乙醇超聲波提取蟲草素的生產(chǎn)工藝流程分析概述目錄TOC\o"1-3"\h\u10308乙醇超聲波提取蟲草素的生產(chǎn)工藝流程分析概述 113341.1現(xiàn)有生產(chǎn)工藝 1121241.2工藝革新及說明 1287131.3工藝流程 2106111.3.1原料預(yù)處理 277291.3.2蟲草素粗制 2253621.3.3萃取蒸餾 2236331.3.4大孔吸附樹脂純化 2177621.3.5純品制備 2180331.4工藝流程圖 31.1現(xiàn)有生產(chǎn)工藝蟲草素可以通過生物法和化學(xué)合成法獲得?；瘜W(xué)合成法原料成本高、合成工藝繁瑣、產(chǎn)物收率低且副產(chǎn)物多，限制了其工業(yè)應(yīng)用，生物法生產(chǎn)蟲草素主要有兩種途徑：一是直接從天然或人工培育的蛹蟲草子實體中提取，二是經(jīng)過液體發(fā)酵，從蛹蟲草菌絲體和發(fā)酵液中提取[16]。蟲草素易溶于水、乙醇、甲醇中，所以一般釆用水、乙醇或甲醇等溶劑提取蟲草素，目前常用的提取方法，分別為浸提法、索氏提取法、閃式提取法[17]、超聲法和回流法[18]。蟲草素純化方法主要有硅膠柱層析、活性炭吸附、離子交換樹脂、超臨界萃取、大孔吸附樹脂[19]、制備色譜分離技術(shù)和高效液相色譜等法。由于活性炭和硅膠柱層析[20]的吸附容量和回收率相對較低，不適用于蟲草素的工業(yè)化生產(chǎn)。盡管高效液相色譜法的純化效果比較好，但是其生產(chǎn)成本、設(shè)備價格都非常高，因此也不適合投入到工業(yè)化生產(chǎn)中。目前主要的測定方法有高效液相色譜法（HPLC）[21]、高效毛細(xì)管電泳法（HPCE）、薄層色譜法（TLCS）、TLCSHPLC聯(lián)用法。1.2工藝革新及說明本實驗首先進(jìn)行乙醇超聲波提取，蟲草素易溶于水、乙醇、甲醇中，因此常作為蟲草素的提取溶劑，但使用乙醇作為提取溶劑，可進(jìn)行回收重復(fù)使用，并提取率相對較高，使用乙酸乙酯萃取蟲草素，濃縮在天然產(chǎn)物的分離純化中起著至關(guān)重要的作用，特別是對于類似蟲草素這類本身含量低的目標(biāo)產(chǎn)物，能富集到較高含量的目標(biāo)產(chǎn)物將降低后續(xù)實驗的難度，且增加了后續(xù)純化中單次試驗獲得到的樣品量。這對于像蟲草素這類目標(biāo)產(chǎn)物含量較少的產(chǎn)物，能純化得到含量較高的目標(biāo)產(chǎn)物[5]。于興會[22]、曾昱[23]、張虎成[24]等人利用大孔吸附樹脂純化蟲草素，大孔吸附樹脂是吸附性和分子篩性原理相結(jié)合的分離吸附材料，其吸附性是由分子間作用力和氫鍵作用產(chǎn)生的，并且大孔吸附樹脂的吸附能力與其孔隙的比表面積有關(guān)，比表面積越大，吸附能力就越強；分子篩性是由于大孔吸附樹脂本身的多孔性結(jié)構(gòu)產(chǎn)生的?；谝陨辖Y(jié)構(gòu)特征和吸附原理，大孔吸附樹脂對化合物的吸附具有選擇性好、吸附容量大、吸附速度快等特點，并且在實際應(yīng)用中，大孔吸附樹脂還具有解吸附條件溫和、穩(wěn)定性好、機械強度高、抗污染能力強、使用操作簡單、再生處理方便、廉價、適合工業(yè)生產(chǎn)等諸多優(yōu)勢[25]。其具有工藝簡單、綠色環(huán)保、高效安全的特點，可滿足工業(yè)生產(chǎn)的需求，最后通過用高效液相色譜測定蟲草素的含量，用乙醇直接提取作對照，比較提取率。1.3工藝流程1.3.1原料預(yù)處理取蛹蟲草原料進(jìn)行清洗、干燥和粉碎后，加入2倍體積的石油醚，脫脂48h，過濾風(fēng)干。1.3.2蟲草素粗制脫脂后的蟲草粉末用80%的乙醇在30℃下超聲輔助提取40min重復(fù)兩次，合并提取液，過濾濃縮，80%乙醇:蟲草粉末=15:1（mL/g），提取液濃縮后，加濃縮液等體積的水得蟲草素粗提液，待萃取。1.3.3萃取蒸餾蟲草素粗提液用乙酸乙酯萃取，蟲草素粗液與乙酸乙酯體積比為1:2.5（mL/mL）；攪拌時間30min，靜置時間1h；萃取次數(shù)3次；將上清液合并進(jìn)行減壓蒸餾，收集濃縮液，并回收乙酸乙酯。1.3.4大孔吸附樹脂純化將層析柱底部的閥門打開，使樹脂床上層去離子水慢慢流下，待水彎月面接近樹脂床面時，將濃縮液用4倍量30℃溫水稀釋后過大孔樹脂柱，先用2Bv的水洗滌除雜，洗脫液棄去，再用5Bv的50%的乙醇溶液洗脫得洗脫液。1.3