CI11920andother12kindsofcomponents

1范圍

本方法規(guī)定了高效液相色譜法測(cè)定染發(fā)類化妝品中CI11920等13種原料的含量。

本方法適用于膏霜乳類化妝品中CI11920等13種原料（不含色淀）含量的測(cè)定。

本方法所指的13種原料包括CI11920（食品橙3）、CI12010（溶劑紅3）、CI12085（顏

料紅4）、CI15800（顏料紅64）、CI15880（顏料紅63）、CI42510（堿性紫14）、CI44045

（堿性藍(lán)26）、CI45190（酸性紫9）、CI45370（酸性橙11）、CI47000（溶劑黃33）、CI58000

（顏料紅83）、CI60725（溶劑紫13）、CI61565（溶劑綠3）。

2方法提要

樣品提取后，經(jīng)高效液相色譜儀分離，二極管陣列檢測(cè)器檢測(cè)，根據(jù)保留時(shí)間和紫外光

譜定性，峰面積定量，以標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì)算含量。

本方法中各原料的檢出限、定量下限及取樣量為0.2g，定容至10mL時(shí)的檢出濃度、

最低定量濃度見表1。

表113種原料的檢出限、檢出濃度、定量下限和最低定量濃度

著色劑索著色劑索引檢出限定量下限檢出濃度最低定量濃

序號(hào)

引號(hào)通用中文名（ng）（ng）（μg/g）度（μg/g）

1CI11920食品橙30.752.57.525

2CI12010溶劑紅30.752.57.525

3CI12085顏料紅40.301.03.010

4CI15800顏料紅640.752.57.525

5CI15880顏料紅630.752.57.525

6CI42510堿性紫140.301.03.010

7CI44045堿性藍(lán)260.301.03.010

8CI45190酸性紫90.752.57.525

9CI45370酸性橙110.301.03.010

10CI47000溶劑黃330.301.03.010

11CI58000顏料紅830.752.57.525

12CI60725溶劑紫130.301.03.010

13CI61565溶劑綠30.301.03.010

3試劑和材料

除另有規(guī)定外，本方法所用試劑均為分析純或以上規(guī)格，水為GB/T6682規(guī)定的一級(jí)水。

3.1甲醇。

3.2四氫呋喃。

3.3甲酸。

3.4二甲基亞砜。

3.5乙腈，色譜純。

3.6乙酸銨，色譜純。

3.7乙酸，色譜純。

3.8甲醇四氫呋喃混合溶液：分別量取甲醇（3.1）120mL和四氫呋喃（3.2）80mL，混勻。

3.9甲醇四氫呋喃混合溶液（含0.2%甲酸）：精密吸取甲酸（3.3）0.2mL，加甲醇四氫呋

喃混合溶劑（3.8）稀釋并定容至100mL，混勻。

3.100.02mol/L乙酸銨溶液：稱取乙酸銨（3.6）1.54g，用水溶解后稀釋至1000mL，混

勻，經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾。

3.11標(biāo)準(zhǔn)品：CI11920等13種原料的標(biāo)準(zhǔn)品信息詳見附錄B。

3.12各原料標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液：按表2稱取CI11920等13種原料的標(biāo)準(zhǔn)品（3.11）適量（精

確到0.00001g）于25mL棕色容量瓶中，分別用表中所示的溶劑溶解并定容，配成各原料

標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液，其濃度如表2所示。

各原料標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液于0℃～6℃下避光保存，保存期為3個(gè)月。

表2標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液和混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶混合標(biāo)準(zhǔn)

序著色劑索著色劑索引稱樣量定容移取體積

液濃度溶液濃度

號(hào)引號(hào)通用中文名[1]（mg）溶劑[2]（mL）

（μg/mL）（μg/mL）

1CI11920食品橙312.53.15002.550

2CI12010溶劑紅312.53.25002.550

3CI12085顏料紅4253.210000.520

4CI15800顏料紅6412.53.45002.550

5CI15880顏料紅6312.53.45002.550

6CI42510堿性紫14253.110000.520

7CI44045堿性藍(lán)26253.110000.520

8CI45190酸性紫912.53.15002.550

9CI45370酸性橙11253.110000.520

10CI47000溶劑黃33253.210000.520

11CI58000顏料紅8312.53.25002.550

12CI60725溶劑紫13253.210000.520

13CI61565溶劑綠3253.210000.520

注：[1]按標(biāo)準(zhǔn)品純度折算后的稱樣量。

[2]定容溶劑的代號(hào)見“3試劑與材料”。

4儀器和設(shè)備

4.1高效液相色譜儀，二極管陣列檢測(cè)器。

4.2液相色譜-串聯(lián)四級(jí)桿質(zhì)譜聯(lián)用儀。

4.3天平。

4.4精密pH計(jì)（精度0.01）。

4.5超聲波清洗器。

4.6渦旋振蕩器。

4.7離心機(jī)。

5分析步驟

5.1混合標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的制備

按表2所示移取體積準(zhǔn)確移取各原料標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液（3.12）于25mL容量瓶中，用甲醇

四氫呋喃混合溶液（3.8）稀釋至刻度，配成混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。取混合標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，用甲醇

四氫呋喃混合溶液（3.8）稀釋得混合標(biāo)準(zhǔn)系列溶液，各原料標(biāo)準(zhǔn)系列溶液濃度見表3。

表3CI11920等13種原料標(biāo)準(zhǔn)系列溶液濃度

序著色劑索著色劑索引混合標(biāo)準(zhǔn)系列溶液濃度（μg/mL）

號(hào)引號(hào)通用中文名混標(biāo)1混標(biāo)2混標(biāo)3混標(biāo)4混標(biāo)5混標(biāo)6

1CI11920食品橙312.55102550

2CI12010溶劑紅312.55102550

3CI12085顏料紅40.41241020

4CI15800顏料紅6412.55102550

5CI15880顏料紅6312.55102550

6CI42510堿性紫140.41241020

7CI44045堿性藍(lán)260.41241020

8CI45190酸性紫912.55102550

9CI45370酸性橙110.41241020

10CI47000溶劑黃330.41241020

11CI58000顏料紅8312.55102550

12CI60725溶劑紫130.41241020

13CI61565溶劑綠30.41241020

注：實(shí)驗(yàn)室可根據(jù)實(shí)際情況調(diào)整合適的標(biāo)準(zhǔn)系列溶液濃度范圍。

5.2樣品處理

稱取樣品0.2g（精確到0.0001g）于10mL具塞比色管中，加甲醇四氫呋喃混合溶液

（含0.2%甲酸）（3.9）適量，渦旋分散，超聲提取10min，用甲醇四氫呋喃混合溶液（含

0.2%甲酸）（3.9）定容至刻度，混勻，經(jīng)0.45μm疏水微孔聚四氟乙烯（PTFE）濾膜過濾，

濾液作為待測(cè)溶液，并于6小時(shí)內(nèi)完成檢測(cè)。

5.3色譜條件

色譜柱：C18柱（4.6×250mm，5μm），或等效色譜柱；

流動(dòng)相：A：乙腈（3.5）；B：0.02mol/L乙酸銨溶液（3.10）；梯度洗脫程序見表4。

表4梯度洗脫程序

時(shí)間/minV（A）/%V（B）/%

02080

74060

184555

281000

381000

392080

流速：0.8mL/min；

柱溫：35℃；

進(jìn)樣量：5μL；

檢測(cè)波長(zhǎng)：250nm（CI11920、CI12010、CI47000、CI58000、CI60725、CI61565）；

500nm（CI12085、CI15800、CI15880、CI42510、CI45190、CI45370）；620nm（CI44045）。

5.4測(cè)定

在“5.3”色譜條件下，取混合標(biāo)準(zhǔn)系列溶液（5.1）分別進(jìn)樣，進(jìn)行色譜分析，以標(biāo)準(zhǔn)系

列溶液濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

取“5.2”項(xiàng)下的待測(cè)溶液進(jìn)樣，根據(jù)保留時(shí)間和紫外光圖譜定性，測(cè)得峰面積，根據(jù)標(biāo)

準(zhǔn)曲線得到待測(cè)溶液中各測(cè)定原料的濃度。按“6”計(jì)算樣品中各原料的含量。

6分析結(jié)果的表述

6.1計(jì)算

V

m

式中:ω——化妝品中CI11920等13種原料的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，μg/g；

ρ——從標(biāo)準(zhǔn)曲線得到待測(cè)原料的濃度，μg/mL；

V——樣品定容體積，mL；

m——樣品取樣量，g。

在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不得超過算術(shù)平均值的10%。

6.2回收率和精密度

CI11920等13種原料的回收率在85.3%～112.9%之間，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于等于8.3%

（n=6）。

7圖譜

圖1混合標(biāo)準(zhǔn)溶液在250nm下的色譜圖

1：CI58000；2：CI11920；3：CI47000；4：CI12010；5：CI60725；6：CI

61565

圖2混合標(biāo)準(zhǔn)溶液在500nm下的色譜圖

7：CI45370；8：CI42510；9：CI15880；10：CI15800；11：CI45190；12：CI12085

圖3混合標(biāo)準(zhǔn)溶液在620nm下的色譜圖

13：CI44045

附錄A

CI11920等13種原料陽(yáng)性結(jié)果的確證

如檢出陽(yáng)性原料，需采用液相色譜-質(zhì)譜法確證結(jié)果。

A.1樣品前處理過程見方法“5.2樣品處理”。

A.2參考色譜條件

色譜柱：C18柱（3.0×100mm，2.7μm），或等效色譜柱；

流動(dòng)相：A：0.01mol/L乙酸銨溶液（用乙酸調(diào)pH值至5.5）；B：0.02%乙酸乙腈溶液；

梯度洗脫程序見表A.1；

表A.1流動(dòng)相梯度洗脫程序

時(shí)間/minV（A）/%V（B）/%

0955

10595

16595

17955

22955

流速：0.3mL/min；

柱溫：35℃；

進(jìn)樣量：2μL。

A.3參考質(zhì)譜條件

離子源：電噴霧離子源（ESI）；

監(jiān)測(cè)模式：正、負(fù)離子多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式（MRM）；監(jiān)測(cè)離子對(duì)及相關(guān)電壓參數(shù)設(shè)定見表

A.2；

離子源加熱溫度：550℃；

離子噴霧電壓：5.5kV（正源）、-4.5kV（負(fù)源）；

氣簾氣：35psi；

霧化氣：50psi；

輔助加熱氣：50psi。

表A.213種原料的監(jiān)測(cè)離子對(duì)及相關(guān)電壓參數(shù)設(shè)定表

著色劑索

著色劑索引電離模母離子子離子碰撞能

序號(hào)引通用中

號(hào)式(m/z)(m/z)(CE)

文名

209.044

1CI42510堿性紫14+302.2

195.046

454.360

2CI44045堿性藍(lán)26+470.3

349.254

105.038

3CI47000溶劑黃33+274.1

228.046

238.037

4CI60725溶劑紫13+330.1

311.834

328.053

5CI61565溶劑綠3+419.2

402.348

121.0-22

6CI11920食品橙3-213.1

92.0-37

262.0-25

7CI12010溶劑紅3-291.1

232.9-39

155.9-27

8CI12085顏料紅4-326.0

171.7-40

247.0-22

9CI15800顏料紅64-291.1

219.0-28

186.9-27

10CI15880顏料紅63-421.0

143.0-45

545.1-46

11CI45190酸性紫9-589.1

184.9-50

443.9-31

12CI45370酸性橙11-488.9

363.0-40

210.0-43

13CI58000顏料紅83-239.0

166.9-39

注：當(dāng)采用不同質(zhì)譜儀器時(shí)，儀器參數(shù)可能存在差異，測(cè)定前應(yīng)將質(zhì)譜參數(shù)優(yōu)化到最佳

A.4定性

用液相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜儀進(jìn)行定性。如樣品檢出的特征離子峰的保留時(shí)間與

濃度相近的標(biāo)準(zhǔn)溶液中對(duì)應(yīng)原料一致，且樣品所選擇的監(jiān)測(cè)離子對(duì)的相對(duì)豐度比與標(biāo)準(zhǔn)溶液

的監(jiān)測(cè)離子對(duì)的相對(duì)豐度比的偏差不超過表A.3規(guī)定范圍，則可判斷樣品中存在對(duì)應(yīng)的待測(cè)

原料。

表A.3結(jié)果確證時(shí)離子對(duì)相對(duì)豐度比的最大允許偏差

相對(duì)離子豐度（k）k>50%50%≥k>20%20%≥k>10%k≤10%

允許的最大偏差±20%±25%±30%±50%

圖A.1標(biāo)準(zhǔn)溶液LC-MS色譜圖（正離子模式）

1：CI42510；2：CI47000；3：CI44045；4：CI60725；5：CI61565

圖A.2標(biāo)準(zhǔn)