1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物抓取與固定實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組與標(biāo)記實(shí)驗(yàn)動(dòng)物被毛去除方法實(shí)驗(yàn)動(dòng)物給藥實(shí)驗(yàn)動(dòng)物麻醉實(shí)驗(yàn)動(dòng)物取血實(shí)驗(yàn)動(dòng)物處死2一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物抓取與固定31.小鼠的抓取保定抓?。河沂肿プ∈笪膊⑻崞穑研∈笾糜诨\蓋或其他粗糙面上，向前方輕拉左手拇指和食指捏住其兩耳和頸部皮膚右手拉緊小鼠尾部，拉直鼠身，左手無名指和小指壓緊尾巴和后肢，中指和手掌心夾住背部皮膚，使小鼠呈一直線保定：四肢及門牙用棉線固定在解剖臺(tái)上41.小鼠的抓取保定抓?。河沂肿プ∈笪膊⑻崞穑研∈笾糜诨\蓋或其他粗糙面上，向前方輕拉左手拇指和食指捏住其兩耳和頸部皮膚右手拉緊小鼠尾部，拉直鼠身，左手無名指和小指壓緊尾巴和后肢，中指和手掌心夾住背部皮膚，使小鼠呈一直線保定：四肢及門牙用棉線固定在解剖臺(tái)上52.大鼠的抓取保定抓?。焊就∈笥沂肿プ∈笪膊⑻崞穑汛笫笾糜诨\蓋或其他粗糙面上，向前方輕拉左手順序按卡大鼠背部，稍加壓力向頭部滑行，拇指和食指捏住其兩耳和頸部皮膚右手拉緊大鼠尾部，拉直鼠身，左手其余三指固定背部皮膚在大魚際肌上保定：同小鼠63.豚鼠的抓取保定抓?。鹤笫州p輕扣、按住豚鼠背部，順勢抓住其肩胛上方皮膚，拇指和食指環(huán)握頸部右手托住其臀部抓取時(shí)必須快、準(zhǔn)、穩(wěn)、柔74.家兔的抓取保定84.家兔的抓取保定9二、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組與標(biāo)記1.分組：分組原那么--隨機(jī)分組每只動(dòng)物都有同等時(shí)機(jī)被分配到各個(gè)實(shí)驗(yàn)組中去，防止人為因素對(duì)實(shí)驗(yàn)造成影響。建立對(duì)照組10分組原那么--隨機(jī)分組(1)完全隨機(jī)分組：將全部動(dòng)物編號(hào)從隨機(jī)數(shù)表中任取一段隨機(jī)數(shù)字，給各個(gè)動(dòng)物依次配號(hào)按所配數(shù)字的奇偶〔兩組〕或除以組數(shù)后的余數(shù)〔兩組以上〕作為歸入的組次分組最后隨機(jī)調(diào)整，使各組的動(dòng)物數(shù)到達(dá)均等11完全隨機(jī)分組--如小鼠20只，分甲、乙兩組小鼠編為1號(hào)～20號(hào)隨機(jī)數(shù)表中取出20個(gè)隨機(jī)數(shù)依次分配給1～20號(hào)動(dòng)物設(shè)單數(shù)為甲組，雙數(shù)為乙組〔下表〕，結(jié)果甲組9只，乙組11只動(dòng)物編號(hào)1234567891011121314151617181920隨機(jī)數(shù)0347437386369647366168343013705574307712組別甲甲甲甲乙乙乙甲乙甲乙乙乙甲乙甲乙乙甲乙分組原那么--隨機(jī)分組(1)12完全隨機(jī)分組--如小鼠20只，分甲、乙兩組小鼠編為1號(hào)～20號(hào)隨機(jī)數(shù)表中取出20個(gè)隨機(jī)數(shù)依次分配給1～20號(hào)動(dòng)物設(shè)單數(shù)為甲組，雙數(shù)為乙組〔表1-3-2〕，結(jié)果甲組9只，乙組11只再查隨機(jī)數(shù)表的第21個(gè)數(shù)為13，將13÷11＝1余2。那么將乙組中的第二位〔6號(hào)動(dòng)物〕取出給甲組。假設(shè)差數(shù)﹥2，可依次法調(diào)整直至兩組動(dòng)物數(shù)相等。分組原那么--隨機(jī)分組(1)13簡化隨機(jī)分組--實(shí)際工作中從隨機(jī)數(shù)表中的任一數(shù)字開始順序取數(shù)，把取得的隨機(jī)數(shù)除以組數(shù)，將所得余數(shù)作為這一輪開始分配的組次，從該組開始順序分配一只再取下一個(gè)隨機(jī)數(shù)，除以組數(shù)，所得余數(shù)作為下一輪分配開始的組次，順序分配每組一只，直到分完為止。分組原那么--隨機(jī)分組(2)14空白對(duì)照--不加任何處理，排除動(dòng)物本身的影響實(shí)驗(yàn)對(duì)照--實(shí)驗(yàn)條件對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照--標(biāo)準(zhǔn)值對(duì)照〔陽性對(duì)照〕自身對(duì)照--自身前后對(duì)照相互對(duì)照--各實(shí)驗(yàn)組相互對(duì)照建立對(duì)照組15目的--將同種動(dòng)物進(jìn)行區(qū)別，以便于觀察。要求--編號(hào)方法不對(duì)動(dòng)物生理或?qū)嶒?yàn)反響產(chǎn)生影響，且號(hào)碼清楚、易認(rèn)和耐久。常用方法：染色法耳孔法烙印法掛牌法2.標(biāo)記編號(hào)16用化學(xué)藥品在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物身體明顯部位涂染，以染色部位、顏色標(biāo)記區(qū)分實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。缺點(diǎn)：長時(shí)間使用，染色劑會(huì)自行褪色，需不斷補(bǔ)充和加深染色--慢性實(shí)驗(yàn)不適用染色劑的毒性對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的影響適用動(dòng)物--大、小鼠染色法173%～5%苦味酸，染成黃色0.5%中性紅或品紅溶液，染成紅色2%硝酸銀溶液，染成咖啡色煤焦油酒精溶液，染成黑色染色法--常用染色劑18單色涂染法：單一顏色的染色劑涂染涂染順序：從左到右，從上到下適用于每組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物不超過10只染色法--染色方法19雙色涂染法：兩種顏色同時(shí)染色標(biāo)記，一種標(biāo)記為個(gè)位數(shù)，另一種標(biāo)記為十位數(shù)涂染方法同單色涂染法可標(biāo)記100位以內(nèi)的號(hào)碼直接標(biāo)號(hào)法：染色劑直接在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物身上編寫號(hào)碼實(shí)驗(yàn)動(dòng)物太小或號(hào)碼位數(shù)太多不適宜染色法--染色方法20用打孔機(jī)直接在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的耳朵上打孔編號(hào)，根據(jù)打在動(dòng)物耳朵上的部位和孔的多少來區(qū)分實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。打孔后須用消毒過的滑石粉抹在打孔局部，以免傷口愈合將耳孔閉合。也可用剪刀在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的耳廓上剪缺口的方法來區(qū)分實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。適用動(dòng)物--家兔耳孔法21用打孔機(jī)直接在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的耳朵上打孔編號(hào)，根據(jù)打在動(dòng)物耳朵上的部位和孔的多少來區(qū)分實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。打孔后須用消毒過的滑石粉抹在打孔局部，以免傷口愈合將耳孔閉合。也可用剪刀在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的耳廓上剪缺口的方法來區(qū)分實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。適用動(dòng)物--家兔耳孔法22直接把標(biāo)記編號(hào)烙印在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物身上，如蓋印章一樣，用來區(qū)別實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。適用動(dòng)物--犬烙印法23將編好的號(hào)碼烙印在金屬牌上，掛在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物頸部、耳部、肢體或籠具上，用來區(qū)別實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。適用動(dòng)物--犬、猴和貓掛牌法24三、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物被毛去除方法目的：去除實(shí)驗(yàn)操作局部的被毛，可防止影響實(shí)驗(yàn)操作和觀察。常用被毛去除方法：拔毛法剪毛法剃毛法脫毛法251.拔毛法方法：固定動(dòng)物后，用食指和拇指將暴露部位的毛拔去。優(yōu)點(diǎn)：刺激局部組織產(chǎn)生擴(kuò)張血管的作用采用部位：血管暴露，進(jìn)行采血或動(dòng)、靜脈穿刺，如兔耳緣靜脈、鼠尾靜脈采血262.剪毛法273.剃毛法284.脫毛法29四、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物給藥灌胃皮下注射靜脈注射腹腔注射301.灌胃準(zhǔn)備：連接灌胃針的注射器吸入待灌藥液311.灌胃準(zhǔn)備：連接灌胃針的注射器吸入待灌藥液過程：一手固定動(dòng)物，并使體位為頭高位一手持注射器，將灌胃針從動(dòng)物口角插入，并緊貼上腭，經(jīng)咽后壁插入至預(yù)定深度深度：小鼠3cm，大鼠5cm灌胃量：小鼠0.01～0.03ml/g

，大鼠0.01～0.02ml/g

321.灌胃準(zhǔn)備：連接灌胃針的注射器吸入待灌藥液過程：一手固定動(dòng)物，并使體位為頭高位一手持注射器，將灌胃針從動(dòng)物口角插入，并緊貼上腭，經(jīng)咽后壁插入至預(yù)定深度深度：小鼠3cm，大鼠5cm灌胃量：小鼠0.01～0.03ml/g

，大鼠0.01～0.02ml/g

332.皮下注射準(zhǔn)備：注射器吸入待注射藥液過程：局部皮膚消毒〔背部〕一手拇指和中指將背部皮膚提起，食指輕按其皮膚，使其形成一個(gè)三角小窩一手持注射器從三角窩下部刺入皮下，輕輕擺動(dòng)針頭，易搖動(dòng)說明針尖在皮下，回抽無血后注入藥液拔針時(shí)左手捏住針刺部位片刻，防止藥液流出注射量：小鼠0.01ml/g，大鼠0.01～0.03ml/g343.靜脈注射〔尾靜脈〕準(zhǔn)備：全新注射器吸入待注射藥液動(dòng)物固定在固定器中，并露出尾巴用45℃～50℃的溫水浸泡尾部半分鐘或用75%的酒精棉球擦拭尾部，使血管擴(kuò)張充血、表皮角質(zhì)軟化353.靜脈注射〔尾靜脈〕準(zhǔn)備：過程：(1)一手拇指與食指捏住尾部兩側(cè)，中指從下托起尾巴，無名指和小指夾持尾尖部一手持注射器使針頭與靜脈平行〔小于30°角〕刺入，推動(dòng)藥液無阻力、無皮丘，可注入藥液注射完畢后尾部向注射側(cè)彎曲或以消毒棉簽止血363.靜脈注射〔尾靜脈〕準(zhǔn)備：過程：(1)一手拇指與食指捏住尾部兩側(cè)，中指從下托起尾巴，無名指和小指夾持尾尖部一手持注射器使針頭與靜脈平行〔小于30°角〕刺入，推動(dòng)藥液無阻力、無皮丘，可注入藥液注射完畢后尾部向注射側(cè)彎曲或以消毒棉簽止血373.靜脈注射〔尾靜脈〕準(zhǔn)備：過程：(2)一手食指與中指從下托起尾巴，無名指和小指夾持尾尖部,拇指輕按尾部383.靜脈注射〔尾靜脈〕準(zhǔn)備：過程：注射量：0.005～0.01ml/g

394.腹腔注射準(zhǔn)備：注射器吸入待注射藥液過程：一手固定動(dòng)物，腹部向上，且呈頭低位404.腹腔注射準(zhǔn)備：注射器吸入待注射藥液過程：一手固定動(dòng)物，腹部向上，且呈頭低位局部皮膚消毒一手持注射器刺入下腹部皮下，針頭向前推進(jìn)3mm后，注射針頭與皮膚面呈45°角刺入腹肌414.腹腔注射準(zhǔn)備：注射器吸入待注射藥液過程：一手固定動(dòng)物，腹部向上，且呈頭低位局部皮膚消毒一手持注射器刺入下腹部皮下，針頭向前推進(jìn)3mm后，注射針頭與皮膚面呈45°角刺入腹肌424.腹腔注射準(zhǔn)備：注射器吸入待注射藥液過程：一手固定動(dòng)物，腹部向上，且呈頭低位局部皮膚消毒一手持注射器刺入下腹部皮下，針頭向前推進(jìn)3mm后，注射針頭與皮膚面呈45°角刺入腹肌434.腹腔注射準(zhǔn)備：注射器吸入待注射藥液過程：一手固定動(dòng)物，腹部向上，且呈頭低位局部皮膚消毒一手持注射器刺入下腹部皮下，針頭向前推進(jìn)3mm后，注射針頭與皮膚面呈45°角刺入腹肌注射量：0.01～0.02ml/g

44五、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物麻醉45五、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物麻醉麻醉藥物濃度動(dòng)物給藥方法劑量（g/kg）維持時(shí)間（h）備注乙醚各種動(dòng)物持續(xù)吸入實(shí)驗(yàn)決定戊巴比妥鈉3%兔、狗、貓iv、ip0.032～4sc0.052～42%小鼠、大鼠ip0.042～4豚鼠ip0.042～4硫噴妥鈉5%兔、狗、貓iv0.0215～30min呼吸抑制較嚴(yán)重，注射必須緩慢ip0.0415～30min2%小鼠、大鼠ip0.0415～30min氨基甲酸乙酯20%兔、狗、貓iv、ip1.002～4毒性較小，安全10%小鼠、大鼠ip1.002～4豚鼠ip1.002～4蛙淋巴囊2.002～4氨基甲酸乙酯+氯醛糖10%+1%兔、貓、大鼠iv、ip0.5+0.0556安全，肌松不完全46六、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物取血剪尾取血法眼眶動(dòng)脈和靜脈取血法頸動(dòng)脈及靜脈、股動(dòng)脈及靜脈取血法斷頭取血法471.剪尾取血法過程：動(dòng)物固定并露出尾巴用45℃～50℃的溫水浸泡尾部半分鐘或用75%的酒精棉球擦拭尾部，使血管擴(kuò)張充血用剪刀剪斷尾尖或鋒利刀片切割一段尾靜脈，即可流出。用手輕輕地從尾根部向尾尖擠捏，可取到更多的血液。取血量：0.3～0.5ml/次

482.眼眶動(dòng)脈和靜脈取血法過程：一手將鼠倒置固定，且用拇指和食指捏緊頭頸部皮膚，使鼠眼球突出。一手持眼科彎鑷或止血鉗，鉗夾一側(cè)眼球根部，將眼球摘出，并用鑷子頭部捅破眼球后包膜，將血滴入玻璃管內(nèi)，直至流血停止取血量：體重4%～5%血液量

493.頸動(dòng)靜脈、股動(dòng)靜脈取血法過程：一手將鼠麻醉仰臥固定，別離暴露出上述血管一手持注射針沿動(dòng)脈或靜脈走向平行刺入血管，抽取所需血量取血量：小鼠抽血0.6ml/20g大鼠抽血8ml/300g504.斷頭取血法準(zhǔn)備：實(shí)驗(yàn)者帶上厚手套過程：一手拇指和食指抓緊鼠頸部位皮膚，并將動(dòng)物頭朝下一手持剪刀，剪掉鼠頸部，讓血流入試管內(nèi)取血量：小鼠抽血0.8～1.2ml

大鼠抽血5～10ml51七、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物處死和器官剖解實(shí)驗(yàn)動(dòng)物處死目的：發(fā)揚(yáng)人道主義精神，保護(hù)和藹待動(dòng)物--實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，應(yīng)讓動(dòng)物無痛苦地死亡或盡量減少死亡的痛苦。小鼠和大鼠的處死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物器官剖解小鼠和大鼠器官剖解521.小鼠和大鼠處死頸椎脫臼法：用攝子或用左手拇指與食指向下壓住鼠頭部枕骨處，另一只手抓住鼠尾用力向后拉，使之頸椎脫臼，鼠立即死亡。斷頭法：在鼠頸部用剪刀快速將鼠頭剪掉，鼠因斷頭和大出血而死。打擊法：用手抓住鼠尾并提起，將其頭部猛擊地面，或用小木錘用力敲擊鼠頭，使鼠致死。過量麻醉法：快速過量注射麻醉藥〔麻醉時(shí)的30倍〕532.小鼠和大鼠器官剖解時(shí)間：處死后應(yīng)立即剖解，越早越好，最好在處死后2～3min內(nèi)解剖器官。

體位：以仰臥位固定動(dòng)物尸體

順序：先腹腔后胸腔，再腦、脊髓、骨髓和皮膚肌肉等

54腹腔器官55胸腔器官用鑷子夾住胸骨劍突，剪斷膈肌與胸骨的連接，提起胸骨，在胸椎兩側(cè)分別剪斷左、右側(cè)胸壁的肋骨，取下整個(gè)胸壁，依次取出胸腺和心臟。將下頜的兩下頜支內(nèi)側(cè)與舌連接的肌肉切斷，將咽、喉、氣管、食管與周圍組織別離，用鑷子夾住氣管向上提起，剪斷肺與胸膜的連接韌帶，然后將咽、喉、氣管、食管邊同整個(gè)肺一并取出。56顱腔及腦小動(dòng)物：從枕骨剪開顱骨，小心剪去顱頂骨片，暴露大腦、小腦和延髓。大動(dòng)物：可用弓形鋸沿眉弓至枕外隆凸上0.5cm連線