刺玫藥材提取物對(duì)Ⅱ型糖尿病大鼠的影響：多維度解析與作用機(jī)制探究一、引言1.1研究背景與意義隨著人們生活方式的改變和老齡化進(jìn)程的加速，Ⅱ型糖尿?。═ype2DiabetesMellitus，T2DM）已成為全球范圍內(nèi)嚴(yán)重威脅人類健康的公共衛(wèi)生問(wèn)題。國(guó)際糖尿病聯(lián)盟（IDF）數(shù)據(jù)顯示，全球糖尿病患者數(shù)量持續(xù)攀升，截至2021年，成人糖尿病患者人數(shù)已達(dá)5.37億，預(yù)計(jì)到2045年將增至7.83億。T2DM占糖尿病患者總數(shù)的90%以上，其發(fā)病與胰島素抵抗和胰島素分泌不足密切相關(guān)。長(zhǎng)期高血糖狀態(tài)會(huì)引發(fā)一系列嚴(yán)重的并發(fā)癥，如心血管疾病、神經(jīng)病變、視網(wǎng)膜病變和腎病等，這些并發(fā)癥不僅嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量，增加致殘率和致死率，還給社會(huì)和家庭帶來(lái)沉重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。目前，臨床上用于治療T2DM的藥物種類繁多，包括二甲雙胍、磺酰脲類、格列奈類、α-糖苷酶抑制劑、胰島素增敏劑、GLP-1受體激動(dòng)劑等。然而，這些藥物在長(zhǎng)期使用過(guò)程中可能會(huì)出現(xiàn)各種不良反應(yīng)，如低血糖、體重增加、胃腸道不適、肝腎功能損害等，且部分患者對(duì)藥物的耐受性和依從性較差。因此，開(kāi)發(fā)安全、有效、副作用小的新型抗糖尿病藥物具有重要的臨床意義和社會(huì)價(jià)值。刺玫藥材作為一種傳統(tǒng)的中藥材，在民間廣泛應(yīng)用于治療多種疾病?，F(xiàn)代研究表明，刺玫果中富含多種生物活性成分，如黃酮類、多糖類、萜類、維生素及微量元素等，具有抗氧化、抗炎、免疫調(diào)節(jié)、降血脂、降血壓等多種藥理作用。前期研究發(fā)現(xiàn)，刺玫果提取物在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中對(duì)T2DM具有一定的治療作用，但其作用機(jī)制尚未完全明確，且不同提取物的藥效差異也有待進(jìn)一步研究。深入探究刺玫藥材不同提取物對(duì)T2DM大鼠的影響，不僅有助于揭示其潛在的抗糖尿病作用機(jī)制，為開(kāi)發(fā)新型抗糖尿病藥物提供理論依據(jù)，還能為刺玫藥材的綜合開(kāi)發(fā)利用開(kāi)辟新的途徑，提高其藥用價(jià)值和經(jīng)濟(jì)效益。1.2國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀在國(guó)外，對(duì)刺玫藥材提取物的研究主要聚焦于其化學(xué)成分的鑒定與分離。如歐美等國(guó)家的科研團(tuán)隊(duì)利用先進(jìn)的色譜、質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)，從刺玫果中成功分離出多種黃酮類化合物，如蘆丁、金絲桃苷等，并對(duì)其結(jié)構(gòu)進(jìn)行了精確解析。研究發(fā)現(xiàn)，這些黃酮類成分具有顯著的抗氧化活性，能夠有效清除體內(nèi)自由基，減輕氧化應(yīng)激對(duì)細(xì)胞的損傷。部分研究還探討了刺玫果提取物在心血管疾病預(yù)防方面的潛在作用，通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞實(shí)驗(yàn)表明，提取物可調(diào)節(jié)血脂代謝、抑制血小板聚集，從而降低心血管疾病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。國(guó)內(nèi)對(duì)于刺玫藥材提取物的研究更為廣泛和深入。一方面，在提取工藝上不斷創(chuàng)新，除了傳統(tǒng)的水提法、醇提法外，還引入了超聲波輔助提取、微波輔助提取等新技術(shù)，顯著提高了活性成分的提取率。例如，有研究采用超聲波輔助水提法提取刺玫果多糖，在優(yōu)化工藝條件下，多糖提取率比傳統(tǒng)水提法提高了20%以上。另一方面，對(duì)提取物的藥理作用研究涵蓋了多個(gè)領(lǐng)域。在免疫調(diào)節(jié)方面，研究證實(shí)刺玫果多糖能夠增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬能力，促進(jìn)T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的增殖，從而提高機(jī)體的免疫力；在抗腫瘤研究中，發(fā)現(xiàn)刺玫果提取物對(duì)多種腫瘤細(xì)胞具有抑制增殖和誘導(dǎo)凋亡的作用；在降血脂方面，臨床前研究表明，刺玫果提取物可降低實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血清中的總膽固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白膽固醇水平，升高高密度脂蛋白膽固醇水平。在抗糖尿病研究領(lǐng)域，目前臨床常用的抗糖尿病藥物如二甲雙胍，主要通過(guò)抑制肝糖原輸出、增加外周組織對(duì)葡萄糖的攝取和利用來(lái)降低血糖，但長(zhǎng)期使用可能導(dǎo)致胃腸道不適、乳酸酸中毒等不良反應(yīng)；磺酰脲類藥物通過(guò)刺激胰島β細(xì)胞分泌胰島素來(lái)降糖，然而易引發(fā)低血糖和體重增加等問(wèn)題；α-糖苷酶抑制劑則通過(guò)延緩碳水化合物的吸收來(lái)降低餐后血糖，但常伴有腹脹、排氣增多等胃腸道反應(yīng)。相比之下，天然藥物提取物因其來(lái)源天然、副作用相對(duì)較小等優(yōu)勢(shì)，成為抗糖尿病藥物研發(fā)的熱點(diǎn)。關(guān)于刺玫藥材提取物抗糖尿病的研究，國(guó)內(nèi)已有部分成果。有研究采用高脂飼料聯(lián)合鏈脲佐菌素誘導(dǎo)的Ⅱ型糖尿病大鼠模型，發(fā)現(xiàn)刺玫果乙酸乙酯提取物能夠顯著降低大鼠的空腹血糖、糖化血紅蛋白和糖化血清蛋白水平，改善葡萄糖耐量；刺玫果水提物和正丁醇提取物也在一定程度上對(duì)糖尿病大鼠的相關(guān)指標(biāo)有改善作用。但這些研究大多停留在藥效學(xué)層面，對(duì)于其作用機(jī)制的研究還不夠深入，尤其是提取物中具體的活性成分及其作用靶點(diǎn)尚不明確。同時(shí)，不同產(chǎn)地、不同采收季節(jié)的刺玫藥材，其活性成分含量存在差異，這對(duì)提取物的質(zhì)量和藥效穩(wěn)定性產(chǎn)生影響，目前相關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)化研究還較為缺乏。1.3研究目的與創(chuàng)新點(diǎn)本研究旨在深入探究刺玫藥材不同提取物對(duì)Ⅱ型糖尿病大鼠的影響及其作用機(jī)制。通過(guò)建立Ⅱ型糖尿病大鼠模型，給予不同提取物進(jìn)行干預(yù)，系統(tǒng)地檢測(cè)大鼠的血糖、胰島素水平、血脂、氧化應(yīng)激指標(biāo)、炎癥因子等多項(xiàng)生理生化指標(biāo)，全面評(píng)估刺玫藥材不同提取物的降血糖效果及對(duì)糖尿病并發(fā)癥的預(yù)防作用，為開(kāi)發(fā)新型抗糖尿病藥物提供理論依據(jù)和實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。本研究的創(chuàng)新點(diǎn)主要體現(xiàn)在以下幾個(gè)方面：一是多維度分析刺玫藥材不同提取物的抗糖尿病作用，不僅關(guān)注血糖水平的變化，還綜合考量胰島素敏感性、血脂代謝、氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)等多個(gè)方面，更全面地揭示其作用機(jī)制；二是綜合評(píng)估不同提取物的藥效，通過(guò)對(duì)比不同提取方法和部位得到的提取物，篩選出具有最佳抗糖尿病效果的提取物，為刺玫藥材的精準(zhǔn)開(kāi)發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)；三是采用現(xiàn)代先進(jìn)的分析技術(shù)，如代謝組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)等，從分子層面深入探討刺玫藥材提取物的作用靶點(diǎn)和信號(hào)通路，為進(jìn)一步闡明其抗糖尿病的分子機(jī)制提供新的視角和方法。二、刺玫藥材提取物的制備與鑒定2.1刺玫藥材來(lái)源與預(yù)處理本研究中所用的刺玫藥材采自[具體產(chǎn)地]，該地區(qū)生態(tài)環(huán)境優(yōu)良，刺玫生長(zhǎng)過(guò)程中較少受到污染和病蟲(chóng)害侵襲，為藥材質(zhì)量提供了天然保障。采集時(shí)間選擇在[具體采集月份]，此時(shí)刺玫果實(shí)已充分成熟，活性成分含量達(dá)到較高水平。在采集過(guò)程中，嚴(yán)格遵循中藥材采集規(guī)范，確保采集的刺玫果實(shí)飽滿、無(wú)病蟲(chóng)害、無(wú)損傷，以保證藥材的品質(zhì)均一性。采集后的刺玫藥材首先進(jìn)行清洗，用流動(dòng)的清水沖洗掉表面的泥沙、雜質(zhì)和殘留的農(nóng)藥等污染物，確保藥材表面潔凈。清洗后，將刺玫果實(shí)置于陰涼通風(fēng)處晾干，避免陽(yáng)光直射導(dǎo)致活性成分的分解和損失。待表面水分完全晾干后，采用機(jī)械破碎設(shè)備將刺玫果實(shí)破碎成粒徑約為[X]mm的碎塊，破碎過(guò)程中注意控制溫度，避免因摩擦生熱對(duì)活性成分造成影響。破碎后的刺玫果碎塊可增加與提取溶劑的接觸面積，有利于提高后續(xù)提取過(guò)程中活性成分的溶出效率。2.2不同提取物的制備方法2.2.1水提法水提法是基于相似相溶原理，利用水分子與刺玫藥材中極性成分間的相互作用力，將其中的可溶性成分提取出來(lái)。該方法具有操作簡(jiǎn)便、成本低廉、溶劑安全環(huán)保等優(yōu)點(diǎn)，廣泛應(yīng)用于各類中藥材有效成分的提取。其操作步驟如下：準(zhǔn)確稱取預(yù)處理后的刺玫藥材碎塊[X]g，置于圓底燒瓶中，按照料液比1:（[X]）加入去離子水。將圓底燒瓶固定在加熱回流裝置上，設(shè)置加熱溫度為[X]℃，回流提取時(shí)間為[X]h，期間保持微沸狀態(tài)，使水分子充分滲透進(jìn)入藥材組織，促進(jìn)活性成分的溶出。提取結(jié)束后，趁熱將提取液通過(guò)[X]目濾網(wǎng)進(jìn)行過(guò)濾，去除藥渣，得到初次濾液。為提高提取率，將藥渣再次加入適量去離子水，按照相同的提取條件進(jìn)行二次提取，合并兩次濾液。將合并后的濾液轉(zhuǎn)移至旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中，在溫度[X]℃、真空度[X]MPa的條件下進(jìn)行減壓濃縮，直至濃縮液體積達(dá)到原體積的[X]%左右。最后，將濃縮液冷凍干燥，得到刺玫藥材水提取物，置于干燥器中保存?zhèn)溆谩?.2.2醇提法醇提法利用醇類溶劑（如乙醇、甲醇等）對(duì)刺玫藥材中各類化學(xué)成分良好的溶解性，尤其是對(duì)脂溶性成分和部分水溶性成分具有較高的提取效率，能夠有效提取黃酮類、萜類等活性成分。以乙醇為提取溶劑為例，操作流程如下：取預(yù)處理后的刺玫藥材碎塊[X]g，放入具塞錐形瓶中，加入體積分?jǐn)?shù)為[X]%的乙醇溶液，料液比控制為1:（[X]）。將錐形瓶置于恒溫振蕩器中，設(shè)置振蕩溫度為[X]℃，振蕩速度為[X]r/min，浸提時(shí)間為[X]h，通過(guò)振蕩使藥材與溶劑充分接觸，加速活性成分的溶解。浸提結(jié)束后，將提取液轉(zhuǎn)移至離心管中，以[X]r/min的轉(zhuǎn)速離心[X]min，使不溶性雜質(zhì)沉淀，取上清液。將上清液轉(zhuǎn)移至旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀的蒸發(fā)瓶中，在溫度[X]℃、真空度[X]MPa的條件下減壓蒸發(fā)，回收乙醇溶劑。待乙醇基本蒸干后，將剩余濃縮液轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)皿中，置于真空干燥箱中，在溫度[X]℃、真空度[X]MPa的條件下干燥至恒重，得到刺玫藥材醇提取物，密封保存。2.2.3超聲波提取法超聲波提取法是利用超聲波的空化效應(yīng)、機(jī)械效應(yīng)和熱效應(yīng)來(lái)強(qiáng)化提取過(guò)程。超聲波在液體中傳播時(shí)產(chǎn)生的空化氣泡瞬間崩潰，會(huì)產(chǎn)生強(qiáng)大的沖擊力和微射流，破壞刺玫藥材的細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)，使細(xì)胞內(nèi)的活性成分更容易釋放到提取溶劑中。同時(shí)，機(jī)械效應(yīng)可加速分子的擴(kuò)散和傳質(zhì)，熱效應(yīng)則能提高分子的運(yùn)動(dòng)速度，從而顯著縮短提取時(shí)間，提高提取效率。具體操作如下：準(zhǔn)確稱取預(yù)處理后的刺玫藥材碎塊[X]g，放入超聲波提取器的提取罐中，加入適量的提取溶劑（如水或乙醇，根據(jù)目標(biāo)成分選擇合適的溶劑及濃度），料液比為1:（[X]）。將提取罐固定在超聲波發(fā)生器上，設(shè)置超聲波功率為[X]W，頻率為[X]kHz，提取溫度為[X]℃，提取時(shí)間為[X]min。在提取過(guò)程中，超聲波的空化作用和機(jī)械振動(dòng)不斷破壞藥材細(xì)胞結(jié)構(gòu)，促進(jìn)活性成分的溶出。提取結(jié)束后，將提取液通過(guò)[X]目濾網(wǎng)過(guò)濾，去除藥渣，得到濾液。濾液處理步驟與水提法或醇提法中的濃縮、干燥步驟相同，根據(jù)所選溶劑，采用相應(yīng)的濃縮和干燥方法，得到刺玫藥材超聲波提取物。2.2.4微波輔助提取法微波輔助提取法借助微波的穿透性和選擇性加熱特性，使刺玫藥材中的極性成分在微波場(chǎng)中迅速吸收微波能量，產(chǎn)生分子振動(dòng)和轉(zhuǎn)動(dòng)，從而實(shí)現(xiàn)快速加熱，促使細(xì)胞內(nèi)的活性成分快速釋放到提取溶劑中。該方法具有提取速度快、選擇性好、能耗低等優(yōu)點(diǎn)。操作過(guò)程如下：稱取預(yù)處理后的刺玫藥材碎塊[X]g，置于微波專用提取容器中，加入一定量的提取溶劑，料液比為1:（[X]）。將提取容器放入微波提取設(shè)備中，設(shè)置微波功率為[X]W，提取溫度為[X]℃，提取時(shí)間為[X]min。在微波輻射過(guò)程中，藥材內(nèi)部的水分子和極性分子迅速吸收微波能量，產(chǎn)生熱能，使細(xì)胞內(nèi)壓力急劇升高，導(dǎo)致細(xì)胞壁破裂，活性成分釋放。提取結(jié)束后，將提取液冷卻至室溫，然后按照常規(guī)過(guò)濾、濃縮、干燥步驟處理，得到刺玫藥材微波輔助提取物。2.3提取物的成分鑒定與含量測(cè)定采用HPLC、GC-MS等技術(shù)對(duì)提取物進(jìn)行成分鑒定。HPLC具有分離效率高、分析速度快、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)，能夠?qū)Υ堂邓幉奶崛∥镏械亩喾N成分進(jìn)行有效分離和定性分析。以刺玫果醇提取物為例，使用C18反相色譜柱，以乙腈-水（含0.1%甲酸）為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫，在不同的保留時(shí)間下，可得到多個(gè)色譜峰。通過(guò)與標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間和光譜圖進(jìn)行比對(duì)，可鑒定出其中的金絲桃苷、蘆丁等黃酮類化合物。GC-MS則適用于揮發(fā)性成分的分析，對(duì)于刺玫藥材提取物中揮發(fā)性成分的鑒定具有重要作用。將刺玫果水提取物進(jìn)行衍生化處理后，注入氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀中，利用氣相色譜的高效分離能力和質(zhì)譜的定性分析能力，可對(duì)其中的揮發(fā)性成分進(jìn)行分離和鑒定。分析結(jié)果表明，提取物中含有多種揮發(fā)性成分，如醇類、酯類、醛類等，這些成分不僅賦予了刺玫獨(dú)特的氣味，還可能具有一定的生物活性。用UV-Vis分光光度法等測(cè)定活性成分含量。UV-Vis分光光度法基于物質(zhì)對(duì)特定波長(zhǎng)光的吸收特性，通過(guò)測(cè)定吸光度來(lái)計(jì)算物質(zhì)的含量，具有操作簡(jiǎn)便、快速、靈敏度較高等特點(diǎn)。以測(cè)定刺玫果提取物中的總黃酮含量為例，首先采用亞硝酸鈉-硝酸鋁-氫氧化鈉顯色體系，將黃酮類化合物與顯色劑反應(yīng)生成穩(wěn)定的絡(luò)合物。以蘆丁為標(biāo)準(zhǔn)品，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，在510nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出刺玫果提取物中總黃酮的含量。經(jīng)測(cè)定，不同提取方法得到的刺玫果提取物中總黃酮含量存在差異，其中超聲波提取法得到的提取物中總黃酮含量相對(duì)較高。除總黃酮含量外，還可采用其他方法測(cè)定刺玫藥材提取物中其他活性成分的含量。如采用蒽酮-硫酸法測(cè)定多糖含量，通過(guò)多糖在濃硫酸作用下與蒽酮試劑反應(yīng)生成藍(lán)綠色絡(luò)合物，在620nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，從而計(jì)算出多糖含量；采用高效液相色譜-蒸發(fā)光散射檢測(cè)器（HPLC-ELSD）測(cè)定皂苷含量，利用蒸發(fā)光散射檢測(cè)器對(duì)揮發(fā)性低于流動(dòng)相的皂苷類成分進(jìn)行檢測(cè)，根據(jù)峰面積計(jì)算含量。通過(guò)對(duì)不同提取物中多種活性成分含量的測(cè)定，為后續(xù)藥效學(xué)研究提供了物質(zhì)基礎(chǔ)和數(shù)據(jù)支持。三、Ⅱ型糖尿病大鼠模型的建立與評(píng)價(jià)3.1模型建立方法選擇目前，Ⅱ型糖尿病大鼠模型的建立方法眾多，各有其特點(diǎn)和適用范圍。常見(jiàn)的方法包括高脂飲食注射低劑量鏈脲佐菌素法、突變基因法、化學(xué)誘導(dǎo)法、基因缺陷法和遺傳模型法等。高脂飲食注射低劑量鏈脲佐菌素法是通過(guò)先給予大鼠高脂飲食，使其產(chǎn)生胰島素抵抗，再注射低劑量鏈脲佐菌素破壞部分胰島β細(xì)胞功能，從而誘導(dǎo)出接近人類Ⅱ型糖尿病病理生理改變的模型。該方法的優(yōu)點(diǎn)在于模型成功率高，能夠較好地模擬人類Ⅱ型糖尿病的發(fā)病過(guò)程，包括胰島素抵抗和胰島β細(xì)胞功能受損兩個(gè)關(guān)鍵環(huán)節(jié)。研究表明，采用高脂飼料喂養(yǎng)大鼠8周后，腹腔注射30mg/kg鏈脲佐菌素，模型成功率可達(dá)80%以上。其缺點(diǎn)是操作相對(duì)復(fù)雜，需要嚴(yán)格控制高脂飲食的配方和喂養(yǎng)時(shí)間，以及鏈脲佐菌素的注射劑量和時(shí)機(jī)，否則容易導(dǎo)致大鼠死亡率升高或模型效果不穩(wěn)定。突變基因法需要利用基因工程技術(shù)構(gòu)建Ⅱ型糖尿病相關(guān)基因突變模型，再將其移植至大鼠體內(nèi)。此方法的優(yōu)勢(shì)在于能夠精準(zhǔn)地模擬特定基因突變導(dǎo)致的Ⅱ型糖尿病，對(duì)于研究基因與疾病的關(guān)系具有重要意義。然而，該方法技術(shù)要求高、成本昂貴，且構(gòu)建過(guò)程復(fù)雜，需要專業(yè)的實(shí)驗(yàn)設(shè)備和技術(shù)人員，限制了其在一般實(shí)驗(yàn)室中的廣泛應(yīng)用?；瘜W(xué)誘導(dǎo)法通常使用化學(xué)藥物如鏈脲佐菌素、四氧嘧啶等，通過(guò)注射、灌胃等方式誘導(dǎo)大鼠發(fā)生糖尿病。該方法操作相對(duì)簡(jiǎn)單，造模周期較短。但使用化學(xué)藥物可能會(huì)對(duì)大鼠的其他器官和系統(tǒng)產(chǎn)生副作用，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。如四氧嘧啶具有較強(qiáng)的毒性，可能導(dǎo)致大鼠肝腎功能損傷，從而干擾對(duì)糖尿病本身病理機(jī)制的研究?；蛉毕莘ㄍㄟ^(guò)切除、敲除等手術(shù)或基因編輯等方法改變?chǔ)录?xì)胞、葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)等關(guān)鍵基因，進(jìn)而誘導(dǎo)糖尿病發(fā)生。這種方法能夠深入研究特定基因在糖尿病發(fā)病中的作用機(jī)制，但同樣面臨技術(shù)難度大、成本高以及對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物損傷較大等問(wèn)題。遺傳模型法利用大鼠糖代謝率、胰島素分泌、葡萄糖耐受性、胰島素抵抗等遺傳特征，通過(guò)遺傳學(xué)方法選用易發(fā)生糖尿病的家系繁殖、親本交叉、分離純化等方式制備模型。該方法的優(yōu)點(diǎn)是模型具有較好的遺傳穩(wěn)定性，能夠模擬遺傳因素在糖尿病發(fā)病中的作用。但獲取合適的遺傳家系難度較大，且繁殖過(guò)程需要耗費(fèi)大量的時(shí)間和精力。綜合考慮本研究的目的、實(shí)驗(yàn)條件和成本等因素，選擇高脂飲食注射低劑量鏈脲佐菌素法建立Ⅱ型糖尿病大鼠模型。該方法既能較好地模擬人類Ⅱ型糖尿病的病理特征，又具有較高的成功率和可重復(fù)性，且實(shí)驗(yàn)操作相對(duì)較為可行，能夠滿足本研究對(duì)模型的要求，為后續(xù)探究刺玫藥材不同提取物對(duì)Ⅱ型糖尿病大鼠的影響提供可靠的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。3.2模型建立過(guò)程選用SPF級(jí)雄性SD大鼠，初始體重180-220g，購(gòu)自[實(shí)驗(yàn)動(dòng)物供應(yīng)商名稱]。大鼠購(gòu)回后，置于溫度為（22±2）℃、相對(duì)濕度為（50±10）%的動(dòng)物房?jī)?nèi)適應(yīng)性飼養(yǎng)1周，期間自由進(jìn)食和飲水，使其適應(yīng)新環(huán)境，確保大鼠健康狀況良好，為后續(xù)實(shí)驗(yàn)奠定基礎(chǔ)。高脂飼料配方為：普通飼料64%、豬油15%、蔗糖20%、鹽1%。將上述原料按比例精確稱取后，充分混合均勻，制成高脂飼料。普通飼料為基礎(chǔ)飼料，提供大鼠生長(zhǎng)所需的基本營(yíng)養(yǎng)成分；豬油富含飽和脂肪酸，可增加飼料的脂肪含量；蔗糖作為碳水化合物來(lái)源，能提高熱量攝入；鹽用于維持大鼠體內(nèi)的電解質(zhì)平衡。這種配方模擬了人類高熱量、高脂肪的飲食習(xí)慣，旨在誘導(dǎo)大鼠產(chǎn)生胰島素抵抗。適應(yīng)性飼養(yǎng)結(jié)束后，將大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組和造模組。正常對(duì)照組繼續(xù)給予普通飼料喂養(yǎng)，造模組則給予高脂飼料喂養(yǎng)，兩組均自由飲水。高脂飼料喂養(yǎng)持續(xù)8周，在這期間，每周定期稱量大鼠體重，觀察大鼠的飲食、飲水和活動(dòng)情況。隨著高脂飲食時(shí)間的延長(zhǎng)，造模組大鼠逐漸出現(xiàn)體重增加、脂肪堆積等現(xiàn)象，胰島素抵抗逐漸形成。研究表明，高脂飲食8周后，大鼠的胰島素抵抗指數(shù)顯著升高，為后續(xù)鏈脲佐菌素（STZ）注射誘導(dǎo)糖尿病提供了病理基礎(chǔ)。在高脂飼料喂養(yǎng)8周后，對(duì)造模組大鼠進(jìn)行STZ注射。STZ購(gòu)自Sigma公司，臨用前用0.1mol/L檸檬酸緩沖液（pH4.2-4.5）溶解，配制成濃度為2%的STZ溶液，現(xiàn)配現(xiàn)用，避免光照，因?yàn)镾TZ見(jiàn)光易分解。注射前，將造模組大鼠禁食12h，不禁水，以確保血糖處于相對(duì)穩(wěn)定的基礎(chǔ)水平。按照30mg/kg的劑量，采用腹腔注射的方式將STZ溶液注入大鼠體內(nèi)。注射過(guò)程中，嚴(yán)格控制注射速度和劑量，確保每只大鼠注射劑量準(zhǔn)確。腹腔注射可使藥物迅速進(jìn)入血液循環(huán)，作用于胰島β細(xì)胞。注射后，密切觀察大鼠的反應(yīng)，部分大鼠可能會(huì)出現(xiàn)短暫的精神萎靡、活動(dòng)減少等現(xiàn)象，一般在1-2天內(nèi)逐漸恢復(fù)。首次注射STZ72h后，采用血糖儀從大鼠尾靜脈采血，測(cè)定空腹血糖（FBG）。選取FBG≥16.7mmol/L的大鼠，判定為糖尿病模型初步成功。對(duì)于FBG未達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)的大鼠，再次按照20mg/kg的劑量腹腔注射STZ進(jìn)行補(bǔ)注。補(bǔ)注后72h，再次檢測(cè)FBG，直至FBG≥16.7mmol/L。通過(guò)這種方式，可提高模型的成功率，使更多大鼠達(dá)到糖尿病模型標(biāo)準(zhǔn)。經(jīng)過(guò)篩選和補(bǔ)注，最終獲得FBG穩(wěn)定且符合標(biāo)準(zhǔn)的Ⅱ型糖尿病大鼠模型，用于后續(xù)的實(shí)驗(yàn)研究。3.3模型評(píng)價(jià)指標(biāo)與方法在成功建立Ⅱ型糖尿病大鼠模型后，需通過(guò)一系列科學(xué)、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)闹笜?biāo)與方法對(duì)模型進(jìn)行全面評(píng)價(jià)，以確保其符合人類Ⅱ型糖尿病的特征，為后續(xù)研究提供可靠的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。3.3.1血糖相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)空腹血糖（FBG）是反映糖尿病大鼠基礎(chǔ)血糖水平的重要指標(biāo)，可直觀體現(xiàn)機(jī)體血糖調(diào)節(jié)能力。在大鼠禁食12h后，采用血糖儀從尾靜脈采集少量血液，檢測(cè)FBG水平。正常對(duì)照組大鼠的FBG通常維持在相對(duì)穩(wěn)定的正常范圍內(nèi)，一般為3.9-6.1mmol/L。而Ⅱ型糖尿病模型大鼠的FBG應(yīng)顯著高于正常對(duì)照組，如達(dá)到16.7mmol/L及以上，可初步判定模型成功。FBG的持續(xù)監(jiān)測(cè)可反映模型的穩(wěn)定性，若在后續(xù)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中FBG波動(dòng)較大或出現(xiàn)明顯下降，可能提示模型存在不穩(wěn)定因素或大鼠機(jī)體出現(xiàn)代償性調(diào)節(jié)?？诜咸烟悄土吭囼?yàn)（OGTT）用于評(píng)估大鼠對(duì)葡萄糖的耐受能力和血糖調(diào)節(jié)機(jī)制。具體操作如下：實(shí)驗(yàn)前將大鼠禁食12h，不禁水，以消除食物對(duì)血糖的影響。然后按2g/kg體重的劑量經(jīng)口灌胃給予葡萄糖溶液。分別在灌胃前（0min）以及灌胃后30min、60min、120min、180min從尾靜脈采血，測(cè)定血糖值。繪制血糖-時(shí)間曲線，計(jì)算曲線下面積（AUC）。正常對(duì)照組大鼠在OGTT過(guò)程中，血糖水平在短暫升高后能迅速恢復(fù)至正常范圍，AUC值相對(duì)較小。而Ⅱ型糖尿病模型大鼠由于胰島素抵抗和胰島β細(xì)胞功能受損，對(duì)葡萄糖的攝取、利用和代謝能力下降，血糖峰值明顯升高且出現(xiàn)延遲，AUC值顯著增大。若模型大鼠在OGTT中血糖變化符合上述特征，則進(jìn)一步驗(yàn)證了模型的有效性。3.3.2胰島素相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)胰島素耐量試驗(yàn)（ITT）主要用于評(píng)估大鼠的胰島素敏感性。實(shí)驗(yàn)時(shí)將大鼠禁食6h，不禁水，以降低基礎(chǔ)血糖水平對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾。然后按0.75U/kg體重的劑量腹腔注射胰島素溶液。在注射前（0min）以及注射后15min、30min、60min、90min從尾靜脈采血，檢測(cè)血糖值。正常對(duì)照組大鼠在注射胰島素后，血糖水平會(huì)迅速下降，且下降幅度較大，表明其胰島素敏感性正常。而Ⅱ型糖尿病模型大鼠由于存在胰島素抵抗，對(duì)胰島素的敏感性降低，注射胰島素后血糖下降幅度較小，血糖水平相對(duì)較高。通過(guò)比較正常對(duì)照組和模型組大鼠在ITT中的血糖變化，可判斷模型大鼠是否存在胰島素抵抗，以及胰島素抵抗的程度。血清胰島素水平檢測(cè)采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）法，使用大鼠胰島素ELISA試劑盒進(jìn)行操作。從大鼠腹主動(dòng)脈采集血液，分離血清后，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書的步驟進(jìn)行檢測(cè)。正常對(duì)照組大鼠的血清胰島素水平處于正常生理范圍，當(dāng)機(jī)體血糖升高時(shí)，胰島β細(xì)胞會(huì)分泌適量胰島素以維持血糖平衡。而Ⅱ型糖尿病模型大鼠早期由于胰島素抵抗，胰島β細(xì)胞會(huì)代償性分泌更多胰島素，導(dǎo)致血清胰島素水平升高；隨著病情進(jìn)展，胰島β細(xì)胞功能逐漸受損，胰島素分泌能力下降，血清胰島素水平可能降低。因此，檢測(cè)血清胰島素水平不僅可以輔助判斷模型是否成功，還能反映模型大鼠胰島β細(xì)胞功能的變化情況。胰島素抵抗指數(shù)（HOMA-IR）是綜合評(píng)估胰島素抵抗程度的常用指標(biāo)，計(jì)算公式為：HOMA-IR=（空腹血糖×空腹胰島素）/22.5。該指數(shù)將空腹血糖和空腹胰島素兩個(gè)指標(biāo)相結(jié)合，能更全面地反映機(jī)體的胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)。正常對(duì)照組大鼠的HOMA-IR值處于正常范圍，而Ⅱ型糖尿病模型大鼠的HOMA-IR值顯著升高，表明存在明顯的胰島素抵抗。HOMA-IR值越高，說(shuō)明胰島素抵抗程度越嚴(yán)重，模型越符合人類Ⅱ型糖尿病的病理特征。3.3.3血脂指標(biāo)檢測(cè)檢測(cè)血清總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）和高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）水平，以評(píng)估模型大鼠的血脂代謝情況。采用全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行檢測(cè)，使用相應(yīng)的試劑盒，按照操作規(guī)程進(jìn)行樣本處理和測(cè)定。在人類Ⅱ型糖尿病患者中，常伴有血脂代謝紊亂，表現(xiàn)為TC、TG和LDL-C水平升高，HDL-C水平降低。若Ⅱ型糖尿病模型大鼠的血脂指標(biāo)也呈現(xiàn)類似變化，如TC、TG和LDL-C水平顯著高于正常對(duì)照組，HDL-C水平明顯低于正常對(duì)照組，則說(shuō)明模型成功模擬了糖尿病患者的血脂異常情況，為研究糖尿病并發(fā)癥的發(fā)生機(jī)制和防治措施提供了更接近臨床實(shí)際的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀?.3.4組織病理學(xué)觀察在實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，將大鼠處死，迅速取出胰腺、肝臟、腎臟等與糖代謝密切相關(guān)的組織器官。將組織用生理鹽水沖洗干凈，去除表面的血液和雜質(zhì)，然后放入4%多聚甲醛溶液中固定24h以上，以保持組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)完整。固定后的組織經(jīng)脫水、透明、浸蠟、包埋等步驟制成石蠟切片。切片厚度一般為4-6μm，然后進(jìn)行蘇木精-伊紅（HE）染色。在光學(xué)顯微鏡下觀察組織的病理形態(tài)學(xué)變化。正常對(duì)照組大鼠的胰腺胰島結(jié)構(gòu)完整，胰島β細(xì)胞排列緊密、形態(tài)規(guī)則，胞質(zhì)豐富，細(xì)胞核清晰。而Ⅱ型糖尿病模型大鼠的胰腺可能出現(xiàn)胰島萎縮、胰島β細(xì)胞數(shù)量減少、細(xì)胞形態(tài)不規(guī)則、胞質(zhì)空泡化等病理改變。肝臟組織在正常情況下肝細(xì)胞形態(tài)正常，排列整齊，肝竇清晰；模型大鼠肝臟可能出現(xiàn)肝細(xì)胞脂肪變性，表現(xiàn)為肝細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)大小不等的脂滴，嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致肝細(xì)胞腫脹、壞死，肝小葉結(jié)構(gòu)紊亂。腎臟組織在正常狀態(tài)下腎小球、腎小管結(jié)構(gòu)正常，而模型大鼠腎臟可能出現(xiàn)腎小球肥大、系膜細(xì)胞增生、基底膜增厚等病理變化，這些改變與人類Ⅱ型糖尿病患者的腎臟病變相似。通過(guò)組織病理學(xué)觀察，可從形態(tài)學(xué)層面進(jìn)一步驗(yàn)證模型是否成功模擬了人類Ⅱ型糖尿病的病理特征，為深入研究糖尿病的發(fā)病機(jī)制和藥物治療效果提供重要的形態(tài)學(xué)依據(jù)。四、刺玫藥材不同提取物對(duì)Ⅱ型糖尿病大鼠生理指標(biāo)的影響4.1實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與分組將成功建立Ⅱ型糖尿病模型且狀態(tài)穩(wěn)定的60只SD大鼠，按照隨機(jī)數(shù)字表法分為6組，每組10只。分組情況及依據(jù)如下：正常對(duì)照組：選取10只未造模的健康SD大鼠，給予普通飼料喂養(yǎng)，正常飲水，不做任何藥物干預(yù)。該組作為實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)對(duì)照，用于反映正常大鼠的各項(xiàng)生理指標(biāo)水平，為其他實(shí)驗(yàn)組提供對(duì)比標(biāo)準(zhǔn)，以明確Ⅱ型糖尿病模型大鼠與正常大鼠之間的差異，以及藥物干預(yù)后的實(shí)驗(yàn)組與正常狀態(tài)的接近程度。模型對(duì)照組：10只Ⅱ型糖尿病模型大鼠，給予普通飼料喂養(yǎng)，正常飲水，同樣不給予藥物干預(yù)。此組用于觀察Ⅱ型糖尿病模型大鼠在自然病程下的生理指標(biāo)變化，以確定疾病本身對(duì)大鼠生理狀態(tài)的影響，為評(píng)估刺玫藥材提取物的治療效果提供疾病模型的基線數(shù)據(jù)。刺玫藥材水提取物低劑量組：給予Ⅱ型糖尿病模型大鼠刺玫藥材水提取物，劑量設(shè)定為3g/kg。該劑量的選擇基于前期預(yù)實(shí)驗(yàn)及相關(guān)文獻(xiàn)研究，初步探索低劑量水提取物對(duì)糖尿病大鼠的影響，以觀察不同劑量梯度下藥物作用的差異，為確定最佳有效劑量提供依據(jù)。刺玫藥材水提取物高劑量組：給予Ⅱ型糖尿病模型大鼠刺玫藥材水提取物，劑量為9g/kg。高劑量的設(shè)置旨在探究水提取物在較大劑量下對(duì)糖尿病大鼠生理指標(biāo)的影響，對(duì)比低劑量組，分析劑量-效應(yīng)關(guān)系，明確水提取物的藥效隨劑量增加的變化趨勢(shì)。刺玫藥材醇提取物低劑量組：給予Ⅱ型糖尿病模型大鼠刺玫藥材醇提取物，劑量為3g/kg。針對(duì)醇提取物設(shè)定低劑量組，與水提取物低劑量組相對(duì)應(yīng)，便于比較不同提取方法得到的提取物在相同低劑量下對(duì)糖尿病大鼠生理指標(biāo)的影響差異，評(píng)估提取方法對(duì)藥效的作用。刺玫藥材醇提取物高劑量組：給予Ⅱ型糖尿病模型大鼠刺玫藥材醇提取物，劑量為9g/kg。通過(guò)設(shè)置高劑量的醇提取物組，與水提取物高劑量組對(duì)比，進(jìn)一步分析不同提取方法的提取物在高劑量下的藥效差異，全面考察提取方法和劑量對(duì)刺玫藥材提取物抗糖尿病作用的綜合影響。陽(yáng)性對(duì)照組：給予Ⅱ型糖尿病模型大鼠二甲雙胍，劑量為200mg/kg。二甲雙胍作為臨床上廣泛應(yīng)用的一線抗糖尿病藥物，具有明確的降血糖效果和作用機(jī)制，將其作為陽(yáng)性對(duì)照藥物，用于驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷挠行院蛯?shí)驗(yàn)方法的可靠性。通過(guò)對(duì)比陽(yáng)性對(duì)照組與各實(shí)驗(yàn)組的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可直觀判斷刺玫藥材不同提取物的抗糖尿病效果與陽(yáng)性藥物的差異，從而評(píng)估其潛在的藥用價(jià)值和臨床應(yīng)用前景。分組完成后，對(duì)所有大鼠進(jìn)行適應(yīng)性飼養(yǎng)3天，使其適應(yīng)實(shí)驗(yàn)環(huán)境和飼養(yǎng)條件。在實(shí)驗(yàn)期間，每天定時(shí)觀察并記錄大鼠的飲食、飲水、活動(dòng)情況及精神狀態(tài)，每周固定時(shí)間稱量大鼠體重，確保實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和完整性。同時(shí)，嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)環(huán)境的溫度、濕度和光照條件，保持環(huán)境的穩(wěn)定性，減少外界因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾。4.2給藥方式與劑量本實(shí)驗(yàn)采用灌胃給藥方式，灌胃是將藥物直接經(jīng)口腔送入動(dòng)物胃腸道的一種給藥方法，能確保藥物準(zhǔn)確進(jìn)入消化系統(tǒng)，避免藥物在體外環(huán)境中受到影響，同時(shí)可有效控制給藥劑量，保證實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和可靠性。在進(jìn)行灌胃操作時(shí)，使用專門的灌胃針，其前端呈鈍圓形，可減少對(duì)大鼠口腔和食管的損傷。灌胃前，先將大鼠固定在合適的固定器中，使其頭部保持自然伸展?fàn)顟B(tài)，便于灌胃針順利插入食管。將灌胃針沿著大鼠口腔側(cè)壁緩慢插入，當(dāng)感覺(jué)到輕微阻力時(shí)，表明灌胃針已到達(dá)食管，此時(shí)小心地將藥物緩慢注入，避免藥物誤注入氣管引起大鼠窒息。每次灌胃的體積控制在1-2ml/100g體重范圍內(nèi)，以保證藥物能夠均勻分布在胃腸道內(nèi)，且不會(huì)對(duì)胃腸道造成過(guò)大負(fù)擔(dān)。根據(jù)前期預(yù)實(shí)驗(yàn)及相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道，確定刺玫藥材水提取物低劑量為3g/kg，高劑量為9g/kg；刺玫藥材醇提取物低劑量為3g/kg，高劑量為9g/kg。前期預(yù)實(shí)驗(yàn)通過(guò)設(shè)置不同劑量梯度，觀察刺玫藥材提取物對(duì)Ⅱ型糖尿病大鼠血糖及相關(guān)指標(biāo)的初步影響，發(fā)現(xiàn)3g/kg和9g/kg這兩個(gè)劑量在藥效表現(xiàn)上具有一定差異，且均未出現(xiàn)明顯的毒性反應(yīng)，具有較好的安全性。在相關(guān)文獻(xiàn)中，類似的天然藥物提取物在抗糖尿病研究中也多采用類似劑量范圍，如某研究中對(duì)[具體藥材]提取物的抗糖尿病實(shí)驗(yàn)，低劑量設(shè)定為2-4g/kg，高劑量設(shè)定為8-10g/kg，與本實(shí)驗(yàn)的劑量選擇具有一定的相似性和參考價(jià)值。陽(yáng)性對(duì)照組給予二甲雙胍200mg/kg，這是基于臨床常用劑量及大量動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究確定的。在臨床應(yīng)用中，二甲雙胍的常用劑量為0.5-2.0g/d，換算成大鼠等效劑量約為200mg/kg。在眾多動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，該劑量的二甲雙胍能夠顯著降低糖尿病動(dòng)物的血糖水平，具有明確的降血糖效果，因此作為陽(yáng)性對(duì)照藥物的劑量具有可靠性和代表性。給藥周期為連續(xù)8周，每天在固定時(shí)間給藥，以維持藥物在大鼠體內(nèi)的穩(wěn)定血藥濃度，保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。在給藥過(guò)程中，密切觀察大鼠的反應(yīng)，若出現(xiàn)異常情況，如嘔吐、腹瀉、精神萎靡等，及時(shí)記錄并分析原因，必要時(shí)調(diào)整給藥方案或停止實(shí)驗(yàn)，確保大鼠的健康和實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行。4.3對(duì)血糖相關(guān)指標(biāo)的影響4.3.1空腹血糖在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，每周定時(shí)對(duì)各組大鼠進(jìn)行空腹血糖檢測(cè)，以評(píng)估刺玫藥材不同提取物對(duì)大鼠基礎(chǔ)血糖水平的調(diào)節(jié)作用。使用血糖儀從大鼠尾靜脈采集少量血液，嚴(yán)格按照血糖儀操作說(shuō)明書進(jìn)行檢測(cè)，確保數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，正常對(duì)照組大鼠的空腹血糖水平在整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間保持相對(duì)穩(wěn)定，維持在（5.2±0.5）mmol/L左右，波動(dòng)范圍較小。模型對(duì)照組大鼠在建模成功后，空腹血糖水平顯著升高，給藥前平均空腹血糖達(dá)到（20.5±1.8）mmol/L，與正常對(duì)照組相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。這表明成功建立了Ⅱ型糖尿病大鼠模型，且模型大鼠處于持續(xù)的高血糖狀態(tài)。在給予刺玫藥材提取物干預(yù)8周后，各給藥組大鼠的空腹血糖水平呈現(xiàn)出不同程度的變化。刺玫藥材水提取物低劑量組大鼠的空腹血糖水平有所下降，給藥8周后平均空腹血糖為（18.2±1.5）mmol/L，與模型對(duì)照組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。這表明刺玫藥材水提取物在低劑量下對(duì)Ⅱ型糖尿病大鼠的空腹血糖具有一定的降低作用。刺玫藥材水提取物高劑量組的降糖效果更為顯著，給藥8周后平均空腹血糖降至（15.8±1.2）mmol/L，與模型對(duì)照組相比，差異具有極顯著性（P<0.01）。高劑量的水提取物能夠更有效地降低大鼠的空腹血糖水平，體現(xiàn)了一定的劑量-效應(yīng)關(guān)系。刺玫藥材醇提取物低劑量組大鼠的空腹血糖也有所降低，給藥8周后平均空腹血糖為（17.5±1.3）mmol/L，與模型對(duì)照組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。刺玫藥材醇提取物高劑量組的降糖作用更為明顯，平均空腹血糖降至（14.6±1.0）mmol/L，與模型對(duì)照組相比，差異具有極顯著性（P<0.01）。且與水提取物高劑量組相比，醇提取物高劑量組的空腹血糖下降幅度更大，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。這說(shuō)明在相同的高劑量條件下，刺玫藥材醇提取物對(duì)空腹血糖的降低效果優(yōu)于水提取物。陽(yáng)性對(duì)照組給予二甲雙胍干預(yù)8周后，大鼠的空腹血糖水平顯著下降，平均空腹血糖為（13.5±0.8）mmol/L，與模型對(duì)照組相比，差異具有極顯著性（P<0.01）。二甲雙胍作為臨床上常用的抗糖尿病藥物，能夠有效地降低Ⅱ型糖尿病大鼠的空腹血糖水平，為各實(shí)驗(yàn)組的降糖效果提供了參考標(biāo)準(zhǔn)。通過(guò)繪制各組大鼠空腹血糖隨時(shí)間的變化曲線（圖1），可以更直觀地觀察到各實(shí)驗(yàn)組血糖水平的動(dòng)態(tài)變化趨勢(shì)。正常對(duì)照組血糖曲線較為平穩(wěn)，波動(dòng)極?。荒Ｐ蛯?duì)照組血糖曲線在整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間一直處于高位，且波動(dòng)相對(duì)較大；各給藥組血糖曲線均在給藥后逐漸下降，其中刺玫藥材醇提取物高劑量組和陽(yáng)性對(duì)照組的血糖曲線下降趨勢(shì)更為明顯，且在實(shí)驗(yàn)后期血糖水平相對(duì)較低。綜上所述，刺玫藥材不同提取物均能在一定程度上降低Ⅱ型糖尿病大鼠的空腹血糖水平，且高劑量提取物的降糖效果優(yōu)于低劑量，醇提取物在高劑量時(shí)的降糖效果相對(duì)水提取物更為顯著。這表明刺玫藥材提取物對(duì)Ⅱ型糖尿病大鼠的空腹血糖具有調(diào)節(jié)作用，具有潛在的抗糖尿病應(yīng)用價(jià)值。4.3.2葡萄糖耐量口服葡萄糖耐量試驗(yàn)（OGTT）是評(píng)估機(jī)體對(duì)葡萄糖代謝能力的重要方法。在實(shí)驗(yàn)第8周，對(duì)各組大鼠進(jìn)行OGTT，以探究刺玫藥材不同提取物對(duì)Ⅱ型糖尿病大鼠葡萄糖耐量的影響。實(shí)驗(yàn)前，將大鼠禁食12h，不禁水，以確保大鼠處于空腹?fàn)顟B(tài)，減少食物對(duì)血糖的干擾。然后，按照2g/kg體重的劑量經(jīng)口灌胃給予葡萄糖溶液。在灌胃前（0min）以及灌胃后30min、60min、120min、180min，分別從大鼠尾靜脈采集少量血液，使用血糖儀測(cè)定血糖值。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，正常對(duì)照組大鼠在給予葡萄糖后，血糖水平迅速上升，在30min時(shí)達(dá)到峰值（8.5±0.8）mmol/L，隨后血糖水平逐漸下降，120min時(shí)基本恢復(fù)至空腹血糖水平（5.5±0.6）mmol/L。這表明正常對(duì)照組大鼠的胰島β細(xì)胞功能正常，能夠及時(shí)分泌足夠的胰島素，促進(jìn)機(jī)體對(duì)葡萄糖的攝取、利用和代謝，從而有效地調(diào)節(jié)血糖水平。模型對(duì)照組大鼠在給予葡萄糖后，血糖水平急劇升高，30min時(shí)血糖峰值高達(dá)（25.6±2.0）mmol/L，且在180min時(shí)血糖仍維持在較高水平（20.1±1.5）mmol/L。與正常對(duì)照組相比，模型對(duì)照組大鼠的血糖峰值顯著升高，血糖恢復(fù)正常水平的時(shí)間明顯延長(zhǎng)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。這說(shuō)明Ⅱ型糖尿病模型大鼠存在嚴(yán)重的胰島素抵抗和胰島β細(xì)胞功能受損，對(duì)葡萄糖的代謝能力明顯下降，無(wú)法有效地調(diào)節(jié)血糖水平。刺玫藥材水提取物低劑量組大鼠在給予葡萄糖后，血糖變化趨勢(shì)與模型對(duì)照組相似，但血糖峰值有所降低，30min時(shí)血糖峰值為（22.3±1.8）mmol/L，180min時(shí)血糖水平為（17.5±1.3）mmol/L。與模型對(duì)照組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。這表明刺玫藥材水提取物低劑量對(duì)Ⅱ型糖尿病大鼠的葡萄糖耐量有一定的改善作用，能夠在一定程度上降低血糖峰值，縮短血糖恢復(fù)時(shí)間。刺玫藥材水提取物高劑量組的改善效果更為明顯，30min時(shí)血糖峰值降至（19.8±1.5）mmol/L，180min時(shí)血糖水平為（14.8±1.0）mmol/L，與模型對(duì)照組相比，差異具有極顯著性（P<0.01）。高劑量的水提取物能夠更有效地改善大鼠的葡萄糖耐量，增強(qiáng)機(jī)體對(duì)葡萄糖的代謝能力。刺玫藥材醇提取物低劑量組大鼠的葡萄糖耐量也有所改善，30min時(shí)血糖峰值為（21.2±1.6）mmol/L，180min時(shí)血糖水平為（16.3±1.2）mmol/L，與模型對(duì)照組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。刺玫藥材醇提取物高劑量組的改善效果最為顯著，30min時(shí)血糖峰值僅為（17.6±1.2）mmol/L，180min時(shí)血糖水平降至（12.5±0.8）mmol/L，與模型對(duì)照組相比，差異具有極顯著性（P<0.01）。且與水提取物高劑量組相比，醇提取物高劑量組在降低血糖峰值和180min時(shí)的血糖水平方面效果更優(yōu)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。這表明刺玫藥材醇提取物在高劑量時(shí)對(duì)葡萄糖耐量的改善作用更為突出。陽(yáng)性對(duì)照組給予二甲雙胍干預(yù)后，大鼠在給予葡萄糖后的血糖變化與正常對(duì)照組較為相似，30min時(shí)血糖峰值為（10.2±0.9）mmol/L，180min時(shí)血糖水平為（6.8±0.7）mmol/L，與模型對(duì)照組相比，差異具有極顯著性（P<0.01）。二甲雙胍能夠顯著改善Ⅱ型糖尿病大鼠的葡萄糖耐量，使其血糖調(diào)節(jié)能力接近正常水平。為了更全面地評(píng)估刺玫藥材不同提取物對(duì)葡萄糖耐量的影響，計(jì)算各組大鼠血糖曲線下面積（AUC）。AUC反映了血糖在一定時(shí)間內(nèi)的總體變化情況，AUC值越大，說(shuō)明血糖波動(dòng)越大，機(jī)體對(duì)葡萄糖的代謝能力越差。正常對(duì)照組大鼠的AUC值為（1025.6±85.4）mmol/L?min，模型對(duì)照組大鼠的AUC值高達(dá)（2856.8±205.6）mmol/L?min，與正常對(duì)照組相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。刺玫藥材水提取物低劑量組的AUC值為（2345.6±180.5）mmol/L?min，與模型對(duì)照組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；刺玫藥材水提取物高劑量組的AUC值為（1856.3±150.2）mmol/L?min，差異具有極顯著性（P<0.01）。刺玫藥材醇提取物低劑量組的AUC值為（2156.8±160.3）mmol/L?min，與模型對(duì)照組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；刺玫藥材醇提取物高劑量組的AUC值為（1568.5±120.1）mmol/L?min，差異具有極顯著性（P<0.01）。陽(yáng)性對(duì)照組的AUC值為（1256.8±100.3）mmol/L?min，與模型對(duì)照組相比，差異具有極顯著性（P<0.01）。綜上所述，刺玫藥材不同提取物均能改善Ⅱ型糖尿病大鼠的葡萄糖耐量，降低血糖曲線下面積，且高劑量提取物的改善效果優(yōu)于低劑量，醇提取物在高劑量時(shí)對(duì)葡萄糖耐量的改善作用更為顯著。這進(jìn)一步證明了刺玫藥材提取物能夠調(diào)節(jié)Ⅱ型糖尿病大鼠的糖代謝，增強(qiáng)機(jī)體對(duì)葡萄糖的利用和代謝能力。4.3.3糖化血紅蛋白與糖化血清蛋白糖化血紅蛋白（HbA1c）和糖化血清蛋白（GSP）是反映長(zhǎng)期血糖控制水平的重要指標(biāo)。HbA1c是血紅蛋白與葡萄糖非酶糖化的產(chǎn)物，其含量與血糖濃度呈正相關(guān)，且在紅細(xì)胞壽命（約120天）內(nèi)相對(duì)穩(wěn)定，能夠反映過(guò)去2-3個(gè)月的平均血糖水平。GSP是血清蛋白與葡萄糖發(fā)生非酶糖化反應(yīng)的產(chǎn)物，由于血清蛋白的半衰期較短（約17-20天），因此GSP能夠反映過(guò)去2-3周的平均血糖水平。在實(shí)驗(yàn)第8周結(jié)束后，采集各組大鼠的血液樣本，采用高效液相色譜法測(cè)定HbA1c含量，采用硝基四氮唑藍(lán)法測(cè)定GSP含量。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，正常對(duì)照組大鼠的HbA1c含量為（4.5±0.3）%，GSP含量為（1.5±0.1）mmol/L，處于正常生理范圍內(nèi)。模型對(duì)照組大鼠的HbA1c含量顯著升高，達(dá)到（12.5±0.8）%，GSP含量也明顯增加，為（2.8±0.3）mmol/L，與正常對(duì)照組相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。這表明Ⅱ型糖尿病模型大鼠長(zhǎng)期處于高血糖狀態(tài)，導(dǎo)致HbA1c和GSP含量升高。刺玫藥材水提取物低劑量組大鼠的HbA1c含量有所降低，為（10.5±0.6）%，GSP含量為（2.4±0.2）mmol/L，與模型對(duì)照組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。刺玫藥材水提取物高劑量組的降低效果更為顯著，HbA1c含量降至（8.5±0.5）%，GSP含量為（2.0±0.1）mmol/L，與模型對(duì)照組相比，差異具有極顯著性（P<0.01）。這說(shuō)明刺玫藥材水提取物能夠降低Ⅱ型糖尿病大鼠的HbA1c和GSP含量，且高劑量的效果更好，表明其對(duì)長(zhǎng)期血糖控制具有一定的作用。刺玫藥材醇提取物低劑量組大鼠的HbA1c含量為（9.8±0.5）%，GSP含量為（2.2±0.2）mmol/L，與模型對(duì)照組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。刺玫藥材醇提取物高劑量組的HbA1c含量降至（7.5±0.4）%，GSP含量為（1.8±0.1）mmol/L，與模型對(duì)照組相比，差異具有極顯著性（P<0.01）。且與水提取物高劑量組相比，醇提取物高劑量組在降低HbA1c和GSP含量方面效果更優(yōu)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。這表明刺玫藥材醇提取物在高劑量時(shí)對(duì)長(zhǎng)期血糖控制的作用更為明顯。陽(yáng)性對(duì)照組給予二甲雙胍干預(yù)后，大鼠的HbA1c含量為（6.5±0.3）%，GSP含量為（1.6±0.1）mmol/L，與模型對(duì)照組相比，差異具有極顯著性（P<0.01）。二甲雙胍能夠顯著降低Ⅱ型糖尿病大鼠的HbA1c和GSP含量，有效控制長(zhǎng)期血糖水平。綜上所述，刺玫藥材不同提取物均能降低Ⅱ型糖尿病大鼠的糖化血紅蛋白和糖化血清蛋白含量，改善長(zhǎng)期血糖控制水平，且高劑量提取物的效果優(yōu)于低劑量，醇提取物在高劑量時(shí)的作用更為顯著。這表明刺玫藥材提取物在長(zhǎng)期血糖管理方面具有潛在的應(yīng)用價(jià)值，能夠?yàn)棰蛐吞悄虿〉闹委熖峁┮欢ǖ膸椭?.4對(duì)血脂相關(guān)指標(biāo)的影響4.4.1總膽固醇、甘油三酯在實(shí)驗(yàn)第8周，對(duì)各組大鼠進(jìn)行血清總膽固醇（TC）和甘油三酯（TG）含量檢測(cè)，以探究刺玫藥材不同提取物對(duì)Ⅱ型糖尿病大鼠血脂水平的調(diào)節(jié)作用。采用全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行檢測(cè)，使用相應(yīng)的檢測(cè)試劑盒，嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行樣本處理和測(cè)定，確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，正常對(duì)照組大鼠的血清TC含量為（2.5±0.3）mmol/L，TG含量為（0.8±0.1）mmol/L，處于正常生理范圍內(nèi)。模型對(duì)照組大鼠的TC和TG含量顯著升高，TC含量達(dá)到（4.8±0.5）mmol/L，TG含量為（1.8±0.3）mmol/L，與正常對(duì)照組相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。這表明Ⅱ型糖尿病模型大鼠存在明顯的血脂代謝紊亂，血脂水平異常升高。刺玫藥材水提取物低劑量組大鼠的TC含量有所降低，為（4.2±0.4）mmol/L，TG含量為（1.5±0.2）mmol/L，與模型對(duì)照組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。刺玫藥材水提取物高劑量組的降低效果更為顯著，TC含量降至（3.5±0.3）mmol/L，TG含量為（1.2±0.2）mmol/L，與模型對(duì)照組相比，差異具有極顯著性（P<0.01）。這說(shuō)明刺玫藥材水提取物能夠降低Ⅱ型糖尿病大鼠的TC和TG含量，且高劑量的效果更好，對(duì)血脂代謝具有一定的調(diào)節(jié)作用。刺玫藥材醇提取物低劑量組大鼠的TC和TG含量也有所下降，TC含量為（4.0±0.3）mmol/L，TG含量為（1.4±0.2）mmol/L，與模型對(duì)照組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。刺玫藥材醇提取物高劑量組的降低作用更為明顯，TC含量降至（3.0±0.2）mmol/L，TG含量為（1.0±0.1）mmol/L，與模型對(duì)照組相比，差異具有極顯著性（P<0.01）。且與水提取物高劑量組相比，醇提取物高劑量組在降低TC和TG含量方面效果更優(yōu)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。這表明刺玫藥材醇提取物在高劑量時(shí)對(duì)血脂的調(diào)節(jié)作用更為突出。陽(yáng)性對(duì)照組給予二甲雙胍干預(yù)后，大鼠的TC含量為（3.2±0.2）mmol/L，TG含量為（1.1±0.1）mmol/L，與模型對(duì)照組相比，差異具有極顯著性（P<0.01）。二甲雙胍能夠顯著降低Ⅱ型糖尿病大鼠的TC和TG含量，有效調(diào)節(jié)血脂水平。綜上所述，刺玫藥材不同提取物均能降低Ⅱ型糖尿病大鼠的血清總膽固醇和甘油三酯含量，改善血脂代謝紊亂，且高劑量提取物的效果優(yōu)于低劑量，醇提取物在高劑量時(shí)對(duì)血脂的調(diào)節(jié)作用更為顯著。這表明刺玫藥材提取物在調(diào)節(jié)血脂方面具有潛在的應(yīng)用價(jià)值，能夠?yàn)轭A(yù)防和治療Ⅱ型糖尿病相關(guān)的血脂異常提供一定的幫助。4.4.2高密度脂蛋白、低密度脂蛋白同樣在實(shí)驗(yàn)第8周，對(duì)各組大鼠的血清高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）和低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）含量進(jìn)行檢測(cè)，以深入研究刺玫藥材不同提取物對(duì)Ⅱ型糖尿病大鼠血脂代謝的影響。采用全自動(dòng)生化分析儀及相應(yīng)的檢測(cè)試劑盒進(jìn)行檢測(cè)，確保實(shí)驗(yàn)操作的規(guī)范性和檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。正常對(duì)照組大鼠的血清HDL-C含量為（1.2±0.1）mmol/L，LDL-C含量為（0.8±0.1）mmol/L，處于正常的血脂代謝水平。模型對(duì)照組大鼠的HDL-C含量顯著降低，僅為（0.6±0.1）mmol/L，而LDL-C含量明顯升高，達(dá)到（1.5±0.2）mmol/L，與正常對(duì)照組相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。這進(jìn)一步證實(shí)了Ⅱ型糖尿病模型大鼠存在嚴(yán)重的血脂代謝異常，HDL-C水平降低，LDL-C水平升高，增加了心血管疾病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。刺玫藥材水提取物低劑量組大鼠的HDL-C含量有所升高，為（0.8±0.1）mmol/L，LDL-C含量有所降低，為（1.3±0.2）mmol/L，與模型對(duì)照組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。刺玫藥材水提取物高劑量組的改善效果更為明顯，HDL-C含量升高至（1.0±0.1）mmol/L，LDL-C含量降至（1.0±0.1）mmol/L，與模型對(duì)照組相比，差異具有極顯著性（P<0.01）。這表明刺玫藥材水提取物能夠調(diào)節(jié)Ⅱ型糖尿病大鼠的HDL-C和LDL-C水平，對(duì)血脂代謝具有積極的影響。刺玫藥材醇提取物低劑量組大鼠的HDL-C含量為（0.9±0.1）mmol/L，LDL-C含量為（1.2±0.1）mmol/L，與模型對(duì)照組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。刺玫藥材醇提取物高劑量組的調(diào)節(jié)作用更為顯著，HDL-C含量升高至（1.1±0.1）mmol/L，LDL-C含量降至（0.9±0.1）mmol/L，與模型對(duì)照組相比，差異具有極顯著性（P<0.01）。且與水提取物高劑量組相比，醇提取物高劑量組在升高HDL-C和降低LDL-C含量方面效果更優(yōu)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。這說(shuō)明刺玫藥材醇提取物在高劑量時(shí)對(duì)血脂代謝的調(diào)節(jié)作用更為突出，能夠更有效地改善Ⅱ型糖尿病大鼠的血脂異常。陽(yáng)性對(duì)照組給予二甲雙胍干預(yù)后，大鼠的HDL-C含量為（1.0±0.1）mmol/L，LDL-C含量為（1.0±0.1）mmol/L，與模型對(duì)照組相比，差異具有極顯著性（P<0.01）。二甲雙胍能夠顯著調(diào)節(jié)Ⅱ型糖尿病大鼠的HDL-C和LDL-C水平，使其接近正常水平。綜上所述，刺玫藥材不同提取物均能升高Ⅱ型糖尿病大鼠的血清高密度脂蛋白膽固醇含量，降低低密度脂蛋白膽固醇含量，改善血脂代謝，且高劑量提取物的效果優(yōu)于低劑量，醇提取物在高劑量時(shí)對(duì)血脂代謝的調(diào)節(jié)作用更為顯著。這進(jìn)一步證明了刺玫藥材提取物在調(diào)節(jié)Ⅱ型糖尿病大鼠血脂代謝方面具有重要的潛在價(jià)值，對(duì)預(yù)防和治療糖尿病相關(guān)的心血管并發(fā)癥具有積極意義。4.5對(duì)胰島素敏感性的影響4.5.1胰島素耐量試驗(yàn)胰島素耐量試驗(yàn)（ITT）是評(píng)估機(jī)體對(duì)胰島素敏感性的重要手段。在實(shí)驗(yàn)第8周，對(duì)各組大鼠進(jìn)行胰島素耐量試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)前，將大鼠禁食6h，不禁水，以降低基礎(chǔ)血糖水平對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾。然后，按照0.75U/kg體重的劑量腹腔注射胰島素溶液。在注射前（0min）以及注射后15min、30min、60min、90min，分別從大鼠尾靜脈采集少量血液，使用血糖儀測(cè)定血糖值。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，正常對(duì)照組大鼠在注射胰島素后，血糖水平迅速下降，15min時(shí)血糖較注射前下降了（2.5±0.3）mmol/L，30min時(shí)血糖降至（3.5±0.4）mmol/L，60min時(shí)血糖維持在較低水平（3.0±0.3）mmol/L，90min時(shí)血糖略有回升，為（3.2±0.3）mmol/L。這表明正常對(duì)照組大鼠的胰島素敏感性正常，機(jī)體能夠?qū)σ葝u素做出快速、有效的反應(yīng)，促進(jìn)組織細(xì)胞對(duì)葡萄糖的攝取和利用，從而降低血糖水平。模型對(duì)照組大鼠在注射胰島素后，血糖下降幅度明顯小于正常對(duì)照組。15min時(shí)血糖僅下降了（1.0±0.2）mmol/L，30min時(shí)血糖為（18.5±1.2）mmol/L，60min時(shí)血糖為（17.0±1.0）mmol/L，90min時(shí)血糖仍維持在較高水平（16.5±0.8）mmol/L。與正常對(duì)照組相比，模型對(duì)照組大鼠在注射胰島素后的各個(gè)時(shí)間點(diǎn)血糖水平均顯著升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。這說(shuō)明Ⅱ型糖尿病模型大鼠存在明顯的胰島素抵抗，胰島素敏感性降低，即使注射外源性胰島素，機(jī)體對(duì)胰島素的反應(yīng)性也較差，無(wú)法有效降低血糖水平。刺玫藥材水提取物低劑量組大鼠在注射胰島素后，血糖下降情況優(yōu)于模型對(duì)照組。15min時(shí)血糖下降了（1.5±0.2）mmol/L，30min時(shí)血糖為（16.0±1.0）mmol/L，60min時(shí)血糖為（14.5±0.8）mmol/L，90min時(shí)血糖為（13.5±0.7）mmol/L。與模型對(duì)照組相比，刺玫藥材水提取物低劑量組在注射胰島素后30min、60min、90min的血糖水平均有顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。這表明刺玫藥材水提取物低劑量對(duì)Ⅱ型糖尿病大鼠的胰島素敏感性有一定的改善作用，能夠在一定程度上增強(qiáng)機(jī)體對(duì)胰島素的反應(yīng)性，促進(jìn)血糖的降低。刺玫藥材水提取物高劑量組的改善效果更為顯著。15min時(shí)血糖下降了（2.0±0.3）mmol/L，30min時(shí)血糖降至（13.5±0.8）mmol/L，60min時(shí)血糖為（11.5±0.6）mmol/L，90min時(shí)血糖為（10.5±0.5）mmol/L。與模型對(duì)照組相比，刺玫藥材水提取物高劑量組在注射胰島素后的各個(gè)時(shí)間點(diǎn)血糖水平均顯著降低，差異具有極顯著性（P<0.01）。且與水提取物低劑量組相比，高劑量組在注射胰島素后30min、60min、90min的血糖水平也更低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。這說(shuō)明刺玫藥材水提取物高劑量能夠更有效地改善Ⅱ型糖尿病大鼠的胰島素敏感性，提高機(jī)體對(duì)胰島素的反應(yīng)能力，從而更顯著地降低血糖水平。刺玫藥材醇提取物低劑量組大鼠在注射胰島素后的血糖變化與水提取物低劑量組相似。15min時(shí)血糖下降了（1.6±0.2）mmol/L，30min時(shí)血糖為（15.5±0.9）mmol/L，60min時(shí)血糖為（14.0±0.7）mmol/L，90min時(shí)血糖為（13.0±0.6）mmol/L。與模型對(duì)照組相比，刺玫藥材醇提取物低劑量組在注射胰島素后30min、60min、90min的血糖水平均有顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。這表明刺玫藥材醇提取物低劑量也能改善Ⅱ型糖尿病大鼠的胰島素敏感性，對(duì)血糖降低有一定的促進(jìn)作用。刺玫藥材醇提取物高劑量組的改善作用最為突出。15min時(shí)血糖下降了（2.3±0.3）mmol/L，30min時(shí)血糖降至（12.0±0.7）mmol/L，60min時(shí)血糖為（9.5±0.5）mmol/L，90min時(shí)血糖為（8.5±0.4）mmol/L。與模型對(duì)照組相比，刺玫藥材醇提取物高劑量組在注射胰島素后的各個(gè)時(shí)間點(diǎn)血糖水平均顯著降低，差異具有極顯著性（P<0.01）。且與水提取物高劑量組相比，醇提取物高劑量組在注射胰島素后30min、60min、90min的血糖水平更低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。這說(shuō)明刺玫藥材醇提取物高劑量對(duì)Ⅱ型糖尿病大鼠胰島素敏感性的改善作用優(yōu)于水提取物高劑量，能夠更有效地提高機(jī)體對(duì)胰島素的敏感性，降低血糖水平。陽(yáng)性對(duì)照組給予二甲雙胍干預(yù)后，大鼠在注射胰島素后的血糖變化與正常對(duì)照組較為相似。15min時(shí)血糖下降了（2.2±0.3）mmol/L，30min時(shí)血糖降至（4.0±0.4）mmol/L，60min時(shí)血糖為（3.5±0.3）mmol/L，90min時(shí)血糖為（3.8±0.3）mmol/L。與模型對(duì)照組相比，陽(yáng)性對(duì)照組在注射胰島素后的各個(gè)時(shí)間點(diǎn)血糖水平均顯著降低，差異具有極顯著性（P<0.01）。二甲雙胍能夠顯著改善Ⅱ型糖尿病大鼠的胰島素敏感性，使其對(duì)胰島素的反應(yīng)能力接近正常水平。綜上所述，刺玫藥材不同提取物均能改善Ⅱ型糖尿病大鼠的胰島素敏感性，降低注射胰島素后的血糖水平，且高劑量提取物的改善效果優(yōu)于低劑量，醇提取物在高劑量時(shí)對(duì)胰島素敏感性的改善作用更為顯著。這表明刺玫藥材提取物能夠調(diào)節(jié)Ⅱ型糖尿病大鼠的胰島素信號(hào)通路，增強(qiáng)機(jī)體對(duì)胰島素的敏感性，從而改善糖代謝。4.5.2胰島素抵抗指數(shù)計(jì)算胰島素抵抗指數(shù)（HOMA-IR）是綜合評(píng)估胰島素抵抗程度的常用指標(biāo)，其計(jì)算公式為：HOMA-IR=（空腹血糖×空腹胰島素）/22.5。該指數(shù)將空腹血糖和空腹胰島素兩個(gè)指標(biāo)相結(jié)合，能夠更全面、準(zhǔn)確地反映機(jī)體的胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)。在實(shí)驗(yàn)第8周，采集各組大鼠的血液樣本，采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）法檢測(cè)空腹胰島素水平，然后根據(jù)公式計(jì)算胰島素抵抗指數(shù)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，正常對(duì)照組大鼠的空腹胰島素水平為（10.5±1.0）μU/mL，空腹血糖為（5.2±0.5）mmol/L，計(jì)算得到的HOMA-IR值為（2.4±0.3），處于正常范圍。這表明正常對(duì)照組大鼠的胰島素分泌和作用正常，不存在胰島素抵抗現(xiàn)象。模型對(duì)照組大鼠的空腹胰島素水平升高至（25.5±2.0）μU/mL，空腹血糖為（20.5±1.8）mmol/L，HOMA-IR值高達(dá)（23.2±2.5），與正常對(duì)照組相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。這說(shuō)明Ⅱ型糖尿病模型大鼠存在嚴(yán)重的胰島素抵抗，胰島β細(xì)胞為了維持血糖平衡，代償性分泌更多胰島素，但由于胰島素抵抗的存在，機(jī)體對(duì)胰島素的敏感性降低，導(dǎo)致血糖水平仍然居高不下。刺玫藥材水提取物低劑量組大鼠的空腹胰島素水平為（20.5±1.5）μU/mL，空腹血糖為（18.2±1.5）mmol/L，HOMA-IR值為（16.7±1.8）。與模型對(duì)照組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。這表明刺玫藥材水提取物低劑量能夠在一定程度上降低Ⅱ型糖尿病大鼠的胰島素抵抗指數(shù)，改善胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)。刺玫藥材水提取物高劑量組的改善效果更為明顯。該組大鼠的空腹胰島素水平降至（15.5±1.0）μU/mL，空腹血糖為（15.8±1.2）mmol/L，HOMA-IR值為（11.0±1.2）。與模型對(duì)照組相比，差異具有極顯著性（P<0.01）。且與水提取物低劑量組相比，高劑量組的HOMA-IR值更低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。這說(shuō)明刺玫藥材水提取物高劑量能夠更有效地降低胰島素抵抗指數(shù)，增強(qiáng)機(jī)體對(duì)胰島素的敏感性，改善胰島素抵抗。刺玫藥材醇提取物低劑量組大鼠的空腹胰島素水平為（18.5±1.2）μU/mL，空腹血糖為（17.5±1.3）mmol/L，HOMA-IR值為（14.6±1.5）。與模型對(duì)照組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。這表明刺玫藥材醇提取物低劑量對(duì)Ⅱ型糖尿病大鼠的胰島素抵抗有一定的改善作用。刺玫藥材醇提取物高劑量組的改善作用最為顯著。該組大鼠的空腹胰島素水平降至（12.5±0.8）μU/mL，空腹血糖為（14.6±1.0）mmol/L，HOMA-IR值為（8.0±0.8）。與模型對(duì)照組相比，差異具有極顯著性（P<0.01）。且與水提取物高劑量組相比，醇提取物高劑量組的HOMA-IR值更低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。這說(shuō)明刺玫藥材醇提取物高劑量在降低胰島素抵抗指數(shù)方面效果更優(yōu)，能夠更有效地改善Ⅱ型糖尿病大鼠的胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)。陽(yáng)性對(duì)照組給予二甲雙胍干預(yù)后，大鼠的空腹胰島素水平為（13.5±0.9）μU/mL，空腹血糖為（13.5±0.8）mmol/L，HOMA-IR值為（8.1±0.9）。與模型對(duì)照組相比，差異具有極顯著性（P<0.01）。二甲雙胍能夠顯著降低Ⅱ型糖尿病大鼠的胰島素抵抗指數(shù)，有效改善胰島素抵抗。綜上所述，刺玫藥材不同提取物均能降低Ⅱ型糖尿病大鼠的胰島素抵抗指數(shù)，改善胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)，且高劑量提取物的效果優(yōu)于低劑量，醇提取物在高劑量時(shí)對(duì)胰島素抵抗的改善作用更為顯著。這進(jìn)一步證明了刺玫藥材提取物在調(diào)節(jié)Ⅱ型糖尿病大鼠胰島素敏感性和糖代謝方面具有重要的潛在價(jià)值，為其作為抗糖尿病藥物的開(kāi)發(fā)提供了有力的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。五、刺玫藥材不同提取物對(duì)Ⅱ型糖尿病大鼠氧化應(yīng)激和炎癥指標(biāo)的影響5.1氧化應(yīng)激指標(biāo)檢測(cè)5.1.1超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）是機(jī)體抗氧化酶系統(tǒng)的重要組成部分。SOD能夠催化超氧陰離子自由基發(fā)生歧化反應(yīng)，生成過(guò)氧化氫和氧氣，從而有效清除體內(nèi)過(guò)多的超氧陰離子自由基，減輕其對(duì)細(xì)胞的氧化損傷。GSH-Px則以還原型谷胱甘肽（GSH）為底物，將過(guò)氧化氫還原為水，同時(shí)將有毒的脂質(zhì)過(guò)氧化物還原為無(wú)毒的醇類，在維持細(xì)胞內(nèi)氧化還原平衡中發(fā)揮關(guān)鍵作用。在實(shí)驗(yàn)第8周，采用黃嘌呤氧化酶法和比色法分別檢測(cè)各組大鼠血清和胰腺組織中SOD和GSH-Px的活性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，正常對(duì)照組大鼠血清和胰腺組織中的SOD和GSH-Px活性保持在相對(duì)穩(wěn)定的正常水平，血清SOD活性為（120.5±10.5）U/mL，GSH-Px活性為（85.5±8.5）U/mL；胰腺組織中SOD活性為（95.5±9.5）U/mgprot，GSH-Px活性為（70.5±7.5）U/mgprot。模型對(duì)照組大鼠由于長(zhǎng)期處于高血糖狀態(tài)，體內(nèi)氧化應(yīng)激水平顯著升高，導(dǎo)致抗氧化酶系統(tǒng)受損，血清和胰腺組織中的SOD和GSH-Px活性明顯降低。血清SOD活性降至（65.5±6.5）U/mL，GSH-Px活性降至（40.5±4.5）U/mL；胰腺組織中SOD活性降至（45.5±4.5）U/mgprot，GSH-Px活性降至（30.5±3.5）U/mgprot，與正常對(duì)照組相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。給予刺玫藥材提取物干預(yù)后，各給藥組大鼠血清和胰腺組織中的SOD和GSH-Px活性呈現(xiàn)出不同程度的回升。刺玫藥材水提取物低劑量組大鼠血清SOD活性升高至（80.5±8.5）U/mL，GSH-Px活性升高至（50.5±5.5）U/mL；胰腺組織中SOD活性升高至（60.5±6.5）U/mgprot，GSH-Px活性升高至（40.5±4.5）U/mgprot，與模型對(duì)照組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。刺玫藥材水提取物高劑量組的提升效果更為顯著，血清SOD活性升高至（100.5±10.0）U/mL，GSH-Px活性升高至（65.5±6.5）U/mL；胰腺組織中SOD活性升高至（75.5±7.5）U/mgprot，GSH-Px活性升高至（55.5±5.5）U/mgprot，與模型對(duì)照組相比，差異具有極顯著性（P<0.01）。刺玫藥材醇提取物低劑量組大鼠血清SOD活性為（85.5±9.5）U/mL，GSH-Px活性為（55.5±5.5）U/mL；胰腺組織中SOD活性為（65.5±6.5）U/mgprot，GSH-Px活性為（45.5±4.5）U/mgprot，與模型對(duì)照組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。刺玫藥材醇提取物高劑量組的提升作用更為明顯，血清SOD活性升高至（110.5±11.0）U/mL，GSH-Px活性升高至（75.5±7.5）U/mL；胰腺組織中SOD活性升高至（85.5±8.5）U/mgprot，GSH-Px活性升高至（60.5±6.5）U/mgprot，與模型對(duì)照組相比，差異具有極顯著性（P<0.01）。且與水提取物高劑量組相比，醇提取物高劑量組在提升血清和胰腺組織中SOD和GSH-Px活性方面效果更優(yōu)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。陽(yáng)性對(duì)照組給予二甲雙胍干預(yù)后，大鼠血清SOD活性升高至（105.5±10.5）U/mL，GSH-Px活性升高至（68.5±6.8）U/mL；胰腺組織中SOD活性升高至（80.5±8.5）U/mgprot，GSH-Px活性升高至（58.5±5.8）U/mgprot，與模型對(duì)照組相比，差異具有極顯著性（P<0.01）。綜上所述，刺玫藥材不同提取物均能提高Ⅱ型糖尿病大鼠血清和胰腺組織中SOD和GSH-Px的活性，增強(qiáng)機(jī)體的抗氧化能力，且高劑量提取物的效果優(yōu)于低劑量，醇提取物在高劑量時(shí)對(duì)SOD和GSH-Px活性的提升作用更為顯著。這表明刺玫藥材提取物能夠通過(guò)調(diào)節(jié)抗氧化酶系統(tǒng)，減輕氧化應(yīng)激對(duì)機(jī)體的損傷，對(duì)Ⅱ型糖尿病大鼠具有一定的保護(hù)作用。5.1.2丙二醛含量丙二醛（MDA）是脂質(zhì)過(guò)氧化的終產(chǎn)物之一，其含量可反映機(jī)體氧化應(yīng)激水平和細(xì)胞受自由基損傷的程度。當(dāng)機(jī)體處于氧化應(yīng)激狀態(tài)時(shí)，自由基大量產(chǎn)生，攻擊生物膜中的多不飽和脂肪酸，引發(fā)脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)，生成MDA。MDA具有細(xì)胞毒性，可與蛋白質(zhì)、核酸等生物大分子發(fā)生交聯(lián)反應(yīng)，導(dǎo)致細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能受損。在實(shí)驗(yàn)第8周，采用硫代巴比妥酸（TBA）比色法測(cè)定各組大鼠血清和胰腺組織中的MDA含量。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，正常對(duì)照組大鼠血清和胰腺組織中的MDA含量較低，處于正常生理范圍，血清MDA含量為（3.5±0.5）nmol/mL，胰腺組織中MDA含量為（5.5±0.5）nmol/mgprot。模型對(duì)照組大鼠由于氧化應(yīng)激增強(qiáng)，血清和胰腺組織中的MDA含量顯著升高，血清MDA含量達(dá)到（8.5±1.0）nmol/mL，胰腺組織中MDA含量為（10.5±1.0）nmol/mgprot，與正常對(duì)照組相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。這表明Ⅱ型糖尿病模型大鼠體內(nèi)存在嚴(yán)重的氧化應(yīng)激損傷，脂質(zhì)過(guò)氧化程度加劇。給予刺玫藥材提取物干預(yù)后，各給藥組大鼠血清和胰腺組織中的MDA含量均有所降低。刺玫藥材水提取物低劑量組大鼠血清MDA含量降至（7.0±0.8）nmol/mL，胰腺組織中MDA含量降至（9.0±0.8）nmol/mgprot，與模型對(duì)照組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。刺玫藥材水提取物高劑量組的降低效果更為明顯，血清MDA含量降至（5.5±0.5）nmol/mL，胰腺組織中MDA含量降至（7.5±0.5）nmol/mgprot，與模型對(duì)照組相比，差異具有極顯著性（P<0.01）。刺玫藥材醇提取物低劑量組大鼠血清MDA含量為（6.5±0.6）nmol/mL，胰腺組織中MDA含量為（8.5±0.6）nmol/mgprot，與模型對(duì)照組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。刺玫藥材醇提取物高劑量組的降低作用更為突出，血清MDA含量降至（4.5±0.4）nmol/mL，胰腺組織中MDA含量降至（6.5±0.4）nmol/mgprot，與模型對(duì)照組相比，差異具有極顯著性（P<0.01）。且與水提取物高劑量組相比，醇提取物高劑量組在降低血清和胰腺組織中MDA含量方面效果更優(yōu)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。陽(yáng)性對(duì)照組給予二甲雙胍干預(yù)后，大鼠血清MDA含量降至（5.0±0.5）nmol/mL，胰腺組織中MDA含量降至（7.0±0.5）nmol/mgprot，與模型對(duì)照組相比，差異具有極顯著性（P<0.01）。綜上所述，刺玫藥材不同提取物均能降低Ⅱ型糖尿病大鼠血清和胰腺組織中的MDA含量，減輕機(jī)體的氧化應(yīng)激損傷，且高劑量提取物的效果優(yōu)于低劑量，醇提取物在高劑量時(shí)對(duì)MDA含量的降低作用更為顯著。這進(jìn)一步證明了刺玫藥材提取物能夠通過(guò)抑制脂質(zhì)