ICS65.020.30

CCSB43

DB6101

西安市地方標(biāo)準(zhǔn)

DB6101/T158—2020

種雞場(chǎng)戊型肝炎（HEV）凈化技術(shù)規(guī)范

2020-11-12發(fā)布2020-12-12實(shí)施

西安市市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布

DB6101/T158—2020

目次

前言............................................................................II

1范圍..............................................................................1

2規(guī)范性引用文件....................................................................1

3術(shù)語和定義........................................................................1

4檢測(cè)要求..........................................................................1

4.1出殼雛雞胎糞的檢測(cè)與淘汰......................................................1

4.2育雛后期的檢測(cè)與淘汰..........................................................2

4.3開產(chǎn)前的檢測(cè)與淘汰............................................................2

4.4留種前的檢測(cè)與處理............................................................2

5飼養(yǎng)管理..........................................................................3

5.1飼養(yǎng)方式......................................................................3

5.2出雛管理......................................................................3

5.3衛(wèi)生消毒......................................................................3

5.4無害化處理....................................................................3

6凈化標(biāo)準(zhǔn)..........................................................................3

6.1病原學(xué)檢測(cè)....................................................................3

6.2血清學(xué)檢測(cè)....................................................................3

附錄A（規(guī)范性）場(chǎng)群內(nèi)個(gè)體監(jiān)測(cè)抽樣數(shù)量..............................................4

I

DB6101/T158—2020

前言

本文件按照GB/T1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起

草。

本文件由西安市市場(chǎng)監(jiān)督管理局提出。

本文件由西安市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局歸口。

本文件起草單位：西安市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心、西北農(nóng)林科技大學(xué)、西安秦嶺野生動(dòng)物園、西安

瑞爾康農(nóng)牧有限公司、咸陽康大農(nóng)牧業(yè)有限公司、西安市長(zhǎng)安區(qū)萬緣養(yǎng)殖專業(yè)合作社。

本文件主要起草人：張靖飛、張園、趙欽、馮鵬、孫亞妮、閔育娜、王新、石龍飛、邵俊峰、吳耀

麗、王向陽、馮蓮英、肖養(yǎng)紅、聶娉舒。

本文件由西安市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心負(fù)責(zé)解釋。

本文件為首次發(fā)布。

聯(lián)系信息如下：

單位：西安市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心。

地址：西安市長(zhǎng)安南路138號(hào)。

郵編：710061

聯(lián)系方式/p>

II

DB6101/T158—2020

種雞場(chǎng)戊型肝炎（HEV）凈化技術(shù)規(guī)范

1范圍

本文件規(guī)定了種雞場(chǎng)戊型肝炎(HEV)凈化技術(shù)的術(shù)語和定義、檢測(cè)、飼養(yǎng)管理、凈化標(biāo)準(zhǔn)等要求。

本文件適用于種雞場(chǎng)戊型肝炎(HEV)凈化。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB13078飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)

GB/T14926.52實(shí)驗(yàn)動(dòng)物酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)

GB/T36195畜禽糞便無害化處理技術(shù)規(guī)范

NY/T388畜禽場(chǎng)環(huán)境質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

NY/T1167畜禽場(chǎng)環(huán)境質(zhì)量及衛(wèi)生控制規(guī)范

NY5027無公害食品畜禽飲用水水質(zhì)

NY/T5038無公害食品家禽養(yǎng)殖生產(chǎn)管理規(guī)范

NY/T5339無公害食品畜禽飼養(yǎng)獸醫(yī)防疫準(zhǔn)則

病死及病害動(dòng)物無害化處理技術(shù)規(guī)范農(nóng)醫(yī)發(fā)[2017]25號(hào)

3術(shù)語和定義

本文件沒有界定的術(shù)語和定義。

4檢測(cè)要求

4.1出殼雛雞胎糞的檢測(cè)與淘汰

4.1.1樣品的收集

出殼前，將每只種雞的種蛋置于同一出殼袋中。在滅菌的1.5mL離心管中每管事先放入0.5mL滅菌的

磷酸鹽緩沖液（PBS，0.01mol/mL，pH7.4），將離心管對(duì)準(zhǔn)雞肛門處輕輕按壓雛雞腹部將胎糞擠入管

內(nèi)。

4.1.2樣品的處理與檢測(cè)

將裝有胎糞的離心管在渦旋震蕩儀上充分震蕩混勻，采用TRIzol法提取糞便樣品中的總RNA。在

RT-nPCR擴(kuò)增過程中使用SuperscriptII反轉(zhuǎn)錄酶，以5μLcDNA產(chǎn)物作為第1輪PCR擴(kuò)增的模板。

兩次PCR均使用TranstaqHighFidelityDNA聚合酶，PCR終產(chǎn)物用1%的瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)。

4.1.3檢測(cè)后處理

1

DB6101/T158—2020

當(dāng)有一只雛雞胎糞檢測(cè)為禽戊型肝炎病毒陽性則其對(duì)應(yīng)母雞與后代均視為禽戊型肝炎病毒陽性，陽

性雞不再做為種雞，應(yīng)無害化處理，陰性雞立即運(yùn)送至育雛舍中飼養(yǎng)。

4.1.4操作要求

對(duì)每一只母雞所產(chǎn)雛雞采集完胎糞后，要進(jìn)行徹底洗手或者更換一次性手套后方可采集下一只母雞

所產(chǎn)雛雞的胎糞。檢測(cè)為陰性的雛雞應(yīng)在最短的時(shí)間內(nèi)運(yùn)送至育雛舍內(nèi)，同一母雞所產(chǎn)雛雞仍在同一運(yùn)

輸箱內(nèi)運(yùn)輸。

4.2育雛后期的檢測(cè)與淘汰

4.2.1雞群血清抗體檢測(cè)

在育雛結(jié)束前10d左右，對(duì)雞只逐一無菌采集抗凝血，按照GB/T14926.50要求，應(yīng)用一種以重組

截短禽HEVORF2蛋白為包被抗原的間接ELISA檢測(cè)血清中的抗-禽HEVIgG抗體，若抗體陽性率大于10%，

宜同時(shí)選取雞群陽性個(gè)體雞糞便進(jìn)行RT-nPCR檢測(cè)，若RT-nPCR檢測(cè)結(jié)果為陽性，淘汰陽性雞。

4.2.2檢測(cè)后處理

ELISA檢測(cè)結(jié)果為陽性雞不再作為種雞，應(yīng)無害化處理，對(duì)檢測(cè)結(jié)果為陰性的選留后備雞應(yīng)維持小

群飼養(yǎng)或單籠飼養(yǎng)。

4.2.3育雛期間操作要求

將同一母雞所產(chǎn)雛雞置于同一籠中飼養(yǎng)，不同籠之間以一次性紙板進(jìn)行隔離。疫苗免疫和采血應(yīng)使

用一次性注射器。

4.3開產(chǎn)前的檢測(cè)與淘汰

4.3.1母雞的檢測(cè)

開產(chǎn)前2周左右，每棟雞舍通過統(tǒng)計(jì)學(xué)計(jì)算選取一定數(shù)量的雞只，采樣數(shù)量見附錄A，采集糞便，

對(duì)其進(jìn)行RT-nPCR檢測(cè)，若檢測(cè)結(jié)果為陽性，則判定該母雞為禽戊型肝炎病毒陽性雞。

4.3.2公雞的檢測(cè)

每棟雞舍通過統(tǒng)計(jì)學(xué)計(jì)算選取一定數(shù)量的公雞，采樣數(shù)量見附錄A，采集糞便，對(duì)其進(jìn)行RT-nPCR

檢測(cè)，若檢測(cè)結(jié)果為陽性，則判定該公雞為禽戊型肝炎病毒陽性雞。

4.3.3檢測(cè)后的處理

檢測(cè)結(jié)果為陽性雞不再列為育種選育個(gè)體，應(yīng)淘汰并做無害化處理，對(duì)檢測(cè)結(jié)果為陰性的選留后備

雞應(yīng)維持單籠飼養(yǎng)。

4.4留種前的檢測(cè)與處理

4.4.1母雞的檢測(cè)

檢測(cè)方法參見4.1.2。

4.4.2公雞的檢測(cè)

檢測(cè)方法參見4.1.2。

2

DB6101/T158—2020

4.4.3檢測(cè)后的處理

引進(jìn)種雞時(shí)，應(yīng)要求出具禽戊型肝炎凈化證明和其他相關(guān)的檢疫合格證或按照NY/T5339的要求進(jìn)

行。RT-nPCR檢測(cè)結(jié)果為陽性雞不再列為育種選育個(gè)體，應(yīng)淘汰做無害化處理，對(duì)檢測(cè)結(jié)果為陰性的選

留后備雞應(yīng)維持單籠飼養(yǎng)。種雞引入后至少隔離飼養(yǎng)60d，并經(jīng)病原學(xué)檢測(cè)確認(rèn)為陰性，同時(shí)按照本場(chǎng)

免疫程序進(jìn)行常規(guī)免疫后方可調(diào)入雞場(chǎng)。

5飼養(yǎng)管理

5.1飼養(yǎng)方式

實(shí)行全進(jìn)全出的飼養(yǎng)方式。對(duì)于原種雞場(chǎng),在育雛和育成雞執(zhí)行單家系飼養(yǎng)管理,產(chǎn)蛋雞采取單籠飼

養(yǎng),執(zhí)行終身跟蹤制度。

5.2出雛管理

按照同只母雞后代的全同胞進(jìn)行裝袋落盤。出雛執(zhí)行嚴(yán)格隔離，品系之間、家系之間不交叉。

5.3衛(wèi)生消毒

應(yīng)符合《中華人民共和國獸藥典》（2015年版）的規(guī)定，選擇廣譜、高效、殺菌作用強(qiáng)、刺激性低、

對(duì)人和雞安全的產(chǎn)品。消毒劑應(yīng)定期輪換使用，以提高殺菌效力。對(duì)場(chǎng)區(qū)環(huán)境、人員、用具、雞舍及種

蛋的消毒按照相關(guān)要求進(jìn)行。并且每天對(duì)孵化室進(jìn)行清掃，并噴霧消毒，保持清潔。入孵前，對(duì)孵化器、

入孵盤進(jìn)行清洗、噴霧消毒，再用甲醛熏蒸30min。出雛后，清除出雛器中的污物、死胚、死雛、蛋殼，

并對(duì)出雛器、出雛盤進(jìn)行清洗和噴霧消毒，再用甲醛熏蒸30min。

5.4無害化處理

對(duì)病死雞、蛋殼和雞糞等和孵化場(chǎng)內(nèi)的廢棄物應(yīng)按《病死及病害動(dòng)物無害化處理技術(shù)規(guī)范》（農(nóng)醫(yī)

發(fā)[2017]25號(hào)）的要求進(jìn)行無害化處理。

6凈化標(biāo)準(zhǔn)

6.1病原學(xué)檢測(cè)

原種場(chǎng)全部為陰性，祖代場(chǎng)和父母代場(chǎng)陽性率低于1%。

6.2血清學(xué)檢測(cè)

原種場(chǎng)全部為陰性，祖代場(chǎng)和父母代場(chǎng)陽性率不能高于10%。

3

DB6101/T158—2020

附錄A

（規(guī)范性附錄）

場(chǎng)群內(nèi)個(gè)體監(jiān)測(cè)抽樣數(shù)量

表A.1給出了場(chǎng)群內(nèi)個(gè)體檢測(cè)抽樣數(shù)量。

表A.1場(chǎng)群內(nèi)個(gè)體監(jiān)測(cè)抽樣數(shù)量

抽樣數(shù)量（只）

場(chǎng)/群存欄數(shù)（只）可接受誤差

5%6%7%8%9%10%

50373330262421

100594942363026

150725948403429

200826553433630

250907056453731

300957358463832

3501007659473932

4001037860483932

4501068061493933

5001098162494033

5501118263504033

6001138364504033

6501158464504133

7001168565514133

7501178665514134

8001188665514134

8501198766514134

9001208766514134

9501218866524134

10001228866524134

11001238967524234

12001258967524234

13001259067524234

140012