ICS13.02021遼寧省市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布IDB21/T4150—2025前言 2規(guī)范性引用文件 3術(shù)語和定義 4方法原理 5試劑和材料 6儀器和設(shè)備 7樣品 8分析步驟 9結(jié)果計(jì)算與表示 10準(zhǔn)確度 11質(zhì)量保證和質(zhì)量控制 12注意事項(xiàng) 附錄A（規(guī)范性）方法的檢出限和測(cè)定下限 7附錄B（資料性）方法的準(zhǔn)確度 8DB21/T4150—2025本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。本文件由遼寧省生態(tài)環(huán)境廳提出并歸口。本文件起草單位：遼寧省葫蘆島生態(tài)環(huán)境監(jiān)測(cè)中心、遼寧省檢驗(yàn)檢測(cè)認(rèn)證中心。本文件主要起草人：張哲、楊惠、宋大英、趙宇、張明洋、付曉燕、付征宇、苑芷茜、陶冶、幺洪波、郭振江、王文華、于志輝、張旭鴻、張立劍、李赫、宋婷、付嬈、于群、滕維新、王美臻。本文件發(fā)布實(shí)施后，任何單位和個(gè)人如有問題和意見建議，均可以通過來電和來函等方式進(jìn)行反饋，我們將及時(shí)答復(fù)并認(rèn)真處理，根據(jù)實(shí)際情況依法進(jìn)行評(píng)估及復(fù)審。歸口管理部門通訊地址：遼寧省生態(tài)環(huán)境廳（遼寧省沈陽市渾南區(qū)雙園路30號(hào)甲），聯(lián)系電話標(biāo)準(zhǔn)起草單位通訊地址：遼寧省葫蘆島生態(tài)環(huán)境監(jiān)測(cè)中心（遼寧省葫蘆島市龍港區(qū)龍灣大街24號(hào)聯(lián)系電話DB21/T4150—20251水質(zhì)6種雙酚類化合物的測(cè)定固相萃取/高效液相色譜法警告：實(shí)驗(yàn)中所使用的甲醇、乙腈、雙酚類化合物、丙酮屬于有毒有機(jī)物，溶液配制過程應(yīng)在通風(fēng)櫥內(nèi)進(jìn)行，操作時(shí)應(yīng)按規(guī)定要求佩戴防護(hù)器具，避免吸入呼吸道、接觸皮膚和衣物。本文件規(guī)定了測(cè)定水中雙酚類化合物的高效液相色譜法。本文件適用于地表水、地下水、生活污水和工業(yè)廢水中雙酚A、雙酚B、雙酚AP、雙酚Z、四甲基雙酚A、雙酚P共6種雙酚類化合物的測(cè)定。當(dāng)取樣體積為250ml，試樣的定容體積為1.0ml，進(jìn)樣體積為20μl時(shí)，方法檢出限為0.03μg/L~0.06μg/L，測(cè)定下限為0.12μg/L～0.24μg/L。詳見附錄A。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。HJ91.1污水監(jiān)測(cè)技術(shù)規(guī)范HJ91.2地表水環(huán)境質(zhì)量監(jiān)測(cè)技術(shù)規(guī)范HJ164地下水環(huán)境監(jiān)測(cè)技術(shù)規(guī)范HJ493水質(zhì)樣品的保存和管理技術(shù)規(guī)定3術(shù)語和定義本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。4方法原理水中的雙酚類化合物在酸性條件下，經(jīng)固相萃取富集、凈化、洗脫、濃縮后使用具有熒光檢測(cè)器的高效液相色譜儀測(cè)定，根據(jù)保留時(shí)間定性，外標(biāo)法定量。5試劑和材料5.1通用要求：除非另有說明，分析時(shí)均使用符合國家標(biāo)準(zhǔn)的分析純?cè)噭?，?shí)驗(yàn)用水為新制備的不含目標(biāo)化合物的純水。5.2硫代硫酸鈉（Na2S2O3·5H2O）：優(yōu)級(jí)純。5.3鹽酸（HCl）：ρ（HCl）=1.19g/ml，優(yōu)級(jí)純。5.4鹽酸溶液：φ（HCl）=50%。量取100ml鹽酸（5.3），緩慢加入到100ml實(shí)驗(yàn)用水中，混勻。DB21/T4150—202525.5甲醇（CH3OH）：色譜純。5.6甲醇溶液：φ（CH3OH）=30%。分別量取30ml甲醇（5.5）和70ml實(shí)驗(yàn)用水，混勻。5.7乙腈（CH3CN）：色譜純。5.8二氯甲烷（CH2Cl2）：農(nóng)殘級(jí)。5.9丙酮（CH3COCH3）：農(nóng)殘級(jí)。5.10雙酚A（C15H16O2）：純度為≥99.9%。5.11雙酚B（C16H18O2）：純度為≥99.23%。5.12雙酚P（C24H26O2）：純度為≥97.4%。5.13雙酚Z（C18H20O2）：純度為≥99.6%。5.14雙酚AP（C20H18O2）：純度為≥99.9%。5.15四甲基雙酚A（C19H24O2）：純度為≥99.9%。5.16雙酚類化合物標(biāo)準(zhǔn)貯備液(ρ=1000μg/ml）分別稱取0.0100g雙酚A（5.10）、雙酚B（5.11）、雙酚P（5.12）、雙酚Z（5.13）、雙酚AP（5.14）和四甲基雙酚A（5.15）置于50ml玻璃燒杯中，加少量甲醇（5.5）溶解，轉(zhuǎn)移至10ml容量瓶中，用甲醇（5.5）稀釋至標(biāo)線，混勻。制備的標(biāo)準(zhǔn)貯備液于4℃以下冷藏、密封、避光保存，保存期為1a。也可購買市售有證標(biāo)準(zhǔn)溶液，按標(biāo)準(zhǔn)溶液證書保存。5.17雙酚類化合物標(biāo)準(zhǔn)中間液(ρ=100μg/ml）準(zhǔn)確移取1.00ml雙酚類化合物標(biāo)準(zhǔn)貯備液（5.16）于10ml容量瓶中，用甲醇（5.5）定容至標(biāo)線，標(biāo)準(zhǔn)中間液于4℃以下，冷藏、密封、避光保存，保存期為6m。5.18雙酚類化合物標(biāo)準(zhǔn)使用液(ρ=10準(zhǔn)確移取1.00ml雙酚類化合物標(biāo)準(zhǔn)中間液（5.17）于10ml容量瓶中，用甲醇（5.5）定容至標(biāo)線，標(biāo)準(zhǔn)使用液于4℃以下，冷藏、密封、避光保存，保存期為6m。5.19石英濾膜：孔徑為0.45μm，使用前在400℃的馬弗爐中烘烤2h。5.20針頭過濾器：有機(jī)系，孔徑為0.45μm，經(jīng)甲醇（5.5）清洗晾干，確保沒有目標(biāo)物。5.21氮?dú)猓杭兌取?9.99%。6儀器和設(shè)備6.1采樣瓶：250ml，棕色細(xì)口玻璃瓶，配玻璃塞。使用前可用實(shí)驗(yàn)用水、丙酮（5.9）依次清洗。6.2高效液相色譜儀（HPLC）：配備熒光檢測(cè)器（FLD）。6.3色譜柱：填料粒徑5μm，柱長25cm，內(nèi)徑4.6mm的C18反相色譜柱，或其他等效色譜柱。6.4濃縮裝置：氮吹儀等性能相當(dāng)?shù)臐饪s裝置。6.5固相萃取裝置：自動(dòng)或手動(dòng)固相萃取儀，可連固相萃取柱。DB21/T4150—202536.6固相萃取柱：500mg/6ml，聚丙烯或者玻璃材質(zhì)，填料為C18或苯乙烯和二乙烯苯共聚物，或其他等效固相萃取柱。6.7玻璃注射器：5ml。6.9量筒：50ml、100ml、250ml。6.10玻璃燒杯：50ml、250ml。6.11容量瓶：10ml。6.12過濾裝置：配有砂芯濾器和真空泵，抽濾壓力勿超過-50kPa。6.13超聲波提取儀：超聲頻率不低于40kHz，具備水溫監(jiān)控功能，保證樣品充分接受超聲萃取。6.14一般實(shí)驗(yàn)室常用儀器和設(shè)備。7樣品7.1樣品的采集與保存按照HJ91.1、HJ91.2、HJ164、HJ493的相關(guān)規(guī)定進(jìn)行樣品采集和保存。用采樣瓶（6.1）采集樣品，如樣品中含有余氯，需向樣品中加入硫代硫酸鈉（5.2使樣品中硫代硫酸鈉的濃度為80mg/L，加鹽酸溶液（5.4）調(diào)節(jié)樣品pH值為1～2。樣品應(yīng)充滿采樣瓶（6.1）并加蓋密封，于4℃以下冷藏、避光保存，7d（168h）內(nèi)完成分析。每批次樣品應(yīng)至少采集1個(gè)全程序空白樣品，將250ml實(shí)驗(yàn)用水放入樣品瓶中密封，并帶到采樣現(xiàn)場(chǎng)，與采樣樣品瓶同時(shí)開蓋和密封，之后隨樣品運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室。7.2試樣的制備7.2.1過濾準(zhǔn)確量取250.0ml樣品經(jīng)石英濾膜（5.19）過濾，濾液置于250ml玻璃燒杯（6.10）中，全部用于固相萃取。過濾后的石英濾膜放入10ml玻璃管中，加入適量甲醇（5.5）使濾膜完全浸沒于甲醇中，超聲提取10min，將超聲提取液經(jīng)針頭過濾器（5.20）過濾后收集至濃縮瓶中。注：若樣品中不存在肉眼可見的懸浮物，無需過濾，準(zhǔn)確量取250ml7.2.2固相萃取7.2.2.1柱活化依次用5ml甲醇（5.5）和5ml實(shí)驗(yàn)用水活化固相萃取柱（6.6），在活化過程中，應(yīng)確保固相萃取柱中填料表面不露出液面。7.2.2.2上樣將過濾后的樣品（7.2.1），以3ml/min～5ml/min的流速通過固相萃取柱。7.2.2.3淋洗DB21/T4150—20254上樣結(jié)束后，用10ml甲醇溶液（5.6）淋洗固相萃取柱（6.6），以去除固相萃取柱上的雜質(zhì)，棄去流出液，然后用氮?dú)猓?.21）吹干固相萃取柱。7.2.2.4洗脫以2ml/min～4ml/min的流速，分別用2ml甲醇（5.5）和5ml二氯甲烷（5.8）洗脫，收集洗脫液至濃縮瓶中。7.2.3濃縮將提取液（7.2.1）和洗脫液（7.2.2）合并后，用濃縮裝置（6.4）濃縮到0.5～1ml，加入3ml甲醇（5.5），再濃縮至約1ml，將溶劑完全置換為甲醇后，用甲醇（5.5）定容至1.0ml，用針頭過濾器（5.20）過濾后待測(cè)。7.3空白試樣的制備7.3.1實(shí)驗(yàn)室空白用實(shí)驗(yàn)用水代替樣品，按照與試樣的制備（7.2）相同的操作步驟，制備實(shí)驗(yàn)室空白試樣。7.3.2全程序空白全程序空白樣品（7.1），按照與試樣的制備（7.2）相同的操作步驟，制備全程序空白試樣。8分析步驟8.1色譜參考條件流動(dòng)相A：乙腈（5.7），流動(dòng)相B：實(shí)驗(yàn)用水；柱溫：30℃;進(jìn)樣體積：20μL；熒光檢測(cè)器：激發(fā)波長227nm，發(fā)射波長313nm；洗脫程序見表1。表1洗脫程序注：不具自動(dòng)清洗程序的儀器，可在10min后延長2～3min的清洗平衡時(shí)間。8.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立分別移取一定量的雙酚類化合物標(biāo)準(zhǔn)使用液（5.18），用甲醇（5.5）逐級(jí)稀釋，配制至少5個(gè)濃度點(diǎn)的標(biāo)準(zhǔn)系列，各組分質(zhì)量濃度分別為50.0μg/L、100μg/L、250μg/L、500μg/L、1000μg/L（此為參考濃度），按照色譜參考條件（8.1），由低濃度到高濃度依次進(jìn)樣，以目標(biāo)化合物濃度為橫坐標(biāo)，以峰面積（或峰高）為縱坐標(biāo)，建立熒光檢測(cè)器的標(biāo)準(zhǔn)曲線。8.3試樣的測(cè)定5將制備好的試樣(7.2),按照與繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線相同的測(cè)定條件(8.2)進(jìn)行測(cè)定。當(dāng)試樣濃度超出標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度范圍時(shí)，應(yīng)適當(dāng)稀釋后測(cè)定。8.4空白試驗(yàn)按照與試樣的測(cè)定(8.3)相同的步驟，進(jìn)行空白試樣(7.3)的測(cè)定。9結(jié)果計(jì)算與表示9.1定性分析根據(jù)樣品中目標(biāo)化合物與標(biāo)準(zhǔn)系列中目標(biāo)化合物的保留時(shí)間進(jìn)行定性。必要時(shí)可以用高效液相色譜-質(zhì)譜儀做進(jìn)一步確認(rèn)。在本文件規(guī)定的色譜參考條件(8.1)下，目標(biāo)化合物的標(biāo)準(zhǔn)色譜圖見圖1。22品6539.2結(jié)果計(jì)算樣品中目標(biāo)化合物的濃度，按照公式(1)進(jìn)行計(jì)算。式中：p——樣品中目標(biāo)化合物的濃度，μg/L;P?——由標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算所得的目標(biāo)化合物濃度，μg/L;V?——試樣的定容體積，ml;D——試樣的稀釋倍數(shù)。DB21/T4150—2025610準(zhǔn)確度10.1精密度3家實(shí)驗(yàn)室分別對(duì)加標(biāo)樣品進(jìn)行6次重復(fù)測(cè)定，加標(biāo)量分別為實(shí)驗(yàn)用水0.050μg、地下水0.200μg和工業(yè)廢水0.750μg。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為：1.7%～9.0%，0.30%～8.7%，0.20%～5.5%。實(shí)驗(yàn)室間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為：2.3%～16%，8.8%～16%，1.5%～9.6%。重復(fù)性限范圍分別為：0.01μg～0.01μg，0.02μg～0.0再現(xiàn)性限范圍分別為：0.01μg～0.02μg，0.精密度結(jié)果參見附錄B中表B.1。10.2正確度3家實(shí)驗(yàn)室分別對(duì)加標(biāo)樣品進(jìn)行6次重復(fù)測(cè)定，加標(biāo)量分別為實(shí)驗(yàn)用水0.050μg、地下水0.200μg、地表水0.500μg、生活污水0.500μg和工業(yè)廢水0.750μg。實(shí)驗(yàn)用水加標(biāo)回收率范圍為：71.3%～109%，加標(biāo)回收率最終值為95.0%±19.3%。地下水加標(biāo)回收率范圍為：70.2%～105%，加標(biāo)回收率最終值為89.7%±21.6%。地表水加標(biāo)回收率范圍為：72.5%～111%，加標(biāo)回收率最終值為92.6%±22.1%。生活污水加標(biāo)回收率范圍為：61.2%～107%，加標(biāo)回收率最終值為85.6%±25.5%。工業(yè)廢水加標(biāo)回收率范圍為：73.4%～101%，加標(biāo)回收率最終值為85.4%±15.1%。正確度結(jié)果參見附錄B中表B.2。11質(zhì)量保證和質(zhì)量控制11.1空白試驗(yàn)每20個(gè)樣品或每批次(≤20個(gè)樣品）應(yīng)至少測(cè)定1個(gè)實(shí)驗(yàn)室空白樣品和1個(gè)全程序空白樣品，測(cè)定結(jié)果應(yīng)小于方法檢出限。11.2標(biāo)準(zhǔn)曲線每批樣品應(yīng)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)應(yīng)≥0.999，否則應(yīng)查找原因，重新繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。每分析20個(gè)樣品或每批次(≤20個(gè)樣品）應(yīng)測(cè)定1個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線中間濃度點(diǎn)，其測(cè)定結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)曲線該點(diǎn)濃度的相對(duì)誤差應(yīng)在±20%以內(nèi)，否則應(yīng)重新繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。11.3平行樣測(cè)定每20個(gè)樣品或每批次(≤20個(gè)樣品）應(yīng)至少分析1個(gè)平行樣，平行樣的相對(duì)偏差應(yīng)在±20%以內(nèi)。11.4基體加標(biāo)每20個(gè)樣品或每批次(≤20個(gè)樣品）應(yīng)做1個(gè)基體加標(biāo)