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152024-02-23發(fā)布本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定本文件由內(nèi)蒙古自治區(qū)畜牧業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會（SAM/TC1I綿羊瘤胃微生物儲備糖原的測定方法GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和微生物儲備糖原microbialreservecarbohyd存糖原的形式儲備多量碳水化合物，稱為微生物儲備糖），125.8無氮PBS緩沖液：準(zhǔn)確稱取665于90ml雙蒸水中，用鹽酸調(diào)節(jié)pH至6.80,定容至100mL。至溶液清亮，然后用塑料管量取上層清液108mL,用無二氧化碳的水稀釋至1000mL,搖勻即可。6.2分析天平，感量0.0001g。6.3量筒，規(guī)格100mL和1000mL。6.4分液漏斗，規(guī)格250mL。6.5生化培養(yǎng)箱，控溫范圍0℃~50℃。6.7低溫冰箱，溫度范圍：-20℃~4℃。6.8高速冷凍離心機，溫度范圍：-20℃~40℃,轉(zhuǎn)速：200rpm～15000rpm。6.9恒溫水浴鍋，精度±0.5℃。通過瘤胃瘺管或口腔瘤胃液取樣器采集瘤胃內(nèi)容物，取200mL瘤胃內(nèi)容物放置于39℃預(yù)熱的暖水瘤胃混合液置于生化培養(yǎng)箱中39℃培養(yǎng)，45min后草渣顆粒上升到頂層，通過漏斗口獲得下層瘤10000rpm離心10min,去除上清液后留取下層固體，獲得混合瘤胃微生物，儲存在-20℃?zhèn)溆?。獲得的混合瘤胃微生沉淀重懸于1mL水中，沸水浴15min使糖苷酶失活，10000rpm離心13置于冰水內(nèi)冷卻至室溫；加完后，將試管放入沸水中水浴15min,水浴液面略高于試管中試劑液面，待反應(yīng)完成后冰水中冷卻至室溫，然后于620nm波長處比色測定吸光8.1糖原含量以W表示，數(shù)值以mg/mL計，按公式(1)進行計算：1/10——表示由10mL瘤胃內(nèi)容

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