2025年醫(yī)衛(wèi)類(lèi)病理學(xué)技術(shù)(中級(jí))相關(guān)專(zhuān)業(yè)知識(shí)-相關(guān)專(zhuān)業(yè)知識(shí)參考題庫(kù)含答案解析一、單選題（共35題）1.下列關(guān)于特殊染色方法的敘述，錯(cuò)誤的是：【選項(xiàng)】A.PAS染色用于顯示糖原和中性黏液物質(zhì)B.剛果紅染色可顯示淀粉樣物質(zhì)C.蘇丹III染色用于證明脂肪變性D.銀染技術(shù)僅用于神經(jīng)纖維的顯示【參考答案】D【解析】A正確：PAS染色通過(guò)過(guò)碘酸氧化多糖的乙二醇基，與Schiff試劑反應(yīng)呈紅色，是糖原和中性黏液的特異性染色。B正確：剛果紅在偏光顯微鏡下呈現(xiàn)蘋(píng)果綠雙折光性，是淀粉樣變性的特異性染色。C正確：蘇丹III可將中性脂肪染成橘紅色，是組織脂肪變性的常用染色方法。D錯(cuò)誤：銀染技術(shù)不僅用于神經(jīng)纖維（如Bielschowsky法），還可用于網(wǎng)狀纖維（如Gomori法）、真菌等多個(gè)領(lǐng)域。2.組織病理學(xué)常規(guī)處理過(guò)程中，首選固定液是：【選項(xiàng)】A.中性甲醛緩沖液B.Bouin液C.Zenker液D.Carnoy液【參考答案】A【解析】A正確：中性甲醛緩沖液（pH7.2-7.4）能良好保存組織結(jié)構(gòu)，是最常用標(biāo)準(zhǔn)固定液。B錯(cuò)誤：Bouin液適用于結(jié)締組織染色，但使組織明顯收縮。C錯(cuò)誤：Zenker液多用于造血器官組織固定，需后續(xù)去汞處理。D錯(cuò)誤：Carnoy液適合快速固定和糖原保存，但會(huì)導(dǎo)致組織過(guò)度硬化。3.酶組織化學(xué)技術(shù)中，檢測(cè)酸性磷酸酶的最佳底物是：【選項(xiàng)】A.β-甘油磷酸鈉B.α-萘酚磷酸鈉C.硝基藍(lán)四唑D.醋酸萘酯【參考答案】A【解析】A正確：β-甘油磷酸鈉在酸性條件下被酸性磷酸酶水解，水解產(chǎn)物與捕獲劑反應(yīng)形成沉淀。B錯(cuò)誤：α-萘酚磷酸鈉主要用于堿性磷酸酶檢測(cè)。C錯(cuò)誤：硝基藍(lán)四唑是脫氫酶反應(yīng)的顯色劑。D錯(cuò)誤：醋酸萘酯用于檢測(cè)非特異性酯酶。4.免疫組織化學(xué)技術(shù)中，抗原修復(fù)最常用的物理方法是：【選項(xiàng)】A.微波加熱法B.高壓加熱法C.酶消化法D.酸水解處理【參考答案】A【解析】A正確：微波加熱98℃維持15-20分鐘可有效打開(kāi)甲醛交聯(lián)的抗原位點(diǎn)，是最常用且穩(wěn)定的方法。B錯(cuò)誤：高壓加熱法容易導(dǎo)致組織脫片，操作控制難度較大。C錯(cuò)誤：酶消化法屬于化學(xué)方法，且僅限于特定抗原（如某些病毒抗原）。D錯(cuò)誤：酸水解處理會(huì)破壞組織結(jié)構(gòu)，僅用于少數(shù)特殊抗原修復(fù)。5.PCR實(shí)驗(yàn)操作中需特別注意的污染預(yù)防措施是：【選項(xiàng)】A.使用帶濾芯的槍頭B.試劑分裝保存C.實(shí)驗(yàn)分區(qū)操作D.模板DNA最后加入【參考答案】D【解析】D正確關(guān)鍵點(diǎn)：模板DNA應(yīng)在所有試劑加入后最后加入，避免氣溶膠污染其他反應(yīng)體系。A/B/C雖然都是重要的防污染措施，但最直接有效的是控制加樣順序。6.電鏡樣本制備時(shí)，常用的雙固定是指：【選項(xiàng)】A.戊二醛-鋨酸順序固定B.甲醛-戊二醛順序固定C.鋨酸-丙酮順序固定D.戊二醛-乙醇順序固定【參考答案】A【解析】A正確：電鏡樣本需先用戊二醛（前固定）穩(wěn)定蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，再用鋨酸（后固定）固定脂類(lèi)并增強(qiáng)電子密度。B錯(cuò)誤：甲醛滲透性差，不適用于電鏡樣本固定。C錯(cuò)誤：丙酮是脫水劑而非固定劑。D錯(cuò)誤：乙醇主要用于脫水步驟。7.常規(guī)HE染色中，蘇木精分化通常使用的試劑是：【選項(xiàng)】A.1%鹽酸乙醇B.0.5%氨水C.純乙醇D.蒸餾水【參考答案】A【解析】A正確：1%鹽酸乙醇能選擇性洗脫非特異性結(jié)合的蘇木精，使染色清晰。B錯(cuò)誤：氨水用于返藍(lán)處理（將酸性環(huán)境變?yōu)閴A性）。C錯(cuò)誤：純乙醇屬于脫水和透明試劑。D錯(cuò)誤：蒸餾水主要用于洗滌步驟。8.冷凍切片最適宜的操作溫度是：【選項(xiàng)】A.-20℃至-25℃B.-5℃至-10℃C.室溫(20-25℃)D.-80℃以下【參考答案】A【解析】A正確：-20℃至-25℃能保持組織適當(dāng)硬度且避免冰晶形成，是最佳切片溫度區(qū)間。B錯(cuò)誤：溫度過(guò)高導(dǎo)致組織硬度不足，切片易皺褶。C錯(cuò)誤：室溫?zé)o法維持組織冷凍狀態(tài)。D錯(cuò)誤：-80℃會(huì)導(dǎo)致組織過(guò)硬，切片易碎裂。9.細(xì)胞學(xué)標(biāo)本常用染色方法是：【選項(xiàng)】A.巴氏染色B.瑞氏染色C.HE染色D.吉姆薩染色【參考答案】A【解析】A正確：巴氏染色可清晰顯示細(xì)胞核結(jié)構(gòu)及胞漿角化程度，是宮頸細(xì)胞學(xué)檢查的金標(biāo)準(zhǔn)。B錯(cuò)誤：瑞氏染色主要用于血液和骨髓涂片。C錯(cuò)誤：HE染色主要用于組織切片。D錯(cuò)誤：吉姆薩染色適用于寄生蟲(chóng)和某些血液標(biāo)本。10.分子病理技術(shù)中，原位雜交的核心預(yù)處理步驟是：【選項(xiàng)】A.蛋白酶K消化B.酸堿處理C.高溫滅活D.抑制劑封閉【參考答案】A【解析】A正確：蛋白酶K處理能適度消化蛋白質(zhì)，暴露靶核酸序列，是保證探針結(jié)合效率的核心步驟。B錯(cuò)誤：酸堿處理會(huì)破壞核酸結(jié)構(gòu)。C錯(cuò)誤：高溫處理主要用于DNA變性而非預(yù)處理。D錯(cuò)誤：內(nèi)源性酶封閉是免疫組化步驟，與雜交無(wú)關(guān)。11.下列哪種特殊染色技術(shù)主要用于顯示組織中的糖原？【選項(xiàng)】A.PAS染色B.剛果紅染色C.蘇木精-伊紅染色D.Masson三色染色【參考答案】A【解析】1.PAS染色（過(guò)碘酸-雪夫反應(yīng)）特異性顯示組織中的糖原、黏液物質(zhì)及基底膜等，原理是通過(guò)過(guò)碘酸氧化糖原的羥基生成醛基，再與雪夫試劑反應(yīng)顯紅色。2.B項(xiàng)剛果紅染色用于淀粉樣物檢測(cè)，C項(xiàng)HE染色為常規(guī)組織形態(tài)學(xué)觀察，D項(xiàng)用于顯示膠原纖維，均不符合題意。12.免疫組織化學(xué)中“抗原修復(fù)”常采用的方法是？【選項(xiàng)】A.直接高壓蒸汽處理B.酶消化法（如胰蛋白酶）C.低溫冷凍法D.酸性脫鈣法【參考答案】B【解析】1.抗原修復(fù)主要用于恢復(fù)因甲醛固定掩蓋的抗原表位，酶消化法（如胰蛋白酶）可水解交聯(lián)蛋白質(zhì)，暴露抗原。2.A項(xiàng)高壓蒸汽法屬熱誘導(dǎo)表位修復(fù)（HIER），非唯一常用方法；C、D項(xiàng)與抗原修復(fù)無(wú)關(guān)，故排除。13.病理組織處理中，中性緩沖福爾馬林固定液的優(yōu)點(diǎn)是？【選項(xiàng)】A.固定速度快，穿透力強(qiáng)B.避免酸性副產(chǎn)物引起組織收縮C.適用于電子顯微鏡樣本D.可長(zhǎng)期保存組織中的RNA完整性【參考答案】B【解析】1.中性緩沖福爾馬林通過(guò)緩沖液維持pH7.0，防止酸性副產(chǎn)物導(dǎo)致的組織收縮和抗原破壞，是常規(guī)病理首選固定液。2.A項(xiàng)描述為Bouin液特點(diǎn)；C項(xiàng)電鏡樣本需戊二醛固定；D項(xiàng)甲醛會(huì)降解RNA，故錯(cuò)誤。14.診斷甲狀腺乳頭狀癌的關(guān)鍵組織學(xué)特征是？【選項(xiàng)】A.砂粒體形成B.核溝和核內(nèi)假包涵體C.濾泡結(jié)構(gòu)破壞D.間質(zhì)玻璃樣變性【參考答案】B【解析】1.甲狀腺乳頭狀癌的典型特征為腫瘤細(xì)胞核呈毛玻璃樣，可見(jiàn)核溝及核內(nèi)假包涵體，是診斷金標(biāo)準(zhǔn)。2.A項(xiàng)砂粒體雖常見(jiàn)但非特異性；C、D項(xiàng)可見(jiàn)于多種甲狀腺病變，特異性不足。15.下列分子病理學(xué)技術(shù)中，用于檢測(cè)基因點(diǎn)突變最靈敏的是？【選項(xiàng)】A.熒光原位雜交（FISH）B.Sanger測(cè)序C.聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)-單鏈構(gòu)象多態(tài)性（PCR-SSCP）D.數(shù)字PCR（dPCR）【參考答案】D【解析】1.數(shù)字PCR通過(guò)微滴分割提高檢測(cè)靈敏度，可檢出低至0.1%的突變等位基因頻率。2.B項(xiàng)Sanger測(cè)序靈敏度約20%，C項(xiàng)PCR-SSCP為非定量方法，A項(xiàng)FISH主要用于拷貝數(shù)變異檢測(cè)。16.免疫組化染色中，內(nèi)源性生物素干擾最有效的阻斷劑是？【選項(xiàng)】A.正常山羊血清B.過(guò)氧化氫C.卵白素-生物素阻斷劑D.牛血清白蛋白（BSA）【參考答案】C【解析】1.卵白素-生物素阻斷劑可預(yù)先封閉組織中內(nèi)源性生物素（如肝、腎富含），避免非特異性結(jié)合。2.A、D項(xiàng)用于阻斷非特異性蛋白吸附，B項(xiàng)用于滅活內(nèi)源性過(guò)氧化物酶，均不針對(duì)生物素干擾。17.下列哪種標(biāo)記物常用于鑒別B細(xì)胞淋巴瘤？【選項(xiàng)】A.CD3B.CD20C.CD68D.S-100【參考答案】B【解析】1.CD20是B細(xì)胞表面特異性標(biāo)記物，廣泛用于B細(xì)胞淋巴瘤（如彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤）的診斷。2.A項(xiàng)CD3為T(mén)細(xì)胞標(biāo)記，C項(xiàng)CD68標(biāo)記巨噬細(xì)胞，D項(xiàng)S-100見(jiàn)于神經(jīng)鞘瘤或黑色素瘤。18.石蠟切片厚度通常要求為？【選項(xiàng)】A.1-2μmB.3-5μmC.8-10μmD.15-20μm【參考答案】B【解析】1.常規(guī)病理石蠟切片厚度為3-5μm，過(guò)薄易碎裂（如1-2μm），過(guò)厚（如8μm以上）影響光學(xué)顯微鏡分辨率和染色效果。2.C、D項(xiàng)常用于冷凍切片或特殊染色，A項(xiàng)為電鏡超薄切片厚度。19.Westernblotting技術(shù)主要用于檢測(cè)？【選項(xiàng)】A.DNA序列變異B.RNA表達(dá)水平C.蛋白質(zhì)分子量及表達(dá)量D.染色體結(jié)構(gòu)異常【參考答案】C【解析】1.Westernblotting通過(guò)凝膠電泳分離蛋白質(zhì)，再經(jīng)抗體雜交檢測(cè)特定蛋白的表達(dá)量及分子量大小。2.A項(xiàng)為測(cè)序技術(shù)范圍，B項(xiàng)需RT-PCR或Northernblot，D項(xiàng)由FISH或核型分析實(shí)現(xiàn)。20.診斷腎小球淀粉樣變性的“金標(biāo)準(zhǔn)”染色方法是？【選項(xiàng)】A.HE染色B.剛果紅染色+偏振光觀察C.PAS染色D.六胺銀染色【參考答案】B【解析】1.剛果紅染色后淀粉樣物呈磚紅色，偏振光下呈蘋(píng)果綠雙折光，是淀粉樣變性確診依據(jù)。2.A、C、D項(xiàng)雖顯示腎小球結(jié)構(gòu)，但無(wú)法特異性識(shí)別淀粉樣沉積物。21.在病理組織學(xué)技術(shù)中，PAS染色主要用于顯示以下哪種物質(zhì)？【選項(xiàng)】A.黏液B.糖原C.纖維素D.黑色素【參考答案】B【解析】PAS染色（過(guò)碘酸-希夫反應(yīng)）主要用于顯示多糖類(lèi)物質(zhì)，尤其是糖原和基膜。A選項(xiàng)黏液常用阿爾辛藍(lán)或黏液卡紅染色；C選項(xiàng)纖維素常用MSB染色法；D選項(xiàng)黑色素常用Fontana-Masson染色。22.免疫組化技術(shù)中，抗原修復(fù)的主要方法是？【選項(xiàng)】A.高壓加熱法B.胃蛋白酶消化法C.胰蛋白酶消化法D.微波處理法【參考答案】A【解析】抗原修復(fù)常用熱誘導(dǎo)表位修復(fù)（HIER），如高壓加熱法或微波處理法（D選項(xiàng)微波是熱修復(fù)的子類(lèi)），其中高壓法最常用。B、C選項(xiàng)為蛋白酶消化法，適用于部分特定抗原，非主流方法。23.組織脫水過(guò)程中，乙醇濃度梯度正確的順序是？【選項(xiàng)】A.70%→80%→90%→100%B.80%→95%→100%→無(wú)水乙醇C.50%→70%→95%→100%D.60%→80%→90%→無(wú)水乙醇【參考答案】C【解析】組織脫水需梯度漸進(jìn)，防止收縮變形。常規(guī)順序?yàn)椋?0%→70%→80%→95%→100%乙醇，或簡(jiǎn)化為50%→70%→95%→100%（選項(xiàng)C最接近）。A、D梯度跳躍不合理，B未包含低濃度起始步驟。24.分子病理檢測(cè)中，RT-PCR技術(shù)主要用于檢測(cè)？【選項(xiàng)】A.DNA突變B.RNA表達(dá)水平C.蛋白質(zhì)表達(dá)D.染色體異位【參考答案】B【解析】RT-PCR（逆轉(zhuǎn)錄PCR）通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄將RNA轉(zhuǎn)為cDNA再進(jìn)行擴(kuò)增，主要用于RNA定量分析。A選項(xiàng)DNA突變用Sanger測(cè)序或NGS；C選項(xiàng)蛋白質(zhì)用WB/IHC；D選項(xiàng)染色體異位常用FISH。25.常規(guī)石蠟包埋步驟的正確順序是？【選項(xiàng)】A.固定→脫水→透明→浸蠟→包埋B.脫水→固定→透明→包埋→浸蠟C.固定→透明→脫水→浸蠟→包埋D.透明→脫水→浸蠟→固定→包埋【參考答案】A【解析】石蠟包埋核心流程為：固定穩(wěn)定結(jié)構(gòu)→脫水去除水分→透明（二甲苯置換乙醇）→浸蠟（石蠟置換二甲苯）→包埋。其余選項(xiàng)順序錯(cuò)誤。26.HE染色中，分化液的常用成分是？【選項(xiàng)】A.鹽酸酒精B.伊紅溶液C.蘇木精染液D.二甲苯【參考答案】A【解析】分化液為1%鹽酸酒精（70%乙醇配制），用于去除細(xì)胞質(zhì)等非目標(biāo)部位的蘇木精染色。B選項(xiàng)伊紅為胞質(zhì)染色劑，C為核染色劑，D為脫蠟透明劑。27.冰凍切片技術(shù)最適用于以下哪種病理場(chǎng)景？【選項(xiàng)】A.常規(guī)活檢診斷B.術(shù)中快速病理診斷C.長(zhǎng)期保存組織樣本D.免疫組化染色【參考答案】B【解析】冰凍切片可在15分鐘內(nèi)完成制片，用于術(shù)中快速診斷。A、D首選石蠟切片（分辨率更高），C需石蠟包埋保存，冰凍樣本易降解。28.電鏡樣本制備中，常用雙固定法使用的試劑組合是？【選項(xiàng)】A.戊二醛+鋨酸B.多聚甲醛+乙醇C.甲醛+二甲苯D.丙酮+環(huán)氧樹(shù)脂【參考答案】A【解析】電鏡樣本需超微結(jié)構(gòu)保存：先用戊二醛初步固定蛋白，再用鋨酸固定脂類(lèi)并增加電子密度。B選項(xiàng)多聚甲醛為光鏡固定劑；C、D選項(xiàng)含透明或包埋劑，非固定液。29.特殊染色中，顯示彈力纖維的經(jīng)典方法是？【選項(xiàng)】A.Verhoeff染色B.剛果紅染色C.Masson三色染色D.VanGieson染色【參考答案】A【解析】Verhoeff染色利用鐵蘇木精特異性染彈力纖維呈黑色。B選項(xiàng)剛果紅染淀粉樣物，C選項(xiàng)染膠原/肌纖維，D選項(xiàng)染膠原（紅）與肌纖維（黃）。30.下列哪種染色方法適用于檢測(cè)幽門(mén)螺桿菌？【選項(xiàng)】A.革蘭染色B.抗酸染色C.吉姆薩染色D.Warthin-Starry銀染【參考答案】D【解析】Warthin-Starry銀染可使幽門(mén)螺桿菌呈棕黑色，背景黃色。A選項(xiàng)革蘭染色菌體小且陰性易漏；B針對(duì)結(jié)核桿菌；C吉姆薩對(duì)部分螺旋體有效，但靈敏度低。31.在病理實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理中，室間質(zhì)量評(píng)價(jià)（EQA）通常由哪個(gè)機(jī)構(gòu)負(fù)責(zé)組織實(shí)施？【選項(xiàng)】A.實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部質(zhì)控小組B.省級(jí)臨床檢驗(yàn)中心C.醫(yī)院醫(yī)務(wù)科D.國(guó)家衛(wèi)生健康委臨床檢驗(yàn)中心【參考答案】D【解析】1.室間質(zhì)量評(píng)價(jià)（EQA）是由外部獨(dú)立機(jī)構(gòu)組織的質(zhì)量評(píng)估活動(dòng)，用于驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。2.國(guó)家衛(wèi)生健康委臨床檢驗(yàn)中心是我國(guó)最高級(jí)別的臨床檢驗(yàn)質(zhì)量管理機(jī)構(gòu)，負(fù)責(zé)全國(guó)范圍EQA計(jì)劃的制定與實(shí)施（如衛(wèi)生部臨檢中心組織的PT項(xiàng)目）。3.選項(xiàng)A是室內(nèi)質(zhì)控（IQC）的執(zhí)行主體；選項(xiàng)B負(fù)責(zé)區(qū)域性質(zhì)量控制；選項(xiàng)C屬于醫(yī)療機(jī)構(gòu)行政管理機(jī)構(gòu)，均非EQA組織主體。32.進(jìn)行骨髓穿刺活檢時(shí)，若標(biāo)本發(fā)生溶血，最可能導(dǎo)致以下哪種檢查結(jié)果異常？【選項(xiàng)】A.腫瘤細(xì)胞形態(tài)識(shí)別B.鐵染色結(jié)果C.骨髓增生程度評(píng)估D.染色體核型分析【參考答案】B【解析】1.溶血會(huì)破壞紅細(xì)胞，釋放細(xì)胞內(nèi)鐵元素，干擾骨髓鐵染色（如普魯士藍(lán)染色）的準(zhǔn)確性。2.腫瘤細(xì)胞形態(tài)識(shí)別主要依賴(lài)細(xì)胞完整性，溶血對(duì)細(xì)胞核影響較?。还撬柙錾潭韧ㄟ^(guò)有核細(xì)胞數(shù)量評(píng)估，不受溶血直接影響；染色體分析需活細(xì)胞，溶血導(dǎo)致細(xì)胞死亡才會(huì)影響。33.病理實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行HE染色時(shí)，分化液通常選用的是：【選項(xiàng)】A.1%鹽酸酒精B.0.5%伊紅溶液C.稀氨水溶液D.磷酸鹽緩沖液【參考答案】A【解析】1.HE染色中分化指去除過(guò)量蘇木素染液，1%鹽酸酒精可選擇性脫去細(xì)胞核過(guò)染的蘇木素。2.選項(xiàng)B為胞質(zhì)染色劑；選項(xiàng)C用于藍(lán)化（返藍(lán)）；選項(xiàng)D為免疫組化常用緩沖液，均不用于分化步驟。34.按照生物安全要求，進(jìn)行結(jié)核分枝桿菌病理標(biāo)本處理的操作應(yīng)在哪種級(jí)別生物安全柜中進(jìn)行？【選項(xiàng)】A.I級(jí)生物安全柜B.II級(jí)A2型生物安全柜C.III級(jí)生物安全柜D.II級(jí)B2型生物安全柜【參考答案】B【解析】1.結(jié)核分枝桿菌屬第三類(lèi)病原微生物，需在BSL-2實(shí)驗(yàn)室操作。2.II級(jí)A2型生物安全柜可提供70%氣體循環(huán)，適用于感染性材料處理；III級(jí)適用于高風(fēng)險(xiǎn)病原體（如埃博拉）；B2型為全排風(fēng)柜，多用于化學(xué)制劑。35.配制乙醇-甲醛（AF）固定液時(shí)，若需制備100ml濃度為4%的甲醛溶液，需取37%甲醛原液約多少毫升？【選項(xiàng)】A.4.0mlB.10.8mlC.5.4mlD.7.3ml【參考答案】B【解析】1.計(jì)算公式：C1V1=C2V2（C1=37%，V1待求；C2=4%，V2=100ml）2.37%×V1=4%×100→V1≈10.8ml二、多選題（共35題）1.1.下列關(guān)于特殊染色方法的描述，正確的是：【選項(xiàng)】A.PAS染色常用于顯示組織中的糖原和基底膜B.剛果紅染色可用于淀粉樣物質(zhì)的鑒別C.蘇丹III染色用于顯示中性脂肪呈藍(lán)色D.網(wǎng)狀纖維染色通常采用Foot染色法E.Masson三色染色中膠原纖維被染成紅色【參考答案】A、B、D【解析】A正確：PAS染色通過(guò)高碘酸氧化糖原等物質(zhì)，使其與Schiff試劑結(jié)合呈紅色；B正確：剛果紅與淀粉樣物質(zhì)結(jié)合后偏光顯微鏡下呈蘋(píng)果綠雙折光；C錯(cuò)誤：蘇丹III染中性脂肪呈橙紅色，而非藍(lán)色；D正確：Foot染色法利用銀浸染技術(shù)顯示網(wǎng)狀纖維；E錯(cuò)誤：Masson三色染色中膠原纖維呈藍(lán)色或綠色，肌纖維呈紅色。2.2.影響組織固定效果的因素包括：【選項(xiàng)】A.固定液的滲透速率B.組織塊厚度C.固定時(shí)間D.固定時(shí)溫度E.固定液與組織體積比【參考答案】A、B、C、D、E【解析】A正確：滲透速率慢的固定液（如甲醛）需更長(zhǎng)時(shí)間；B正確：過(guò)厚組織中心固定不徹底；C正確：時(shí)間不足導(dǎo)致固定不充分，過(guò)長(zhǎng)引起組織硬化；D正確：通常4°C可延緩自溶，室溫（25°C）加速固定；E正確：推薦固定液體積為組織體積的10-20倍。3.3.免疫組化染色中出現(xiàn)非特異性染色的可能原因是：【選項(xiàng)】A.內(nèi)源性過(guò)氧化物酶未阻斷B.一抗?jié)舛冗^(guò)高C.封閉血清失效D.DAB顯色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)E.組織自身熒光干擾【參考答案】A、B、C、D【解析】A正確：紅細(xì)胞、粒細(xì)胞含內(nèi)源性酶，需用過(guò)氧化氫阻斷；B正確：高濃度一抗導(dǎo)致非特異性結(jié)合；C正確：封閉血清可減少背景染色，失效時(shí)增加非特異性結(jié)合；D正確：顯色超時(shí)使背景加深；E錯(cuò)誤：熒光干擾屬于免疫熒光技術(shù)問(wèn)題，與常規(guī)DAB顯色無(wú)關(guān)。4.4.關(guān)于PCR技術(shù)操作規(guī)范，正確的防控污染措施是：【選項(xiàng)】A.試劑分裝保存B.擴(kuò)增區(qū)與產(chǎn)物分析區(qū)物理分隔C.使用帶濾芯吸頭D.反應(yīng)體系中加入dUTP和UNG酶E.紫外線(xiàn)照射預(yù)處理耗材【參考答案】A、B、C、D、E【解析】A正確：分裝可避免反復(fù)凍降引入污染；B正確：分區(qū)操作防止氣溶膠擴(kuò)散；C正確：濾芯吸頭減少交叉污染；D正確：UNG酶降解含dU的污染物模板；E正確：紫外線(xiàn)可破壞核酸鏈。5.5.顯微鏡油鏡使用注意事項(xiàng)包括：【選項(xiàng)】A.滴香柏油后直接100×物鏡觀察B.調(diào)節(jié)時(shí)先粗調(diào)后微調(diào)C.鏡頭清潔需用二甲苯拭鏡紙D.觀察后立即用擦鏡紙擦拭油漬E.高倍鏡下避免調(diào)節(jié)聚光器光圈【參考答案】B、C、D【解析】A錯(cuò)誤：需先從低倍鏡定位后再轉(zhuǎn)油鏡；B正確：粗調(diào)接近樣本后改用微調(diào)對(duì)焦；C正確：香柏油殘留需用二甲苯溶解清除；D正確：防止油漬干涸損壞鏡頭；E錯(cuò)誤：油鏡需全開(kāi)光圈保證進(jìn)光量。6.6.組織脫水透明常用試劑組合正確的是：【選項(xiàng)】A.乙醇-二甲苯B.丙酮-氯仿C.甲醇-苯D.乙醇-松節(jié)油E.異丙醇-二甲苯【參考答案】A、B、D、E【解析】A常規(guī)組合：乙醇脫水后二甲苯透明；B替代方案：丙酮脫水快但收縮性強(qiáng)，氯仿透明溫和；D可行：松節(jié)油環(huán)保但透明速度慢；E適用：異丙醇脫水收縮??；C錯(cuò)誤：甲醇不用于脫水，苯因毒性已淘汰。7.7.石蠟包埋時(shí)溫度過(guò)高可能導(dǎo)致：【選項(xiàng)】A.組織塊變脆B.蠟塊出現(xiàn)結(jié)晶C.切片厚度不均D.組織抗原性破壞E.染色后細(xì)胞核淡染【參考答案】A、B、D【解析】A正確：高溫加速組織蛋白變性；B正確：超過(guò)石蠟熔點(diǎn)（通常56-58°C）致結(jié)構(gòu)破壞；D正確：高溫顯著影響抗原熱穩(wěn)定性；C錯(cuò)誤：厚度不均多因切片機(jī)故障；E錯(cuò)誤：核淡染常因蘇木素氧化不足或分化過(guò)度。8.8.HE染色中鹽酸乙醇分化的作用是：【選項(xiàng)】A.去除細(xì)胞質(zhì)過(guò)量染液B.調(diào)節(jié)細(xì)胞核著色深淺C.增強(qiáng)染色對(duì)比度D.水解DNA暴露磷酸基團(tuán)E.促進(jìn)伊紅著色【參考答案】B、C【解析】B正確：分化過(guò)度則核染色淺，不足則背景深；C正確：分化后僅細(xì)胞核保留蘇木素染色，與伊紅形成對(duì)比；A錯(cuò)誤：分化針對(duì)細(xì)胞核蘇木素；D錯(cuò)誤：酸水解用于Feulgen染色；E錯(cuò)誤：伊紅著色與分化無(wú)關(guān)。9.9.冷凍切片的操作要點(diǎn)包括：【選項(xiàng)】A.組織塊需充分固定后冷凍B.切片厚度通常為4-6μmC.速凍時(shí)用OCT包埋劑防冰晶D.恒冷箱溫度設(shè)為-20～-25°CE.未染色切片可長(zhǎng)期室溫保存【參考答案】B、C、D【解析】A錯(cuò)誤：固定應(yīng)在切片后進(jìn)行以防冰晶；B正確：較石蠟切片略厚；C正確：OCT減少冰晶形成；D正確：多數(shù)組織適用此溫度區(qū)間；E錯(cuò)誤：未染色切片需-80°C保存以防抗原降解。10.10.符合生物安全二級(jí)（BSL-2）實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)范的是：【選項(xiàng)】A.處理結(jié)核分枝桿菌樣本B.穿隔離衣戴護(hù)目鏡C.在生物安全柜內(nèi)操作可疑致病菌D.高壓滅菌后廢棄物按醫(yī)療垃圾處理E.可進(jìn)行未知病原體的分離培養(yǎng)【參考答案】B、C、D【解析】B、C、D正確：符合BSL-2個(gè)人防護(hù)及操作要求；A錯(cuò)誤：結(jié)核分枝桿菌需BSL-3；E錯(cuò)誤：未知病原體需在更高級(jí)別實(shí)驗(yàn)室（如BSL-3/4）操作。11.下列關(guān)于特殊染色技術(shù)的應(yīng)用，正確的是？【選項(xiàng)】A.過(guò)碘酸-雪夫(PAS)染色主要用于顯示糖原和中性粘多糖B.剛果紅染色可特異性顯示淀粉樣物質(zhì)C.Masson三色染色中膠原纖維呈藍(lán)色D.普魯士藍(lán)染色用于檢測(cè)含鐵血黃素E.黑色素可通過(guò)Fontana-Masson染色標(biāo)記【參考答案】A,B,D,E【解析】1.A正確：PAS染色通過(guò)氧化糖類(lèi)中的乙二醇基生成醛基，再與無(wú)色品紅結(jié)合顯色，適用于糖原和中性粘多糖。2.B正確：剛果紅與淀粉樣物質(zhì)中的β-折疊結(jié)構(gòu)特異性結(jié)合，偏振光下呈蘋(píng)果綠色雙折光。3.C錯(cuò)誤：Masson三色染色中膠原纖維呈藍(lán)色（改良法）或綠色（經(jīng)典法），肌纖維呈紅色。4.D正確：普魯士藍(lán)染色中三價(jià)鐵與亞鐵氰化鉀反應(yīng)生成藍(lán)色沉淀，用于含鐵血黃素檢測(cè)。5.E正確：Fontana-Masson染色利用銀氨溶液還原黑色素中的還原性基團(tuán)使其顯黑色。12.下列哪些是免疫組織化學(xué)技術(shù)中常用的上皮源性標(biāo)記物？【選項(xiàng)】A.CK（細(xì)胞角蛋白）B.Vimentin（波形蛋白）C.EMA（上皮膜抗原）D.CD34E.HMB45【參考答案】A,C【解析】1.A正確：CK是上皮細(xì)胞特異性中間絲蛋白，廣泛用于carcinomas標(biāo)記。2.B錯(cuò)誤：Vimentin是間葉組織標(biāo)記物（如纖維母細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞）。3.C正確：EMA是上皮細(xì)胞膜糖蛋白，尤其腺上皮中高表達(dá)。4.D錯(cuò)誤：CD34是血管內(nèi)皮和造血干細(xì)胞標(biāo)記物。5.E錯(cuò)誤：HMB45為黑色素細(xì)胞腫瘤特異性標(biāo)記。13.關(guān)于病理組織固定液的描述，哪些屬于混合固定液？【選項(xiàng)】A.Bouin液（苦味酸+甲醛+冰醋酸）B.4%多聚甲醛C.Zenker液（重鉻酸鉀+升汞+冰醋酸）D.10%中性福爾馬林E.Carnoy液（乙醇+冰醋酸+氯仿）【參考答案】A,C,E【解析】1.A正確：Bouin液由三種成分組成，適用于結(jié)締組織和肌肉組織的良好固定。2.B錯(cuò)誤：4%多聚甲醛為單一成分固定液，用于分子病理研究。3.C正確：Zenker液含三種成分，對(duì)細(xì)胞核固定效果佳，需注意重鉻酸鉀毒性。4.D錯(cuò)誤：10%中性福爾馬林由甲醛與磷酸鹽緩沖液配制，仍屬單一活性成分。5.E正確：Carnoy液為快速穿透性混合液，常用于糖原固定。14.關(guān)于顯微鏡油鏡的使用，以下操作正確的是？【選項(xiàng)】A.使用香柏油作為介質(zhì)B.可直接用蒸餾水清洗鏡頭C.需配合100倍物鏡使用D.觀察后需立即用二甲苯擦拭鏡頭E.使用時(shí)應(yīng)升高聚光器并開(kāi)大光圈【參考答案】A,C,D,E【解析】1.A正確：油鏡需香柏油匹配鏡頭與玻片的折射率（約1.515）。2.B錯(cuò)誤：蒸餾水無(wú)法溶解香柏油，應(yīng)使用專(zhuān)用鏡頭清潔劑或二甲苯。3.C正確：油鏡對(duì)應(yīng)物鏡放大倍數(shù)為100×。4.D正確：不及時(shí)清潔會(huì)導(dǎo)致樹(shù)脂硬化損壞鏡頭。5.E正確：提升聚光器并開(kāi)大光圈可增加景深和分辨率。15.關(guān)于蘇木精染色的"返藍(lán)"處理，必要條件是？【選項(xiàng)】A.流水沖洗10分鐘以上B.使用1%鹽酸乙醇分化C.弱堿性溶液處理（如稀氨水）D.需在染色后立即進(jìn)行E.可用飽和碳酸鋰溶液替代【參考答案】A,C,E【解析】1.A正確：充分水洗去除酸性分化液是返藍(lán)基礎(chǔ)。2.B錯(cuò)誤：鹽酸乙醇用于分化而非返藍(lán)。3.C正確：弱堿性環(huán)境（pH7.5-8.0）使蘇木精轉(zhuǎn)化為藍(lán)色氧化產(chǎn)物。4.D錯(cuò)誤：返藍(lán)在水洗后進(jìn)行，非染色后立即操作。5.E正確：0.5-1%氨水或飽和碳酸鋰均為常用返藍(lán)試劑。16.在分子病理技術(shù)中，PCR反應(yīng)體系必需成分包括？【選項(xiàng)】A.模板DNAB.特異性引物C.dNTPs混合物D.TaqDNA聚合酶E.Mg2?【參考答案】A,B,C,D,E【解析】1.A正確：模板DNA提供擴(kuò)增基礎(chǔ)。2.B正確：引物決定擴(kuò)增特異性。3.C正確：dNTPs為合成新鏈的原料。4.D正確：耐熱DNA聚合酶催化鏈延伸。5.E正確：Mg2?是Taq酶的輔助因子，其濃度直接影響擴(kuò)增效率。17.下列染色液成分與染色目標(biāo)匹配正確的是？【選項(xiàng)】A.維多利亞藍(lán)+核固紅→彈性纖維B.麗春紅+亮綠→Masson三色染色C.硫酸阿利新藍(lán)→酸性粘多糖D.普魯士藍(lán)→鈣鹽沉積E.油紅O→脂肪【參考答案】A,B,C,E【解析】1.A正確：維多利亞藍(lán)染彈性纖維呈藍(lán)綠色，核固紅復(fù)染細(xì)胞核。2.B正確：麗春紅染肌纖維，亮綠染膠原纖維。3.C正確：阿利新藍(lán)在酸性環(huán)境中與羧基/硫酸基團(tuán)結(jié)合顯示酸性粘多糖。4.D錯(cuò)誤：普魯士藍(lán)染含鐵血黃素，鈣鹽常用茜素紅或VonKossa法。5.E正確：油紅O為脂溶性染料，冰凍切片中特異性顯示中性脂肪。18.免疫組化中“抗原修復(fù)”方法包括？【選項(xiàng)】A.檸檬酸鹽緩沖液微波修復(fù)B.EDTA堿性溶液高壓修復(fù)C.蛋白酶K消化D.胃蛋白酶消化E.胰蛋白酶消化【參考答案】A,B,C,D,E【解析】1.A正確：pH6.0檸檬酸鹽緩沖液適用于多數(shù)抗原的微波修復(fù)。2.B正確：pH8.0-9.0EDTA溶液對(duì)核抗原修復(fù)效果更佳。3.C正確：蛋白酶K常用于膜相關(guān)抗原的消化暴露。4.D正確：胃蛋白酶（pH2.0）適用于胞質(zhì)抗原修復(fù)。5.E正確：胰蛋白酶（pH7.8）用于病毒包涵體等致密抗原。19.關(guān)于電鏡標(biāo)本制備，正確的描述是？【選項(xiàng)】A.戊二醛主要固定蛋白質(zhì)B.鋨酸可固定脂類(lèi)并提高電子密度C.脫水需梯度乙醇從50%至100%D.包埋劑常用環(huán)氧樹(shù)脂812E.超薄切片厚度通常為50-80nm【參考答案】A,B,D,E【解析】1.A正確：戊二醛通過(guò)交聯(lián)氨基固定蛋白結(jié)構(gòu)。2.B正確：鋨酸與不飽和脂肪酸結(jié)合，同時(shí)賦予膜結(jié)構(gòu)高電子密度。3.C錯(cuò)誤：脫水應(yīng)從低濃度（如30%）開(kāi)始逐步遞增，避免組織收縮。4.D正確：環(huán)氧樹(shù)脂812具有良好切割性和電子穿透性。5.E正確：50-80nm切片可滿(mǎn)足透射電鏡觀察需求。20.HE染色中“分化”的目的是？【選項(xiàng)】A.去除細(xì)胞核非特異性吸附的蘇木精B.增強(qiáng)細(xì)胞質(zhì)的著色能力C.使細(xì)胞核與背景對(duì)比更清晰D.防止染色過(guò)度E.促進(jìn)伊紅與胞質(zhì)結(jié)合【參考答案】A,C,D【解析】1.A正確：鹽酸乙醇分化溶解核外多余染料，實(shí)現(xiàn)特異性染色。2.B錯(cuò)誤：分化針對(duì)核染色，與胞質(zhì)染色無(wú)直接關(guān)聯(lián)。3.C正確：分化不足會(huì)導(dǎo)致核染色彌散，過(guò)度則核過(guò)淺。4.D正確：分化是控制核染色深淺的關(guān)鍵步驟。5.E錯(cuò)誤：伊紅染色在分化后進(jìn)行，兩者無(wú)促進(jìn)關(guān)系。21.下列關(guān)于HE染色中分化和藍(lán)化的描述，正確的是：【選項(xiàng)】A.分化是指將切片中需要觀察的結(jié)構(gòu)保留染料，而其他成分脫去染料的過(guò)程B.藍(lán)化是用堿性溶液使蘇木精與組織中的鐵離子結(jié)合呈現(xiàn)藍(lán)色C.過(guò)度分化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞核染色過(guò)淺D.藍(lán)化不充分會(huì)造成細(xì)胞核呈現(xiàn)灰紫色而非藍(lán)色E.藍(lán)化后需流水沖洗10分鐘以上確保顏色穩(wěn)定【參考答案】ACDE【解析】A.正確，分化是通過(guò)選擇性脫色保留特定結(jié)構(gòu)的關(guān)鍵步驟。B.錯(cuò)誤，藍(lán)化使用弱堿性溶液（如飽和碳酸鋰）促使蘇木精顯色為藍(lán)色，并非與鐵離子結(jié)合。C.正確，過(guò)度分化會(huì)脫去過(guò)多核染色質(zhì)上的染料。D.正確，堿性環(huán)境不足會(huì)導(dǎo)致染色偏紅。E.正確，充分沖洗可去除殘留堿性物，保證染色穩(wěn)定性。22.關(guān)于特殊染色技術(shù)的應(yīng)用匹配，正確的是：【選項(xiàng)】A.網(wǎng)狀纖維染色—Gomori銀氨溶液法B.黏液物質(zhì)染色—阿爾辛藍(lán)（AB）染色C.脂肪染色—油紅O冰凍切片法D.淀粉樣物質(zhì)—?jiǎng)偣t偏振光觀察E.黑色素—Fontana-Masson銀染法【參考答案】ABCDE【解析】A.正確，網(wǎng)狀纖維需銀染顯示黑色。B.正確，AB特異性顯示酸性黏液物質(zhì)。C.正確，油紅O是脂肪特異性染色劑。D.正確，剛果紅染色后在偏振光下呈現(xiàn)蘋(píng)果綠雙折射。E.正確，該法可使黑色素呈現(xiàn)黑色顆粒狀。23.免疫組化假陽(yáng)性的可能原因包括：【選項(xiàng)】A.內(nèi)源性過(guò)氧化物酶未完全阻斷B.抗體濃度過(guò)高導(dǎo)致非特異性結(jié)合C.組織自發(fā)熒光未處理D.抗原熱修復(fù)時(shí)間不足E.二抗種屬來(lái)源選擇錯(cuò)誤【參考答案】ABC【解析】A.正確，紅細(xì)胞等含有內(nèi)源性酶會(huì)顯色。B.正確，高濃度抗體易產(chǎn)生交叉反應(yīng)。C.正確，彈性纖維等可出現(xiàn)自發(fā)熒光。D.錯(cuò)誤，抗原修復(fù)不足會(huì)導(dǎo)致假陰性。E.錯(cuò)誤，種屬錯(cuò)誤主要導(dǎo)致假陰性。24.在分子病理檢測(cè)中，關(guān)于PCR技術(shù)的描述正確的是：【選項(xiàng)】A.實(shí)時(shí)定量PCR可通過(guò)Ct值檢測(cè)初始模板量B.巢式PCR通過(guò)兩輪擴(kuò)增提高特異性C.RT-PCR用于檢測(cè)DNA中的特定序列D.甲基化特異性PCR需先進(jìn)行亞硫酸鹽處理E.擴(kuò)增產(chǎn)物污染是假陽(yáng)性的主要原因【參考答案】ABDE【解析】A.正確，Ct值與初始模板量呈負(fù)相關(guān)。B.正確，兩次引物設(shè)計(jì)減少非特異擴(kuò)增。C.錯(cuò)誤，RT-PCR是檢測(cè)RNA的技術(shù)。D.正確，亞硫酸鹽可將未甲基化胞嘧啶轉(zhuǎn)化為尿嘧啶。E.正確，擴(kuò)增產(chǎn)物氣溶膠污染是常見(jiàn)問(wèn)題。25.病理技術(shù)質(zhì)量控制的關(guān)鍵環(huán)節(jié)包括：【選項(xiàng)】A.組織固定時(shí)間控制在4-24小時(shí)B.脫水機(jī)試劑每周更換并記錄C.石蠟熔點(diǎn)檢測(cè)每月進(jìn)行1次D.HE染色切片每批次設(shè)陰性對(duì)照E.免疫組化陰陽(yáng)性對(duì)照同步實(shí)驗(yàn)【參考答案】ABE【解析】A.正確，甲醛固定不足或過(guò)度均影響后續(xù)處理。B.正確，脫水試劑劣化會(huì)導(dǎo)致組織收縮脆裂。E.正確，陰陽(yáng)對(duì)照是判斷染色有效性的必備條件。C.錯(cuò)誤，石蠟熔點(diǎn)應(yīng)每次新批次檢測(cè)。D.錯(cuò)誤，HE染色無(wú)需陰性對(duì)照。26.關(guān)于冰凍切片制備規(guī)范的是：【選項(xiàng)】A.新鮮組織需立即冷凍處理防止自溶B.最佳切片溫度為-18℃至-22℃C.OCT包埋劑用量覆蓋組織邊緣即可D.切片厚度通常為5-8μmE.甲苯胺藍(lán)染色用于快速判斷組織質(zhì)量【參考答案】ABD【解析】A.正確，快速冷凍減少冰晶偽影。B.正確，該溫區(qū)保證切片完整性。D.正確，過(guò)厚影響觀察。C.錯(cuò)誤，OCT應(yīng)完全包埋組織。E.錯(cuò)誤，甲苯胺藍(lán)用于神經(jīng)組織染色。27.符合電鏡樣品處理要求的是：【選項(xiàng)】A.戊二醛-鋨酸雙重固定B.梯度乙醇脫水C.環(huán)氧樹(shù)脂618包埋D.超薄切片厚度50-70nmE.醋酸鈾-檸檬酸鉛雙重染色【參考答案】ABDE【解析】A.正確，戊二醛固定蛋白，鋨酸固定脂質(zhì)。B.正確，常規(guī)脫水方法。D.正確，該厚度適于透射電鏡觀察。E.正確，分別突出細(xì)胞膜和細(xì)胞器。C.錯(cuò)誤，常用812環(huán)氧樹(shù)脂。28.實(shí)驗(yàn)室安全操作規(guī)范包括：【選項(xiàng)】A.二甲苯操作需在通風(fēng)櫥進(jìn)行B.甲醛處理佩戴N95口罩C.銳器直接丟棄于普通垃圾桶D.離心機(jī)配平誤差不超過(guò)0.1gE.緊急噴淋裝置位于走廊明顯位置【參考答案】AD【解析】A.正確，有機(jī)溶劑揮發(fā)需防護(hù)。D.正確，精密離心要求嚴(yán)格配平。B.錯(cuò)誤，甲醛應(yīng)使用防有機(jī)氣體口罩。C.錯(cuò)誤，銳器必須投入專(zhuān)用容器。E.錯(cuò)誤，噴淋裝置應(yīng)設(shè)置在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)。29.病理檔案管理要求正確的是：【選項(xiàng)】A.石蠟塊儲(chǔ)存溫度≤24℃B.玻片按年份編號(hào)存檔C.電子數(shù)據(jù)定期雙重備份D.標(biāo)本保存期限：普通標(biāo)本1年E.借閱檔案需登記借閱人和歸還日期【參考答案】CE【解析】C.正確，防止數(shù)據(jù)丟失。E.正確，確保檔案可追溯性。A.錯(cuò)誤，石蠟塊應(yīng)常溫避光干燥保存。B.錯(cuò)誤，按病理號(hào)連續(xù)編號(hào)管理。D.錯(cuò)誤，普通標(biāo)本至少保存15年。30.關(guān)于自動(dòng)染色機(jī)使用的注意事項(xiàng)：【選項(xiàng)】A.晨間開(kāi)機(jī)需空載運(yùn)行程序預(yù)熱B.每月清洗染液管路防止結(jié)晶堵塞C.脫水試劑與染色試劑共用加注口D.HE染色程序設(shè)定蘇木精染色5分鐘E.異常停機(jī)需立即重啟設(shè)備【參考答案】AB【解析】A.正確，穩(wěn)定系統(tǒng)溫度。B.正確，防止殘留染料積聚。C.錯(cuò)誤，必須隔離防止試劑污染。D.錯(cuò)誤，常規(guī)蘇木精染色為8-10分鐘。E.錯(cuò)誤，應(yīng)先排除故障原因再重啟。31.下列哪些染色方法是常用于顯示真菌的特殊染色法？（）【選項(xiàng)】A.PAS染色B.革蘭染色C.抗酸染色D.六胺銀染色E.蘇丹Ⅲ染色【參考答案】A、D【解析】1.PAS染色（過(guò)碘酸雪夫染色）可使真菌細(xì)胞壁中的多糖成分呈紅色，常用于真菌檢測(cè)。2.六胺銀染色（GMS染色）能將真菌的細(xì)胞壁染成黑色，背景對(duì)比清晰，是診斷真菌感染的金標(biāo)準(zhǔn)。3.革蘭染色主要用于細(xì)菌分類(lèi)，抗酸染色用于結(jié)核桿菌，蘇丹Ⅲ染色用于脂肪組織，均不直接用于真菌顯示。32.下列哪些屬于組織固定不當(dāng)可能導(dǎo)致的后果？（）【選項(xiàng)】A.細(xì)胞自溶B.抗原性喪失C.組織收縮變形D.染色異常E.核酸降解【參考答案】A、B、C、D【解析】1.固定不足可導(dǎo)致細(xì)胞自溶（A正確）及核酸降解（E錯(cuò)誤，固定不足會(huì)加速核酸降解，但固定過(guò)度也可能破壞核酸）。2.固定液選擇或時(shí)間不當(dāng)會(huì)破壞抗原表位，導(dǎo)致免疫組化假陰性（B正確）。3.甲醛濃度過(guò)高或時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可引起組織過(guò)度硬化收縮（C正確）。4.固定不良會(huì)影響染料結(jié)合，導(dǎo)致染色不均（D正確）。E選項(xiàng)描述不全面，故不選。33.免疫組化技術(shù)中，造成假陰性的常見(jiàn)原因包括？（）【選項(xiàng)】A.抗原修復(fù)不充分B.一抗?jié)舛冗^(guò)高C.組織固定時(shí)間過(guò)長(zhǎng)D.內(nèi)源性過(guò)氧化物酶未阻斷E.顯色時(shí)間不足【參考答案】A、C、E【解析】1.抗原修復(fù)不充分（A正確）會(huì)阻礙抗體與抗原結(jié)合；固定過(guò)度（C正確）可掩蔽抗原位點(diǎn)。2.顯色時(shí)間不足（E正確）導(dǎo)致信號(hào)未充分顯現(xiàn)。一抗?jié)舛冗^(guò)高可能導(dǎo)致非特異性結(jié)合（B錯(cuò)誤）；內(nèi)源性酶未阻斷主要引起假陽(yáng)性（D錯(cuò)誤）。34.關(guān)于冰凍切片技術(shù)的描述，正確的是？（）【選項(xiàng)】A.適用于脂肪含量高的組織B.可獲得較石蠟切片更薄的切片C.常用于術(shù)中快速病理診斷D.組織需經(jīng)梯度酒精脫水E.切片后需立即固定防止干燥【參考答案】C、E【解析】1.冰凍切片主要用于術(shù)中快速診斷（C正確），切片后需立即固定以防組織干燥變形（E正確）。2.脂肪組織因難以冷凍硬化，通常不適合冰凍切片（A錯(cuò)誤）；石蠟切片厚度更?。˙錯(cuò)誤）；冰凍切片無(wú)需脫水包埋（D錯(cuò)誤）。35.下列哪些因素會(huì)影響HE染色效果？（）【選項(xiàng)】A.脫蠟不徹底B.蘇木素氧化過(guò)度C.分化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)D.封片膠濃度過(guò)高E.組織固定不充分【參考答案】A、B、C、E【解析】1.脫蠟不徹底（A正確）會(huì)導(dǎo)致染色不均；蘇木素氧化過(guò)度（B正確）使細(xì)胞核過(guò)染；分化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)（C正確）致核染色淺淡；固定不良（E正確）引起細(xì)胞結(jié)構(gòu)模糊。2.封片膠濃度影響封片效果，與染色無(wú)關(guān)（D錯(cuò)誤）。三、判斷題（共30題）1.1.組織處理過(guò)程中，固定后的組織在梯度乙醇脫水時(shí)，高濃度乙醇（如95%、100%）的處理時(shí)間應(yīng)長(zhǎng)于低濃度乙醇（如70%、80%），以確保徹底脫水?！具x項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】B【解析】錯(cuò)誤。梯度乙醇脫水應(yīng)遵循“低濃度時(shí)間長(zhǎng)，高濃度時(shí)間短”的原則。低濃度乙醇（如70%、80%）滲透性較強(qiáng)，需較長(zhǎng)時(shí)間（通常1-2小時(shí)）充分置換組織中水分；高濃度乙醇（如95%、100%）脫水速度較快，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)易導(dǎo)致組織過(guò)度硬化或脆裂，通常每級(jí)30-60分鐘即可。因此，題干描述錯(cuò)誤。2.2.Masson三色染色中，膠原纖維被染成藍(lán)色，肌纖維染成紅色，細(xì)胞核染成黑色?！具x項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】A【解析】正確。Masson三色染色是區(qū)分膠原纖維與肌纖維的常用方法。其原理為：酸性染料麗春紅（或品紅）與肌纖維結(jié)合呈紅色，苯胺藍(lán)與膠原纖維結(jié)合呈藍(lán)色，鐵蘇木素將細(xì)胞核染成藍(lán)黑色。因此題干描述符合標(biāo)準(zhǔn)染色結(jié)果。3.3.PAS染色（過(guò)碘酸-雪夫反應(yīng)）陽(yáng)性?xún)H代表組織中存在糖原，不可用于黏液物質(zhì)的鑒別。【選項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】B【解析】錯(cuò)誤。PAS染色通過(guò)過(guò)碘酸氧化糖類(lèi)中的乙二醇基生成醛基，再與雪夫試劑結(jié)合顯色，可用于檢測(cè)糖原、中性黏液物質(zhì)、基底膜成分等多種含多糖或糖蛋白的結(jié)構(gòu)。題干中“僅代表糖原”的表述錯(cuò)誤，其應(yīng)用范圍更廣。4.4.免疫組化染色中，內(nèi)源性過(guò)氧化物酶的滅活需在抗原修復(fù)步驟之前完成，以避免假陽(yáng)性結(jié)果?！具x項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】A【解析】正確。內(nèi)源性過(guò)氧化物酶（如紅細(xì)胞、粒細(xì)胞中的酶）會(huì)在后續(xù)DAB顯色時(shí)產(chǎn)生非特異性著色，導(dǎo)致假陽(yáng)性。滅活步驟通常在阻斷劑處理前完成，且必須在抗原修復(fù)后進(jìn)行，否則高溫修復(fù)可能破壞滅活效果。題干表述正確。5.5.免疫組化技術(shù)中，熱修復(fù)（如高壓修復(fù)、微波修復(fù)）與酶消化修復(fù)可任意互換使用，對(duì)染色結(jié)果無(wú)顯著影響?！具x項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】B【解析】錯(cuò)誤。熱修復(fù)適用于因甲醛交聯(lián)掩蓋的抗原表位，而酶消化（如胰蛋白酶）主要用于分解阻礙抗原暴露的蛋白質(zhì)。兩者作用機(jī)制不同，需根據(jù)抗原特性選擇：如細(xì)胞膜抗原多用酶消化，核抗原多用熱修復(fù)?；Q可能導(dǎo)致抗原活性喪失或背景增高。6.6.冰凍切片厚度通常為5-10μm，若切片過(guò)厚（如>15μm），易導(dǎo)致染色不均或細(xì)胞重疊影響觀察?！具x項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】A【解析】正確。冰凍切片因無(wú)需脫水包埋，組織含水多，最佳厚度為4-8μm。過(guò)厚時(shí)切片易皺褶、染色試劑滲透不均，且細(xì)胞層次重疊會(huì)干擾顯微鏡下結(jié)構(gòu)判讀（如核質(zhì)比例評(píng)估）。題干描述符合操作規(guī)范。7.7.PCR實(shí)驗(yàn)室中，擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)應(yīng)與試劑配制區(qū)嚴(yán)格分開(kāi)，主要目的是防止引物降解。【選項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】B【解析】錯(cuò)誤。分區(qū)管理的核心目的是避免擴(kuò)增產(chǎn)物氣溶膠污染試劑或樣本，造成假陽(yáng)性。引物降解主要與儲(chǔ)存條件（如反復(fù)凍融、核酸酶污染）相關(guān)，與分區(qū)無(wú)直接聯(lián)系。題干混淆了分區(qū)的核心意義。8.8.蘇木精-伊紅（HE）染色中，分化是指用酸性溶液（如1%鹽酸乙醇）去除細(xì)胞核中過(guò)染的蘇木精，使染色深淺適度?！具x項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】A【解析】正確。蘇木精為堿性染料，與細(xì)胞核內(nèi)酸性物質(zhì)結(jié)合后易過(guò)度染色。分化步驟利用酸性環(huán)境削弱蘇木精與組織非特異性結(jié)合，僅保留細(xì)胞核的理想著色強(qiáng)度，是HE染色質(zhì)量控制的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。9.9.熒光顯微鏡觀察時(shí)，若采用落射式光源，可直接使用普通蓋玻片而非熒光專(zhuān)用蓋玻片?！具x項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】B【解析】錯(cuò)誤。落射式熒光顯微鏡雖光路設(shè)計(jì)優(yōu)于透射式，但普通蓋玻片厚度不均或含自發(fā)熒光雜質(zhì)（如某些玻璃中的金屬離子），仍可能降低成像清晰度或引入背景噪音。專(zhuān)用蓋玻片（厚度0.17mm、低熒光）可確保光學(xué)性能和信號(hào)準(zhǔn)確性。10.10.用于分子病理的RNA提取過(guò)程中，組織樣本應(yīng)全程在-20℃保存以避免RNA酶降解?！具x項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】B【解析】錯(cuò)誤。-20℃不能完全抑制RNA酶活性，長(zhǎng)期儲(chǔ)存需置于-80℃。此外，提取過(guò)程中需使用RNase-free耗材及試劑，并添加RNA酶抑制劑（如焦碳酸二乙酯）。題干中“-20℃保存”不符合RNA穩(wěn)定性要求。11.1.在病理組織處理過(guò)程中，冰凍切片技術(shù)通常不需要經(jīng)過(guò)固定的步驟即可直接進(jìn)行切片?！具x項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】A【解析】冰凍切片技術(shù)通過(guò)快速冷凍使組織變硬，直接切片以避免常規(guī)石蠟切片中的固定和脫水步驟。固定主要用于保存組織形態(tài)和防止自溶，但冰凍切片的目標(biāo)是快速獲取診斷結(jié)果，因此無(wú)需常規(guī)固定（快速冷凍本身已能暫時(shí)固定組織）。12.2.PAS染色（糖原染色）陽(yáng)性的物質(zhì)可完全確認(rèn)是糖原，無(wú)需其他輔助染色鑒別?！具x項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】B【解析】PAS染色對(duì)糖原、中性黏液物質(zhì)、基底膜等均呈陽(yáng)性反應(yīng)。需結(jié)合淀粉酶消化實(shí)驗(yàn)輔助鑒別：若消化后PAS陽(yáng)性消失則為糖原，否則為其他物質(zhì)（如黏液）。因此僅憑PAS陽(yáng)性不能明確是糖原。13.3.免疫組織化學(xué)染色中，內(nèi)源性過(guò)氧化物酶的滅活是阻斷非特異性染色的必要步驟?！具x項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】A【解析】?jī)?nèi)源性過(guò)氧化物酶（如紅細(xì)胞、粒細(xì)胞）會(huì)與顯色底物反應(yīng)產(chǎn)生假陽(yáng)性，需用3%過(guò)氧化氫或甲醇-H?O?處理滅活，以確保特異性信號(hào)源于目標(biāo)抗原-抗體反應(yīng)。14.4.中性福爾馬林固定液的pH值應(yīng)嚴(yán)格控制在7.8-8.0，以維持最佳固定效果?！具x項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】B【解析】中性福爾馬林的最佳pH值是7.2-7.4。若pH＞8.0會(huì)導(dǎo)致組織過(guò)度硬化，且易形成福爾馬林色素沉淀；pH過(guò)低則降低交聯(lián)效率，影響固定質(zhì)量。15.5.蘇木精-伊紅（HE）染色中，伊紅染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞核被染成紅色。【選項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】B【解析】伊紅主要染細(xì)胞質(zhì)和間質(zhì)（紅色），細(xì)胞核由蘇木精染色（藍(lán)色）。若伊紅時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，僅會(huì)加深胞質(zhì)/間質(zhì)著色，不會(huì)改變細(xì)胞核的顏色（因蘇木精已結(jié)合且分化步驟限定了核著色范圍）。16.6.腎穿刺活檢標(biāo)本的電子顯微鏡檢查必須使用戊二醛固定液而非福爾馬林?！具x項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】A【解析】戊二醛能更好保存超微結(jié)構(gòu)（如腎小球基底膜），而福爾馬林易使蛋白質(zhì)交聯(lián)過(guò)度，導(dǎo)致電鏡細(xì)節(jié)模糊。因此電鏡樣本需專(zhuān)用戊二醛固定，常規(guī)光鏡樣本可用福爾馬林。17.7.Masson三色染色中，膠原纖維被染成藍(lán)色是因其與甲基藍(lán)選擇性結(jié)合。【選項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】B【解析】Masson染色中膠原纖