高級中學名校試卷PAGEPAGE1濱城高中聯(lián)盟2024-2025學年高二下學期5月期中考試一、選擇題（本題共15小題，每小題2分，共30分。在每小題給出的四個選項中，只有一項是符合題目要求的。）1.制作泡菜需要的菌種是（）A.酵母菌 B.醋酸菌 C.乳酸菌 D.毛霉【答案】C〖祥解〗（1）泡菜的制作原理：泡菜的制作離不開乳酸菌。在無氧條件下，乳酸菌將葡萄糖分解成乳酸。（2）泡菜的制作過程：【詳析】A、酵母菌用于制作果酒，A錯誤；B、醋酸菌用于制作果醋，B錯誤；C、乳酸菌用于制作泡菜，C正確；D、毛霉用于制作腐乳，D錯誤。故選C。2.下列有關變異與育種的敘述中，正確的是（）A.某植物經(jīng)X射線處理后未出現(xiàn)新的性狀，則沒有新基因產(chǎn)生B.利用生長素處理得到無子備茄的過程中發(fā)生的變異是不可遺傳的C.二倍體植株的花粉經(jīng)離體培養(yǎng)便可得到穩(wěn)定遺傳的植株D.通過基因工程獲得的抗蟲棉，其原理是基因突變【答案】B〖祥解〗四種育種方法的比較如下：

雜交育種誘變育種單倍體育種多倍體育種方法

雜交→自交→選優(yōu)

輻射誘變、激光誘變、化學藥劑處理花藥離體培養(yǎng)、秋水仙素誘導加倍

秋水仙素處理萌發(fā)的種子或幼苗原理

基因重組基因突變

染色體變異（染色體組先成倍減少，再加倍，得到純種）

染色體變異（染色體組成倍增加）【詳析】A、某植物經(jīng)X射線處理如果發(fā)生了隱性突變，則性狀不會改變，但有新基因的產(chǎn)生，A錯誤；B、利用生長素得到無子番茄的原理是生長素可以促進子房壁發(fā)育成果實，遺傳物質(zhì)沒有改變，屬于不可遺傳變異，B正確；C、二倍體植株的花粉經(jīng)離體培養(yǎng)可得到單倍體植株，需要經(jīng)過秋水仙素加倍處理才能獲得穩(wěn)定遺傳的植株，C錯誤；D、基因工程育種的原理是基因重組，D錯誤。故選B。3.關于動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)敘述錯誤的是（）A.植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)的理論基礎相同，都利用了細胞的全能性B.植物克隆和動物克隆的技術基礎分別是植物組織培養(yǎng)技術、動物細胞培養(yǎng)技術C.動物細胞培養(yǎng)過程中傳代培養(yǎng)時均需要離心法收集細胞D.植物組織培養(yǎng)技術最終會形成完整植株【答案】A〖祥解〗細胞工程分為植物細胞工程和動物細胞工程，植物細胞過程包括植物組織培養(yǎng)、植物體細胞雜交，動物細胞工程包括動物細胞培養(yǎng)、動物細胞融合、單克隆抗體的制備、核移植技術等?！驹斘觥緼、植物組織培養(yǎng)的理論基礎是細胞的全能性，而動物細胞培養(yǎng)的理論基礎是細胞增殖（分裂），并未體現(xiàn)全能性，A錯誤；B、植物克隆依賴植物組織培養(yǎng)技術，動物克隆以細胞培養(yǎng)為基礎，B正確；C、在動物細胞培養(yǎng)過程中的傳代培養(yǎng)時，需要采用離心法收集細胞，以便更換培養(yǎng)液等操作，C正確；D、植物組織培養(yǎng)技術是將離體的植物器官、組織或細胞，經(jīng)過脫分化形成愈傷組織，再經(jīng)過再分化形成根、芽等器官，最終形成完整植株，D正確。故選A。4.下列有關哺乳動物受精作用的敘述，錯誤的是（）A.剛剛排出的精子要在雌性動物生殖道內(nèi)發(fā)生相應生理變化才能獲得受精的能力B.精子需要釋放多種酶才能溶解、穿越卵細胞膜外透明帶等結(jié)構(gòu)C.精子觸及卵細胞膜的瞬間發(fā)生卵細胞膜反應阻止后來精子進入D.卵子在輸卵管內(nèi)發(fā)育到MⅡ期時才具備受精的能力【答案】C〖祥解〗受精作用：概念：受精作用是指卵細胞和精子相互識別、融合成為受精卵的過程?；具^程：精子的頭部進入卵細胞；精子的細胞核與卵細胞的細胞核融合；實質(zhì)：精子的細胞核與卵細胞的細胞核相互融合。【詳析】A、精子需在雌性生殖道內(nèi)經(jīng)歷獲能過程才能獲得受精能力，該過程涉及生理變化，A正確；B、精子通過頂體反應釋放酶類溶解卵丘細胞間物質(zhì)和透明帶，以穿越這些結(jié)構(gòu)，B正確；C、卵細胞膜反應（卵子細胞膜阻止多精受精）發(fā)生在精子進入卵子之后，而非“觸及瞬間”。觸及卵細胞膜時觸發(fā)的是透明帶反應（阻止其他精子進入透明帶），C錯誤；D、卵子需在輸卵管中發(fā)育至減數(shù)第二次分裂中期（MⅡ期）才具備受精能力，D正確。故選C。5.PCR擴增目基因是一項根據(jù)DNA半保留復制的原理，在體外對目的基因進行大量復制的過程。與DNA在細胞內(nèi)的復制相比，下列選項中兩者間相同的是（）A.參與反應的酶 B.反應的模板C.反應的溫度 D.反應的過程【答案】B〖祥解〗PCR技術是聚合酶鏈式反應的縮寫，其原理與DNA半保留復制的原理相同，在體外提供參與復制的各種組分與反應條件，對目的基因的核苷酸序列進行大量復制的技術?！驹斘觥緼、PCR技術用到耐高溫的DNA聚合酶，DNA分子的體內(nèi)復制需要DNA聚合酶和解旋酶，A不符合題意；B、PCR技術和體內(nèi)DNA復制都是以DNA的每一條鏈為模板，模板是相同的，B符合題意；C、PCR技術是在較高溫度條件下進行的，DNA分子的體內(nèi)復制的溫度低，C不符合題意；D、PCR技術是在較高溫度條件下打開雙鏈后進行擴增的，不是邊解旋邊復制的，DNA分子的體內(nèi)邊解旋邊復制，D不符合題意。故選B。6.下列關于限制酶和DNA連接酶的描述，正確的是A.DNA連接酶可以恢復DNA分子中的氫鍵B.在基因工程中可以用DNA聚合酶代替DNA連接酶C.它們的化學本質(zhì)都是蛋白質(zhì)D.它們不能被反復利用【答案】C〖祥解〗【詳析】A、DNA連接酶在兩個DNA分子間形成磷酸二酯鍵，不可以恢復DNA分子中的氫鍵，A錯誤；B、DNA聚合酶將游離的脫氧核苷酸連接到DNA單鏈上，DNA連接酶連接DNA片段，不能代替，B錯誤；C、這兩種酶的化學本質(zhì)都是蛋白質(zhì)，C正確；D、在酶的結(jié)構(gòu)沒有被破壞的情況下，可以被反復利用，D錯誤。故選C【『點石成金』】7.下列有關蛋白質(zhì)工程說法正確的是（）A.蛋白質(zhì)工程無需構(gòu)建基因表達載體B.通過蛋白質(zhì)工程改造后的蛋白質(zhì)有的仍是天然的蛋白質(zhì)C.蛋白質(zhì)工程需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶D.蛋白質(zhì)工程是在蛋白質(zhì)分子水平上改造蛋白質(zhì)的【答案】C〖祥解〗蛋白質(zhì)工程就是通過對蛋白質(zhì)化學、蛋白質(zhì)晶體學和蛋白質(zhì)動力學的研究，獲得有關蛋白質(zhì)理化特性和分子特性的信息，在此基礎上對編碼蛋白質(zhì)的基因進行有目的的設計和改造，通過基因工程技術獲得可以表達蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)基因生物系統(tǒng)，這個生物系統(tǒng)可以是轉(zhuǎn)基因微生物、轉(zhuǎn)基因植物、轉(zhuǎn)基因動物，甚至可以是細胞系統(tǒng)。【詳析】A.據(jù)分析可知，蛋白質(zhì)工程需對編碼蛋白質(zhì)的基因進行有目的的設計和改造，A錯誤；B.蛋白質(zhì)工程通過基因的修飾或基因的合成，對現(xiàn)有的基因進行改造或制造一種新的蛋白質(zhì)，改造后的蛋白質(zhì)有的不再是天然的蛋白質(zhì)，B錯誤；C.蛋白質(zhì)工程需對編碼蛋白質(zhì)的基因進行有目的的設計和改造，需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶，C正確；D.蛋白質(zhì)工程是通過基因的修飾或基因的合成，對現(xiàn)有的基因進行改造或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。D錯誤；答案選C.8.為研究多種血糖調(diào)節(jié)因子的作用，我國科學家開發(fā)出胰島素抵抗模型鼠。為擴增模型鼠數(shù)量，科學家通過誘導優(yōu)良模型鼠體細胞轉(zhuǎn)化獲得誘導胚胎干細胞（iPS細胞），繼而利用iPS細胞培育出與模型鼠遺傳特性相同的克隆鼠，具體步驟如圖所示。下列敘述錯誤的是（）A.誘導優(yōu)良模型鼠體細胞轉(zhuǎn)化為iPS細胞的過程類似于植物組織培養(yǎng)的脫分化B.胚胎移植前要檢查胚胎質(zhì)量并在囊胚或原腸胚階段移植C.胚胎移植后，重構(gòu)胚進一步擴大導透明帶破裂的過程稱為孵化D.為確定克隆鼠培育是否成功，須對黑色鼠3進行胰島素抵抗的相關檢測【答案】B〖祥解〗哺乳動物胚胎干細胞是由早期胚胎或原始性腺中分離出來的一類細胞；胚胎干細胞的細胞核一般較大，核仁明顯，而細胞質(zhì)相對較少；在功能上具有發(fā)育的全能性。植物組織培養(yǎng)的脫分化：讓已經(jīng)分化的細胞，經(jīng)過誘導后，失去其特有的結(jié)構(gòu)和功能而轉(zhuǎn)變成未分化細胞的過程?！驹斘觥緼、優(yōu)良模型鼠體細胞在誘導因子的作用下轉(zhuǎn)化為iPS細胞的過程與植物組織培養(yǎng)中的脫分化過程類似，是組織細胞恢復分裂能力的過程，A正確；B、胚胎移植前要檢查胚胎質(zhì)量并在桑葚胚或囊胚階段移植，B錯誤；C、囊胚進一步擴大，會導致透明帶的破裂，胚胎從其中伸展出來，這一過程叫做孵化，C正確；D、據(jù)圖示，最終得到了黑色鼠3個體，實驗最終目的為“開發(fā)出胰島素抵抗模型鼠”，故為確定克隆鼠培育是否成功，須對黑色鼠3進行胰島素抵抗的相關檢測，D正確。故選B。9.下列關于目的基因?qū)胧荏w細胞的描述，正確的是（）A.可以通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)雱游锏捏w細胞中B.通過基因工程大量獲得胰高血糖素時，受體細胞選擇大腸桿菌比酵母菌更有優(yōu)勢C.可以用PEG處理大腸桿菌將目的基因?qū)肫浼毎麅?nèi)D.該過程不發(fā)生堿基互補配對【答案】D〖祥解〗將目的基因?qū)胧荏w細胞的方法：（1）將目的基因?qū)胫参锛毎恨r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法（約80%的轉(zhuǎn)基因植物都是用這種方法獲得的）；基因槍法：是單子葉植物中常用的一種基因轉(zhuǎn)化方法，但是成本較高；花粉管通道法：這是我國科學家獨創(chuàng)的一種方法，是一種十分簡便經(jīng)濟的方法。（2）將目的基因?qū)雱游锛毎椒ǎ猴@微注射技術。（最有效一種方法）（3）將目的基因?qū)胛⑸锛毎松锾攸c：繁殖快、多為單細胞、遺傳物質(zhì)相對較少等（也是常用原核生物作為受體的原因）；方法：Ca2+處理法（感受態(tài)細胞法）。【詳析】A、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法主要用于植物細胞，因其Ti質(zhì)粒的T-DNA可轉(zhuǎn)移至植物細胞，而動物細胞通常采用顯微注射法或病毒載體法，A錯誤；B、胰高血糖素為多肽類激素，雖結(jié)構(gòu)簡單，但其前體需加工修飾，大腸桿菌（原核）缺乏內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，無法完成真核蛋白的正確加工，而酵母菌（真核）更合適，B錯誤；C、大腸桿菌的轉(zhuǎn)化常用Ca2?處理（感受態(tài)細胞法），PEG多用于植物原生質(zhì)體或動物細胞融合，C錯誤；D、目的基因?qū)胧荏w細胞的過程（如質(zhì)粒進入細胞）僅為物理轉(zhuǎn)移，未涉及DNA復制或重組，故無堿基互補配對，D正確。故選D。10.紅茶菌液是一種以糖茶水為原料的微生物發(fā)酵飲料，能幫助消化，治療多種胃病。紅茶菌種是酵母菌、醋酸菌和乳酸菌的共生體，其制備流程為：紅茶糖液→接種紅茶菌種→發(fā)酵→紅茶菌液。下列敘述錯誤的是（）A.為防止雜菌污染，接種前要將紅茶糖液煮沸殺菌B.可通過加入陳紅茶菌液的方法進行接種C.溫度高低既會影響發(fā)酵速度，也會影響菌液口味D.發(fā)酵過程需要在嚴格的無氧條件下進行【答案】D〖祥解〗根據(jù)題目信息可知，紅茶菌是由含酵母菌、醋酸菌和乳酸菌三種菌的混合菌液共同發(fā)酵完成，酵母菌為兼性厭氧菌，醋酸菌為好氧菌，乳酸菌為厭氧菌?！驹斘觥緼、接種前要將紅茶糖液煮沸殺菌，目的是防止雜菌污染，A正確；B、可通過加入陳紅茶菌液的方法進行接種，目的是增加菌種的數(shù)量，B正確；C、溫度會影響細胞呼吸酶的活性，所以溫度高低既會影響發(fā)酵速度，進而影響菌液口味，C正確；D、酵母菌屬于兼性厭氧菌，醋酸菌屬于嚴格的好氧細菌，乳酸菌屬于厭氧細菌，活菌飲料由3種菌共同發(fā)酵產(chǎn)生，因此發(fā)酵的整個過程不需要在嚴格的無氧條件下進行，D錯誤。故選D。11.關于采用瓊脂糖凝膠電泳鑒定PCR產(chǎn)物的實驗，下列敘述不正確的是（）A.瓊脂糖凝膠濃度的選擇需考慮待分離DNA片段的大小B.凝膠載樣緩沖液中指示劑作用是指示DNA分子的具體位置C.在同一電場作用下，DNA片段越長，遷移速率越慢D.瓊脂糖凝膠中的DNA分子可在紫外光燈下被檢測出來【答案】B〖祥解〗不同大小的DNA片段在不同濃度的瓊脂糖凝膠中遷移率不同，一般來說，DNA片段越大，需要的瓊脂糖凝膠濃度越低。將PCR產(chǎn)物與LoadingBuffer（含染色劑和甘油）混合后加入凝膠孔中，在電場作用下，不同長度的DNA片段按分子量大小分離，形成不同的條帶?！驹斘觥緼、瓊脂糖凝膠濃度影響凝膠孔徑大小，濃度高適合分離小片段DNA，濃度低適合大片段，因此需根據(jù)待分離DNA片段大小選擇濃度，A正確；B、凝膠載樣緩沖液中的指示劑（如溴酚藍）用于指示電泳進程，而非直接顯示DNA位置，DNA需通過染色（如溴化乙錠）后在紫外線下觀察，B錯誤；C、DNA片段越長，在凝膠中遷移阻力越大，遷移速率越慢，C正確；D、瓊脂糖凝膠中的DNA經(jīng)熒光染料（如溴化乙錠）染色后，可在紫外光燈下被檢測，D正確；故選B。12.若下圖中甲、乙、丙所代表的結(jié)構(gòu)或物質(zhì)如表中所示，則相應的敘述與圖示不符的（）選項甲乙丙相應的敘述A植物體一部分愈傷組織植物體若甲離體培養(yǎng)，則①過程表示脫分化，②過程包括再分化B二倍體花粉單倍體經(jīng)①和②過程形成的丙一般含有一個染色體組，③表示用秋水仙素處理萌發(fā)的種子或幼苗C下丘腦垂體甲狀腺①為促甲狀腺激素激素釋放激素，③表示的激素對甲和乙都能起到反饋調(diào)節(jié)作用D基因mRNA蛋白質(zhì)①不同于②的堿基配對方式為T－A；在原核細胞中，①②過程可在細胞同一區(qū)域同時發(fā)生A.A B.B C.C D.D【答案】B〖祥解〗植物組織培養(yǎng)包括了脫分化和再分化；二倍體的單倍體含有一個染色體組，單倍體高度不育，只能用秋水仙素處理幼苗；甲狀腺激素分泌的分級調(diào)節(jié)中，甲狀腺分泌的甲狀腺激素對下丘腦和垂體都有反饋調(diào)節(jié)的作用；轉(zhuǎn)錄不同于翻譯的堿基配對方式是T－A，在原核細胞中，轉(zhuǎn)錄和翻譯可以同時在細胞質(zhì)中完成?！驹斘觥緼、由圖可知甲到乙，乙可以到丙，而丙又可以到乙，甲離體培養(yǎng)，經(jīng)過脫分化可以形成乙，即愈傷組織，愈傷組織經(jīng)過再分化可以形成完整植株丙，A正確；B、如果甲是二倍體經(jīng)過減數(shù)分裂形成乙花粉，花粉含1個染色體組，乙（花粉）經(jīng)過離體培養(yǎng)形成單倍體植株丙，丙經(jīng)秋水仙素處理形成甲（二倍體植株），由于單倍體高度不育，只能用秋水仙素處理幼苗，B錯誤；C、如果甲是下丘腦，其分泌的促甲狀腺激素釋放激素可以作用于垂體，垂體分泌促甲狀腺激素作用于甲狀腺，甲狀腺分泌的甲狀腺激素，對下丘腦和垂體都有反饋調(diào)節(jié)作用，C正確；D、如果甲表示的是基因，經(jīng)過轉(zhuǎn)錄形成RNA，RNA翻譯形成蛋白質(zhì)，轉(zhuǎn)錄和翻譯過程中的堿基配對方式不完全相同，在轉(zhuǎn)錄過程中是T-A，在翻譯過程中是U-A。在原核細胞中，轉(zhuǎn)錄和翻譯同時發(fā)生在細胞質(zhì)中，D正確。故選B。13.融合PCR技術采用具有互補末端的引物，形成具有重疊鏈的PCR產(chǎn)物，通過PCR產(chǎn)物重疊鏈的延伸，從而將不同來源的任意DNA片段連接起來。其原理如圖所示，據(jù)圖分析不正確的是（）A.上述過程中使用的引物P2和P3的堿基不需要完全互補配對B.可在同一個反應體系中進行甲基因和乙基因的擴增C.融合PCR的第一步兩條鏈重疊部位可互為另一條鏈的引物，不需要另加入引物D.若融合PCR的第二步獲得128個融合基因，理論上該過程消耗了127個P1引物【答案】B〖祥解〗PCR是利用DNA在體外攝氏95°高溫時變性會變成單鏈，低溫（經(jīng)常是60°C左右）時引物與單鏈按堿基互補配對的原則結(jié)合，再調(diào)溫度至DNA聚合酶最適反應溫度（72°C左右），DNA聚合酶沿著5'→3'的方向合成互補鏈?；诰酆厦钢圃斓腜CR儀實際就是一個溫控設備，能在變性溫度，復性溫度，延伸溫度之間很好地進行控制?！驹斘觥緼、上述過程中使用的引物P2和P3的堿基不需要完全互補配對，只需要部分堿基互補配對即可，A正確；B、在融合PCR技術里，甲基因擴增依賴引物P1、P2，乙基因擴增依賴引物P3、P4。不同基因擴增所需引物特異性結(jié)合各自模板鏈，且反應條件（如引物與模板的適配性等）有差異，若放同一反應體系，引物間易相互干擾，無法精準、高效完成甲、乙基因各自擴增，所以不能在同一反應體系進行，B錯誤；C、結(jié)合圖示可知，融合PCR的第一步兩條鏈重疊部位即互補配對，可互為另一條鏈的引物，不需要另加入引物，C正確；D、融合PCR第二步，以第一步得到的產(chǎn)物為模板，根據(jù)DNA半保留復制，新合成128個融合基因，需新合成127條單鏈（第一條單鏈為模板鏈，不需要引物合成），理論上消耗127個P1引物，D正確。故選B。14.青霉素別名盤尼西林，它是最早發(fā)現(xiàn)、最先提純、臨床上應用最廣的一種抗生素，發(fā)酵工程中常利用產(chǎn)黃青霉來生產(chǎn)青霉素，產(chǎn)黃青霉生長最適溫度和產(chǎn)生青霉素的適宜溫度不同。下列相關敘述錯誤的是（）A.選育菌種可以借助誘變育種B.發(fā)酵過程中使用的培養(yǎng)基可以利用高壓蒸汽滅菌C.為了提高青霉素產(chǎn)量，發(fā)酵時不同階段要控制不同溫度D.根據(jù)青霉素的化學性質(zhì)采用過濾、沉淀等方法從發(fā)酵液中提取青霉素【答案】D【詳析】發(fā)酵工程是指利用微生物的特定功能，通過現(xiàn)代工程技術，規(guī)?；a(chǎn)對人類有用的產(chǎn)品，主要包括微生物的代謝物、酶及菌體本身。發(fā)酵工程一般包括菌種的選育，擴大培養(yǎng)，培養(yǎng)基的配制、滅菌，接種，發(fā)酵、產(chǎn)品的分離、提純等方面。〖祥解〗A、誘變育種通過物理或化學因素提高突變率，是選育高產(chǎn)青霉素菌種的常用方法，A正確；B、高壓蒸汽滅菌法適用于對培養(yǎng)基和發(fā)酵設備等進行滅菌，能夠有效地殺滅雜菌，保證發(fā)酵的順利進行，B正確；C、由題干信息可知，發(fā)酵工程中常利用產(chǎn)黃青霉來生產(chǎn)青霉素，產(chǎn)黃青霉生長最適溫度和產(chǎn)生青霉素的適宜溫度不同，所以為了提高青霉素產(chǎn)量，發(fā)酵時不同階段要控制不同溫度，C正確；D、青霉素是一種小分子有機物，通常采用蒸餾、萃取、離子交換等方法從發(fā)酵液中提取，而過濾、沉淀等方法一般用于分離固體和液體，不適用于提取青霉素這種小分子有機物，D錯誤。故選D。15.基因工程常用土壤農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒作為載體，需把目的基因插入Ti質(zhì)粒的T-DNA才能整合到植物染色體DNA上。下圖表示抗蟲棉培育中使用的三種限制酶A.B.C的識別序列以及Ti質(zhì)粒上限制酶切割位點的分布，抗蟲基因內(nèi)部不含切割位點，兩側(cè)標明序列為切割區(qū)域。下列敘述錯誤的是A.應該使用酶B和酶C切取抗蟲基因B.應該使用酶A和酶B切割Ti質(zhì)粒C.成功建構(gòu)的重組質(zhì)粒含1個酶A的識別位點D.成功建構(gòu)的重組質(zhì)粒用酶C處理將得到2個DNA片段【答案】C〖祥解〗分析題圖：在目的基因的左側(cè)只有B酶的識別位點，右側(cè)只有C酶的識別位點；質(zhì)粒上含有三種酶的識別位點，其中T-DNA上含有酶A和酶B的識別位點，因此應選用酶B和酶C切取目的基因，選用酶A和酶B切割Ti質(zhì)粒?！驹斘觥緼、在目的基因的左側(cè)只有B酶的識別位點，右側(cè)只有C酶的識別位點，因此應該使用酶B和酶C切取抗蟲基因，A正確；B、應該將目的基因插入T-DNA，而T-DNA中含有A酶和B酶的切割位點，因此應該使用酶A和酶B切割Ti質(zhì)粒，B正確；C、酶A和酶C切割形成的黏性末端相同，使用酶B和酶C切取抗蟲基因，使用酶A和酶B切割Ti質(zhì)粒，再用DNA連接酶連接兩者形成重組質(zhì)粒后，重組質(zhì)粒不含酶A的識別位點，C錯誤；D、成功建構(gòu)的重組質(zhì)粒含有兩個酶C的識別位點，因此用酶C處理重組質(zhì)粒將得到2個DNA片段，D正確。故選C。二、選擇題（共5小題，每小題3分，共15分。每小題給出的四個選項中，有一項或多項是符合題目要求的。全部選對得3分，選對但選不全得1分，有選錯得0分。）16.擬采用“取材→消毒→愈傷組織培養(yǎng)→出芽→生根→移栽”的方法繁殖一種名貴花卉，下列有關敘述正確的是（）A.在愈傷組織培養(yǎng)基中加入細胞融合的誘導劑，可獲得染色體加倍的細胞B.消毒的原則是既要殺死材料表面的微生物，又減少消毒劑對細胞的傷害C.出芽是外植體經(jīng)細胞脫分化后再分化的結(jié)果，受基因選擇性表達的調(diào)控D.誘導生長物分化生根和生芽后，可將試管苗直接進行移栽以適應外界環(huán)境【答案】BC〖祥解〗植物組織培養(yǎng)的過程為：離體的植物組織，器官或細胞經(jīng)過脫分化形成愈傷組織；愈傷組織經(jīng)過再分化過程形成胚狀體，進一步發(fā)育形成植株，該過程受基因選擇性表達的調(diào)控。【詳析】A、愈傷組織細胞含有細胞壁，加入細胞融合誘導劑不會誘導細胞融合，因此不會得到染色體加倍的細胞，A錯誤；B、消毒指用比較溫和的物理或化學方法清除或殺滅除芽孢外的所有病原微生物，使其數(shù)量減少達到無害化，同時減少消毒劑對細胞的傷害，B正確；C、外植體經(jīng)細胞脫分化形成愈傷組織，愈傷組織再分化形成胚狀體后，一般先形成芽，再形成根，因此出芽是外植體經(jīng)細胞脫分化后再分化的結(jié)果，受基因選擇性表達的調(diào)控，C正確；D、誘導生長物分化生根和生芽后，可將試管苗先進行練苗后再進行移栽，以保證成活率，D錯誤。故選BC。17.如圖是研究人員從紅棕壤中篩選高效分解尿素細菌的過程示意圖，有關敘述錯誤的是（）A.獲得高效分解尿素細菌純培養(yǎng)物的關鍵是防止雜菌污染，故應對紅棕壤、培養(yǎng)基及用具進行滅菌B.步驟③采用涂布平板法接種，并需向牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中加入尿素C.若要判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用需要設置未接種的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作為對照D.步驟④挑取③中不同種的菌落分別接種，分解尿素能力高的會產(chǎn)生更多得NH3，溶液pH更高【答案】ABC〖祥解〗培養(yǎng)基的概念、種類及營養(yǎng)構(gòu)成：（1）概念：人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出的供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。（2）種類：固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基。（3）營養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求；微生物常見的接種的方法：（1）平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種、劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落；（2）稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落?！驹斘觥緼、紅棕壤中篩選微生物，不能對其滅菌，A錯誤；B、步驟③篩選分解尿素的細菌，培養(yǎng)基中應以尿素為唯一氮源，不能加入牛肉膏蛋白胨，B錯誤；C、若要判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用，應該用接種了的全營養(yǎng)培養(yǎng)基作對照，即接種了的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基來培養(yǎng)細菌，C錯誤；D、步驟④鑒定細菌分解尿素的能力時，挑?、壑胁煌N的菌落分別接種，比較細菌分解尿素的能力，分解尿素能力高的會產(chǎn)生更多得NH3，溶液pH更高，D正確。故答案為：ABC。18.在體細胞克隆猴培育過程中，為調(diào)節(jié)相關基因的表達，提高胚胎的發(fā)育率和妊娠率，研究人員將組蛋白去甲基化酶Kdm4d的mRNA注入了重構(gòu)胚，同時用組蛋白脫乙酰酶抑制劑（TSA）處理，具體培育流程如下圖所示。下列說法正確的是（）A.去核時使用的差速離心、紫外線長時間照射和化學物質(zhì)處理等方法都沒有穿透卵母細胞的透明帶B.卵母細胞在去核環(huán)節(jié)實際操作中被去除的不是核膜包被的細胞核，而是紡錘體-染色體復合物C.組蛋白甲基化和乙酰化的表觀遺傳修飾都不利于重構(gòu)胚的分裂和發(fā)育D.為得到遺傳背景相同的克隆猴用于科研，可用機械方法將早期胚胎隨機切割成2份或4份后再進行胚胎移植【答案】B〖祥解〗細胞核移植概念：將動物的一個細胞的細胞核移入一個已經(jīng)去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育成動物個體。用核移植的方法得到的動物稱為克隆動物。目前核移植技術中普遍使用的去核方法是顯微直接去除法還有人采用密度梯度離心，紫外光短時間照射、化學物質(zhì)處理等方法?！驹斘觥緼、目前核移植技術中普遍使用的去核方法是密度梯度離心，紫外光短時間照射、化學物質(zhì)處理，A錯誤；B、將卵母細胞培養(yǎng)到中期Ⅱ后進行去核操作，此時細胞核退化，出現(xiàn)的是紡錘體和染色體復合物，去核事實上是去除卵母細胞的紡錘體和染色體結(jié)構(gòu)，B正確；C、科學家將組蛋白去甲基化酶Kdm4d的mRNA注入重構(gòu)胚，同時用組蛋白脫乙酰酶抑制劑處理重構(gòu)胚，這樣可降低組蛋白的甲基化水平，提高組蛋白的乙?；?，從而改變組蛋白的表觀遺傳修飾來調(diào)控基因表達，C錯誤；D、為得到遺傳背景相同的克隆猴用于科研，可用機械方法將早期胚胎均勻切割成2份或4份后再進行胚胎移植，D錯誤。故選B。19.干細胞是一類未參與分化或未完全分化的細胞，分裂能力強。按照其來源分為胚胎干細胞和成體干細胞（如造血干細胞、神經(jīng)干細胞）。下列關于干細胞的說法正確的是（）A.胚胎干細胞可分化形成動物體的任何一種類型細胞B.胚胎干細胞的分化程度小于造血干細胞C.骨髓移植治療白血病就是利用了造血干細胞能分化成各種血細胞的能力D.將帶有遺傳標記的胚胎干細胞植入早期胚胎，通過組織化學染色可追尋胚胎發(fā)育中細胞分化和器官形成的規(guī)律【答案】ABCD〖祥解〗（1）胚胎干細胞簡稱ES或EK細胞，來源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的內(nèi)細胞團）。（2）胚胎干細胞的特點：具有胚胎細胞的特性，體積較小，細胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動物任何一種組織細胞。另一方面，在體外培養(yǎng)條件下，ES細胞可不斷增殖而不發(fā)生分化，可進行冷凍保存，也可以進行某些遺傳改造。（3）胚胎干細胞的主要用途是：①可用于研究哺乳動物個體發(fā)生和發(fā)育規(guī)律；②是在體外條件下研究細胞分化的理想材料。ES細胞在飼養(yǎng)層細胞上或在添加抑制因子的培養(yǎng)液中，能夠維持不分化的狀態(tài)。在培養(yǎng)液中加入分化誘導因子，如牛黃酸、丁酰環(huán)腺苷酸等化學物質(zhì)時，就可以誘導ES細胞向分化，這為揭示細胞分化和細胞凋亡機理提供了有效的手段；③可以用于治療人類的某些頑疾，如帕金森綜合征、糖尿病、老年癡呆癥、肝衰竭、新衰竭、成骨不良；④培育各種組織器官，用于器官移植，解決供體器官不足和器官移植后免疫排斥的問題。【詳析】A、胚胎干細胞具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動物體內(nèi)的任何一種類型的細胞，A正確；B、胚胎干細胞的分化程度小于造血干細胞，因此其全能性高于造血干細胞，B正確；C、骨髓移植治療白血病就是利用了造血干細胞能分化成各種血細胞的能力，C正確；D、將帶有遺傳標記的胚胎干細胞植入早期胚胎，通過組織化學染色可追尋胚胎發(fā)育中細胞分化和器官形成的規(guī)律，D正確。故選ABCD。20.利用PCR將某小段含目的基因的DNA分子擴增循環(huán)n次，則（）A.需要已知目的基因的全部序列以便設計引物B.共需2n＋1－2個引物參與子代DNA分子的合成C.應向反應體系中加入解旋酶、DNA聚合酶、緩沖液等D.理論上第4輪循環(huán)產(chǎn)物中含兩種引物的DNA片段占15/16【答案】B〖祥解〗PCR技術：①概念：PCR全稱為聚合酶鏈式反應，是一項在生物體外復制特定DNA的核酸合成技術；②原理：DNA復制；③條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）；④方式：以指數(shù)的方式擴增，即約2n；⑤過程：高溫變性、低溫復性、中溫延伸?！驹斘觥緼、PCR是一項在生物體外復制特定的DNA分子片段的技術，只要有模板基因就行，不需要知道其序列就可擴增，保證引物能與模板基因結(jié)合就可以開始復制，即部分序列就可以設計引物，A錯誤；B、PCR技術的原理是DNA復制，根據(jù)DNA分子半保留復制特點可知，共有2n-1對引物參與子代DNA分子的合成，每對引物包含2個，即共需2n+1?2個引物，B正確；C、PCR是利用高溫進行解旋，不需要加入解旋酶，C錯誤；D、第4輪循環(huán)產(chǎn)物共得到24=16個DNA片段，其中親本的2個模板鏈不含引物，故含兩種引物的DNA片段占14/16=7/8，D錯誤。故選B。三、非選擇題（本題共5小題，共55分）21.某研究人員設計了下列技術路線，以期獲得甘藍和蘿卜體細胞雜交植株。請回答下列問題：（1）制備原生質(zhì)體時，常用兩種酶處理，分別是______。誘導原生質(zhì)體融合常用的物理法是______。圖中X是______。（2）為誘導融合體產(chǎn)生不定芽，通常應在培養(yǎng)基中加入兩類植物激素，分別是______。（3）若想獲得抗鹽的體細胞雜交植株，一般選用X作為人工誘變的材料，原因是______，且需在含較高濃度的NaCl培養(yǎng)基中篩選。（4）利用X進行細胞產(chǎn)物工廠化生產(chǎn)所采用的技術是______，從物理性質(zhì)角度分析應使用______培養(yǎng)基【答案】（1）①.纖維素酶和果膠酶②.離心、振動、電刺激等③.愈傷組織（2）細胞分裂素和生長素（3）具有分裂分化能力，突變頻率高，愈傷組織包含了兩個物種的全部遺傳信息，且具有全能性（4）①.植物細胞培養(yǎng)技術②.液體〖祥解〗植物體細胞雜交技術：就是將不同種的植物體細胞原生質(zhì)體在一定條件下融合成雜種細胞，并把雜種細胞培育成完整植物體的技術?！窘馕觥浚?）植物細胞壁的主要成分是纖維素和果膠，所以制備原生質(zhì)體，需要用纖維素酶和果膠酶將細胞壁去除，誘導原生質(zhì)體融合常用的物理法有離心、振動、電刺激等。圖中X經(jīng)過離體培養(yǎng)，可以形成試管苗，所以X是愈傷組織。（2）植物組織培養(yǎng)中常加入植物激素，主要是細胞分裂素和生長素，當生長素和細胞分裂素的比值低時，有利于芽的形成，所以起主要作用的是細胞分裂素。（3）由于愈傷組織具有分裂分化能力，突變頻率高，包含了兩個物種的全部遺傳信息，且具有全能性，所以可選用愈傷組織作為人工誘變的材料。（4）利用X愈傷組織進行細胞產(chǎn)物工廠化生產(chǎn)所采用的技術是植物細胞培養(yǎng)技術。這種技術可以在實驗室條件下大量培養(yǎng)細胞，并使其產(chǎn)生所需的細胞產(chǎn)物。從物理性質(zhì)角度分析，為了維持細胞的生長和分裂，應使用液體培養(yǎng)基，以提供充足的營養(yǎng)和生長環(huán)境。22.2024年3月Nature雜志發(fā)表：科學家研究發(fā)現(xiàn)負責免疫細胞更新的造血干細胞（HSC）會逐漸走上“歪路”，破壞不同免疫細胞的再生的平衡，使用特定單抗清除這些跑偏的造血干細胞，可重新平衡衰老的造血系統(tǒng)，讓免疫系統(tǒng)再次年輕。下圖是探索以造血干細胞表面標志物CD150蛋白為靶點，制備單克隆抗體的過程，請回答：（1）注射小鼠的物質(zhì)是___。①過程可用___酶處理剪碎后的小鼠脾臟，從小鼠脾臟中提取具有免疫能力的B淋巴細胞。體外培養(yǎng)骨髓瘤細胞時，必須保證環(huán)境是無菌、無毒的，具體措施是___。（2）②過程先誘導細胞融合，后用特定的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)以獲得到雜交瘤細胞，此特定的培養(yǎng)基從功能上看屬于___培養(yǎng)基（填“選擇”或“鑒別”），雜交瘤細胞的特點是___。（3）培養(yǎng)雜交瘤細胞的培養(yǎng)瓶放在___中，培養(yǎng)的氣體環(huán)境中CO?的主要作用是___。③過程通過___方法獲得產(chǎn)CD150抗體的雜交瘤細胞。在體外條件下大規(guī)模培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖。（4）與傳統(tǒng)的從血漿中提取的抗體相比，抗CD150單克隆抗體的優(yōu)點是___。（5）為檢測針對不同靶點的單抗清除“跑偏”造血干細胞（my-HSCs）的效果，科學家進行了實驗（結(jié)果如下圖），此實驗的結(jié)果表明___。【答案】（1）①.CD150②.胰蛋白（或膠原蛋白）③.需要對培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進行滅菌處理、在無菌環(huán)境進行操作、定期更換培養(yǎng)液（2）①.選擇②.既能迅速大量增殖，又能產(chǎn)生抗體（3）①.CO2培養(yǎng)箱②.維持培養(yǎng)液的pH③.克隆化培養(yǎng)和抗體檢測（4）特異性強、靈敏度高、能大量制備（5）抗CD62p、抗NEO1和抗CD150單克隆抗體都具有清除“跑偏”造血干細胞（my-HSCs）的效果最好，其中抗CD150單克隆抗體的效果最好〖祥解〗由題圖信息分析可知：過程①獲得具有免疫能力的B細胞；過程②是將具有免疫能力的B細胞和骨髓瘤細胞融合；過程③是用抗體檢測和克隆培養(yǎng)得到能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞；過程④是將產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞注射到小鼠腹腔內(nèi)或體外培養(yǎng)?！窘馕觥浚?）圖中篩選出了能產(chǎn)生抗CD150抗體的雜交瘤細胞，所以注射小鼠的物質(zhì)是CD150蛋白。①過程用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理剪碎后的小鼠脾臟，從小鼠脾臟中提取具有免疫能力的B淋巴細胞。體外培養(yǎng)動物細胞時，必須保證環(huán)境是無菌、無毒的，即需要對培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進行滅菌處理以及在無菌環(huán)境下進行操作。培養(yǎng)液還需要定期更換，以便清除代謝物，防止細胞代謝物積累對細胞自身造成危害。（2）②過程要將雜交瘤細胞從促融處理后的多種細胞中篩選出來需要選擇培養(yǎng)基，雜交瘤細胞既能迅速大量增殖，又能產(chǎn)生抗體。（3）實驗過程中培養(yǎng)雜交瘤細胞的培養(yǎng)瓶放在了含5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。③過程通過克隆化培養(yǎng)和抗體檢測獲得產(chǎn)CD150抗體的雜交瘤細胞。在體外條件下大規(guī)模培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖。（4）與傳統(tǒng)的從血漿中提取的抗體相比，單克隆抗體具有能準確地識別抗原的細微差異，與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合，并且可以大量制備的優(yōu)點。（5）由圖中的結(jié)果可知，抗CD62p、抗NEO1和抗CD150單克隆抗體都具有清除“跑偏”造血干細胞（my-HSCs）的效果最好，其中抗CD150單克隆抗體的效果最好。23.米醋是眾多種類的醋中營養(yǎng)價值較高的一種，制作米醋的主要流程是：蒸熟拌曲→入壇發(fā)酵→加水醋化?；卮鹣铝袉栴}：(1)“蒸熟拌曲”階段中拌入的“酒曲”中含有酵母菌，從呼吸作用類型看，該微生物屬于___________型生物。將大米蒸熟、冷卻，經(jīng)酶處理后得到葡萄糖的目的是更好地為微生物提供___________。(2)“入壇發(fā)酵”階段產(chǎn)生的乙醇與重鉻酸鉀反應呈現(xiàn)___________色。該階段在生產(chǎn)時總是先“來水”后“來酒”，原因是____________________________________________。該階段雖未經(jīng)滅菌，但在___________的發(fā)酵液中，酵母菌能大量生長繁殖，絕大多數(shù)其他微生物都因無法適應這一環(huán)境而受到抑制。(3)“加水醋化”階段中醋酸發(fā)酵前，對米酒進行稀釋的目的是_____________________。進入該階段需要將發(fā)酵條件變?yōu)開_________________。請寫出該階段相關的化學反應式：_________________________________。【答案】①.兼性厭氧②.碳源③.灰綠④.酵母菌在發(fā)酵前期進行有氧呼吸，產(chǎn)生水；在發(fā)酵后期進行無氧呼吸，產(chǎn)生酒精⑤.缺氧、呈酸性⑥.使發(fā)酵液中酒精濃度降低，以利于醋酸菌的生長繁殖⑦.通入無菌空氣，溫度設置為30?35℃⑧.〖祥解〗（1）酒精發(fā)酵的最適溫度為18-25℃，醋酸發(fā)酵的最適溫度為30-35℃。（2）醋酸制作的原理：當氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄糖分解成醋酸；當缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿?。【詳析】?）酵母菌既能進行有氧呼吸，又能進行無氧呼吸，屬于兼性厭氧型微生物。將大米蒸熟、冷卻，經(jīng)酶處理后得到葡萄糖的目的是更好地為微生物提供碳源。（2）乙醇與酸性條件下的重鉻酸鉀反應為灰綠色。由于“蒸熟拌曲”階段中拌入的“酒曲”中含有酵母菌，在發(fā)酵前期酵母菌進行有氧呼吸，產(chǎn)生水；而在發(fā)酵后期進行無氧呼吸，產(chǎn)生酒精，故發(fā)酵過程中總是先“來水”后“來酒”。在酒精發(fā)酵旺盛時，發(fā)酵液為缺氧、呈酸性的狀態(tài)，在此環(huán)境中酵母菌能大量生長繁殖，而絕大多數(shù)其他微生物都因無法適應這一環(huán)境而受到抑制，所以盡管“入壇發(fā)酵”階段沒有滅菌，但雜菌仍不會大量繁殖。（3）“加水醋化”階段中醋酸發(fā)酵前，對米酒進行稀釋的目的是使發(fā)酵液中酒精濃度降低，以利于醋酸菌的生長繁殖。由于酵母菌發(fā)酵時為無氧環(huán)境、且酒精發(fā)酵的最適溫度為18?25℃，而醋酸菌為好氧菌，且最適生長溫度為30?35℃，故進入該階段需要將發(fā)酵條件改變?yōu)椋和ㄈ霟o菌空氣，溫度設置為30?35℃。該階段醋酸菌將酒精變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿幔磻綖椋??！尽狐c石成金』】本題考查的是酒精發(fā)酵和醋酸發(fā)酵的原理和流程，熟練掌握酒精發(fā)酵和醋酸發(fā)酵的原理和流程是解題的關鍵。24.如圖為利用胚胎工程技術培養(yǎng)純種荷斯坦小奶牛的繁殖過程，請回答下列問題：（1）為讓供體母牛進行超數(shù)排卵，需要給母牛注射______。從供體母牛采集的卵母細胞需要進行體外培養(yǎng)，其目的是______。從優(yōu)秀種公牛采集的精子需______后才能進行受精作用。（2）胚胎在早期培養(yǎng)時，如需對初期胚胎進行性別鑒定，宜取囊胚期的______細胞進行鑒定。（3）荷斯坦奶牛胚胎在黃牛子宮中成活的生理學基礎是______。（4）上述胚胎工程的理論基礎為______。（5）如果培育轉(zhuǎn)基因荷斯坦奶牛，可采用______技術將藥用蛋白基因?qū)氲絖_____中。在檢測受體細胞是否表達相應蛋白，常采用的方法是______技術?！敬鸢浮浚?）①.促性腺激素②.使卵母細胞成熟③.獲能（2）滋養(yǎng)層（3）受體對移入的外來胚胎基本不發(fā)生免疫排斥反應（4）哺乳動物受精和早期胚胎發(fā)育的規(guī)律（5）①.顯微注射②.受精卵③.抗原—抗體雜交〖祥解〗囊胚：桑椹胚進一步發(fā)育，細胞開始出現(xiàn)分化。聚集在胚胎一端，個體較大的細胞，稱為內(nèi)細胞團，將來發(fā)育成胎兒的各種組織，而沿透明帶內(nèi)壁擴展和排列的、個體較小的細胞，稱為滋養(yǎng)層細胞，它們將來發(fā)有成胎膜和胎盤?！窘馕觥浚?）為使供體母牛超數(shù)排卵，需要給其注射促性腺激素。從供體母牛采集的卵母細胞，都需要培養(yǎng)至減數(shù)第二次分裂中期，其目的是使卵母細胞成熟。剛剛排出的精子不能立即與卵子受精，必須在雌性動物的生殖道發(fā)生相應的生理變化后，才能獲得受精能力，這一生理現(xiàn)象稱為“精子獲能”，因此從優(yōu)秀種公牛采集的精子需獲能后才能進行受精作用。（2）囊胚由內(nèi)細胞團和滋養(yǎng)層組成，如需對初期胚胎進行性別鑒定，宜取囊胚期的滋養(yǎng)層細胞（將來發(fā)育為胎兒的胎膜和胎盤）進行鑒定。（3）荷斯坦奶牛胚胎能在黃牛的子宮中成活，是因為受體對移入的外來胚胎基本不發(fā)生免疫排斥反應。（4）胚胎工程的理論基礎是哺乳動物受精和早期胚胎發(fā)育的規(guī)律。（5）將目的基因轉(zhuǎn)入動物細胞，采用顯微注射技術將藥用蛋白基因?qū)胧芫眩ㄈ苄宰罡撸┲小Ｔ跈z測受體細胞是否表達相應蛋白時，常采用的方法是抗原一抗體雜交技術。25.下圖表示獲得抗除草劑轉(zhuǎn)基因玉米的培育過程，圖中的報告基因只能在真核生物中正確表達，其產(chǎn)物能使某種能被細胞吸收的無色物質(zhì)K呈現(xiàn)藍色。請回答以下問題：（1）構(gòu)建重組質(zhì)粒是基因工程核心，此過程中為防止酶切產(chǎn)物自身環(huán)化，構(gòu)建重組質(zhì)粒需用2種限制性內(nèi)切核酸酶，選擇的原則是______（填序號）。①Ti質(zhì)粒內(nèi)，每種限制酶只有一個切割位點②G基因編碼蛋白質(zhì)的序列中，每種限制酶只有一個切割位點③酶切后，Ti質(zhì)粒形成的兩個黏性末端序列相同④酶切后，G基因形成的兩個黏性末端序列不相同（2）Ti質(zhì)粒是農(nóng)桿菌中的一種質(zhì)粒，其上有一段包含報告基因的T-DNA序列，該片段能進入植物細胞并______，從而使其攜帶的目的基因的遺傳遵循孟德爾遺傳定律。（3）圖中篩選1的目的是______。農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化愈傷組織的過程中，愈傷組織表面常殘留農(nóng)桿菌，會導致未轉(zhuǎn)化的愈傷組織可能在含除草劑的培養(yǎng)基中生