2025年醫(yī)療器械無菌檢驗培訓考核試題（含答案）一、單項選擇題（每題2分，共30分）1.根據(jù)《中國藥典》2020年版四部1101無菌檢查法要求，無菌檢驗應在（）環(huán)境下進行。A.非潔凈區(qū)B.B級背景下的A級潔凈區(qū)C.C級潔凈區(qū)D.D級潔凈區(qū)2.無菌檢驗中，需氧-厭氧培養(yǎng)基的常用名稱是（）。A.胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基（TSB）B.沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基（SDB）C.硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基（FTM）D.營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基3.以下哪種微生物不能作為無菌檢驗陽性對照菌？（）A.金黃色葡萄球菌（ATCC6538）B.枯草芽孢桿菌（ATCC9372）C.白色念珠菌（ATCC10231）D.大腸埃希菌（ATCC8739）4.無菌檢驗中，供試品接種量的一般要求是（）。A.每管培養(yǎng)基接種量≤1g或1mLB.每管培養(yǎng)基接種量≤10g或10mLC.每管培養(yǎng)基接種量≤20g或20mLD.每管培養(yǎng)基接種量≤50g或50mL5.無菌檢查時，若供試品具有抑菌性，需采用（）方法消除干擾。A.增加培養(yǎng)基體積B.稀釋法或中和法C.延長培養(yǎng)時間D.減少接種量6.無菌檢驗用培養(yǎng)箱的溫度驗證應至少包括（）。A.溫度均勻性和波動度B.濕度控制精度C.光照強度D.氣壓穩(wěn)定性7.以下哪項不屬于無菌檢驗前的準備工作？（）A.培養(yǎng)基靈敏度檢查B.超凈工作臺紫外消毒30分鐘C.操作人員手部消毒D.供試品外觀檢查8.無菌檢驗中，陰性對照的作用是（）。A.驗證供試品是否無菌B.驗證培養(yǎng)基是否被污染C.驗證操作環(huán)境是否符合要求D.驗證陽性對照菌的活性9.若供試品為液體，需通過（）方式轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)基中。A.直接傾倒B.無菌注射器抽取C.玻璃棒引流D.漏斗過濾10.無菌檢驗的培養(yǎng)時間通常為（）。A.3天B.5天C.7天D.14天11.以下哪種情況不會導致無菌檢查結(jié)果無效？（）A.陽性對照管未生長B.陰性對照管未生長C.操作過程中超凈工作臺風速異常D.培養(yǎng)基促生長試驗失敗12.無菌檢驗記錄應至少保存（）。A.1年B.3年C.5年D.10年13.對于植入性醫(yī)療器械，無菌檢驗的樣本量應至少為（）。A.1個/批B.3個/批C.5個/批D.10個/批14.無菌檢驗中，若供試品含防腐劑，需通過（）方法處理。A.離心后取沉淀B.過濾沖洗法C.超聲破碎D.高溫滅活15.以下關(guān)于無菌檢驗結(jié)果判定的描述，錯誤的是（）。A.所有培養(yǎng)管均未長菌，判為無菌B.陽性對照管長菌，陰性對照管未長菌，結(jié)果有效C.若僅有1管長菌，可直接判為不合格D.若長菌管需確認是否為污染菌，需進行菌株鑒定二、判斷題（每題2分，共20分。正確填“√”，錯誤填“×”）1.無菌檢驗可在普通實驗室進行，無需控制環(huán)境潔凈度。（）2.硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基主要用于真菌的培養(yǎng)。（）3.陽性對照菌的接種量應不超過100CFU/管。（）4.供試品若為固體，需先粉碎后再接種培養(yǎng)基。（）5.無菌檢驗中，操作人員需穿戴無菌工作服、口罩、手套，避免裸手接觸供試品。（）6.若培養(yǎng)基在培養(yǎng)前已出現(xiàn)渾濁，可繼續(xù)使用，不影響結(jié)果。（）7.無菌檢查失敗后，需對環(huán)境、人員、設備、培養(yǎng)基等進行偏差調(diào)查。（）8.植入性醫(yī)療器械的無菌檢驗需采用直接接種法，不可使用薄膜過濾法。（）9.無菌檢驗的培養(yǎng)溫度：需氧菌和厭氧菌為30~35℃，真菌為20~25℃。（）10.無菌檢驗記錄只需記錄結(jié)果，無需記錄操作過程中的異常情況。（）三、簡答題（每題8分，共40分）1.簡述無菌檢驗的核心原理。2.列舉無菌檢驗中需進行的3項關(guān)鍵驗證或確認項目，并說明其目的。3.說明陽性對照在無菌檢驗中的作用及操作要點。4.若無菌檢驗中發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基渾濁，可能的原因有哪些？應如何處理？5.簡述醫(yī)療器械無菌檢驗的完整操作流程（從樣本接收至結(jié)果判定）。四、案例分析題（10分）某企業(yè)對一批骨科植入鋼板進行無菌檢驗，操作過程如下：-環(huán)境：B級背景下的A級潔凈區(qū)，操作前超凈工作臺紫外消毒20分鐘，風速0.3m/s（標準要求0.35~0.5m/s）；-人員：操作人員穿戴普通白大褂，未戴口罩，手部用75%乙醇噴灑消毒；-供試品處理：鋼板直接放入硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基（FTM）和胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基（TSB），每管接種1塊；-培養(yǎng)：FTM和TSB均置于35℃培養(yǎng)箱，培養(yǎng)5天后觀察結(jié)果；-結(jié)果：FTM管出現(xiàn)渾濁，TSB管澄清，陽性對照管長菌，陰性對照管未長菌。問題：（1）分析操作過程中存在的不符合項；（2）判斷檢驗結(jié)果是否有效，并說明理由；（3）若結(jié)果無效，應采取哪些糾正措施？答案一、單項選擇題1.B（解析：無菌檢驗需在B級背景下的A級潔凈區(qū)進行，確保操作環(huán)境的微生物控制。）2.C（解析：硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基（FTM）用于需氧菌和厭氧菌培養(yǎng)，TSB用于真菌和需氧菌。）3.D（解析：大腸埃希菌為革蘭氏陰性菌，無菌檢驗陽性對照菌需選擇藥典規(guī)定的需氧菌、厭氧菌或真菌，如金葡菌、枯草芽孢桿菌、白色念珠菌。）4.A（解析：一般供試品接種量不超過1g或1mL/管，避免過量抑制微生物生長。）5.B（解析：抑菌性供試品需通過稀釋法（降低抑菌成分濃度）或中和法（添加中和劑）消除干擾。）6.A（解析：培養(yǎng)箱需驗證溫度均勻性（各點溫度差異）和波動度（溫度穩(wěn)定性），確保培養(yǎng)條件符合要求。）7.D（解析：供試品外觀檢查屬于入庫驗收，非無菌檢驗前的專項準備工作。）8.C（解析：陰性對照（未接種供試品的培養(yǎng)基）用于驗證操作環(huán)境、人員、設備是否引入污染。）9.B（解析：液體供試品需用無菌注射器抽取，避免污染。）10.C（解析：《中國藥典》規(guī)定無菌檢驗培養(yǎng)時間為14天，但部分醫(yī)療器械標準可縮短至7天，本題默認藥典要求。）11.B（解析：陰性對照未生長說明無外源性污染，結(jié)果有效；陽性對照未生長說明培養(yǎng)基或操作異常，結(jié)果無效。）12.C（解析：根據(jù)《醫(yī)療器械生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》，檢驗記錄至少保存5年。）13.B（解析：植入性醫(yī)療器械樣本量至少3個/批，確保代表性。）14.B（解析：含防腐劑的供試品需用薄膜過濾法沖洗，去除防腐劑干擾。）15.C（解析：若僅有1管長菌，需確認是否為污染菌（如與陰性對照比較、菌株鑒定），不能直接判不合格。）二、判斷題1.×（需在B級背景下的A級潔凈區(qū)進行。）2.×（FTM用于需氧菌和厭氧菌，SDB用于真菌。）3.√（陽性對照菌接種量≤100CFU/管，避免過量影響結(jié)果判斷。）4.×（固體供試品需先無菌粉碎或溶解，不可直接整塊接種。）5.√（需穿戴無菌服、口罩、手套，避免人體脫落菌污染。）6.×（培養(yǎng)基渾濁可能已被污染，需廢棄并更換。）7.√（失敗后需調(diào)查偏差根源，如環(huán)境、人員、設備等。）8.×（植入性器械若體積大，可采用薄膜過濾法，需驗證方法適用性。）9.√（需氧/厭氧菌30~35℃，真菌20~25℃，符合藥典要求。）10.×（記錄需包含操作過程、異常情況及處理措施。）三、簡答題1.無菌檢驗的核心原理：通過將供試品接種于適合需氧菌、厭氧菌和真菌生長的培養(yǎng)基中，在適宜溫度下培養(yǎng)足夠時間（通常14天），觀察培養(yǎng)基是否渾濁或出現(xiàn)菌膜等微生物生長跡象。若所有培養(yǎng)基均未顯示微生物生長，則判定供試品無菌；若有生長，需確認是否為污染菌，最終判定是否符合無菌要求。2.關(guān)鍵驗證或確認項目及目的：（1）培養(yǎng)基靈敏度檢查：驗證培養(yǎng)基支持微生物生長的能力，確保培養(yǎng)基質(zhì)量符合要求；（2）方法適用性試驗（挑戰(zhàn)試驗）：確認所選無菌檢查方法（如直接接種法、薄膜過濾法）對供試品的有效性，特別是針對有抑菌性的供試品；（3）環(huán)境監(jiān)測（沉降菌、浮游菌、表面微生物）：確認操作環(huán)境的潔凈度符合B級背景下A級區(qū)的要求，避免環(huán)境微生物污染供試品或培養(yǎng)基。3.陽性對照的作用及操作要點：作用：驗證培養(yǎng)基的促生長能力、操作過程的有效性（如接種方法是否正確），確保檢驗系統(tǒng)（培養(yǎng)基、環(huán)境、人員）處于正常狀態(tài)。若陽性對照未生長，說明檢驗系統(tǒng)失效，結(jié)果無效。操作要點：-選擇藥典規(guī)定的陽性菌（如金葡菌、枯草芽孢桿菌、白色念珠菌）；-接種量≤100CFU/管，避免過量導致假陽性；-與供試品同時接種、培養(yǎng)，條件一致；-若為薄膜過濾法，需將陽性菌接種于濾膜上，與供試品處理步驟一致。4.培養(yǎng)基渾濁的可能原因及處理：可能原因：-供試品本身帶菌（真陽性）；-操作過程中污染（如環(huán)境、人員、設備引入雜菌）；-培養(yǎng)基本身被污染（如滅菌不徹底或保存不當）；-供試品與培養(yǎng)基反應產(chǎn)生沉淀（非微生物生長）。處理措施：-首先檢查陰性對照管：若陰性對照管渾濁，說明操作污染，結(jié)果無效，需重新檢驗；-若陰性對照管澄清，取渾濁管的培養(yǎng)物進行涂片染色鏡檢，觀察是否有微生物；-若鏡檢陽性，需進行菌株鑒定（如革蘭氏染色、生化試驗），判斷是否為污染菌（如與環(huán)境監(jiān)測菌屬一致）；-若確認是供試品帶菌，判為不合格；若為污染菌，需調(diào)查污染來源并重新檢驗。5.完整操作流程：（1）樣本接收：核對樣品信息（名稱、批號、數(shù)量、規(guī)格），檢查包裝完整性，確認未啟封；（2）前處理：根據(jù)供試品特性（固體、液體、是否含抑菌成分）選擇方法（直接接種法或薄膜過濾法），需抑菌處理的供試品進行稀釋或中和；（3）環(huán)境準備：開啟超凈工作臺或隔離器，紫外消毒30分鐘，檢測風速、沉降菌等環(huán)境指標，確認符合A級區(qū)要求；（4）人員準備：穿戴無菌服、口罩、手套，手部用75%乙醇消毒，避免裸手接觸物品；（5）培養(yǎng)基準備：檢查培養(yǎng)基名稱、有效期，進行靈敏度檢查（每批培養(yǎng)基使用前需驗證），分裝至無菌容器；（6）接種：-直接接種法：用無菌器具取供試品（≤1g/1mL/管），分別接種至FTM（需氧/厭氧）和TSB（真菌）培養(yǎng)基；-薄膜過濾法：將供試品溶液通過無菌濾膜過濾，沖洗濾膜（去除抑菌成分），將濾膜轉(zhuǎn)移至FTM和TSB培養(yǎng)基；（7）對照設置：每批檢驗需設置陽性對照（接種≤100CFU陽性菌）和陰性對照（未接種供試品的培養(yǎng)基）；（8）培養(yǎng)：FTM置于30~35℃培養(yǎng)，TSB置于20~25℃培養(yǎng)，培養(yǎng)時間≥14天（或根據(jù)產(chǎn)品標準縮短至7天）；（9）觀察記錄：每天觀察培養(yǎng)基狀態(tài)（渾濁、菌膜、沉淀），記錄異常情況；（10）結(jié)果判定：-若所有供試品管未長菌，陽性對照長菌，陰性對照未長菌→判為無菌；-若供試品管長菌，需確認是否為污染菌（通過陰性對照、菌株鑒定）→污染則重新檢驗，非污染則判不合格；（11）記錄與填寫檢驗記錄（包括環(huán)境參數(shù)、人員、培養(yǎng)基信息、培養(yǎng)條件、觀察結(jié)果），出具檢驗報告，保存至少5年。四、案例分析題（1）不符合項分析：①超凈工作臺風速0.3m/s（低于標準0.35~0.5m/s），可能導致氣流保護不足，增加污染風險；②操作人員穿戴普通白大褂（需無菌服），未戴口罩（可能通過呼吸引入污染）；③鋼板直接放入培養(yǎng)基（固體供試品需先無菌粉碎或切割成小塊，確保與培養(yǎng)基充分接觸）；④培養(yǎng)時間僅5天（藥典要求至少14天，可能漏檢緩慢生長的微生物）；⑤未對TSB培養(yǎng)基進行真菌培養(yǎng)（TSB應置于20~25℃培養(yǎng)，而案例中與FTM同置于35℃，可能抑制真菌生長）。（2）結(jié)果有效性判斷：結(jié)果無效。理由：-超凈工作臺風速不符合要求，可能導致操作污染；-人員防護不符合要求（未戴口罩、穿普通白大褂），增加人為污染風險；-培養(yǎng)時間不足（5天＜14天），可能未完全培養(yǎng)出微生物；-TSB培養(yǎng)溫度