生物制藥一次性凍存袋范圍本文件給出了生物制藥工藝中一次性凍存袋的術(shù)語(yǔ)和定義、分類、要求、試驗(yàn)方法、檢驗(yàn)規(guī)則、標(biāo)志、包裝、運(yùn)輸和貯存等。本文件適用于生物制藥工藝中溫度范圍為-196℃~60℃，在液氮環(huán)境或低溫冷凍存儲(chǔ)的以聚合物復(fù)合膜為原料制成的一次性凍存袋。規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改）適用于本文件。GB/T1.1-2025GB/T191包裝儲(chǔ)運(yùn)圖示標(biāo)志(eqvISO780:1997)GB/T6543運(yùn)輸包裝用單瓦楞紙箱和雙瓦楞紙箱GB/T1037塑料薄膜和片材透水蒸氣試驗(yàn)方法杯式法(neqASTMF1249-20)GB/T2918塑料試樣狀態(tài)調(diào)節(jié)和試驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)環(huán)境(idtISO291:1997)GB/T6672-2001塑料薄膜和薄片厚度測(cè)定機(jī)械測(cè)量法(idtISO4593:1993)GB/T6673塑料薄膜和薄片長(zhǎng)度和寬度的測(cè)定(idtISO4593:1992)GB/T2410-1980透明塑料透光率及霧度試驗(yàn)方法(eqvASTMD1003:1977)GB/T1040.3-2006塑料拉伸性能的測(cè)定第3部分:薄膜和薄片的試驗(yàn)條件(ASTMD882-18,IDT)GB/T8808軟質(zhì)復(fù)合塑料材料剝離試驗(yàn)方法GB/T9639.1塑料薄膜和薄片抗沖擊性能試驗(yàn)方法自由落鏢法第1部分:梯級(jí)法GB9685食品容器、包裝材料用添加劑使用衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)（ASTMD1709-2016aIDT）GB/T5009.60食品包裝用聚乙烯、聚苯乙烯、聚丙烯成型品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的分析方法GB/T2828.1計(jì)數(shù)抽樣檢驗(yàn)程序第1部分按接收質(zhì)量限(AQL)檢索的逐批檢驗(yàn)抽樣計(jì)劃GB9687食品包裝用聚乙烯成型品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)GB9688食品包裝用聚丙烯成型品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)GB12904-2003商品條碼(ISO/IEC15420:2000，NEQ)GB/T14257-2002商品條碼符號(hào)位置GB/T14258-2003信息技術(shù)自動(dòng)識(shí)別與數(shù)據(jù)采集技術(shù)條碼符號(hào)印制質(zhì)量的檢驗(yàn)(ISO/IEC15416:2000.MOD)GB/T16886-2022醫(yī)療器械生物學(xué)評(píng)價(jià)YBB00342002-2015多層共擠輸液用膜、袋通則ISO11137衛(wèi)生管理制品的滅菌.批準(zhǔn)和常規(guī)控制的要求.輻射滅菌ISO10993醫(yī)療器械生物學(xué)評(píng)價(jià)ISO9001質(zhì)量管理體系要求ISO15747:2018靜脈注射用塑料容器USP<161>醫(yī)療器械-細(xì)菌內(nèi)毒素和熱原檢查法（GB/14233.2-2005醫(yī)用輸液、輸血、注射器具檢驗(yàn)方法第2部分:生物學(xué)試驗(yàn)方法EQV）USP<87>體外生物反應(yīng)性測(cè)試USP<88>體內(nèi)生物反應(yīng)性測(cè)試USP<661>塑料包裝系統(tǒng)與其組成材料EP<3.2.2.1>塑料容器測(cè)定聚合物材料RoHS.Directive（EU)2015/863有害物質(zhì)限制指令BPOG生物制藥生產(chǎn)過(guò)程中一次性使用系統(tǒng)可提取物測(cè)試的標(biāo)準(zhǔn)方案ASTMF1306-16柔性阻擋膜和層壓材料緩速滲透阻力的標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)方法

ASTMD3985-17用庫(kù)侖傳感器測(cè)量透過(guò)塑料薄膜和薄片的氧氣傳輸速率的標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)方法(neqGB/T1038)

ASTMD4169-16運(yùn)輸集裝箱和系統(tǒng)性能試驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施規(guī)程ASTMD1434-82測(cè)定塑料薄膜和涂層透氣性的標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)方法T/CNPPA3005-2019藥包材生產(chǎn)質(zhì)量管理指南T/SHBX003-2023<制藥工藝一次性聚合物組件可提取物技術(shù)規(guī)程><中華人民共和國(guó)藥典>（2025年版）術(shù)語(yǔ)和定義3.1一次性凍存袋用于生物醫(yī)藥中過(guò)程產(chǎn)物的冷凍保存，具有良好的生物相容性和特定的物理化學(xué)性能的存儲(chǔ)袋。3.2生物相容性經(jīng)過(guò)一次性凍存袋保存后的生物產(chǎn)品在使用過(guò)程中與人體組織接觸時(shí)，不引起不良反應(yīng)的特性。分類按照袋體適用溫度將生物制藥一次性凍存袋分為冷凍凍存袋和液氮凍存袋，見表1。表1生物制藥一次性凍存袋使用溫度項(xiàng)目使用溫度冷凍凍存袋-80℃~60℃液氮凍存袋-196℃~60℃要求5.1外觀質(zhì)量取膜材適量，除去標(biāo)簽，將供試品置遮光板邊緣處，在明視距離(指供試品至人眼的清晰觀測(cè)距離，通常為25cm)，光照度應(yīng)為2000~3000lx，應(yīng)透明、光潔、無(wú)肉眼可見異物，符合生產(chǎn)商質(zhì)量放行標(biāo)準(zhǔn)；由膜材制作的袋體，也應(yīng)符合生產(chǎn)公司生產(chǎn)驗(yàn)收合格標(biāo)準(zhǔn)。5.2滅菌按照ISO11137的方法進(jìn)行輻照滅菌處理，根據(jù)原材料的輻照耐受水平確認(rèn)最高輻照劑量，劑量分布測(cè)試確認(rèn)產(chǎn)品輻照時(shí)最高和最低劑量點(diǎn)位，指導(dǎo)日常輻照劑量監(jiān)測(cè)，確保產(chǎn)品滅菌劑量和過(guò)程持續(xù)有效。5.3耐低溫選取高劑量輻照后的一次性凍存袋,裝入標(biāo)識(shí)體積推薦比例的純水，觀察24h無(wú)漏液后放置在對(duì)應(yīng)溫度環(huán)境中（產(chǎn)品之間保持一定間距），在7天后放置室溫進(jìn)行解凍，檢查外觀是否破損，袋子是否發(fā)生漏液。若未發(fā)生漏液，則將上述步驟循環(huán)2次。并進(jìn)行對(duì)一次性凍存袋的完整性、連接牢固度、熱合強(qiáng)度、跌落實(shí)驗(yàn)進(jìn)行測(cè)試。5.4袋跌落性能袋的跌落性能應(yīng)符合表2的規(guī)定。表2袋的跌落性能包裝件重量lb/g跌落高度/mm要求0-20(0-9.1)381無(wú)破損/無(wú)泄漏20-40(9.1-18.1)330無(wú)破損/無(wú)泄漏40-60(18.1-27.2)305無(wú)破損/無(wú)泄漏60-80(27.2-36.3)254無(wú)破損/無(wú)泄漏80-100(36.3-45.5)229無(wú)破損/無(wú)泄漏100-200(45.5-90.7)178無(wú)破損/無(wú)泄漏5.5機(jī)械強(qiáng)度5.5.1拉伸強(qiáng)度（膜）取產(chǎn)品適量，按照測(cè)試方法，縱向、橫向拉伸強(qiáng)度都需要滿足13MPa。5.5.2熱合強(qiáng)度（袋）接口通過(guò)軟管和上下游管路連接，評(píng)價(jià)產(chǎn)品經(jīng)低溫冷凍后用扎帶緊固軟管和接頭的完整性和強(qiáng)度。熱合部位要求受到外力時(shí)不易脫落，冷凍前后連接牢固度未明顯變化，熱合部位的平均值不得低于30.842N/15mm，接頭連接處沿垂直方向施加20N的拉力15s無(wú)脫落。5.5.3透光率（膜）取本品平整部位，切成5個(gè)0.9cmx4cm的切片，分別沿入射光垂直方向放入吸收池中，加滿水，并以水作為空白，在450nm處測(cè)定透光率，均不得低于75%。5.6阻隔性能（膜）阻隔性能應(yīng)符合表3的規(guī)定。表3阻隔性能項(xiàng)目冷凍凍存袋液氮凍存袋輻照前輻照后輻照前輻照后水蒸氣透過(guò)率/（g/m2·24h）≤0.2≤0.2≤30≤30氧氣透過(guò)率（cm3/m2·24h·0.1MPa）≤0.1≤0.1≤1600≤1600二氧化碳透過(guò)率（cm3/m2·24h·0.1MPa）≤0.6≤0.5≤3000≤30005.7物理化學(xué)性能5.7.1熾灼殘?jiān)”酒愤m量，剪碎，精密稱定5.0g，置于已恒重的坩堝。加熱至100℃干燥1小時(shí)后緩緩熾灼至完全炭化，放冷，在550℃±50℃熾灼使完全灰化，移至干燥器內(nèi)，放冷，精密稱定后，再在550℃±50℃熾灼至恒重，遺留殘?jiān)坏眠^(guò)0.05%。5.7.2重金屬精密量取供試液20ml，加醋酸鹽緩沖液(pH3.5)2ml，依法檢查(<中華人民共和國(guó)藥典>（2025年版）四部通則0821第一法)，含重金屬不得過(guò)百萬(wàn)分之一。5.8不溶性微粒袋體根據(jù)<中華人民共和國(guó)藥典>（2025年版）四部通則0903,不溶性微粒檢查法。按照“供注射用無(wú)菌原料藥”的檢查法進(jìn)行檢測(cè)，不溶性微粒的檢出上限見表4：表4不溶性微粒檢測(cè)上限顆粒物大小（μm）最大顆粒物數(shù)（個(gè)）/測(cè)試樣品（ml）注釋≥5100供參考≥1025需滿足≥253需滿足5.9袋體連接牢固度測(cè)試一次性袋子產(chǎn)品用扎帶緊固的管路與接頭的完整性完好，受到外力時(shí)不易脫落，冷凍前后連接牢固度未發(fā)生變化。5.10細(xì)菌內(nèi)毒素每1ml在水性溶液中浸提制成袋體供試品溶液中含內(nèi)毒素≤0.25EU。5.11生物相容性生物相容性應(yīng)符合表5的規(guī)定。表5生物相容性檢測(cè)項(xiàng)類比要求體外生物相容性USP<87>在24h、48h的時(shí)間點(diǎn)，未表現(xiàn)出細(xì)胞毒反應(yīng)IS010993-3存在或不存在S9代謝激活的情況下，測(cè)試樣品的提取物都不會(huì)導(dǎo)致每個(gè)平板的測(cè)試菌株平均回復(fù)突變數(shù)顯著增加。IS010993-4與血液直接接觸的一次性袋子提取物均為非溶血性IS010993-5在24h、48h和72h的時(shí)間點(diǎn)沒有表現(xiàn)細(xì)胞毒性體內(nèi)生物相容性USP<88>classⅥ注射部分反應(yīng)的測(cè)試分?jǐn)?shù)分別為:0(生理鹽水)、0(油脂)、0(生理鹽水+5%乙醇)和0(聚乙二醇);體重正常且未出現(xiàn)除皮膚反應(yīng)外的臨床癥狀。ISO10993-6三組兔子第一天至第八天的臨床癥狀和體重均無(wú)明顯變化。ISO10993-10對(duì)豚鼠(48h)和兔子(4天)進(jìn)行測(cè)試未對(duì)皮膚產(chǎn)生局部刺激作用。ISO10993-11(1)3h內(nèi)的測(cè)試免子均未出現(xiàn)超過(guò)或等于0.5℃的體溫升高;(2)未見異常臨床觀察，給藥后各組動(dòng)物體重變化均在標(biāo)準(zhǔn)要求范圍內(nèi)。注1：醫(yī)療器械生物學(xué)評(píng)價(jià)是否檢測(cè)根據(jù)生產(chǎn)商實(shí)際生產(chǎn)為準(zhǔn)5.13袋體的完整性每個(gè)一次性凍存袋產(chǎn)品，出廠前應(yīng)100%接受完整性檢測(cè)。完整性測(cè)試的方法需經(jīng)過(guò)驗(yàn)證，以確定檢測(cè)方法的靈敏度。5.14袋體對(duì)微生物抗?jié)B性一次性冷凍袋在使用過(guò)程中，應(yīng)不滲透微生物。試驗(yàn)方法6.1試樣狀態(tài)調(diào)節(jié)和試驗(yàn)的環(huán)境按GB/T2918中規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)環(huán)境（溫度23℃±2℃，相對(duì)濕度50%±10%）進(jìn)行，并在此條件下進(jìn)行試驗(yàn)。狀態(tài)調(diào)節(jié)時(shí)間應(yīng)不小于4h。6.2外觀在自然光下，通過(guò)目視觀察，需要符合生產(chǎn)放行標(biāo)準(zhǔn),按可見異物檢查法<中華人民共和國(guó)藥典>（2025年版）四部通則0904)的規(guī)定進(jìn)行。6.3滅菌一次性系統(tǒng)根據(jù)IS011137/GB18280標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行輻照驗(yàn)證，使用產(chǎn)品定義中代表產(chǎn)品進(jìn)行過(guò)程定義，確定一次性系統(tǒng)達(dá)到無(wú)菌保證水平(SAL)達(dá)到10-6所需滅菌劑量，根據(jù)原材料的輻照耐受水平確認(rèn)最高輻照劑量，劑量分布測(cè)試確認(rèn)產(chǎn)品輻照時(shí)最高和最低劑量點(diǎn)位，指導(dǎo)日常輻照劑量監(jiān)測(cè)，確保產(chǎn)品滅菌劑量和過(guò)程持續(xù)有效。6.4耐低溫選取3個(gè)高劑量輻照后的一次性袋體裝入標(biāo)識(shí)體積的純水，觀察24h無(wú)漏液后放置于-80℃的冰箱內(nèi)(產(chǎn)品之間保持一定間距)。在7天后放置室溫進(jìn)行解凍，檢查外觀是否破損，袋子是否發(fā)生漏液。若未發(fā)生漏液，則將上述步驟循環(huán)2次。同理，按照一次性凍存袋檢測(cè)步驟選取3個(gè)高劑量輻照后的一次性液氮凍存袋，溫度-196℃，檢測(cè)一次性液氮凍存袋耐低溫性能6.5跌落性能袋體按ASTMD4169-16Ⅱ級(jí)跌落的規(guī)定進(jìn)行。6.6拉伸強(qiáng)度（膜）按GB/T1040.3的規(guī)定進(jìn)行。試樣采用長(zhǎng)條形，長(zhǎng)度為150mm,寬度為15mm,標(biāo)距為100mm+1mm，試樣拉伸速度(空載)為250mm/min+25mm/min。6.7熱合強(qiáng)度（袋）按藥包材熱合強(qiáng)度測(cè)定法<中華人民共和國(guó)藥典>（2025年版）四部通則4008)的規(guī)定進(jìn)行。6.8透光率（膜）按照紫外-可見分光光度法<中華人民共和國(guó)藥典>（2025年版）四部通則0401)的規(guī)定進(jìn)行。6.9阻隔性能（膜）阻隔性能按照表6檢測(cè)參考標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢測(cè)。表6阻隔性能項(xiàng)目測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)水蒸氣透過(guò)率按GB/T1037的規(guī)定進(jìn)行。試樣條件溫度38℃±0.6℃,相對(duì)濕度90%±2%。試驗(yàn)時(shí)將熱封面朝向濕度低的一側(cè)氧氣透過(guò)率ASTMD-3985二氧化碳透過(guò)率ASTMD1434-19826.10熾灼殘?jiān)鼨z測(cè)按照<中華人民共和國(guó)藥典>（2025年版）四部通則0841熾灼殘?jiān)鼨z查法檢測(cè)6.11重金屬檢測(cè)供試液的制備:取本品平整部分內(nèi)表面積600cm2，切成5cmx0.5cm的小片，置具塞錐形瓶中，加水適量，振搖洗滌，棄去水，重復(fù)操作兩次后，加水200ml，密封，置高壓蒸汽滅菌器中，121℃加熱30min，放冷至室溫，作為供試液:另取水同法操作，作為空白液，進(jìn)行試驗(yàn)。精密量取供試液20ml，加醋酸鹽緩沖液(pH3.5)2ml，依照<中華人民共和國(guó)藥典>（2025年版）四部通則0821第一法檢查。6.12不溶性微粒檢測(cè)根據(jù)<中華人民共和國(guó)藥典>（2025年版）四部通則0903,不溶性微粒檢查法。將膜材制成不小于60cm2內(nèi)表面積的袋體,用10ml無(wú)不溶性微粒的純水進(jìn)行潤(rùn)洗(潤(rùn)洗的比表面積>100cm2/mL)。按照“供注射用無(wú)菌原料藥”的檢查法進(jìn)行檢測(cè)。若是監(jiān)測(cè)范圍≥5μm，參考<中華人民共和國(guó)藥典>（2025年版）四部通則4206藥包材不溶性微粒測(cè)定法進(jìn)行測(cè)試。6.13袋體連接牢固度檢測(cè)將產(chǎn)品放入超低溫環(huán)境中(產(chǎn)品之間保持間距)，冷凍7天后，在室溫下，進(jìn)行解凍，觀察產(chǎn)品是否發(fā)生漏液。若未發(fā)生漏液，將袋子連接部分一端固定，對(duì)連接部分進(jìn)行靜態(tài)軸向拉力拉伸測(cè)試，檢查連接部分是否脫落或斷裂，記錄脫落或斷裂時(shí)承受的最大受力值，并與冷凍前數(shù)據(jù)進(jìn)行對(duì)比。對(duì)比結(jié)果需要符合生產(chǎn)放行標(biāo)準(zhǔn)。6.14袋體細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)按照<中華人民共和國(guó)藥典>（2025年版）四部通則1143規(guī)定進(jìn)行測(cè)試。袋體供試品溶液的制備在水性溶液中浸提制成袋體供試品溶液。通過(guò)鱟試劑與內(nèi)毒素產(chǎn)生凝集反應(yīng)的原理進(jìn)行限度檢測(cè)或半定量檢測(cè)內(nèi)毒素的方法，當(dāng)測(cè)定結(jié)果有爭(zhēng)議時(shí)，除另有規(guī)定外，以凝膠限度試驗(yàn)結(jié)果為準(zhǔn)6.15生物相容性檢測(cè)按GB/T16886或者USP<87>、USP<88>的規(guī)定進(jìn)行。6.16袋體的完整性采用壓力衰減法檢測(cè)。每種規(guī)格的一次性凍存袋獨(dú)立測(cè)試根據(jù)產(chǎn)品的氣體保壓性能制定保壓測(cè)試的起始?jí)毫?。保壓時(shí)間、壓降判讀閾值等關(guān)鍵參數(shù)，需經(jīng)過(guò)方法開發(fā)和驗(yàn)證。6.17袋體對(duì)微生物抗?jié)B性按照ISO15747:2018annexc.2規(guī)定步驟進(jìn)行檢驗(yàn)。檢驗(yàn)規(guī)則7.17.1產(chǎn)品檢驗(yàn)分為型式檢驗(yàn)和出廠檢驗(yàn)。7.2有下列情況之一時(shí)，應(yīng)按標(biāo)準(zhǔn)的要求進(jìn)行全項(xiàng)檢驗(yàn)。(1)產(chǎn)品注冊(cè)。(2)產(chǎn)品出現(xiàn)重大質(zhì)量事故后重新生產(chǎn)。7.3有下列情況之一時(shí)，應(yīng)按標(biāo)準(zhǔn)的要求進(jìn)行除生物相容性項(xiàng)目檢驗(yàn)。(1)監(jiān)督抽驗(yàn)。(2)產(chǎn)品停產(chǎn)后重新恢復(fù)生產(chǎn)。7.4產(chǎn)品批