學(xué)而優(yōu)·教有方PAGEPAGE11.2.2微生物的選擇培養(yǎng)和計(jì)數(shù)【能力提升】題組一微生物的計(jì)數(shù)方法1.(2021山東泰安新泰一中高二期中,)下列有關(guān)稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)和顯微鏡直接計(jì)數(shù)法的描述不正確的是 ()A.利用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)屬于顯微鏡直接計(jì)數(shù)法,其缺點(diǎn)是不能區(qū)分死菌與活菌B.兩種計(jì)數(shù)方法,其統(tǒng)計(jì)值與實(shí)際值相比均有差異,但差異原因不同C.兩種計(jì)數(shù)方法均能在計(jì)數(shù)的同時(shí)能觀察到所研究微生物的形態(tài)特征D.當(dāng)菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí),一般選取菌落數(shù)在30~300的且差異不大的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)2.(2021江蘇泰州高三期末,)研究小組利用稀釋涂布平板法來(lái)估測(cè)大腸桿菌的數(shù)量,每一個(gè)濃度涂布四個(gè)平板。下列關(guān)于操作步驟的敘述正確的是 ()A.因?yàn)閷?shí)驗(yàn)前后形成對(duì)照,因此本實(shí)驗(yàn)不必設(shè)置空白對(duì)照組B.涂布前將沾有少量酒精的涂布器引燃,待涂布器冷卻后再涂布C.為避免混淆應(yīng)在培養(yǎng)皿的皿蓋上做標(biāo)記,并將培養(yǎng)皿倒置培養(yǎng)D.用此法估測(cè)的數(shù)值往往偏小,故應(yīng)以菌落數(shù)最多平板計(jì)數(shù)為準(zhǔn)題組二微生物的選擇培養(yǎng)3.(2021遼寧鐵嶺六校高二聯(lián)考,)某科研人員欲從被石油污染的土壤中分離獲得能降解石油成分“多環(huán)芳烴菲”的菌株X,為消除石油污染提供微生物資源。下列敘述錯(cuò)誤的是 ()A.若圖中A~C以“多環(huán)芳烴菲”為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng),可提高降解菌的濃度B.本實(shí)驗(yàn)用到的固體培養(yǎng)基在接種前是不透明的,周?chē)型该魅Φ木浼礊槟康木銫.在接種前,可將滅菌后的空白平板先培養(yǎng)一段時(shí)間,目的是檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格D.可用平板劃線法或稀釋涂布平板法對(duì)分離出的菌種進(jìn)行純化并計(jì)數(shù)4.(2021遼寧朝陽(yáng)高三月考,)大腸桿菌含量是國(guó)家飲用水重要檢測(cè)指標(biāo)之一,如圖所示,用濾膜法和伊紅—亞甲藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基(EMB培養(yǎng)基)測(cè)定水中大腸桿菌含量的大致流程為準(zhǔn)備工作→用濾膜過(guò)濾待測(cè)水樣→將濾膜轉(zhuǎn)移到EMB培養(yǎng)基上→培養(yǎng)→觀察并統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目。下列敘述正確的是 ()伊紅—亞甲藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基配方基礎(chǔ)培養(yǎng)基 100mL20%乳糖溶液 2mL2%伊紅水溶液 2mL0.5%亞甲藍(lán)水溶液 1mL瓊脂 1.5gA.EMB培養(yǎng)基從用途來(lái)分屬于選擇培養(yǎng)基B.配方的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中除水外還必須含有無(wú)機(jī)鹽和碳源C.觀察并統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目時(shí),應(yīng)選擇培養(yǎng)基上的深紫色菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)D.選用濾膜孔徑的大小不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果5.(不定項(xiàng))(2021山東濟(jì)南外國(guó)語(yǔ)學(xué)校高三月考,)營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株是野生型菌株經(jīng)過(guò)人工誘變或自發(fā)突變失去合成某種成長(zhǎng)因子的能力,只能在補(bǔ)充了相應(yīng)的生長(zhǎng)因子的基本培養(yǎng)基中才能正常生長(zhǎng)的變異菌株。某研究小組對(duì)酵母菌用紫外線照射后將其接種到甲培養(yǎng)皿的培養(yǎng)基上,一段時(shí)間后將甲培養(yǎng)皿的菌落影印接種(不改變菌落位置)到乙、丙兩培養(yǎng)皿的培養(yǎng)基中,進(jìn)一步培養(yǎng)得到如圖所示結(jié)果。下列分析正確的是 ()A.接種到甲培養(yǎng)皿采用的是稀釋涂布平板法B.甲、丙兩培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基是基本培養(yǎng)基C.甲培養(yǎng)皿中菌落數(shù)有可能比接種的酵母菌數(shù)少D.甲、乙、丙三個(gè)培養(yǎng)皿都可能存在營(yíng)養(yǎng)缺陷型6.(2021四川成都七中高二期中,)某種物質(zhì)S(一種含氮有機(jī)物)難以降解,會(huì)對(duì)環(huán)境造成污染,只有某些細(xì)菌能降解S。研究人員按照如圖1所示流程從淤泥中分離得到能高效降解S的細(xì)菌菌株。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需要Ⅰ、Ⅱ兩種培養(yǎng)基,Ⅰ的組分為無(wú)機(jī)鹽、水和S,Ⅱ的組分為無(wú)機(jī)鹽、水、S和Y?；卮鹣铝袉?wèn)題:(1)實(shí)驗(yàn)中,盛有水或培養(yǎng)基的搖瓶通常采用進(jìn)行滅菌。Ⅱ培養(yǎng)基中的Y物質(zhì)是。Ⅰ、Ⅱ培養(yǎng)基均屬于培養(yǎng)基。

(2)實(shí)驗(yàn)中初步估測(cè)搖瓶M中細(xì)菌細(xì)胞數(shù)為2×107個(gè)/mL,若要在每個(gè)平板上涂布0.1mL稀釋后的菌液,且保證每個(gè)平板上長(zhǎng)出的菌落數(shù)不超過(guò)200個(gè),則至少應(yīng)將搖瓶M中的菌液稀釋倍。

(3)物質(zhì)S在培養(yǎng)基中達(dá)到一定量時(shí)培養(yǎng)基表現(xiàn)為不透明。從淤泥中分離目標(biāo)菌的過(guò)程中,發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上甲、乙兩種細(xì)菌都能生長(zhǎng)并形成菌落(如圖2所示)。如果要得到目標(biāo)菌,應(yīng)該選擇菌落進(jìn)一步純化,選擇的依據(jù)是。

(4)淤泥中的某些微生物可以利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈?。若要設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步確定甲菌能否利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈?請(qǐng)簡(jiǎn)要寫(xiě)出實(shí)驗(yàn)思路、預(yù)期結(jié)果和結(jié)論,即。

參考答案與解析【能力提升】1.C2.B3.D4.C5.AC1.C顯微鏡直接計(jì)數(shù)法無(wú)法區(qū)分死菌和活菌,A正確;稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)時(shí),當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起時(shí),平板上觀察到的往往是一個(gè)菌落,故而統(tǒng)計(jì)值比實(shí)際值偏小,顯微鏡直接計(jì)數(shù)時(shí)不能區(qū)分死菌和活菌,故統(tǒng)計(jì)值大于實(shí)際值,因此兩種計(jì)數(shù)方法,其統(tǒng)計(jì)值與實(shí)際值相比均有差異,但差異原因不同,B正確;稀釋涂布平板法觀察到的是菌落的形態(tài)特征,而不是微生物的形態(tài)特征,顯微鏡直接計(jì)數(shù)法觀察到的是微生物的形態(tài)特征,C錯(cuò)誤;當(dāng)菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí),一般選取菌落數(shù)在30~300的且差異不大的平板進(jìn)行計(jì)數(shù),D正確。2.B該實(shí)驗(yàn)需要一個(gè)空白平板作對(duì)照,可以判斷平板是否被雜菌污染,A錯(cuò)誤;涂布器滅菌時(shí),將沾有少量酒精的涂布器放在火焰上灼燒,待酒精燃盡、涂布器冷卻后,再進(jìn)行涂布,B正確;應(yīng)在培養(yǎng)皿的皿底上做標(biāo)記,因?yàn)槿绻麡?biāo)記在皿蓋上,培養(yǎng)皿倒置后標(biāo)記就看不到了,C錯(cuò)誤;當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí),平板上觀察到的只是一個(gè)菌落,因此統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目少,一般選擇菌落數(shù)在30~300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù),密度過(guò)大會(huì)使計(jì)數(shù)結(jié)果偏小,影響結(jié)果的準(zhǔn)確性,D錯(cuò)誤。3.D步驟A~C應(yīng)為選擇培養(yǎng),分離獲得能降解石油成分“多環(huán)芳烴菲”的菌株X,培養(yǎng)液中加入多環(huán)芳烴菲作為唯一碳源,可提高降解菌的濃度,A正確;固體培養(yǎng)基接種前是不透明的,原因是培養(yǎng)基中含“多環(huán)芳烴菲”,當(dāng)“多環(huán)芳烴菲”被降解后,培養(yǎng)基會(huì)變透明,所以其中有透明圈的菌落即為目的菌落,B正確;在接種前,隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先培養(yǎng)一段時(shí)間,目的是檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格,C正確;平板劃線法不用于對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù),D錯(cuò)誤。4.CEMB培養(yǎng)基從用途來(lái)分屬于鑒別培養(yǎng)基,A錯(cuò)誤;配方的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中除水外還必須含有無(wú)機(jī)鹽和氮源,乳糖可作為碳源,B錯(cuò)誤;大腸桿菌在EMB培養(yǎng)基上可呈深紫色,并有金屬光澤,觀察并統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目時(shí),應(yīng)選擇培養(yǎng)基上的深紫色菌落進(jìn)行計(jì)數(shù),C正確;選用濾膜孔徑過(guò)大可能會(huì)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果比實(shí)際值偏小,D錯(cuò)誤。5.AC甲培養(yǎng)皿的菌落均勻分布,接種方法應(yīng)為稀釋涂布平板法,A正確;甲、丙兩培養(yǎng)皿中包括野生酵母菌菌株和某種營(yíng)養(yǎng)缺陷型酵母菌菌株,乙培養(yǎng)皿中是野生型酵母菌菌株,乙培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基是基本培養(yǎng)基,甲和丙培養(yǎng)皿中是加入了同種營(yíng)養(yǎng)成分的培養(yǎng)基,B錯(cuò)誤;由于基因突變具有不定向性,接種到甲培養(yǎng)皿的酵母菌可能還有其他營(yíng)養(yǎng)缺陷型,且有些菌落不一定由一個(gè)酵母菌形成,所以,甲培養(yǎng)皿中菌落數(shù)有可能比接種的酵母菌數(shù)少,C正確;乙培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基是基本培養(yǎng)基,形成的菌落只可能是野生型酵母菌菌落,D錯(cuò)誤。6.答案(1)高壓蒸汽瓊脂選擇(2)104(3)乙乙菌落周?chē)霈F(xiàn)透明圈,說(shuō)明乙菌能降解S(4)將甲菌接種在不含氮源的培養(yǎng)基上,若甲菌能生長(zhǎng),則說(shuō)明該細(xì)菌能利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈唇馕?1)實(shí)驗(yàn)中,盛有水或培養(yǎng)基的搖瓶通常采用高壓蒸汽進(jìn)行滅菌。Ⅱ培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基,因此,Ⅱ培養(yǎng)基中的Y物質(zhì)是瓊脂。Ⅰ、Ⅱ培養(yǎng)基均以物質(zhì)S為唯一的氮源,屬于選擇培養(yǎng)基。(2)利用稀釋涂布平板法對(duì)細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù),要保證每個(gè)平板上長(zhǎng)出的菌落數(shù)不超過(guò)200,假設(shè)稀釋倍數(shù)為a,在每個(gè)平板上涂布0.1mL稀釋后的菌液,則有200×a÷0.1=2×107,則稀釋倍數(shù)a=104,即至少應(yīng)將搖瓶M中的菌液稀釋104倍。(3)物質(zhì)S在培養(yǎng)基中達(dá)到一定量時(shí)培養(yǎng)基表現(xiàn)為不透明。據(jù)此可推測(cè),隨著物質(zhì)S被降解,菌落周?chē)鷳?yīng)會(huì)出現(xiàn)透明圈,且透明圈越大,細(xì)菌分解物質(zhì)S的能力越強(qiáng),據(jù)圖2可知,如果要得到目標(biāo)菌,應(yīng)該