2025年綜合類-臨床醫(yī)學檢驗技術(士)-流式細胞儀分析技術及應用歷年真題摘選帶答案(5卷單選題百道集合)2025年綜合類-臨床醫(yī)學檢驗技術(士)-流式細胞儀分析技術及應用歷年真題摘選帶答案(篇1)【題干1】流式細胞術中熒光染料的熒光顏色主要取決于染料本身的物理特性，以下哪項描述正確？【選項】A.染料分子大小決定顏色B.染料與細胞膜結合方式決定顏色C.染料中金屬螯合物的種類決定顏色D.染料分子所發(fā)射的光子能量決定顏色【參考答案】D【詳細解析】熒光顏色由光子能量決定，能量越高（波長越短）顏色越偏向藍色，反之則偏向紅色。選項A錯誤因分子大小影響擴散而非顏色，選項B錯誤因結合方式影響標記效率而非顏色，選項C錯誤因金屬螯合物影響熒光強度而非顏色?！绢}干2】流式細胞儀進行多色檢測時，必須通過補償實驗消除哪種干擾？【選項】A.細胞體積差異B.熒光淬滅現(xiàn)象C.不同熒光通道間的串色D.樣本濃度過高【參考答案】C【詳細解析】串色（crosstalk）指一種熒光通道的光信號被其他通道誤接收，需通過補償實驗校正。選項A影響的是細胞體積參數(shù)，選項B需通過減少染料濃度或縮短染色時間解決，選項D需稀釋樣本?！绢}干3】流式細胞儀細胞分選技術中，分選精度最高的模式是？【選項】A.激光誘導熒光分選B.電場誘導分選C.基于表面標志物的分選D.基于細胞體積的分選【參考答案】C【詳細解析】基于表面標志物的分選（如FSC-A/SSC-A雙參數(shù)分選）利用熒光標記的抗體特異性結合，分選精度可達±1個細胞體積單位。選項A依賴熒光強度，易受濃度和淬滅影響；選項B電場分選不依賴特異性標記。【題干4】流式細胞儀數(shù)據(jù)分析中，G1/S期細胞的典型表達參數(shù)是？【選項】A.DNA含量≈2n，Ki-67陽性B.DNA含量≈4n，CD34陰性C.DNA含量≈1n，p53陽性D.DNA含量≈3n，增殖標志物升高【參考答案】A【詳細解析】G1/S期細胞DNA含量為2n（未復制），Ki-67表達陽性（增殖期標志）。選項B為S/G2期（4n），選項C為G0期（1n但p53異常），選項D為G2/M期?！绢}干5】流式細胞儀質控標準中，CD45陰性細胞比例應達到多少？【選項】A.≥95%B.≥85%C.≤10%D.≤5%【參考答案】C【詳細解析】CD45陰性細胞（非淋巴細胞）應≤10%，若比例過高提示樣本污染或儀器設置錯誤。選項A/B適用于CD45陽性樣本（如血液），選項D為嚴格標準。【題干6】流式細胞儀樣本制備時，若出現(xiàn)熒光漂移（fluorescence漂移），最可能的原因是？【選項】A.樣本濃度過低B.保存時間過長C.染料未充分溶解D.儀器電壓設置不當【參考答案】B【詳細解析】熒光漂移多因樣本保存超過4小時，染料與細胞膜結合或氧化導致信號衰減。選項A引起信號弱但非漂移，選項C需重新溶解染料包，選項D需校準電壓參數(shù)。【題干7】流式細胞儀進行細胞周期分析時，常用哪些參數(shù)組合？【選項】A.DNA含量（DNA）與增殖細胞核抗原（PCNA）B.DNA含量（DNA）與Ki-67C.細胞體積（FSC）與熒光強度（SSC）D.熒光強度（FSC-A）與熒光強度（SSC-A）【參考答案】B【詳細解析】DNA含量（2n/G1，4n/S/G2，8n/M）結合Ki-67（增殖標志）可區(qū)分細胞周期。選項A中PCNA在G1/S期高表達，但Ki-67更特異；選項C/D用于細胞體積或顆粒分析?！绢}干8】流式細胞儀報警提示“FlowRateOutofRange”，最可能的原因是？【選項】A.樣本管堵塞B.激光功率不足C.樣本體積過小D.電壓設置異常【參考答案】A【詳細解析】流量異常多因樣本管堵塞導致壓力變化，需檢查管路或更換濾芯。選項B引起信號弱但非流量報警，選項C需增加樣本量，選項D需校準電壓?！绢}干9】流式細胞儀數(shù)據(jù)分析中，熒光強度轉換（FSC-A/SSC-A）主要反映？【選項】A.細胞體積與細胞器數(shù)量B.細胞密度與顆粒分布C.細胞表面抗原表達D.細胞增殖狀態(tài)【參考答案】A【詳細解析】FSC-A反映細胞體積（biggercellsscattermorelight），SSC-A反映細胞內顆粒（如細胞器或凋亡小體）。選項B需結合熒光通道，選項C需特異性抗體標記，選項D依賴增殖標志物?！绢}干10】流式細胞儀質控圖（DotPlot）中出現(xiàn)“云霧狀”分布，最可能提示？【選項】A.樣本污染B.染料濃度過高C.儀器電壓不穩(wěn)定D.細胞固定不充分【參考答案】A【詳細解析】云霧狀分布表明樣本中存在非目標細胞（如碎片或污染細胞），需檢查樣本制備流程。選項B引起信號過飽和（點擠在一起），選項C導致信號波動，選項D需延長固定時間。【題干11】流式細胞儀熒光標記時，哪種熒光染料需避光保存？【選項】A.碘化苯胺（DAPI）B.羥基熒光素（FITC）C.碘化丙啶（PI）D.針心蘭（PE）【參考答案】A【詳細解析】DAPI為熒光染料，需避光保存（4℃光照易降解）。選項B/FITC、C/PI、D/PE均為常規(guī)熒光染料，可常溫避光保存。【題干12】流式細胞儀進行細胞毒性檢測時，常用哪種熒光染料？【選項】A.DAPIB.針心蘭（PE）C.碘化丙啶（PI）D.羥基熒光素（FITC）【參考答案】C【詳細解析】PI染色結合膜通透性變化可檢測凋亡或壞死細胞（核膜完整性破壞）。選項A用于核DNA定量，選項B標記CD標記物，選項D標記細胞表面抗原?！绢}干13】流式細胞儀數(shù)據(jù)分析中，若G0/G1期細胞比例異常升高，可能提示？【選項】A.細胞凋亡B.激素刺激C.細胞周期阻滯D.儀器電壓設置錯誤【參考答案】C【詳細解析】G0/G1期比例升高（>40%）常見于細胞周期阻滯（如藥物處理或接觸抑制）。選項A凋亡細胞DNA含量低但Ki-67陰性，選項B激素刺激可能加速周期進程，選項D需校準電壓?！绢}干14】流式細胞儀樣本制備時，哪種處理方法可減少熒光淬滅？【選項】A.4℃保存樣本B.超聲波裂解細胞膜C.使用預冷緩沖液洗滌D.增加固定劑濃度【參考答案】C【詳細解析】預冷緩沖液洗滌（4℃冰浴）可減少熒光染料與細胞膜結合時間，降低淬滅。選項A延長暴露時間加重淬滅，選項B破壞膜結構導致非特異性結合，選項D增加固定劑可能抑制標記效率?！绢}干15】流式細胞儀進行免疫細胞亞群檢測時，哪種抗體需采用間接標記法？【選項】A.CD3（鼠源抗體）B.CD4（兔源抗體）C.CD8（人源抗體）D.針心蘭（PE標記抗體）【參考答案】A【詳細解析】鼠源抗體（如CD3）與人樣本可能存在非特異性結合，需間接法（一抗為兔抗鼠IgG二抗）。選項B/C為人源抗體可直接標記，選項D為熒光標記二抗無需間接法?！绢}干16】流式細胞儀校準時，熒光強度參數(shù)的設置標準是？【選項】A.標準熒光beads在50%熒光強度B.標準熒光beads在100%熒光強度C.標準熒光beads在10%熒光強度D.標準熒光beads在5%熒光強度【參考答案】B【詳細解析】校準時需將標準熒光beads（已知熒光強度）設為100%，用于后續(xù)樣本數(shù)據(jù)標準化。選項A/B/C/D分別對應不同校準模式，但標準操作為選項B?！绢}干17】流式細胞儀進行細胞凋亡檢測時，哪種參數(shù)組合最常用？【選項】A.PI（凋亡）與AnnexinV（凋亡）B.PI與Ki-67C.AnnexinV與CD45D.FSC與SSC【參考答案】A【詳細解析】PI染色（核膜破裂）結合AnnexinV（膜磷脂外翻）是經典凋亡檢測組合。選項BKi-67用于增殖分析，選項C區(qū)分凋亡與淋巴細胞，選項D用于細胞體積分析?！绢}干18】流式細胞儀數(shù)據(jù)分析中，若出現(xiàn)“鬼影細胞”（ghostcells），最可能的原因是？【選項】A.樣本濃度過高B.染料未完全結合C.細胞膜通透性異常D.儀器電壓設置不當【參考答案】C【詳細解析】鬼影細胞（無熒光信號但通過儀器）多因細胞膜通透性異常（如固定不充分或凋亡早期）。選項A引起信號飽和，選項B需延長染色時間，選項D需校準電壓。【題干19】流式細胞儀進行細胞間連接性檢測時，常用哪種標記物？【選項】A.CD31（血管內皮標記）B.CD326（上皮細胞間連接蛋白）C.CD44（歸巢受體）D.CD62L（歸巢受體）【參考答案】B【詳細解析】CD326（E-cadherin）標記上皮細胞間鈣黏蛋白，反映細胞間連接性。選項A用于血管分析，選項C/D標記歸巢或遷移相關分子?！绢}干20】流式細胞儀樣本保存時，哪種處理可延長熒光信號穩(wěn)定性？【選項】A.直接-20℃冷凍保存B.4℃保存并添加EDTAC.4℃保存并添加疊氮鈉D.4℃保存并添加肝素【參考答案】C【詳細解析】疊氮鈉（NaN3）可抑制熒光酶活性，防止熒光淬滅。選項A冷凍可能破壞膜結構，選項BEDTA抑制鈣離子但非熒光酶，選項DL肝素防止凝血但無保護熒光作用。2025年綜合類-臨床醫(yī)學檢驗技術(士)-流式細胞儀分析技術及應用歷年真題摘選帶答案(篇2)【題干1】流式細胞術中熒光染料的吸收和發(fā)射波長通常位于什么光譜區(qū)？【選項】A.紫外光區(qū)B.可見光區(qū)C.近紅外光區(qū)D.紅外光區(qū)【參考答案】C【詳細解析】流式細胞儀常用熒光染料吸收波長在可見光區(qū)（約450-650nm），發(fā)射波長在近紅外光區(qū)（約650-900nm），以避免光散射干擾。紫外光區(qū)易損傷細胞，紅外光區(qū)穿透力不足，因此正確答案為C。【題干2】細胞分選的標準中，細胞團塊（CellClump）通常定義為直徑超過多少微米的細胞聚集物？【選項】A.10μmB.15μmC.20μmD.25μm【參考答案】B【詳細解析】細胞分選時，直徑超過15μm的細胞聚集物（如細胞團塊或碎片）可能導致分選失敗或儀器堵塞。10μm以下通常視為正常細胞群，25μm可能包含雜質顆粒，因此正確答案為B?！绢}干3】熒光淬滅（FluorescenceQuenching）現(xiàn)象的主要原因是？【選項】A.染料分子間能量轉移B.染料與細胞膜結合C.儀器光源不穩(wěn)定D.樣本制備污染【參考答案】A【詳細解析】熒光淬滅指熒光染料分子因能量轉移（如F?rster增強散射或非輻射能量傳遞）導致發(fā)射強度下降，與染料濃度過高或分子間相互作用有關，而非儀器或樣本問題，故選A。【題干4】流式細胞儀電壓設置中，前向散射電壓（FSC）和側向散射電壓（SSC）的最佳范圍通常為？【選項】A.FSC50-150V，SSC50-150VB.FSC100-200V，SSC100-200VC.FSC200-300V，SSC200-300VD.FSC50-100V，SSC50-100V【參考答案】B【詳細解析】前向散射電壓（FSC）反映細胞體積，最佳范圍100-200V；側向散射電壓（SSC）反映細胞復雜度，范圍100-200V。過高電壓會導致信號飽和，過低則噪聲增大，因此選B?！绢}干5】流式細胞術樣本制備中，若細胞膜通透性不足，可能導致哪種現(xiàn)象？【選項】A.熒光信號過強B.熒光信號缺失C.細胞碎片增多D.儀器漂移【參考答案】B【詳細解析】熒光染料需穿透細胞膜才能結合目標抗原/抗體，若膜通透性不足（如未使用裂解液），染料無法進入細胞，導致熒光信號缺失，故選B?！绢}干6】流式細胞儀的熒光通道中，哪些參數(shù)用于校正非特異性熒光干擾？【選項】A.熒光補償B.電壓設置C.細胞分選閾值D.儀器校準【參考答案】A【詳細解析】熒光補償通過測量未標記樣本的熒光強度，消除背景干擾（如儀器雜散光或非特異性結合），是校正非特異性熒光的核心步驟，故選A?！绢}干7】流式細胞儀運行中，若發(fā)現(xiàn)前向散射光（FSC）分布異常寬泛，可能由哪些原因引起？【選項】A.樣本濃度過低B.電壓設置過高C.細胞團塊過多D.儀器光源老化【參考答案】C【詳細解析】細胞團塊（直徑>15μm）會顯著增加前向散射光強度，導致FSC分布寬泛。樣本濃度過低或電壓過高主要影響信號強度而非分布形態(tài)，光源老化會導致整體信號下降，故選C。【題干8】流式細胞儀的熒光強度參數(shù)（FL1-FL6）通常以什么單位表示？【選項】A.阿伏伽德羅常數(shù)B.紅光單位C.阿貝數(shù)D.熒光強度單位（如AU）【參考答案】D【詳細解析】熒光強度單位為相對熒光強度單位（RelativeFluorescenceUnits,RFU），反映檢測到的熒光信號強度，與儀器設置和樣本濃度相關，故選D?！绢}干9】流式細胞儀校準中，熒光強度標準器（FluorescenceStandard）的主要作用是？【選項】A.校正儀器漂移B.確定熒光補償值C.標定細胞分選閾值D.校準前向/側向散射光【參考答案】B【詳細解析】熒光強度標準器（如unstainedbeads）用于校準熒光補償值，消除系統(tǒng)誤差，確保不同實驗間結果可比性，故選B?！绢}干10】流式細胞術數(shù)據(jù)分析中，若gates（門控）設置不當，可能導致哪種結果？【選項】A.熒光信號過強B.細胞類型誤判C.儀器漂移D.樣本污染【參考答案】B【詳細解析】門控錯誤（如未正確區(qū)分活/死細胞或亞群）會導致細胞類型誤判（如將凋亡細胞歸為正常細胞），影響后續(xù)分析，故選B?！绢}干11】流式細胞儀的熒光淬滅率（QuenchingRate）通?？刂圃谑裁捶秶鷥?？【選項】A.<5%B.5%-10%C.10%-15%D.>15%【參考答案】A【詳細解析】熒光淬滅率應<5%，過高（>15%）表明染料濃度過高或標記過量，需稀釋樣本或減少標記量，故選A?！绢}干12】流式細胞儀運行中，若發(fā)現(xiàn)后向散射光（SSC）信號異常升高，可能由哪些原因引起？【選項】A.細胞碎片過多B.電壓設置過低C.儀器光源老化D.樣本制備污染【參考答案】A【詳細解析】SSC信號升高通常由細胞碎片（如凋亡細胞或制備過程中機械損傷）引起，碎片表面積增大導致散射光增強，故選A?！绢}干13】流式細胞儀的熒光標記中，若需檢測細胞表面糖蛋白，哪種熒光染料最合適？【選項】A.碘化丙啶（PI）B.藻紅素（Eosin）C.碧璽藻素（Cy5）D.羊抗熒光素（FITC）【參考答案】C【詳細解析】Cy5（近紅外熒光）穿透力強，適合標記大分子（如糖蛋白），避免可見光區(qū)染料（如FITC）的淬滅效應，故選C?！绢}干14】流式細胞儀的熒光補償實驗中，若未正確扣除同型抗體（IsotypeControl）信號，會導致哪種現(xiàn)象？【選項】A.背景熒光升高B.熒光信號缺失C.儀器漂移D.分選閾值錯誤【參考答案】A【詳細解析】未扣除同型抗體信號會引入非特異性結合的熒光干擾，導致背景升高，影響目標信號檢測，故選A?！绢}干15】流式細胞儀的細胞分選精度（Purity）通常要求達到多少？【選項】A.>95%B.>90%C.>80%D.>70%【參考答案】A【詳細解析】臨床流式分選要求純度>95%，尤其是用于治療或研究的細胞亞群，故選A?！绢}干16】流式細胞儀的熒光通道中，若檢測到異常高熒光信號（如FL2>10^5RFU），可能由哪些原因引起？【選項】A.樣本濃度過高B.染料標記過量C.電壓設置過低D.儀器漂移【參考答案】B【詳細解析】染料標記過量（如過比例）會導致熒光信號飽和或異常升高，需稀釋樣本或減少標記量，故選B?！绢}干17】流式細胞儀的儀器漂移（Drift）校正中，通常需要每隔多少小時進行一次？【選項】A.1小時B.2小時C.4小時D.8小時【參考答案】C【詳細解析】儀器漂移需每4小時校正一次（尤其是長時間實驗），因光源強度可能隨時間逐漸衰減，故選C。【題干18】流式細胞術樣本制備中，若需檢測細胞凋亡，哪種熒光染料組合最常用？【選項】A.PI/AnnexinVB.7-AAD/AnnexinVC.PI/ECDD.AnnexinV/FITC【參考答案】B【詳細解析】7-AAD（凋亡特異性染料）與AnnexinV（膜磷脂轉染染料）組合可區(qū)分凋亡（7-AAD+AnnexinV+）和壞死（7-AAD+AnnexinV-），故選B?！绢}干19】流式細胞儀的熒光通道中，若檢測到雙陽性細胞（如CD3+CD4+）異常增多，可能由哪種現(xiàn)象引起？【選項】A.熒光淬滅B.儀器漂移C.標記交叉反應D.細胞團塊【參考答案】C【詳細解析】標記交叉反應（Cross-reactivity）會導致非目標抗原/抗體結合，錯誤標記為雙陽性，需優(yōu)化抗體孵育條件，故選C?！绢}干20】流式細胞儀的儀器校準中，前向散射光（FSC）和熒光強度參數(shù)（FL1-FL6）的校準標準器應分別是什么？【選項】A.細胞微球/熒光標準器B.熒光標準器/細胞微球C.細胞微球/細胞微球D.熒光標準器/熒光標準器【參考答案】A【詳細解析】FSC校準需使用細胞微球（如FSC微球）標定大小分布，熒光強度校準需熒光標準器（如unstainedbeads），故選A。2025年綜合類-臨床醫(yī)學檢驗技術(士)-流式細胞儀分析技術及應用歷年真題摘選帶答案(篇3)【題干1】流式細胞術熒光標記的原理主要基于哪種光物理效應？【選項】A.光致產熱B.光致氧化C.光致產生活性氧D.光致光敏化【參考答案】A【詳細解析】熒光標記依賴熒光素或藻膽素等熒光物質在受激發(fā)光照射后吸收能量并發(fā)射特定波長的熒光，此過程屬于光致產熱效應。選項B光致氧化涉及自由基生成，與熒光標記無直接關聯(lián)；選項C活性氧產生需特定波長激發(fā)（如紫外光），而常規(guī)流式細胞術多使用可見光；選項D光敏化需光敏劑參與，非熒光標記基礎原理?！绢}干2】流式細胞儀進行細胞分選時，關鍵控制參數(shù)是？【選項】A.細胞體積與熒光強度B.細胞表面抗原與內部DNA含量C.細胞形態(tài)與細胞周期階段D.細胞密度與流速穩(wěn)定性【參考答案】A【詳細解析】流式細胞儀分選功能基于前向散射光（FSC）和側向散射光（SSC）反映的細胞體積與熒光強度參數(shù)。選項B表面抗原與DNA含量需通過特定熒光標記檢測，但分選時無法實時動態(tài)判斷；選項C形態(tài)學分析依賴圖像采集而非分選；選項D密度與流速影響儀器穩(wěn)定性，但非分選觸發(fā)條件?！绢}干3】流式細胞術數(shù)據(jù)分析中，G1期細胞比例異?？赡芴崾灸姆N疾?。俊具x項】A.病毒性肝炎B.淋巴瘤C.糖尿病D.腫瘤溶解綜合征【參考答案】B【詳細解析】淋巴瘤患者因B細胞異常增殖導致增殖周期紊亂，G1期細胞比例顯著升高（正常約60-70%）。選項A肝炎病毒主要影響肝細胞，與淋巴細胞周期無直接關聯(lián)；選項C糖尿病與細胞周期無直接關聯(lián)；選項D腫瘤溶解綜合征主要表現(xiàn)為電解質紊亂，與細胞周期階段無關?！绢}干4】流式細胞儀使用前必須校準的關鍵參數(shù)是？【選項】A.液滴形成效率B.熒光補償值C.細胞捕獲率D.光學系統(tǒng)穩(wěn)定性【參考答案】B【詳細解析】熒光補償校準用于消除多色標記間的光譜重疊，確保各通道信號準確性。選項A液滴效率影響檢測通量但非必須校準項；選項C捕獲率與儀器狀態(tài)相關但非校準重點；選項D穩(wěn)定性需持續(xù)監(jiān)測但校準流程中補償值優(yōu)先?！绢}干5】流式細胞術檢測CD4+T細胞時，常用哪種熒光染料？【選項】A.碘化丙啶B.碘化吡羅紅C.羧基花青素D.羥基羅丹明【參考答案】C【詳細解析】羧基花青素（如CD45-FITC）因與細胞膜結合穩(wěn)定且熒光強度高，是檢測表面抗原的常用染料。選項A碘化丙啶用于細胞核DNA定量；選項B碘化吡羅紅同樣用于核DNA染色；選項D羥基羅丹明多用于細胞內小分子檢測。【題干6】流式細胞術檢測細胞凋亡時，需同時標記哪種參數(shù)？【選項】A.膜完整性B.膜電位C.細胞體積D.細胞周期【參考答案】A【詳細解析】膜完整性檢測（如AnnexinV-FITC）結合PI染色可區(qū)分凋亡（膜完整但PI不染）與壞死（膜破損PI染色）。選項B膜電位與線粒體功能相關，但非凋亡特異性；選項C體積變化非凋亡標志；選項D周期階段與凋亡無直接關聯(lián)?！绢}干7】流式細胞儀發(fā)生熒光淬滅時，主要解決方法是？【選項】A.提高激光功率B.增加染色時間C.更換熒光標記物D.調整鞘液流速【參考答案】C【詳細解析】熒光淬滅因染料分子構象改變導致，更換未淬滅的新標記物可恢復信號。選項A提高功率會加劇光損傷；選項B延長染色時間反而加速淬滅；選項D鞘液流速影響液滴形成但非根本原因。【題干8】流式細胞術檢測嵌合體時，需設置哪種對照？【選項】A.同種異體對照B.同種同體對照C.自身對照D.空白對照【參考答案】B【詳細解析】嵌合體檢測需同種同體對照（如健康供體與患者混合樣本）以區(qū)分真實細胞與污染。選項A同種異體對照無法排除污染；選項C自身對照無法驗證標記特異性；選項D空白對照僅檢測背景干擾?！绢}干9】流式細胞儀進行多色標記時，補償實驗必須包含？【選項】A.單標記對照B.雙標記對照C.三標記對照D.四標記對照【參考答案】B【詳細解析】補償實驗需通過雙標記對照（如CD3+與CD4+雙染）計算各通道交叉干擾，進而建立三色及以上標記的補償矩陣。選項A單標記無法檢測光譜重疊；選項C/D多標記對照需基于雙標記補償結果。【題干10】流式細胞術檢測細胞增殖時，常用哪種染料組合？【選項】A.BrdU與Ki-67B.PI與AnnexinVC.CFSE與CD34D.DAPI與Hoechst【參考答案】A【詳細解析】BrdU（增殖標志物）與Ki-67（細胞周期標志物）組合可區(qū)分S期（BrdU+Ki-67-）與G1/S期（BrdU+Ki-67+）。選項B用于凋亡檢測；選項CCFSE標記細胞遷移能力；選項D用于核DNA定量?！绢}干11】流式細胞儀液流控制閥堵塞的典型表現(xiàn)為？【選項】A.信號強度漂移B.細胞截留率下降C.液滴斷裂D.通道光散射異?！緟⒖即鸢浮緽【詳細解析】液流閥堵塞導致細胞通過量減少，表現(xiàn)為截留率（Retainedcells）顯著低于設定閾值（通常<5%）。選項A信號漂移多因光學系統(tǒng)污染；選項C液滴斷裂與鞘液壓力相關；選項D散射異常需檢查光路或樣品制備?！绢}干12】流式細胞術檢測干細胞時，需重點排除哪種干擾？【選項】A.血清污染B.膠原纖維干擾C.細胞簇聚集D.標記物交叉反應【參考答案】C【詳細解析】干細胞（如間充質干細胞）常以單細胞形式存在，需通過低角度散射光（FSC-A）篩選排除細胞簇聚集。選項A血清污染影響熒光強度；選項B膠原纖維需通過固定/透化處理；選項D需通過預實驗驗證標記特異性?！绢}干13】流式細胞術檢測細胞間連接時，常用哪種標記？【選項】A.CD31與CD34B.E-cadherin與N-cadherinC.AnnexinV與PID.CD45與CD3【參考答案】B【詳細解析】E-cadherin（上皮細胞間連接）與N-cadherin（間質細胞間連接）聯(lián)合檢測可區(qū)分上皮性與間質性細胞群。選項A血管內皮細胞標記；選項C凋亡相關；選項D免疫細胞標記。【題干14】流式細胞儀進行細胞毒性實驗時，需監(jiān)測哪種參數(shù)？【選項】A.細胞存活率B.膜電位C.細胞體積D.熒光淬滅程度【參考答案】B【詳細解析】膜電位（通過熒光染料如JC-1檢測）反映線粒體膜完整性，可間接評估細胞毒性。選項A需結合臺盼藍染色；選項C體積變化非特異性；選項D與染料穩(wěn)定性相關?！绢}干15】流式細胞術檢測病毒載量時，需使用哪種染色方法？【選項】A.直接免疫熒光B.間接免疫熒光C.末端脫氧核苷酸轉移酶（TdT）法D.PCR定量【參考答案】C【詳細解析】TdT法通過標記病毒顆粒末端（如HIV、EBV）的3'羥基端，特異性檢測病毒DNA/RNA。選項A/B用于抗原檢測；選項D為分子生物學方法，非流式細胞術范疇?！绢}干16】流式細胞儀進行細胞亞群分選時，需優(yōu)先校準哪種參數(shù)？【選項】A.液滴形成率B.分選閾值C.熒光補償D.細胞捕獲效率【參考答案】B【詳細解析】分選閾值校準（如FSC-A閾值設置）直接影響目標細胞捕獲精度。選項A液滴率影響通量但非分選質量；選項C補償影響信號準確性；選項D需在閾值合理范圍內優(yōu)化?！绢}干17】流式細胞術檢測細胞外基質時，常用哪種標記物？【選項】A.Vimentin與CollagenIVB.Fibronectin與LamininC.CD31與CD34D.AnnexinV與PI【參考答案】A【詳細解析】Vimentin（間質細胞標志物）與CollagenIV（基底膜成分）聯(lián)合檢測可評估細胞外基質重構。選項BFibronectin與Laminin多用于血管內皮研究；選項C為血管細胞標記；選項D用于凋亡檢測?！绢}干18】流式細胞術檢測細胞遷移時，需控制哪種環(huán)境參數(shù)？【選項】A.激光功率B.鞘液溫度C.液流速率D.熒光強度【參考答案】B【詳細解析】鞘液溫度（通常25-37℃）影響細胞黏附與遷移行為，需與實驗溫度一致。選項A影響光散射信號；選項C液流速率影響通量但非遷移模擬；選項D需通過標記驗證。【題干19】流式細胞術檢測細胞周期時，需使用哪種染料？【選項】A.PI與Hoechst33342B.BrdU與EdUC.CD45與CD3D.AnnexinV與PI【參考答案】A【詳細解析】PI（檢測細胞核DNA）與Hoechst33342（細胞質DNA）聯(lián)合染色可區(qū)分G1（2nDNA）、S（4nDNA）、G2（4nDNA）及M期（2nDNA）。選項B用于增殖活性檢測；選項C免疫細胞標記；選項D用于凋亡檢測?！绢}干20】流式細胞術檢測腫瘤微環(huán)境時，需重點分析哪種細胞群？【選項】A.CD8+T細胞B.CD4+T細胞C.髓系細胞D.筋膜細胞【參考答案】C【詳細解析】髓系細胞（如單核細胞、巨噬細胞）在腫瘤微環(huán)境中具有免疫調節(jié)作用，需通過CD68/CD163等標記分析其浸潤情況。選項A效應T細胞；選項B輔助T細胞；選項D非腫瘤相關細胞。2025年綜合類-臨床醫(yī)學檢驗技術(士)-流式細胞儀分析技術及應用歷年真題摘選帶答案(篇4)【題干1】流式細胞術熒光標記中，熒光染料與細胞膜結合后產生熒光的主要機制是？【選項】A.熒光淬滅B.能量轉移C.熒光發(fā)射D.熒光衰減【參考答案】B【詳細解析】能量轉移是熒光標記的核心機制，當染料分子吸收光能后，通過F?rster增強型能量轉移（FRET）或非輻射能量轉移（NRET）將能量傳遞給報告染料，使其發(fā)射特定波長熒光。選項A（淬滅）會導致熒光減弱，C（發(fā)射）是結果而非機制，D（衰減）與儀器性能相關?！绢}干2】流式細胞儀進行細胞分選時，主要依據(jù)細胞的哪種物理特性？【選項】A.細胞體積B.細胞熒光強度C.細胞黏附性D.細胞代謝活性【參考答案】A【詳細解析】細胞分選的核心依據(jù)是物理特性（如體積、熒光強度），其中細胞體積通過光散射信號（前向/側向散射）實現(xiàn)。選項B屬于熒光分選依據(jù)，C（黏附性）和D（代謝活性）需依賴化學探針，非儀器直接檢測參數(shù)?！绢}干3】流式細胞儀的熒光檢測器通常采用哪種檢測方式？【選項】A.光電倍增管B.光子計數(shù)器C.光電二極管陣列D.紅外光譜儀【參考答案】A【詳細解析】光電倍增管（PMT）是主流選擇，其通過多級倍增過程放大微弱熒光信號，具有高靈敏度（可檢測10?1?摩爾熒光物質）。選項B光子計數(shù)器適用于單光子檢測，C光子計數(shù)陣列多用于多色流式，D紅外光譜儀非流式專用設備。【題干4】流式細胞儀運行前必須校準的關鍵參數(shù)是？【選項】A.熒光補償B.細胞體積補償C.激發(fā)光強度D.氣流壓力【參考答案】A【詳細解析】熒光補償校準可消除非特異性熒光干擾，確保各通道信號準確。選項B體積補償用于消除細胞大小差異導致的散射信號偏差，C（激發(fā)光）和D（氣流）屬于設備性能參數(shù)，需定期檢測但非每日校準重點?！绢}干5】流式細胞術檢測凋亡細胞的常用標記物是？【選項】A.AnnexinV-FITCB.CD45-PEC.Ki-67-APCD.TdT-FITC【參考答案】A【詳細解析】AnnexinV-FITC特異性結合凋亡細胞膜磷脂酰絲氨酸外翻，TdT-FITC用于DNA片段檢測（TdT酶標記3'OH末端的寡聚核苷酸）。選項B（CD45）用于區(qū)分造血細胞與非造血細胞，C（Ki-67）反映增殖活性。【題干6】流式細胞儀運行中若出現(xiàn)前向散射信號異常升高，可能原因不包括？【選項】A.樣本濃度過高B.激發(fā)光強度不足C.細胞碎片過多D.氣流壓力不足【參考答案】B【詳細解析】前向散射（FSC）反映細胞體積，濃度過高或碎片過多均會導致信號升高。選項B（激發(fā)光不足）會降低熒光信號而非散射信號，D（氣流不足）可能引起細胞捕獲效率下降?！绢}干7】流式細胞術數(shù)據(jù)分析中，gates（門控）的主要作用是？【選項】A.消除背景噪聲B.篩選目標細胞亞群C.檢測熒光淬滅程度D.調節(jié)儀器靈敏度【參考答案】B【詳細解析】門控技術通過設定閾值（如FSCvsSSC散點圖）排除非目標細胞（如碎片、雜質），聚焦于特定亞群（如活細胞、特定標記細胞）。選項A（背景噪聲）通過熒光補償消除，C（淬滅）需熒光強度標準化處理，D（靈敏度）由儀器參數(shù)設置控制?！绢}干8】流式細胞儀進行多色檢測時，熒光染料的熒光顏色差異主要取決于？【選項】A.染料分子量B.染料發(fā)射波長C.染料合成工藝D.染料溶解溫度【參考答案】B【詳細解析】發(fā)射波長是熒光顏色區(qū)分的核心標準，如FITC（綠，530-550nm）、PE（紅，575-590nm）、APC（紫，660-680nm）。選項A（分子量）影響染料物理性質，C（合成工藝）影響純度，D（溶解溫度）與儲存條件相關?！绢}干9】流式細胞儀校準中，熒光補償校準的目的是？【選項】A.消除同型異構體干擾B.平衡不同熒光通道信號C.消除背景熒光D.校準細胞體積參數(shù)【參考答案】B【詳細解析】熒光補償通過調整各通道信號比例，消除非特異性熒光信號（如細胞膜穿透染料進入其他通道），確保檢測特異性。選項A（同型異構體）需通過抗體純化解決，C（背景熒光）需優(yōu)化樣本制備，D（體積參數(shù)）通過體積補償校準?！绢}干10】流式細胞術檢測CD4+T細胞時，常用熒光標記組合是？【選項】A.CD4-FITC/CD8-PEB.CD4-PE/CD8-APCC.CD4-APC/CD8-FITCD.CD4-PE/CD8-FITC【參考答案】A【詳細解析】FITC（綠）與PE（紅）光譜重疊較少，適合雙色檢測。選項B（PE/APC）光譜重疊較大，需三色檢測器；選項C（APC/FITC）可但需注意抗體密度；選項D（PE/FITC）同種顏色標記易混淆?！绢}干11】流式細胞儀運行中，若發(fā)現(xiàn)細胞分選效率低于預期，可能原因不包括？【選項】A.樣本黏度不匹配B.激發(fā)光波長偏差C.染料濃度過高D.分選針孔直徑過大【參考答案】B【詳細解析】分選效率受樣本黏度（A）、染料濃度（C）、針孔直徑（D）影響。選項B（激發(fā)光波長偏差）主要影響熒光強度而非分選物理特性?！绢}干12】流式細胞術檢測細胞凋亡時，熒光染料TdT-FITC的檢測閾值通常設置為？【選項】A.50道B.100道C.200道D.500道【參考答案】C【詳細解析】TdT標記的3'OH末端寡核苷酸需在200道以上（即細胞數(shù)≥200）才能降低偶然誤差，50道（A）樣本量不足，100道（B）接近臨界值，500道（D）屬于過量檢測?！绢}干13】流式細胞儀的熒光通道通常需要設置幾個補償樣本？【選項】A.1個B.2個C.3個D.4個【參考答案】C【詳細解析】熒光補償需至少3個樣本（未標記、熒光標記、同型對照）進行交叉校正，排除非特異性結合。選項A（1個）無法校正多通道干擾，B（2個）僅能校正單通道，D（4個）超出常規(guī)需求。【題干14】流式細胞術檢測造血細胞系時，CD34+標記的熒光染料常用？【選項】A.APC-Cy5B.PE-Cy7C.ECD（EmaxRed）D.CFSE【參考答案】C【詳細解析】CD34+造血干細胞常用ECD（EmaxRed，613nm）或PE-Cy7（780nm），APC-Cy5（690nm）需搭配三色檢測器。選項D（CFSE，543nm）用于追蹤細胞增殖。【題干15】流式細胞術數(shù)據(jù)分析軟件中，用于生成散點圖的常用工具是？【選項】A.FlowJoB.ModFitC.FACSAriaD.CytometrySA【參考答案】A【詳細解析】FlowJo是主流分析軟件，支持散點圖、門控、統(tǒng)計分析。選項B（ModFit）用于定量分析，C（FACSAria）是分選儀配套軟件，D（CytometrySA）已停用?！绢}干16】流式細胞儀檢測細胞周期時，常用熒光染料是？【選項】A.BrdU-FITCB.Ki-67-PEC.EdU-APCD.PCNA-PE【參考答案】A【詳細解析】BrdU（5-溴脫氧尿苷）結合DNA后通過流式檢測，Ki-67（增殖標志）、EdU（新生DNA）、PCNA（增殖細胞核抗原）均為增殖相關標志物，但BrdU是經典檢測方法。【題干17】流式細胞儀校準中，每日必須檢測的參數(shù)是？【選項】A.激發(fā)光強度B.氣流壓力C.熒光補償D.細胞體積參數(shù)【參考答案】B【詳細解析】氣流壓力需每日檢測，以確保細胞捕獲效率（最佳氣流壓力為40-60psi）。選項A（激發(fā)光）每月檢測，C（熒光補償）每次檢測需校準，D（體積參數(shù)）通過體積補償實時調整?！绢}干18】流式細胞術檢測免疫細胞亞群時，CD3+T細胞常用的熒光標記是？【選項】A.CD3-FITCB.CD3-PEC.CD3-APCD.CD3-BrilliantRed-605【參考答案】D【詳細解析】BrilliantRed-605（605nm）與PE-Cy7（780nm）光譜重疊較少，適合雙色檢測。選項A（FITC）與CD4/CD8標記易混淆，B（PE）需搭配其他長波長染料，C（APC）需三色檢測器。【題干19】流式細胞儀檢測細胞表面分子時，若抗體與細胞膜結合過強，可能導致？【選項】A.熒光淬滅B.細胞膜破裂C.熒光信號增強D.檢測靈敏度下降【參考答案】B【詳細解析】抗體過強結合可能破壞細胞膜完整性，導致細胞破裂（碎片增加）。選項A（淬滅）由染料濃度或溫度引起，C（信號增強）為假陽性，D（靈敏度下降）與儀器性能相關。【題干20】流式細胞術檢測細胞凋亡時，AnnexinV-FITC與PI雙標記法的核心原理是？【選項】A.AnnexinV識別磷脂酰絲氨酸B.PI檢測細胞膜完整性C.AnnexinV標記活細胞D.PI標記凋亡細胞【參考答案】A【詳細解析】AnnexinV-FITC標記凋亡細胞膜磷脂酰絲氨酸外翻（活細胞陰性），PI（碘丙啶）染色細胞核DNA（膜完整時無法進入）。選項B（膜完整性）是PI檢測基礎，C（活細胞標記）錯誤，D（PI標記凋亡）與實際情況相反。2025年綜合類-臨床醫(yī)學檢驗技術(士)-流式細胞儀分析技術及應用歷年真題摘選帶答案(篇5)【題干1】流式細胞術檢測細胞表面抗原時，熒光染料標記的抗體與抗原結合后，需通過哪種技術校正非特異性結合導致的熒光淬滅？【選項】A.電壓調整B.數(shù)據(jù)轉換C.補償技術D.激發(fā)光源優(yōu)化【參考答案】C【詳細解析】補償技術（Compensation）通過數(shù)學方法消除不同熒光通道間的交叉干擾，校正因非特異性結合或散射光導致的熒光淬滅。選項A電壓調整用于優(yōu)化信號閾值，B數(shù)據(jù)轉換是后期處理步驟，D與光源無關，均非正確答案?！绢}干2】流式細胞儀進行細胞分選時，若發(fā)現(xiàn)分選效率低于預期，應優(yōu)先檢查哪個系統(tǒng)？【選項】A.激發(fā)光源穩(wěn)定性B.粒子聚焦系統(tǒng)C.數(shù)據(jù)采集軟件D.樣本濃度梯度【參考答案】B【詳細解析】分選效率與粒子聚焦系統(tǒng)直接相關，若聚焦不良會導致細胞無法精準進入分選通道。選項A影響熒光強度穩(wěn)定性，C需在分選前調試完成，D需通過預實驗優(yōu)化，均非優(yōu)先檢查項?！绢}干3】流式細胞術分析中，若細胞群體呈現(xiàn)雙峰分布，可能提示哪種細胞周期異常？【選項】A.G1/S期阻滯B.G2/M期阻滯C.S期延長D.細胞凋亡【參考答案】B【詳細解析】G2/M期阻滯會導致細胞停滯在分裂中期，形成體積增大亞群，呈現(xiàn)雙峰分布。選項A表現(xiàn)為單峰左移，C導致DNA含量異常，D伴隨凋亡特征（如AnnexinV陽性），均不匹配雙峰特征?！绢}干4】流式細胞儀檢測凋亡細胞時，常用哪種熒光染料標記線粒體？【選項】A.碘化丙啶（PI）B.7-AADC.AnnexinV-FITCD.碘化乙啶（EB）【參考答案】B【詳細解析】7-AAD（7-Aminomethylcoumarin乙二胺）特異性結合凋亡細胞膜通透性增加后的線粒體膜間隙，呈紅色熒光。選項A標記壞死細胞膜破裂的DNA，C標記磷脂酰絲氨酸外翻，D用于核DNA染色，均不適用凋亡檢測。【題干5】流式細胞儀的熒光通道補償校準中，若FSC（前向散射）與SSC（側向散射）通道未完全分離，會導致哪種分析結果偏差？【選項】A.熒光強度高估B.細胞體積分類錯誤C.細胞類型混淆D.儀器噪聲增加【參考答案】B【詳細解析】FSC/SSC分離度不足會導致細胞體積（FSC）與顆粒度（SSC）重疊，影響細胞亞群分類。選項A需通過熒光補償解決，C涉及抗原表達差異，D與光學系統(tǒng)有關，均非直接后果。【題干6】流式細胞術檢測CD4+T細胞時，若發(fā)現(xiàn)陰性對照群體出現(xiàn)假陽性，最可能的原因是？【選項】A.染料濃度過高B.樣本處理時間過長C.儀器電壓設置過低D.抗體保存不當【參考答案】A【詳細解析】熒光染料濃度過高會引發(fā)非特異性結合，導致陰性對照出現(xiàn)假陽性。選項B可能導致細胞失活，C影響信號閾值判斷，D導致抗體失活，均非直接原因?！绢}干7】流式細胞儀進行多色檢測時，若某熒光通道信號強度異常升高，可能提示哪種實驗問題？【選項】A.樣本污染B.激發(fā)光源漂移C.染料光漂白D.抗體效價不足【參考答案】B【詳細解析】激發(fā)光源漂移會導致特定波長熒光信號異常增強，需通過波長標準器校準。選項A表現(xiàn)為全通道信號升高，C需通過避光保存避免，D導致信號弱而非異常強，均不符合?！绢}干8】流式細胞術分析造血干細胞時，常用哪種標記物檢測細胞增殖活性？【選項】A.BrdUB.Ki-67C.CD34D.PDGF-R【參考答案】A【詳細解析】BrdU（5-溴脫氧尿苷）通過摻入DNA合成鏈評估增殖活性，Ki-67反映細胞周期進展，CD34標記造血干細胞表面抗原，PDGF-R與細胞外基質相互作用，均不直接反映增殖能力?！绢}干9】流式細胞儀進行細胞毒性實驗時，若死細胞比例顯著升高，可能提示哪種藥物副作用？【選項】A.粒子吸附B.膜通透性改變C.細胞代謝抑制D.核酸損傷【參考答案】B【詳細解析】細胞毒性藥物通過改變細胞膜通透性導致死亡，表現(xiàn)為PI（碘化丙啶）染色陽性。選項A導致非特異性死亡，C影響代謝活性，D需通過TUNEL檢測，均非直接關聯(lián)?！绢}干10】流式細胞術檢測腫瘤細胞表面標志物時，若發(fā)現(xiàn)CD15+亞群比例異常升高，可能提示哪種疾病？【選項】A.淋巴瘤B.急性髓系白血病C.慢性粒細胞白血病D.多發(fā)性骨髓瘤【參考答案】B【詳細解析】CD15+為急性髓系白血病（AML）特征性標志物，淋巴瘤（CD19+/-）和慢性粒細胞白血病（BCR-ABL+）表達不同，多發(fā)性骨