2025年醫(yī)衛(wèi)類微生物檢驗技術(shù)(士)基礎(chǔ)知識-專業(yè)實踐能力參考題庫含答案解析一、單選題（共35題）1.下列哪種染色方法可用于區(qū)分革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌？【選項】A.抗酸染色B.鍍銀染色C.革蘭氏染色D.墨汁負染【參考答案】C【解析】革蘭氏染色是最經(jīng)典的細菌鑒別染色法，通過結(jié)晶紫初染、碘液媒染、乙醇脫色和番紅復(fù)染四個步驟，可將細菌分為革蘭氏陽性菌（呈紫色）和革蘭氏陰性菌（呈紅色）。抗酸染色主要用于結(jié)核分枝桿菌等抗酸菌的檢測；鍍銀染色用于螺旋體等特殊形態(tài)細菌；墨汁負染則用于觀察莢膜結(jié)構(gòu)。2.SS瓊脂培養(yǎng)基主要用于分離哪種病原菌？【選項】A.葡萄球菌B.鏈球菌C.沙門氏菌和志賀氏菌D.霍亂弧菌【參考答案】C【解析】SS瓊脂是強選擇性培養(yǎng)基，含膽鹽、枸櫞酸鈉等成分抑制革蘭氏陽性菌及部分腸道非致病菌，同時通過乳糖和中性紅指示劑區(qū)分乳糖發(fā)酵菌（如大腸埃希氏菌）與非發(fā)酵菌（如沙門氏菌、志賀氏菌）。沙門氏菌和志賀氏菌因不發(fā)酵乳糖，菌落呈無色透明狀，區(qū)別于發(fā)酵菌的紅色菌落。3.高壓蒸汽滅菌法的標準條件是？【選項】A.100℃,15分鐘B.121℃,15分鐘C.160℃,2小時D.80℃,30分鐘【參考答案】B【解析】高壓蒸汽滅菌法是最可靠的滅菌方法，標準條件為121℃（蒸汽壓103.4kPa）維持15-20分鐘，可殺滅所有微生物包括芽孢。100℃為煮沸消毒條件，160℃干熱滅菌適用于玻璃器皿，80℃不足以滅活芽孢。4.下列哪種試驗用于檢測細菌的過氧化氫酶活性？【選項】A.氧化酶試驗B.觸酶試驗C.凝固酶試驗D.血漿酶試驗【參考答案】B【解析】觸酶試驗（過氧化氫酶試驗）用于檢測細菌能否產(chǎn)生過氧化氫酶，陽性菌（如葡萄球菌）加入3%H?O?后產(chǎn)生氣泡。氧化酶試驗檢測細胞色素C氧化酶；凝固酶試驗用于金黃色葡萄球菌鑒定；血漿酶試驗不屬常規(guī)檢測項目。5.結(jié)核分枝桿菌最適生長溫度是？【選項】A.28℃B.35-37℃C.42℃D.25℃【參考答案】B【解析】結(jié)核分枝桿菌為專性需氧菌，最適生長溫度為35-37℃，生長緩慢需2-8周形成典型“菜花樣”菌落。28℃為某些環(huán)境分枝桿菌的生長溫度，42℃可能抑制其生長，25℃不適宜。6.肥達試驗主要用于診斷哪種疾?。俊具x項】A.猩紅熱B.傷寒C.梅毒D.布魯氏菌病【參考答案】B【解析】肥達試驗為試管凝集試驗，通過檢測患者血清中抗傷寒沙門氏菌O抗原和H抗原的抗體效價，輔助診斷傷寒或副傷寒。猩紅熱由鏈球菌引起，梅毒常用TPPA試驗，布魯氏菌病用虎紅平板凝集試驗。7.紫外線消毒的有效距離通常不超過？【選項】A.0.5米B.1米C.2米D.3米【參考答案】B【解析】紫外線消毒的有效波長為253.7nm，穿透力弱且受距離影響顯著，有效消毒距離為1米內(nèi)，超過1米殺菌效果急劇下降。此外，紫外線僅能殺滅直接照射到的微生物，陰影區(qū)域無消毒作用。8.K-B法藥敏試驗中，抑菌圈直徑的測量應(yīng)針對？【選項】A.整個抑菌圈邊緣B.僅測量清晰區(qū)的直徑C.以肉眼完全無菌生長的區(qū)域為準D.包含部分弱生長區(qū)的直徑【參考答案】C【解析】K-B法（紙片擴散法）測量抑菌圈時，需以肉眼觀察無可見菌落生長的完全抑制區(qū)直徑為準，忽略微弱生長或單個菌落區(qū)域。測量工具應(yīng)為精確的游標卡尺，結(jié)果參照CLSI標準判讀敏感、中介或耐藥。9.制備固體培養(yǎng)基時，調(diào)整pH的適宜時機是？【選項】A.高壓滅菌前B.高壓滅菌后C.倒平板前D.培養(yǎng)基凝固后【參考答案】A【解析】培養(yǎng)基pH需在高壓滅菌前調(diào)整至目標值（如7.2-7.4），因高溫滅菌會輕微降低pH。滅菌后調(diào)整易引入污染，倒平板前培養(yǎng)基已凝固無法混勻，凝固后更無法操作。10.疑似霍亂患者的糞便標本應(yīng)選擇何種保存液？【選項】A.甘油鹽水緩沖液B.卡里-布萊爾運送培養(yǎng)基C.堿性蛋白胨水D.SS培養(yǎng)基【參考答案】C【解析】霍亂弧菌在堿性環(huán)境（pH8.4-9.2）中生長良好，堿性蛋白胨水既能抑制雜菌又可增殖霍亂弧菌，是糞便標本保存和增菌的首選。甘油鹽水緩沖液用于志賀氏菌保存，卡里-布萊爾培養(yǎng)基適用于彎曲菌，SS培養(yǎng)基用于沙門氏菌和志賀氏菌分離。11.革蘭染色中用于脫色的試劑是？【選項】A.結(jié)晶紫B.碘液C.95%乙醇D.稀釋復(fù)紅【參考答案】C【解析】革蘭染色步驟包括初染（結(jié)晶紫）、媒染（碘液）、脫色（95%乙醇）和復(fù)染（稀釋復(fù)紅）。脫色試劑為95%乙醇，作用是去除革蘭陰性菌的初染染料，而革蘭陽性菌因細胞壁厚、肽聚糖致密不易脫色。A、B、D分別為初染、媒染和復(fù)染試劑，排除。12.分離培養(yǎng)腦膜炎奈瑟菌應(yīng)選用的培養(yǎng)基是？【選項】A.血瓊脂平板B.巧克力色瓊脂平板C.SS瓊脂平板D.麥康凱瓊脂平板【參考答案】B【解析】腦膜炎奈瑟菌營養(yǎng)要求高，需補充因子（如V、X因子）且對冷敏感。巧克力色瓊脂平板在80℃加熱后釋放紅細胞中的生長因子，適合培養(yǎng)苛養(yǎng)菌。A適用于多數(shù)細菌但缺乏特殊因子；C、D用于腸道致病菌分離，含抑制劑不適合腦膜炎奈瑟菌。13.高壓蒸汽滅菌法的標準條件是？【選項】A.100℃,15-20分鐘B.121℃,15-20分鐘C.160℃,2小時D.71.7℃,15秒【參考答案】B【解析】高壓蒸汽滅菌通過高壓提高蒸汽溫度至121℃并維持15-20分鐘，可殺死所有微生物包括芽孢。A為煮沸消毒條件；C為干熱滅菌條件；D為巴氏消毒法，均不符合高壓滅菌標準。14.用于檢測細菌動力最簡便的方法是？【選項】A.懸滴法B.半固體穿刺培養(yǎng)C.鞭毛染色D.電子顯微鏡觀察【參考答案】B【解析】半固體穿刺培養(yǎng)中，有動力的細菌沿穿刺線擴散生長，無動力者僅沿穿刺線生長。A（懸滴法）需顯微鏡觀察，操作復(fù)雜；C、D需特殊染色或設(shè)備，非最簡便方法。15.鑒定白喉棒狀桿菌毒力的實驗是？【選項】A.抗酸染色B.Elek平板毒力試驗C.肥達試驗D.血漿凝固酶試驗【參考答案】B【解析】Elek平板試驗通過白喉毒素與抗毒素的沉淀線判斷毒力，是經(jīng)典方法。A用于結(jié)核分枝桿菌鑒定；C檢測傷寒抗體；D用于金黃色葡萄球菌鑒定，均無關(guān)。16.觀察真菌菌絲和孢子形態(tài)的最佳方法是？【選項】A.革蘭染色B.乳酸酚棉藍染色C.抗酸染色D.墨汁負染【參考答案】B【解析】乳酸酚棉藍染色可清晰顯示真菌菌絲和孢子的結(jié)構(gòu)特征，且不易褪色。A適用于細菌；C用于結(jié)核桿菌；D用于隱球菌莢膜觀察，均不適用于常規(guī)真菌形態(tài)學(xué)檢查。17.病毒血凝抑制試驗的臨床意義是？【選項】A.檢測病毒抗原B.鑒定病毒型別C.測定抗體效價D.觀察細胞病變效應(yīng)【參考答案】B【解析】血凝抑制試驗通過抗體抑制病毒血凝作用，特異性強，常用于流感病毒等分型鑒定。A常用ELISA；C用中和試驗；D為病毒培養(yǎng)的觀察指標，均非此試驗的用途。18.結(jié)核菌素試驗的原理屬于？【選項】A.速發(fā)型超敏反應(yīng)B.細胞毒型超敏反應(yīng)C.免疫復(fù)合物型超敏反應(yīng)D.遲發(fā)型超敏反應(yīng)【參考答案】D【解析】結(jié)核菌素試驗是IV型超敏反應(yīng)（遲發(fā)型），由致敏T細胞接觸抗原后釋放細胞因子引發(fā)紅腫硬結(jié)。A為I型（如青霉素過敏）；B為II型（如輸血反應(yīng)）；C為III型（如血清?。?，均不符。19.可用于區(qū)分大腸埃希菌與變形桿菌的生化試驗是？【選項】A.甲基紅試驗B.尿素酶試驗C.靛基質(zhì)試驗D.枸櫞酸鹽利用試驗【參考答案】B【解析】變形桿菌尿素酶陽性（分解尿素產(chǎn)氨），而大腸埃希菌陰性。A、D為IMViC試驗項目，兩者均甲基紅陽性、枸櫞酸鹽陰性；C（靛基質(zhì)）兩者均陽性，無法區(qū)分。20.在無菌操作中，酒精燈火焰滅菌效果最佳的區(qū)域是？【選項】A.內(nèi)焰B.外焰C.焰心D.內(nèi)焰與外焰交界處【參考答案】B【解析】酒精燈外焰溫度最高（400-500℃），燃燒充分，滅菌效果最佳。焰心溫度最低，內(nèi)焰次之，交界處溫度波動，均非最適區(qū)域。21.下列關(guān)于革蘭染色的關(guān)鍵步驟描述，正確的是：A.結(jié)晶紫初染1分鐘→盧戈碘液媒染10秒→95%酒精脫色30秒→沙黃或稀釋復(fù)紅復(fù)染30秒B.結(jié)晶紫初染1分鐘→盧戈碘液媒染1分鐘→95%酒精脫色30秒→沙黃或稀釋復(fù)紅復(fù)染1分鐘C.結(jié)晶紫初染30秒→盧戈碘液媒染1分鐘→無水乙醇脫色至無色→沙黃復(fù)染5分鐘D.結(jié)晶紫初染1分鐘→盧戈碘液媒染1分鐘→95%酒精脫色至無色→沙黃復(fù)染1分鐘【選項】ABCD【參考答案】B【解析】革蘭染色的標準流程為：①結(jié)晶紫初染1分鐘；②盧戈碘液媒染1分鐘（增強染料與細菌結(jié)合）；③95%酒精脫色約30秒（脫色時間需調(diào)整至無色流出，但不可過長）；④沙黃或稀釋復(fù)紅復(fù)染1分鐘（對比染色）。A選項媒染時間不足，C選項脫色劑使用錯誤（應(yīng)為95%酒精）、復(fù)染時間過長，D選項脫色終點未明確說明“至無色”，操作描述不完整。22.在血瓊脂平板上培養(yǎng)的細菌呈現(xiàn)α溶血現(xiàn)象，其特點是：A.菌落周圍形成透明溶血環(huán)，紅細胞完全溶解B.菌落周圍呈草綠色環(huán)，紅細胞部分溶解C.無溶血環(huán)形成D.菌落周圍呈雙環(huán)狀，內(nèi)環(huán)完全溶血、外環(huán)部分溶血【選項】ABCD【參考答案】B【解析】α溶血（草綠色溶血）是細菌產(chǎn)生過氧化氫酶致血紅蛋白氧化變性，表現(xiàn)為菌落周圍不透明草綠色環(huán)（紅細胞未完全溶解）；A為β溶血（完全透明環(huán)），C為γ溶血（不溶血），D為鏈球菌某些菌株的特殊溶血現(xiàn)象。23.高壓蒸汽滅菌法達到滅菌效果的必需參數(shù)是：A.121℃、15psi、15~20分鐘B.100℃、10psi、30分鐘C.115℃、13psi、10分鐘D.126℃、20psi、5分鐘【選項】ABCD【參考答案】A【解析】高壓蒸汽滅菌標準參數(shù)為121℃（對應(yīng)壓力15psi）維持15~20分鐘，可滅活所有微生物及芽孢。B為常壓滅菌參數(shù)（不徹底），C僅能殺死繁殖體，D溫度過高易破壞器械。24.伊紅美藍培養(yǎng)基（EMB）用于鑒別腸道致病菌的主要依據(jù)是：A.大腸埃希菌呈無色透明菌落B.傷寒沙門菌呈金屬光澤綠色菌落C.致病性大腸埃希菌呈粉紅色菌落D.大腸埃希菌呈紫黑色帶金屬光澤菌落【選項】ABCD【參考答案】D【解析】EMB為弱選擇性培養(yǎng)基，大腸埃希菌發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸使伊紅與美藍結(jié)合形成紫黑色金屬光澤菌落；致病菌（如沙門菌）不發(fā)酵乳糖呈無色半透明菌落。A、C描述錯誤，B為SS培養(yǎng)基特征。25.微生物實驗室生物安全二級（BSL-2）必須配備的核心設(shè)施是：A.負壓實驗室和雙扉高壓滅菌器B.生物安全柜和防護面罩C.獨立通風系統(tǒng)和化學(xué)消毒淋浴裝置D.HEPA過濾排風和氣密門【選項】ABCD【參考答案】B【解析】BSL-2要求配備生物安全柜（防止氣溶膠擴散）和面部防護裝置。A為BSL-3設(shè)施，C、D為更高級別實驗室要求。26.KIA（克氏雙糖鐵瓊脂）試驗中，若斜面紅色、底層黃色且產(chǎn)H?S，表明細菌：A.葡萄糖和乳糖均發(fā)酵B.僅發(fā)酵葡萄糖不發(fā)酵乳糖C.葡萄糖發(fā)酵產(chǎn)堿、乳糖不利用D.葡萄糖發(fā)酵產(chǎn)酸、乳糖不發(fā)酵【選項】ABCD【參考答案】D【解析】KIA中斜面代表乳糖發(fā)酵（紅色為堿性/不發(fā)酵），底層代表葡萄糖發(fā)酵（黃色為產(chǎn)酸）。H?S生成顯示黑色沉淀。符合題干描述的細菌（如沙門菌）特征為：葡萄糖+（產(chǎn)酸）、乳糖-（斜面紅）、H?S+。27.監(jiān)測紫外線燈滅菌效果時，一般采用何種生物指示劑：A.嗜熱脂肪芽孢桿菌芽孢B.枯草芽孢桿菌黑色變種芽孢C.大腸埃希菌ATCC25922D.白色念珠菌ATCC10231【選項】ABCD【參考答案】B【解析】紫外線主要作用于DNA，枯草芽孢桿菌黑色變種（ATCC9372）芽孢對紫外線敏感，是國際通用指示菌。A用于高壓滅菌監(jiān)測，C、D為常規(guī)質(zhì)控菌。28.痰標本抗酸染色前處理的常用方法是：A.4%NaOH消化15分鐘B.1%鹽酸酒精脫色C.生理鹽水直接涂片D.胰酶-半胱氨酸液化【選項】ABCD【參考答案】A【解析】痰標本需用4%NaOH消化液化（兼具去污殺菌作用），時間通常15分鐘以去除雜菌并濃縮抗酸菌。B為染色步驟，C不適用黏稠標本，D用于真菌培養(yǎng)前處理。29.細菌內(nèi)毒素檢測的“凝膠法”所用試劑是：A.家兔熱原試驗B.鱟試劑C.酶聯(lián)免疫吸附試劑D.膠體金標記抗體【選項】ABCD【參考答案】B【解析】鱟試劑中的凝固酶原可與內(nèi)毒素（LPS）反應(yīng)形成凝膠，此為凝膠法原理。A為傳統(tǒng)熱原檢測法，C、D用于抗原/抗體檢測。30.在MH瓊脂平板上進行紙片擴散法藥敏試驗，菌液濃度應(yīng)調(diào)整為：A.0.5麥氏比濁度（1×10?CFU/mL）B.2.0麥氏比濁度（6×10?CFU/mL）C.5.0麥氏比濁度（1.5×10?CFU/mL）D.直接使用肉湯培養(yǎng)物【選項】ABCD【參考答案】A【解析】CLSI標準規(guī)定：紙片擴散法需將菌液調(diào)至0.5麥氏濃度（約1×10?CFU/mL），過高導(dǎo)致假耐藥，過低致假敏感。D未標準化不可直接使用。31.關(guān)于微生物檢驗中革蘭氏染色法的關(guān)鍵步驟，下列哪項描述錯誤？【選項】A.初染劑為結(jié)晶紫，作用時間約1分鐘B.媒染劑為盧戈碘液，增強染料與細胞結(jié)合C.脫色劑為95%乙醇，脫色時間通常20-30秒D.復(fù)染劑為石炭酸復(fù)紅，染色時間約2分鐘【參考答案】D【解析】革蘭氏染色復(fù)染劑應(yīng)為稀釋堿性復(fù)紅或沙黃，染色時間通常為30秒至1分鐘。石炭酸復(fù)紅是抗酸染色的復(fù)染劑，用于區(qū)分分枝桿菌，故D選項錯誤。A、B、C選項均符合革蘭氏染色標準操作流程。32.下列哪種培養(yǎng)基適用于鑒別大腸埃希菌與產(chǎn)氣腸桿菌？【選項】A.血瓊脂平板B.麥康凱瓊脂C.KIA雙糖鐵培養(yǎng)基D.動力-吲哚-尿素（MIU）培養(yǎng)基【參考答案】B【解析】麥康凱瓊脂含乳糖和中性紅指示劑，大腸埃希菌發(fā)酵乳糖呈粉紅色菌落，產(chǎn)氣腸桿菌因分解乳糖弱或延遲呈淡粉色或無色，為關(guān)鍵鑒別培養(yǎng)基。血瓊脂（A）用于觀察溶血性；KIA（C）用于糖發(fā)酵與H?S產(chǎn)生；MIU（D）用于檢測細菌動力、吲哚及尿素酶，非主要鑒別培養(yǎng)基。33.關(guān)于高壓蒸汽滅菌法的參數(shù)要求，正確的是：【選項】A.115℃維持20分鐘適用于普通培養(yǎng)基滅菌B.121℃維持15分鐘可完全殺滅芽孢C.134℃維持3分鐘常用于手術(shù)器械快速滅菌D.所有含糖培養(yǎng)基均需100℃流通蒸汽滅菌【參考答案】B【解析】121℃高壓滅菌15分鐘是殺滅所有微生物包括芽孢的金標準（B正確）。115℃常用于含糖培養(yǎng)基（A錯誤）；134℃是預(yù)真空滅菌參數(shù)，需維持4分鐘（C錯誤）；含糖培養(yǎng)基可采用115℃滅菌，非必須流通蒸汽（D錯誤）。34.細菌氧化酶試驗陽性的表現(xiàn)為：【選項】A.加入試劑后菌落變藍色B.濾紙條10秒內(nèi)變紫紅色C.培養(yǎng)基由綠變黃D.產(chǎn)生黑色沉淀【參考答案】B【解析】氧化酶試驗原理是細菌細胞色素氧化酶使鹽酸四甲基對苯二胺氧化為醌類化合物，濾紙條接觸菌落后10秒內(nèi)變?yōu)樽霞t色為陽性（B正確）。A為觸酶試驗（過氧化氫酶）；C為糖發(fā)酵指示；D為硫化氫試驗。35.用于病毒分離培養(yǎng)的最佳細胞系是：【選項】A.Hela細胞（人宮頸癌細胞）B.Vero細胞（非洲綠猴腎細胞）C.CHO細胞（中國倉鼠卵巢細胞）D.MDCK細胞（狗腎細胞）【參考答案】B【解析】Vero細胞對多種病毒（如腸道病毒、皰疹病毒）敏感且無干擾素產(chǎn)生，是病毒分離的常用細胞系（B正確）。Hela細胞（A）多用于科研；CHO細胞（C）常用于重組蛋白表達；MDCK細胞（D）主要用于流感病毒培養(yǎng)。二、多選題（共35題）1.下列關(guān)于微生物檢驗標本采集與處理的表述，正確的有？A.采集痰標本時應(yīng)囑患者清晨深咳后留取B.腦脊液標本采集后應(yīng)立即送檢，室溫保存不超過1小時C.尿液標本接種需使用定量接種環(huán)，避免污染D.糞便標本若無法及時送檢，可加入甲醛固定保存【選項】A.采集痰標本時應(yīng)囑患者清晨深咳后留取B.腦脊液標本采集后應(yīng)立即送檢，室溫保存不超過1小時C.尿液標本接種需使用定量接種環(huán)，避免污染D.糞便標本若無法及時送檢，可加入甲醛固定保存【參考答案】ABC【解析】A正確：痰標本需清晨深咳獲取下呼吸道分泌物，減少口腔污染。B正確：腦脊液對溫度敏感，室溫放置過久可能導(dǎo)致細菌死亡或繁殖干擾結(jié)果。C正確：尿液定量接種可標準化菌落計數(shù)，降低污染風險。D錯誤：甲醛會殺死微生物，糞便標本應(yīng)采用Cary-Blair運送培養(yǎng)基保存。2.關(guān)于細菌染色技術(shù)，下列哪些操作符合規(guī)范？A.革蘭染色中脫色時間需根據(jù)涂片厚度調(diào)整B.抗酸染色需以5%石碳酸復(fù)紅初染5分鐘C.鞭毛染色前需用鞣酸媒染增強著色D.莢膜染色宜采用負染法避免破壞結(jié)構(gòu)【選項】A.革蘭染色中脫色時間需根據(jù)涂片厚度調(diào)整B.抗酸染色需以5%石碳酸復(fù)紅初染5分鐘C.鞭毛染色前需用鞣酸媒染增強著色D.莢膜染色宜采用負染法避免破壞結(jié)構(gòu)【參考答案】ACD【解析】A正確：脫色過度會導(dǎo)致革蘭陽性菌誤判為陰性，需動態(tài)控制。B錯誤：抗酸染色初染應(yīng)使用萋-尼氏染色法中的強染劑（如5%石碳酸復(fù)紅）加熱染色5分鐘。C正確：鞣酸媒染可增加鞭毛直徑便于觀察。D正確：負染法（如墨汁法）保留莢膜天然形態(tài)。3.下列培養(yǎng)基與用途匹配正確的是？A.SS瓊脂——選擇性培養(yǎng)沙門菌、志賀菌B.巧克力瓊脂——需氧菌的增菌培養(yǎng)C.羅氏培養(yǎng)基——分枝桿菌分離培養(yǎng)D.慶大霉素瓊脂——彎曲菌選擇性培養(yǎng)【選項】A.SS瓊脂——選擇性培養(yǎng)沙門菌、志賀菌B.巧克力瓊脂——需氧菌的增菌培養(yǎng)C.羅氏培養(yǎng)基——分枝桿菌分離培養(yǎng)D.慶大霉素瓊脂——彎曲菌選擇性培養(yǎng)【參考答案】ACD【解析】A正確：SS瓊脂含膽鹽抑制革蘭陽性菌及大腸桿菌。B錯誤：巧克力瓊脂用于苛養(yǎng)菌（如流感嗜血桿菌）培養(yǎng)，需添加X、V因子。C正確：羅氏培養(yǎng)基含孔雀綠抑制雜菌，適于結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)。D正確：慶大霉素可抑制腸道菌群，利于彎曲菌生長。4.消毒滅菌操作中，正確的措施包括？A.高壓蒸汽滅菌手術(shù)器械需121℃維持15-20分鐘B.紫外線消毒時每平方米需1.5W功率照射30分鐘C.環(huán)氧乙烷滅菌后物品需通風24小時去除殘留D.75%乙醇可用于皮膚消毒但不可用于器械滅菌【選項】A.高壓蒸汽滅菌手術(shù)器械需121℃維持15-20分鐘B.紫外線消毒時每平方米需1.5W功率照射30分鐘C.環(huán)氧乙烷滅菌后物品需通風24小時去除殘留D.75%乙醇可用于皮膚消毒但不可用于器械滅菌【參考答案】ABCD【解析】A正確：此為壓力蒸汽滅菌常規(guī)參數(shù)。B正確：按《消毒技術(shù)規(guī)范》要求計算輻射強度。C正確：環(huán)氧乙烷殘留對人體有害，需充分解析。D正確：乙醇無法殺滅芽孢，僅適用于低水平消毒。5.關(guān)于細菌生化鑒定試驗，表述正確的是？A.尿素酶試驗陽性者培養(yǎng)基變桃紅色B.氧化酶試驗陽性者30秒內(nèi)出現(xiàn)深藍色C.吲哚試驗需在蛋白胨水中加入Kovac試劑D.枸櫞酸鹽利用試驗陽性者培養(yǎng)基由綠變藍【選項】A.尿素酶試驗陽性者培養(yǎng)基變桃紅色B.氧化酶試驗陽性者30秒內(nèi)出現(xiàn)深藍色C.吲哚試驗需在蛋白胨水中加入Kovac試劑D.枸櫞酸鹽利用試驗陽性者培養(yǎng)基由綠變藍【參考答案】BCD【解析】A錯誤：尿素酶陽性呈粉紅色（如變形桿菌），桃紅色為VP試驗結(jié)果。B正確：氧化酶試劑（如四甲基對苯二胺）遇酶即顯色。C正確：Kovac試劑與色氨酸分解產(chǎn)物反應(yīng)顯紅色。D正確：溴麝香草酚藍指示劑在pH升高時由綠轉(zhuǎn)藍。6.藥敏試驗操作中需遵循的原則有？A.M-H瓊脂厚度應(yīng)控制在4mm±0.5mmB.葡萄球菌藥敏需添加2%NaCl檢測苯唑西林C.KB法需在15小時內(nèi)讀取抑菌環(huán)直徑D.β-內(nèi)酰胺酶檢測可使用頭孢硝噻吩紙片【選項】A.M-H瓊脂厚度應(yīng)控制在4mm±0.5mmB.葡萄球菌藥敏需添加2%NaCl檢測苯唑西林C.KB法需在15小時內(nèi)讀取抑菌環(huán)直徑D.β-內(nèi)酰胺酶檢測可使用頭孢硝噻吩紙片【參考答案】ABD【解析】A正確：CLSI規(guī)定瓊脂厚度影響藥物擴散速率。B正確：高鹽環(huán)境可增強甲氧西林耐藥性表達。C錯誤：需培養(yǎng)16-18小時后測定，過早可能誤差。D正確：頭孢硝噻吩水解后由黃變紅指示酶活性。7.真菌檢驗中，正確的操作是？A.墨汁負染用于新型隱球菌莢膜觀察B.乳酸酚棉藍染色適用于絲狀真菌形態(tài)學(xué)鑒定C.小培養(yǎng)法可觀察孢子著生方式D.芽管形成試驗需在血清中37℃培養(yǎng)3小時【選項】A.墨汁負染用于新型隱球菌莢膜觀察B.乳酸酚棉藍染色適用于絲狀真菌形態(tài)學(xué)鑒定C.小培養(yǎng)法可觀察孢子著生方式D.芽管形成試驗需在血清中37℃培養(yǎng)3小時【參考答案】ABCD【解析】A正確：墨汁背景中莢膜呈透亮暈圈。B正確：棉藍染色使真菌細胞壁顯藍色便于鏡檢。C正確：小培養(yǎng)（如瓊脂方塊法）可觀察產(chǎn)孢結(jié)構(gòu)。D正確：白色念珠菌在動物血清中2-3小時形成芽管。8.下列微生物與對應(yīng)檢測方法匹配正確的是？A.結(jié)核分枝桿菌——抗酸染色+羅氏培養(yǎng)B.軍團菌——BCYE培養(yǎng)基分離C.厭氧菌——焦性沒食子酸法培養(yǎng)D.支原體——Giemsa染色觀察【選項】A.結(jié)核分枝桿菌——抗酸染色+羅氏培養(yǎng)B.軍團菌——BCYE培養(yǎng)基分離C.厭氧菌——焦性沒食子酸法培養(yǎng)D.支原體——Giemsa染色觀察【參考答案】ABD【解析】A正確：抗酸染色為首選初篩，羅氏培養(yǎng)基為金標準。B正確：BCYE含L-半胱氨酸和焦磷酸鐵為必需因子。C錯誤：焦性沒食子酸僅用于少量標本，現(xiàn)多用厭氧罐。D正確：Giemsa染色可使支原體胞漿呈淡紫色。9.關(guān)于質(zhì)量控制的措施，正確的包括？A.每日用ATCC25922大腸埃希菌監(jiān)測藥敏試驗B.新批次培養(yǎng)基需以標準菌株驗證生長情況C.高壓滅菌器每月用嗜熱脂肪芽孢桿菌監(jiān)測效果D.微生物室溫度應(yīng)記錄并控制在18-25℃【選項】A.每日用ATCC25922大腸埃希菌監(jiān)測藥敏試驗B.新批次培養(yǎng)基需以標準菌株驗證生長情況C.高壓滅菌器每月用嗜熱脂肪芽孢桿菌監(jiān)測效果D.微生物室溫度應(yīng)記錄并控制在18-25℃【參考答案】ABC【解析】A正確：CLSI要求日質(zhì)控需用特定ATCC菌株。B正確：新批號/新貨號培養(yǎng)基均需做生長試驗。C正確：生物指示劑可驗證滅菌效果，每月最少1次。D錯誤：細菌培養(yǎng)常規(guī)溫度為35±2℃，非18-25℃。10.易混淆的微生物鑒別要點包括？A.肺炎鏈球菌與草綠色鏈球菌——Optochin敏感試驗B.大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌——IMViC試驗C.金黃色葡萄球菌與凝固酶陰性葡萄球菌——血漿凝固酶試驗D.白假絲酵母菌與熱帶假絲酵母菌——顯色培養(yǎng)基顏色差異【選項】A.肺炎鏈球菌與草綠色鏈球菌——Optochin敏感試驗B.大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌——IMViC試驗C.金黃色葡萄球菌與凝固酶陰性葡萄球菌——血漿凝固酶試驗D.白假絲酵母菌與熱帶假絲酵母菌——顯色培養(yǎng)基顏色差異【參考答案】ABCD【解析】A正確：Optochin抑制肺炎鏈球菌，草綠色鏈球菌耐藥。B正確：大腸埃希菌IMViC為++--，肺炎克雷伯菌為--++。C正確：金黃色葡萄球菌凝固酶陽性是重要鑒別特征。D正確：白假絲酵母菌顯綠色，熱帶假絲酵母菌顯藍色。11.下列關(guān)于革蘭染色法操作注意事項的描述，正確的是：【選項】A.脫色時間是影響染色結(jié)果的關(guān)鍵因素，需嚴格控制在5~10秒B.陳舊培養(yǎng)物因細胞壁結(jié)構(gòu)改變易導(dǎo)致假陽性結(jié)果C.染色過程中涂片過厚會導(dǎo)致細菌重疊，影響脫色效果D.95%乙醇作為脫色劑優(yōu)于無水乙醇E.革蘭陽性菌因肽聚糖層厚、脂質(zhì)含量低而呈紫色【參考答案】C、D、E【解析】1.A錯誤：脫色時間需根據(jù)涂片厚度調(diào)整（通常20-30秒），固定時間可能導(dǎo)致脫色不徹底或過度。2.B錯誤：陳舊培養(yǎng)物因細胞壁降解易出現(xiàn)假陰性（G+染成G-）。3.C正確：過厚涂片阻礙染液滲透，導(dǎo)致脫色不均。4.D正確：95%乙醇脫水能力適中，無水乙醇會使細胞過度收縮導(dǎo)致脫色過度。5.E正確：G+菌肽聚糖層厚（保留結(jié)晶紫-碘復(fù)合物）、脂質(zhì)含量低于G-菌（乙醇不易溶解脂質(zhì)層）。12.下列培養(yǎng)基與其對應(yīng)用途匹配正確的是：【選項】A.麥康凱瓊脂——分離革蘭陰性腸道桿菌B.巧克力瓊脂——培養(yǎng)需X、V因子的流感嗜血桿菌C.SS瓊脂——選擇培養(yǎng)腸道致病性大腸埃希菌D.羅氏培養(yǎng)基——分枝桿菌分離培養(yǎng)E.庖肉培養(yǎng)基——厭氧菌增菌培養(yǎng)【參考答案】A、B、D、E【解析】1.A正確：麥康凱含膽鹽和乳糖，抑制G+菌，區(qū)分乳糖發(fā)酵（粉紅）與非發(fā)酵菌（無色）。2.B正確：巧克力瓊脂通過加熱釋放X、V因子，滿足嗜血桿菌生長。3.C錯誤：SS瓊脂用于沙門氏菌和志賀氏菌（強選擇性），大腸埃希菌通常被抑制。4.D正確：羅氏培養(yǎng)基含孔雀綠抑制雜菌，用于結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)。5.E正確：庖肉培養(yǎng)基的肉渣可消耗氧氣，提供厭氧環(huán)境。13.關(guān)于高壓蒸汽滅菌法的操作要求，錯誤的是：【選項】A.滅菌包體積不超過30cm×30cm×50cmB.器械類物品需在121℃下維持20分鐘C.含糖培養(yǎng)基需采用115℃滅菌15分鐘D.滅菌后需待壓力降至零才能開啟滅菌器E.滅菌效果監(jiān)測可使用嗜熱脂肪芽孢桿菌生物指示劑【參考答案】A、C【解析】1.A錯誤：標準滅菌包體積應(yīng)≤30cm×30cm×25cm（過大影響蒸汽穿透）。2.B正確：常規(guī)器械標準滅菌參數(shù)。3.C錯誤：含糖培養(yǎng)基需用115℃滅菌15-20分鐘，但此選項未明確時間下限（15分鐘可能不足）。4.D正確：過早開蓋會導(dǎo)致壓力驟降引發(fā)表面液體沸騰污染。5.E正確：該菌的芽孢耐熱性強，常用于滅菌效果驗證。14.進行紙片擴散法（K-B法）藥敏試驗時，必須遵守的要點包括：【選項】A.使用M-H瓊脂培養(yǎng)基，厚度4mmB.菌懸液濃度調(diào)至1.5×10?CFU/ml（0.5麥氏濁度）C.紙片貼放后需室溫放置15分鐘再孵育D.β-內(nèi)酰胺酶抑制劑復(fù)合藥物需延長孵育時間至24小時E.測量抑菌環(huán)直徑應(yīng)從培養(yǎng)基背面觀察【參考答案】A、B、E【解析】1.A正確：CLSI規(guī)定M-H瓊脂為標準培養(yǎng)基，厚度影響藥物擴散。2.B正確：0.5麥氏濁度相當于1×10?~2×10?CFU/ml。3.C錯誤：紙片貼附后應(yīng)立即35℃孵育，放置會導(dǎo)致藥物預(yù)擴散。4.D錯誤：常規(guī)孵育時間為16-18小時，僅特殊菌（如MRSA）需延至24小時。5.E正確：背面觀察可避免表面反光影響測量準確性。15.下列病毒培養(yǎng)與鑒定方法的組合，正確的是：【選項】A.乙型肝炎病毒——雞胚尿囊腔接種B.流感病毒——MDCK細胞培養(yǎng)觀察CPEC.輪狀病毒——電鏡直接觀察糞便標本D.單純皰疹病毒——乳鼠腦內(nèi)接種E.呼吸道合胞病毒——HEp-2細胞培養(yǎng)出現(xiàn)合胞體效應(yīng)【參考答案】B、C、E【解析】1.A錯誤：HBV無法用常規(guī)細胞/雞胚培養(yǎng)，需分子檢測或血清學(xué)診斷。2.B正確：狗腎細胞（MDCK）是流感病毒常用培養(yǎng)體系，CPE表現(xiàn)為細胞圓縮脫落。3.C正確：輪狀病毒顆?？赏ㄟ^磷鎢酸負染電鏡直接檢出。4.D錯誤：HSV常接種人胚肺纖維細胞，乳鼠接種用于柯薩奇病毒等。5.E正確：RSV在HEp-2細胞中融合形成多核巨細胞為特征性CPE。16.微生物實驗室生物安全操作規(guī)范包括：【選項】A.二級生物安全柜可用于結(jié)核分枝桿菌涂片操作B.高致病性病原體標本轉(zhuǎn)運需使用三層包裝系統(tǒng)C.移液操作必須使用機械吸球，禁止口吸D.實驗服需每周消毒，不得穿出實驗室E.生物安全柜內(nèi)物品擺放應(yīng)前低后高，左右保留空隙【參考答案】B、C、D【解析】1.A錯誤：結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)需BSL-3實驗室，涂片染色可在BSL-2環(huán)境進行但不可用安全柜反向掩蓋風險。2.B正確：三層包裝（主容器+吸水材料+硬質(zhì)外包裝）符合UN2814標準。3.C正確：口吸移液可能造成氣溶膠感染。4.D正確：實驗服應(yīng)每日消毒，無特殊污染時每周集中處理。5.E錯誤：物品應(yīng)前高后低（避免阻擋進風格柵），兩側(cè)留5cm空隙保障氣流循環(huán)。17.關(guān)于細菌生化鑒定的描述，正確的是：【選項】A.氧化酶試驗陽性菌株可排除腸桿菌科細菌B.觸酶試驗用于鑒別葡萄球菌（+）與鏈球菌（-）C.克氏雙糖鐵瓊脂中僅底部變黃表示葡萄糖發(fā)酵D.動力-吲哚-尿素（MIU）培養(yǎng)基可同時檢測三種特性E.血漿凝固酶試驗是鑒定金黃色葡萄球菌的關(guān)鍵指標【參考答案】A、B、D、E【解析】1.A正確：腸桿菌科均為氧化酶陰性（如大腸埃希菌），陽性多為弧菌科或非發(fā)酵菌。2.B正確：葡萄球菌觸酶分解H?O?產(chǎn)氣泡，鏈球菌無此酶。3.C錯誤：底部變黃示葡萄糖發(fā)酵產(chǎn)酸，若斜面也變黃表明乳糖/蔗糖發(fā)酵。4.D正確：MIU中動力（擴散生長）、吲哚（Kovac試劑顯色）、尿素（酚紅變紅）可同步觀察。5.E正確：凝固酶陽性是金黃色葡萄球菌區(qū)別于表皮/腐生葡萄球菌的核心特征。18.真菌檢驗的注意事項中，正確的有：【選項】A.皮屑標本直接鏡檢需先用10%KOH消化角質(zhì)層B.隱球菌墨汁染色可見寬厚莢膜C.絲狀真菌鑒定主要依據(jù)菌落形態(tài)與顯微鏡特征D.沙保弱培養(yǎng)基需添加氯霉素抑制細菌生長E.乳酸酚棉藍染色適用于觀察真菌孢子結(jié)構(gòu)【參考答案】A、B、C、D、E【解析】1.A正確：KOH溶解角質(zhì)蛋白，凸顯菌絲/孢子。2.B正確：隱球菌莢膜在墨汁負染下呈透亮halo效應(yīng)。3.C正確：絲狀真菌依賴菌落形態(tài)（顏色、紋理）及分生孢子結(jié)構(gòu)鑒別。4.D正確：沙保弱培養(yǎng)基常規(guī)添加氯霉素（50mg/L）或放線菌酮。5.E正確：棉藍使真菌細胞壁著色，便于觀察孢子排列和隔膜結(jié)構(gòu)。19.臨床微生物標本采集與運送原則包括：【選項】A.血培養(yǎng)應(yīng)在寒戰(zhàn)初期采集，成人每套8-10ml血液B.痰液標本需在抗菌藥物使用前采集C.糞便標本查找霍亂弧菌需用堿性蛋白胨水保存D.腦脊液標本室溫放置不得超過1小時E.尿道拭子應(yīng)采集晨起第一次尿液【參考答案】A、B、C【解析】1.A正確：寒戰(zhàn)時菌血癥程度最高，成人推薦每瓶8-10ml（總量20-30ml）。2.B正確：抗菌藥物會顯著降低病原體檢出率。3.C正確：堿性蛋白胨水（pH8.4-8.6）利于霍亂弧菌存活。4.D錯誤：腦脊液需15分鐘內(nèi)送檢，室溫放置≥1小時會使病死率倍增。5.E錯誤：尿道感染取中段尿，拭子僅用于宮頸/尿道口標本采集。20.微生物自動化鑒定系統(tǒng)的優(yōu)勢體現(xiàn)在：【選項】A.VITEK系統(tǒng)采用比色法與熒光法檢測生化反應(yīng)B.MALDI-TOFMS可直接用菌落進行蛋白指紋鑒定C.MicroScanWalkAway可同時進行藥敏試驗D.全自動血培養(yǎng)儀通過監(jiān)測CO?濃度判斷陽性E.自動化結(jié)果判讀完全無需人工復(fù)核【參考答案】A、B、C、D【解析】1.A正確：VITEK通過檢測底物代謝引起的顏色/熒光變化。2.B正確：MALDI-TOF通過分析核糖體蛋白峰譜快速鑒定菌種。3.C正確：WalkAway系統(tǒng)可同步完成鑒定及藥敏板孵育讀數(shù)。4.D正確：CO?濃度變化（如BACTEC的熒光感應(yīng)）是主要檢測原理。5.E錯誤：自動化系統(tǒng)對少見菌或混合培養(yǎng)仍需人工復(fù)核（如鏡檢補充）。21.下列哪些是革蘭染色法的基本步驟？（）【選項】A.結(jié)晶紫初染B.碘液媒染C.酸性復(fù)紅復(fù)染D.95%乙醇脫色E.石炭酸復(fù)紅復(fù)染【參考答案】A,B,D,E【解析】1.革蘭染色標準步驟為：結(jié)晶紫初染（A正確）→碘液媒染（B正確）→95%乙醇脫色（D正確）→石炭酸復(fù)紅復(fù)染（E正確）。2.C選項酸性復(fù)紅為抗酸染色試劑，非革蘭染色步驟，故錯誤。22.關(guān)于高壓蒸汽滅菌法的參數(shù)，正確的組合包括（）【選項】A.121℃,15-20分鐘B.115℃,30分鐘C.126℃,10分鐘D.134℃,3-5分鐘E.100℃,60分鐘【參考答案】A,B,D【解析】1.標準高壓滅菌條件：121℃維持15-20分鐘（A正確）或115℃維持30分鐘（B正確）；快速滅菌常用134℃維持3-5分鐘（D正確）。2.126℃參數(shù)不常用（C錯誤）；100℃為煮沸滅菌條件（E錯誤）。23.可作為腸道致病菌選擇培養(yǎng)基的是（）【選項】A.SS瓊脂B.麥康凱瓊脂C.血瓊脂平板D.巧克力瓊脂E.中國藍瓊脂【參考答案】A,B,E【解析】1.SS瓊脂選擇性抑制革蘭陽性菌，用于沙門/志賀菌（A正確）；麥康凱（B正確）和中國藍瓊脂（E正確）含膽鹽抑制非腸道菌。2.血瓊脂（C）和巧克力瓊脂（D）為營養(yǎng)培養(yǎng)基，無選擇性。24.以下屬專性厭氧菌的是（）【選項】A.破傷風梭菌B.結(jié)核分枝桿菌C.脆弱擬桿菌D.乳酸桿菌E.肉毒梭菌【參考答案】A,C,E【解析】1.破傷風梭菌（A）、脆弱擬桿菌（C）、肉毒梭菌（E）必須在無氧環(huán)境生長。2.結(jié)核分枝桿菌（B）為專性需氧菌；乳酸桿菌（D）為兼性厭氧菌。25.關(guān)于細菌內(nèi)毒素的特征，正確的有（）【選項】A.來源于G?菌細胞壁B.成分為脂多糖C.耐高溫D.可引發(fā)熱原反應(yīng)E.能被甲醛脫毒【參考答案】A,B,C,D【解析】1.內(nèi)毒素為G?菌細胞壁脂多糖（A,B正確），耐高壓（C正確），致發(fā)熱（D正確）。2.甲醛脫毒用于外毒素（類毒素制備），內(nèi)毒素無此特性（E錯誤）。26.下列微生物中需通過革蘭染色鑒別的有（）【選項】A.金黃色葡萄球菌B.大腸埃希菌C.白假絲酵母菌D.肺炎鏈球菌E.結(jié)核分枝桿菌【參考答案】A,B,D【解析】1.金葡菌（G?）、大腸埃希菌（G?）、肺炎鏈球菌（G?）需革蘭染色區(qū)分（A,B,D正確）。2.白假絲酵母菌為真菌，用乳酸棉藍染色（C錯誤）；結(jié)核分枝桿菌用抗酸染色（E錯誤）。27.關(guān)于藥敏試驗K-B法的操作，要求包括（）【選項】A.菌液濃度為0.5麥氏比濁B.孵育溫度35±2℃C.培養(yǎng)基厚度≥4mmD.含5%羊血的M-H瓊脂E.16-18小時觀察結(jié)果【參考答案】A,B,E【解析】1.K-B法需0.5麥氏菌懸液（A正確），35℃孵育（B正確），16-18小時判讀（E正確）。2.培養(yǎng)基為普通M-H瓊脂（非血瓊脂），厚度僅需4mm（C,D錯誤）。28.可導(dǎo)致血培養(yǎng)假陽性的操作是（）【選項】A.皮膚消毒不徹底B.采血量不足C.未更換針頭直接注入培養(yǎng)瓶D.使用含SPS的抗凝管E.未在厭氧瓶中接種【參考答案】A,C【解析】1.皮膚消毒不徹底（A）及針頭污染（C）會引入雜菌；SPS抗凝管為血培養(yǎng)標準容器（D錯誤）。2.采血量不足降低陽性率（B錯誤）；未接種厭氧瓶僅影響厭氧菌檢出（E錯誤）。29.關(guān)于真菌顯微鏡檢查，正確的描述是（）【選項】A.墨汁負染用于隱球菌莢膜觀察B.乳酸棉藍染色顯示真菌結(jié)構(gòu)C.直接鏡檢見菌絲可確診深部感染D.10%KOH處理可溶解角質(zhì)E.熒光染色可提高靈敏度【參考答案】A,B,D,E【解析】1.墨汁染莢膜（A正確）；乳酸棉藍顯形態(tài)（B正確）；KOH溶解角質(zhì)（D正確）；熒光法更敏感（E正確）。2.菌絲僅提示可能感染，需培養(yǎng)確診（C錯誤）。30.病毒培養(yǎng)中可用于分離鑒定的細胞系包括（）【選項】A.Hela細胞B.Vero細胞C.雞胚成纖維細胞D.MDCK細胞E.THP-1細胞【參考答案】A,B,C,D【解析】1.Hela（A）、Vero（B）用于多種病毒；雞胚細胞（C）培養(yǎng)流感病毒；MDCK（D）為犬腎細胞系。2.THP-1為人單核細胞系，多用于免疫研究（E錯誤）。31.關(guān)于革蘭染色的操作步驟，下列描述正確的有哪些？【選項】A.初染使用結(jié)晶紫，染色時間約1分鐘B.碘液媒染后需用95%乙醇脫色C.脫色時間過長可能導(dǎo)致革蘭陽性菌被誤判為陰性D.復(fù)染試劑通常為稀釋石炭酸復(fù)紅或沙黃【參考答案】ABCD【解析】1.革蘭染色步驟為：初染（結(jié)晶紫1分鐘）→媒染（碘液1分鐘）→脫色（95%乙醇至無紫色脫落）→復(fù)染（稀釋復(fù)紅或沙黃30秒）；2.脫色是關(guān)鍵步驟，過度脫色會使革蘭陽性菌紫色褪去，導(dǎo)致假陰性結(jié)果；3.復(fù)染試劑用于使脫色的革蘭陰性菌染成紅色，與陽性菌形成對比。32.微生物實驗室中，高壓蒸汽滅菌法的正確參數(shù)組合包括哪些？【選項】A.115℃,30分鐘B.121℃,15分鐘C.126℃,10分鐘D.134℃,3分鐘【參考答案】ABD【解析】1.標準滅菌參數(shù)為121℃維持15-20分鐘（選項B正確）；2.115℃適用于含糖培養(yǎng)基等不耐高溫物品（選項A正確）；3.134℃用于快速滅菌（如朊病毒污染物品，選項D正確）；4.126℃非標準化參數(shù)（選項C錯誤）。33.下列哪些指標可用于評價消毒劑的效果？【選項】A.殺菌率B.D值（殺滅90%微生物所需時間）C.酚系數(shù)D.最小抑菌濃度（MIC）【參考答案】ABC【解析】1.殺菌率直接反映消毒劑殺滅微生物的比例（A正確）；2.D值表示消毒效率（B正確）；3.酚系數(shù)通過對比苯酚殺菌能力評價消毒劑效力（C正確）；4.MIC用于抗生素藥敏試驗（D錯誤）。34.關(guān)于細菌藥敏試驗的K-B法，下列描述正確的有哪些？【選項】A.使用水解酪蛋白（M-H）培養(yǎng)基B.菌液濃度應(yīng)調(diào)至1.5×10?CFU/mLC.貼藥敏紙片后需倒置平板D.抑菌環(huán)直徑測量需包含紙片直徑【參考答案】ABCD【解析】1.M-H培養(yǎng)基是CLSI推薦的標準培養(yǎng)基（A正確）；2.菌液濃度需匹配0.5麥氏比濁標準（B正確）；3.倒置防止冷凝水影響藥效擴散（C正確）；4.抑菌環(huán)直徑=實際測量值+紙片直徑（D正確）。35.下列微生物與其對應(yīng)檢測培養(yǎng)基匹配正確的有哪些？【選項】A.結(jié)核分枝桿菌——羅氏培養(yǎng)基B.霍亂弧菌——堿性蛋白胨水C.白喉棒狀桿菌——呂氏血清斜面D.軍團菌——巧克力培養(yǎng)基【參考答案】ABC【解析】1.羅氏培養(yǎng)基含孔雀綠可抑制雜菌生長，專用于結(jié)核桿菌（A正確）；2.堿性蛋白胨水（pH8.4-9.2）為霍亂弧菌增菌液（B正確）；3.呂氏血清斜面含凝固血清，適于白喉桿菌異染顆粒觀察（C正確）；4.軍團菌需專用BCYE培養(yǎng)基（巧克力培養(yǎng)基用于嗜血桿菌，D錯誤）。三、判斷題（共30題）1.革蘭氏染色法中，脫色劑使用的是體積分數(shù)95%的乙醇溶液?！具x項】A.正確B.錯誤【參考答案】A.正確【解析】革蘭氏染色法標準步驟為：結(jié)晶紫初染→碘液媒染→95%乙醇脫色→稀釋復(fù)紅復(fù)染。脫色劑為95%乙醇，用于溶解革蘭陰性菌細胞壁脂質(zhì)，使其脫色，而革蘭陽性菌因細胞壁肽聚糖層厚，脫色困難，故保留紫色。2.SS瓊脂培養(yǎng)基中，膽鹽和煌綠的組合能抑制大腸桿菌生長，但志賀氏菌可在此培養(yǎng)基上生長形成無色透明菌落?！具x項】A.正確B.錯誤【參考答案】A.正確【解析】SS瓊脂為選擇性培養(yǎng)基，膽鹽和煌綠可抑制革蘭陽性菌及多數(shù)腸道非致病菌（如大腸桿菌）。志賀氏菌因不發(fā)酵乳糖，菌落呈無色透明；若能生長則表明其未被抑制劑完全抑制，符合培養(yǎng)基設(shè)計原理。3.血瓊脂平板培養(yǎng)厭氧菌時需在普通培養(yǎng)箱中進行，無需特殊無氧環(huán)境?！具x項】A.正確B.錯誤【參考答案】B.錯誤【解析】厭氧菌需在無氧或低氧環(huán)境下生長，普通培養(yǎng)箱無法提供無氧條件。通常需使用厭氧罐或厭氧工作站，并配合厭氧袋或產(chǎn)氣包（如鈀催化劑+氫氣）創(chuàng)造厭氧環(huán)境。4.抗酸染色中，加熱的目的是增強細菌細胞壁對染料的通透性。【選項】A.正確B.錯誤【參考答案】A.正確【解析】抗酸染色采用石炭酸復(fù)紅加熱染色，高溫可使分枝桿菌細胞壁中的分枝菌酸軟化，增強染料滲透性，使菌體著色牢固，后續(xù)鹽酸酒精不易脫色。5.ELISA法檢測病毒抗原時，若顯色反應(yīng)呈陽性，說明標本中存在該病毒特異性抗體?！具x項】A.正確B.錯誤【參考答案】B.錯誤【解析】ELISA法檢測抗原時，包被的是病毒特異性抗體，若標本中含病毒抗原，會形成“抗體-抗原-酶標抗體”復(fù)合物，顯色陽性表示抗原存在。若檢測抗體，則包被抗原，陽性代表抗體存在。6.血清學(xué)試驗中，肥達反應(yīng)可用于輔助診斷斑疹傷寒?！具x項】A.正確B.錯誤【參考答案】B.錯誤【解析】肥達反應(yīng)通過檢測患者血清中抗傷寒沙門菌“O”及“H”抗體效價，輔助診斷傷寒或副傷寒。斑疹傷寒由立克次體引起，其血清學(xué)診斷常用外斐反應(yīng)（OX19抗原）。7.所有細菌的最適pH均為中性（pH7.2-7.6），堿性或酸性條件均抑制其生長。【選項】A.正確B.錯誤【參考答案】B.錯誤【解析】多數(shù)病原菌最適pH為中性（如大腸桿菌），但霍亂弧菌需堿性（pH8.4-9.2），乳酸桿菌需酸性（pH5.5-6.2）。不同細菌對pH適應(yīng)性差異顯著。8.凝集試驗中，顆粒性抗原（如細菌）可直接與相應(yīng)抗體發(fā)生可見凝集現(xiàn)象?！具x項】A.正確B.錯誤【參考答案】A.正確【解析】直接凝集試驗中，顆粒性抗原表面的多個表位與抗體結(jié)合后可形成網(wǎng)狀凝集物（如肥達反應(yīng)）?？扇苄钥乖栉接谳d體顆粒（如膠乳）方能進行間接凝集試驗。9.PCR反應(yīng)體系中加入dNTPs（脫氧核苷三磷酸）的作用是作為DNA擴增的原料?！具x項】A.正確B.錯誤【參考答案】A.正確【解析】dNTPs含dATP、dCTP、dGTP、dTTP，是DNA聚合酶催化合成新鏈的底物。其在PCR中逐步摻入引物延伸鏈，形成互補DNA雙鏈，是擴增的必要成分。10.分離培養(yǎng)幽門螺桿菌時，常采用含5%-10%羊血及萬古霉素、兩性霉素B的選擇性培養(yǎng)基?！具x項】A.正確B.錯誤【參考答案】B.錯誤【解析】幽門螺桿菌常用含7%-10%羊血的腦心浸液瓊脂或布氏瓊脂，并添加萬古霉素、兩性霉素B及多黏菌素B（而非慶大霉素）。常用培養(yǎng)基為Skirrow或改良Thayer-Martin培養(yǎng)基，需微需氧環(huán)境（5%O?）。11.糞便標本用于檢查痢疾阿米巴滋養(yǎng)體時，送檢時間不應(yīng)超過標本采集后的24小時?！具x項】正確（）錯誤（）【參考答案】錯誤【解析】痢疾阿米巴滋養(yǎng)體對外界抵抗力弱，離體后易死亡，糞便標本需在采集后30分鐘內(nèi)送檢并立即檢測，超過2小時可能影響結(jié)果準確性。12.巧克力培養(yǎng)基的主要成分包括脫纖維羊血和瓊脂。【選項】正確（）錯誤（）【參考答案】正確【解析】巧克力培養(yǎng)基是在血瓊脂基礎(chǔ)上加熱至80~90℃使紅細胞破裂釋放血紅素，含脫纖維羊血、瓊脂及其他營養(yǎng)物質(zhì)，用于培養(yǎng)苛養(yǎng)菌（如流感嗜血桿菌）。13.革蘭染色中脫色步驟使用95%乙醇需持續(xù)30秒以上?！具x項】正確（）錯誤（）【參考答案】錯誤【解析】脫色是革蘭染色關(guān)鍵步驟，95%乙醇脫色時間通常為10~30秒，過長可能導(dǎo)致革蘭陽性菌脫色過度而誤判為陰性。14.高壓蒸汽滅菌法適用于含糖培養(yǎng)基的滅菌?！具x項】正確（