源的培養(yǎng)基，B正確；

C、細(xì)菌是原核生物，沒(méi)有成形的細(xì)胞核和染色體，因此用射線(xiàn)照射不會(huì)引起細(xì)菌染色體變異，C錯(cuò)誤；

D、透明圈大的菌落，酶活性不一定大，因此對(duì)初篩選的透明圈大的菌落要進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，進(jìn)一步對(duì)發(fā)酵液進(jìn)行酶活性檢測(cè)，D

錯(cuò)誤。

蠅ACD。

19.野生型大腸桿菌菌株能在基本培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，氨基酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株由干發(fā)生基因突變而無(wú)法合成某種氨基酸只能在完全培

養(yǎng)基上生長(zhǎng)，下圖為純化某第基酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型突變株的部分流程圖，數(shù)字代表培養(yǎng)基，A、B、C表示操作步驟。下列有關(guān)說(shuō)法

不正確的是（）

無(wú)菌落

A.①②為完全培養(yǎng)基，③④為基木培養(yǎng)基

B.A操作的目的是提高突變菌株的濃度

CB操作可用涂布器蘸取菌液均勻的涂布在②表面

D.經(jīng)C過(guò)程影印及培養(yǎng)后，可從④培養(yǎng)基中挑取E菌落進(jìn)行純化培養(yǎng)

【答案】ACD

【解析】

題圖分析：圖中首先利用稀釋涂布平板法分離細(xì)菌，然后運(yùn)用“影印法”將菌種接種到兩種培養(yǎng)基中，分別是基本培養(yǎng)基、完全

培養(yǎng)基；在基本培養(yǎng)基中，某氨基酸突變株不能生長(zhǎng)，而在完全培養(yǎng)基中能夠生長(zhǎng)，據(jù)此可以選擇出氨基酸突變株。

【詳解】

A、完全培養(yǎng)基上無(wú)法合成氨基酸的也可以生長(zhǎng)，野生型的能在基本培養(yǎng)基培養(yǎng)，①②④為完全培養(yǎng)基，③為基本培養(yǎng)基，慶錯(cuò)

誤；

B、紫外線(xiàn)可以提高突變的頻率，A操作的目的是提高突變菌株的濃渡，擴(kuò)大培養(yǎng)，B正確；

C、B操作是將菌液滴加到培養(yǎng)基表面，再用涂布器將菌液均勻的涂布在②表面，以便獲得單菌落，C錯(cuò)誤；

D、從圖中可看出，D在基本培養(yǎng)基中無(wú)法生長(zhǎng)，在完全培養(yǎng)基中可生長(zhǎng)，說(shuō)明D是氨基酸缺陷型菌落，故經(jīng)C過(guò)程影印及培

養(yǎng)后，可從④培養(yǎng)基中另緲D菌落進(jìn)行純化培養(yǎng)，D錯(cuò)誤.

姆ACD。

20.某生物興趣小組完成了“土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離和計(jì)數(shù)”的實(shí)驗(yàn)，具體操作流程如圖所示。下列相關(guān)敘述正確的是

（）

0.5mL0.5mL0.1mL

0.5mL

平均160個(gè)

10g土樣90mL無(wú)菌水土壤懸浮液4.5mL無(wú)菌水純化培養(yǎng)

A.純化培養(yǎng)階段使用選擇培養(yǎng)基，應(yīng)以尿素為唯?氮源

B.振蕩的目的是為了增加尿素分解菌的濃度

C.中間試管涂布的3個(gè)平板的菌落平均數(shù)小于160

D.由圖中數(shù)據(jù)可知10克土樣中的菌株數(shù)約為1.6X108個(gè)

【答案】AD

【解析】

每克祥品中的菌株數(shù)=（c+V）xM,其中c代表某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體

積（mL）,M代表稀釋倍甑

【詳解】

A、在含有尿素為唯一氮源的選擇性培養(yǎng)基上，只有能夠分解尿素的微生物才能生長(zhǎng)繁殖，故純化培養(yǎng)階段使用選擇培養(yǎng)基，應(yīng)

以尿素為唯一氮源，A正確；

B、振蕩的目的是提高培養(yǎng)液的溶解氧的含量，使菌體充分接觸培養(yǎng)液，提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率，B錯(cuò)誤；

C、懈倍數(shù)越高，平板上出現(xiàn)的菌落數(shù)越少，所以中間試管涂布的3個(gè)平板的菌落平均數(shù)應(yīng)大于160,C錯(cuò)誤；

D、匿示平板中平均有160個(gè)菌落，該過(guò)程中稀釋的倍數(shù)為1（?,最后只取了0.1mL進(jìn)行涂布稀釋?zhuān)虼擞蓤D示菌落計(jì)數(shù)結(jié)果

可知10克土樣中的菌株數(shù)約為160x105+0.1x10=1.6x108個(gè),D正確。

雌AD。

三、解答題

21.回答下列與細(xì)菌培養(yǎng)相關(guān)的問(wèn)題。

（1）在細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基中能同時(shí)提仗碳源、氮源的成分是（填“蛋白麻”“葡萄糖”或“NaNOJ）o通常，

制備培養(yǎng)基時(shí)要根據(jù)所培養(yǎng)細(xì)菌的不同來(lái)調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH,其原因是.硝化細(xì)菌在沒(méi)有碳源的培養(yǎng)基上（填“能

夠”或“不能”）生長(zhǎng)，原因是。

（2）用平板培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)一般需要將平板（填“倒置”或“正置”）。

（3）單個(gè)細(xì)菌在平板上會(huì)形成菌落，研允人員通?？筛鶕?jù)菌落的形狀、大小、顏色等特征來(lái)初步區(qū)分不同種的微生物，原因是

（4）有些使用后的培養(yǎng)基在丟棄前需要經(jīng)過(guò)處理，這種處理可以殺死丟棄物中所有的微生物。

【答案】①蛋白陳②不同細(xì)菌牛.長(zhǎng)繁爾所需的最適pH不同③能夠④硝化細(xì)菌可以利用空氣中的CO2作為碳源

⑤倒置⑥在一定的培養(yǎng)條件下，不同種微生物表現(xiàn)出各自穩(wěn)定的菌落特征⑦滅菌

【解析】

1、微生物培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成：①各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽：②不同培養(yǎng)基還要滿(mǎn)足

不同微生物對(duì)pH、將殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。

2、配制牛肉在蛋白陳固體培養(yǎng)基的注意耳項(xiàng)：①倒平板的溫度一般50C左右適宜，溫度過(guò)高會(huì)燙手，過(guò)低培養(yǎng)基又會(huì)凝固；

②平板需倒置，這樣既可使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。

【詳解】

（1）葡萄糖只能為細(xì)菌提供碳源，硝酸鈉為細(xì)菌提供無(wú)機(jī)鹽，而蛋白陳既可以為細(xì)菌碳源，也可以為細(xì)菌提供氮源；由于不同

的細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的最適宜pH是不同的，因此制備培養(yǎng)基時(shí)要根據(jù)所培養(yǎng)的絹菌的不同來(lái)調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH；硝化細(xì)菌屬于化能

自養(yǎng)生微生物，其可以利用氨氧化稀放的能量將空氣中的?.氧化碳固定為有?肛物，因此硝化細(xì)菌可以在無(wú)碳培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。

（2）用平板培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)，一般需要將平板倒置培養(yǎng)，以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。

（3）由于每一大類(lèi)微生物都有其獨(dú)特的細(xì)胞形態(tài)，因而其菌落形態(tài)特征也各異，因此根據(jù)菌落的形態(tài)、大小、顏色等特征來(lái)初

步區(qū)分不同種的微生物。

（4）有些使用后的培養(yǎng)基丟棄前一定要進(jìn)行滅菌處理，以免污染環(huán)境。

【點(diǎn)睛】

解答本題的關(guān)鍵是識(shí)記微生物培養(yǎng)基的成分、培育條件、培養(yǎng)過(guò)程以及注意事項(xiàng)，能夠根據(jù)不同微生物的代謝類(lèi)型判斷其所需營(yíng)

養(yǎng)成分的種類(lèi)，進(jìn)而結(jié)合題干要求分析答題。

22.某種物質(zhì)S（一種含有C、H、N的有機(jī)物）難以降解，會(huì)對(duì)環(huán)境造成污染，只有某些細(xì)菌能降解S。研究人員按照下圖所示

流程從淤泥中分離得到能高效降解S的細(xì)菌菌株。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需要甲、乙兩種培養(yǎng)基，甲的組分為無(wú)機(jī)鹽、水和S,乙的組分為

無(wú)機(jī)鹽、水、S和Y。

接種稀釋涂右平板挑單菌落接種多次篩選

無(wú)菌水甲乙甲

回答下列問(wèn)題：

（I）實(shí)驗(yàn)時(shí)，盛有水或培養(yǎng)基的搖瓶通莒采用的方法進(jìn)行滅菌。乙培養(yǎng)基中的Y物質(zhì)是.

甲、乙培養(yǎng)基均屬于培養(yǎng)基。

（2）實(shí)驗(yàn)中初步估測(cè)搖瓶M中細(xì)菌細(xì)胞數(shù)為2x10,個(gè)/mL,若要在每個(gè)平板上涂布100uL稀釋后的菌液，旦保證每個(gè)平板上長(zhǎng)

出的菌落數(shù)不超過(guò)200個(gè)，則至少應(yīng)將搖瓶M中的菌液稀杼倍。

（3）在步驟⑤的篩選過(guò)程中，發(fā)現(xiàn)當(dāng)培養(yǎng)基中的S超過(guò)某一濃度時(shí)，某菌株對(duì)S的降解量反而下降，其原因可能是

_（答出1點(diǎn)即可）。

（4）若要測(cè)定淤泥中能降解S的細(xì)菌細(xì)胞數(shù)，請(qǐng)寫(xiě)出主要實(shí)驗(yàn)步驟o

（5）上述實(shí)驗(yàn)中，甲、乙兩種培養(yǎng)基所含有的組分雖然不同，但都能為細(xì)菌的生長(zhǎng)提供4類(lèi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，即o

【答案】①高壓蒸汽滅菌②瓊脂③選擇④IO4⑤S的濃度超過(guò)某一值時(shí)會(huì)抑制菌株的生長(zhǎng)⑥取淤泥加入無(wú)

菌水，涂布（或稀釋涂布）到乙培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后計(jì)數(shù)⑦水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽

【解析】

培養(yǎng)基一般含有水、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽等.

常用的接種方法：平板劃線(xiàn)法和稀釋涂布平板法。

常用的滅菌方法：干熱滅菌法、灼燒滅菌法、高壓蒸汽滅菌法。

【詳解】

（1）常用高壓蒸汽滅菌法處理盛有水或培養(yǎng)基的搖瓶，乙為固體培養(yǎng)基，故需要加入Y瓊脂；甲和乙培養(yǎng)基可以用于篩選能降

解S的菌株，故均屬干選擇培養(yǎng)基.

（2）若要在每個(gè)平板上涂布lOOuL稀痛后的菌液，且每個(gè)平板上長(zhǎng)出的菌落數(shù)不超過(guò)200個(gè)，則搖瓶M中的菌液稀釋的倍

■少為2xl07+1000xl00+200=lxl￥倍.

(3)當(dāng)培養(yǎng)基中的S超過(guò)某一濃度后，可能會(huì)抑制菌株的生長(zhǎng)，從而造成其對(duì)S的降解量下降。

(4)要測(cè)定淤泥中能降解S的細(xì)菌的細(xì)胞數(shù)，可以取淤泥加無(wú)菌水制成菌懸液，稀釋涂布到乙培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后進(jìn)行計(jì)數(shù)。

(5)甲和乙培養(yǎng)基均含有水、無(wú)機(jī)鹽、碳源、氮源。

【點(diǎn)睛】

培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌，闞工具應(yīng)該進(jìn)行灼燒滅菌，玻璃器皿等耐高溫的、需要干燥的物品，常采用干熱滅菌。

某同學(xué)從被石油污染的土壤中分離得到A和B兩株可以降解石油的細(xì)菌，在此基礎(chǔ)上采用平板培養(yǎng)法比較二者降解石油的能

力，棄分析兩個(gè)菌株的其他生理功能。

實(shí)驗(yàn)所用的培養(yǎng)基成分如下。

培養(yǎng)基I：K2Hpeh,MgSO4,NH4NO3,石油。

培養(yǎng)基I【：K2HPO4,MgSO』，石油。

操作步驟：

①將A、B菌株分別接種在兩瓶液體培養(yǎng)基I中培養(yǎng)，得到A、B菌液：

②液體培養(yǎng)基I、II中添加瓊脂，分別制成平板I、【【，并按圖中所示在平版上打甲、乙兩孔。

(1)實(shí)驗(yàn)所用培養(yǎng)基中作為碳源的成分是。培養(yǎng)基中NH4NO3的作用是為菌株的生長(zhǎng)提供氮源，圓.源在菌體內(nèi)可以

參與合成(答出2種即可)等生物人分子。

(2)步驟①中，在資源和空間不受限制的階段，若最初接種No個(gè)A細(xì)菌，繁殖n代后細(xì)菌的數(shù)量是。

(3)為了比較A、B降解石油的能力，某同學(xué)利用步驟②所得到的平板I、H進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如表所示(“+”表示有透明圈，

“十”越多表示透明圈越大，“一’表示無(wú)透明圈)，推測(cè)該同學(xué)的實(shí)驗(yàn)思路是。

(4)現(xiàn)有一貧氮且被石油污染的土壤，根據(jù)上表所示實(shí)驗(yàn)結(jié)果，治理石油污染應(yīng)選用的菌株是,理由是

【答案】

(1)①石油②DNA、RNA、蛋白質(zhì)

(2)No?2n

(3)在無(wú)菌條件下，將等量等濃度的A菌液和B菌液分別接種到平板I的甲和乙兩孔處，平板口也進(jìn)行同樣的操作，在相同且

適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間，比較兩個(gè)平板的兩孔處的透明圈大小并作記錄，根據(jù)透明圈大降解能力強(qiáng)，透明圈小降解能力弱，進(jìn)

而比較A、B降解石油的能力

(4)①A②A菌株降解石油的能力高于B菌株，并且在沒(méi)有添加氮源的培養(yǎng)基中也能生長(zhǎng)

【解析】

培養(yǎng)基對(duì)微生物具有選擇作用。配置培養(yǎng)基時(shí)根據(jù)某一種或某一類(lèi)微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求.加入某些物質(zhì)或除去某些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，

抑制其他微生物的牛.長(zhǎng)，也可以根據(jù)某些微生物對(duì)一些物理、化學(xué)因素的抗性，在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，從而篩選出待定

的微生物。這種培養(yǎng)基叫做選擇培養(yǎng)基。

【小問(wèn)1詳解】

培養(yǎng)基的成分有碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽和水等，從組成培養(yǎng)基的物質(zhì)所含化學(xué)元素可知，作為碳源的成分是石油。生物大分子

DNA、RNA、蛋白質(zhì)都含有N元素，故毓源在菌體內(nèi)可以參與合成這些物質(zhì)。

【小問(wèn)2詳解】

由題意“資源和空間不受限制“可知，細(xì)菌的種群數(shù)量呈J型曲線(xiàn)增長(zhǎng)，由于細(xì)菌進(jìn)行二分裂，細(xì)菌每繁殖一代就是上一代的2

倍,根據(jù)公式Nt=No?A，,X=2,繁殖n代后細(xì)菌的數(shù)量是No?2Z

【小問(wèn)3詳解】

分析表格數(shù)據(jù)可知，實(shí)驗(yàn)的結(jié)果是：在平板I上，A菌株降解石油的能力高于B菌株；在平板UA菌株仍然能降解石油，而

B菌株不能降解，根據(jù)實(shí)驗(yàn)的單一變量和對(duì)照原則，推測(cè)該同學(xué)的思路是：在無(wú)菌條件下，將等量等濃度的A曲液和B菌液分

別接種到平板【的甲和乙兩孔處，平板II也進(jìn)行同樣的操作，在相同且適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間，比較兩個(gè)平板的兩孔處的透明

圈大小并作記錄，根據(jù)透明圈大降解能力強(qiáng)，透明圈小降解能力弱，進(jìn)而比較A、B降解石油的能力。

【小問(wèn)4詳解】

由表格數(shù)據(jù)可知，在平板II(無(wú)氮源的培養(yǎng)基)上，A菌株仍然能降解石油，而B(niǎo)菌株不能降解，所以要治理貧氮且被石油污染

的土壤，應(yīng)該選用A菌株，因?yàn)锳菌株降解石油的能力高于B菌株，并且在沒(méi)有添加氮源的培養(yǎng)基中也能生長(zhǎng)。

化合物S被廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、食品和化工工業(yè)、用菌株C可生產(chǎn)S,S的產(chǎn)量與菌株C培養(yǎng)所利用的碳源關(guān)系密切。為此，某小

組通過(guò)實(shí)驗(yàn)比較不同碳源對(duì)菌體生長(zhǎng)和S產(chǎn)量的影響，結(jié)果見(jiàn)表。

碳源細(xì)胞干重(g/L)S產(chǎn)量(g/L)

葡萄糖3.120.15

淀粉0.010.00

制糖廢液2.300.18

回答下列問(wèn)題。

(1)通常在實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物時(shí)，需要對(duì)所需的玻璃器皿進(jìn)行滅菌，火菌的方法有(答出2點(diǎn)即可)。

(2)由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，菌株C生長(zhǎng)的最適碳源是；用菌株C生產(chǎn)S的最適碳源是°菌株C的牛.長(zhǎng)除需要碳源外，

還需要(答出2點(diǎn)即可)等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。

(3)由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，碳源為淀粉時(shí)菌株C不能生長(zhǎng)，其原因是o

(4)若以制糖廢液作為碳源,為進(jìn)?步確定生產(chǎn)S的最適碳源濃度.某同學(xué)進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn).請(qǐng)簡(jiǎn)要寫(xiě)出實(shí)驗(yàn)思路：.

(5)利用制糖廢液生產(chǎn)S可以實(shí)現(xiàn)廢物利用，其意義是(答出1點(diǎn)即可)。

【答案】

(1)高壓蒸汽火菌、干熱滅菌

(2)①的茹糖②制糖廢液③氮源、無(wú)機(jī)鹽、水

(3)缺少淀粉酶

(4)分別配制一系列不同濃度梯度的以制糖廢液為唯一碳源的培養(yǎng)基，培養(yǎng)菌株C,其他條件相同且適宜，一段時(shí)間后，測(cè)定

并比較不同濃度制糖廢液中的S的產(chǎn)量，S產(chǎn)量最高時(shí)對(duì)應(yīng)的制糖廢液濃度爐為生產(chǎn)S的最適碳源濃度

(5)減少污染、節(jié)省原料、降低生產(chǎn)成本

【解析】

1、實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法：(1)灼燒滅菌：將微生物的接種工具，如接種環(huán)、接種針或其他金屬工具，直接在酒精燈火焰的充

分燃燒層灼燒，可以迅速?gòu)氐椎販缇?2)干熱滅菌：能耐高溫的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿(吸管,培養(yǎng)皿)和金

屬用具等，可以采用這種方法滅菌；(3)高壓蒸汽滅菌：將滅菌物品放置在盛有適量水的高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)，為達(dá)到良好的滅

菌效果,一般在壓力為100kPa,溫度為12rC的條件下,維持15?30min,

2、培笄基的營(yíng)界構(gòu)成：各種培界基的具體配方不問(wèn)，但一般都含有水、碳源、風(fēng)源和無(wú)機(jī)鹽；不同培養(yǎng)基還要循足不同微生物

對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。

【小問(wèn)1詳解】

通常在實(shí)驗(yàn)空培養(yǎng)微生物時(shí)，為防止實(shí)驗(yàn)用的玻璃器nn等物品中原有的微生物污染培養(yǎng)物，需要使用屈烈的理化因素殺死物體內(nèi)

外一切微生物的細(xì)胞、芽泡和抱子，即對(duì)所需的玻璃器皿進(jìn)行滅菌，玻璃器皿常用的滅菌的方法有干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌等。

【小問(wèn)2詳解】

由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，與以制糖廢液為碳源相比，以葡萄糖為碳源時(shí)菌株C的細(xì)胞干重最大，說(shuō)明最適于菌株C生長(zhǎng)的碳源是葡萄

糖：而以制糖廢液為碳源時(shí)，用菌株C生產(chǎn)S的產(chǎn)量高于以葡萄糖為碳源時(shí)的產(chǎn)量，說(shuō)明最適于生產(chǎn)S的碳源是制糖廢液。微生

物的生長(zhǎng)一般都需要水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽，還需要滿(mǎn)足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、氧氣以及特殊代養(yǎng)物質(zhì)的要求，放菌株C的生長(zhǎng)

除需要碳源外，還需要氮源、無(wú)機(jī)鹽、水等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。

【小問(wèn)3詳解】

分析題圖表格可以看出在以淀粉為碳源的培養(yǎng)基中，菌株C不能生長(zhǎng)，原因可能是菌株C不能合成淀粉酶或菌株C不能分泌淀粉

曬，因而不能利用淀粉。

【小問(wèn)4詳解】

要測(cè)定生產(chǎn)S的最適制糖廢液為碳源的濃度，實(shí)驗(yàn)自變量為制糖廢液的濃度，可分別配制一系列不同濃度梯度的以制糖廢液為唯

?碳源的培養(yǎng)基，培養(yǎng)菌株C,其他條件相同且適宜，?段時(shí)間后，測(cè)定并比較不同濃度制糖廢液中的S的產(chǎn)星，S產(chǎn)量最高時(shí)

對(duì)應(yīng)的制糖廢液濃度，即為生產(chǎn)S的最適碳源濃度。

【小問(wèn)5詳解】

利用制糖廢液生產(chǎn)S可以實(shí)驗(yàn)廢物利用，既有利于減少污染、節(jié)省原料，又能降低生產(chǎn)成本。

牛奶是適合微生物生長(zhǎng)的良好培養(yǎng)基。牛奶在飲用前都要用巴氏消毒法消毒，以殺死有害微生物。某小組為檢測(cè)自制酸奶是否被

雜菌污染，進(jìn)行了如圖所示操作。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題：

(1)圖1所示方法為，若取