醫(yī)療器械微生物知識(shí)考試試題及答案一、單項(xiàng)選擇題（每題2分，共30分）1.以下哪種微生物是醫(yī)療器械無(wú)菌檢查中需重點(diǎn)關(guān)注的“控制菌”？A.金黃色葡萄球菌B.枯草芽孢桿菌C.黑曲霉D.白色念珠菌答案：A解析：控制菌指在醫(yī)療器械中不得檢出的特定致病性微生物，金黃色葡萄球菌是常見(jiàn)控制菌之一；枯草芽孢桿菌常用于滅菌驗(yàn)證的生物指示劑，黑曲霉和白色念珠菌屬于真菌，雖需控制但非典型“控制菌”。2.根據(jù)《中國(guó)藥典》2020年版，非無(wú)菌植入性醫(yī)療器械（接觸人體組織≥30天）的需氧菌總數(shù)標(biāo)準(zhǔn)為：A.≤100CFU/件B.≤1000CFU/件C.≤10CFU/件D.≤500CFU/件答案：C解析：《中國(guó)藥典》四部1107微生物限度檢查法規(guī)定，非無(wú)菌植入性醫(yī)療器械（接觸時(shí)間≥30天）的需氧菌總數(shù)應(yīng)≤10CFU/件，接觸時(shí)間＜30天的為≤100CFU/件。3.環(huán)氧乙烷（EO）滅菌確認(rèn)中，生物指示劑通常選擇：A.嗜熱脂肪芽孢桿菌（ATCC7953）B.枯草芽孢桿菌黑色變種（ATCC9372）C.短小芽孢桿菌（ATCC27142）D.生孢梭菌（ATCC19404）答案：B解析：EO滅菌的生物指示劑需選擇對(duì)EO耐受力強(qiáng)的菌株，枯草芽孢桿菌黑色變種（ATCC9372）是EO滅菌的標(biāo)準(zhǔn)生物指示劑；嗜熱脂肪芽孢桿菌用于濕熱滅菌。4.潔凈區(qū)（室）沉降菌測(cè)試時(shí)，培養(yǎng)皿暴露時(shí)間應(yīng)為：A.30分鐘B.60分鐘C.4小時(shí)D.2小時(shí)答案：B解析：GB/T16294-2010《醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）沉降菌的測(cè)試方法》規(guī)定，沉降菌測(cè)試時(shí)培養(yǎng)皿暴露時(shí)間通常為30分鐘～4小時(shí)，常規(guī)檢測(cè)推薦60分鐘。5.以下哪種滅菌方法不適用于含液體的醫(yī)療器械？A.濕熱滅菌B.環(huán)氧乙烷滅菌C.輻射滅菌（γ射線）D.干熱滅菌答案：D解析：干熱滅菌通過(guò)高溫使微生物脫水碳化，適用于玻璃、金屬等耐干熱材料；含液體的器械因液體導(dǎo)熱性差，易導(dǎo)致溫度分布不均，且液體蒸發(fā)可能破壞包裝，故不適用干熱滅菌。6.醫(yī)療器械微生物限度檢查中，需氧菌總數(shù)檢測(cè)使用的培養(yǎng)基是：A.胰酪大豆胨瓊脂（TSA）B.沙氏葡萄糖瓊脂（SDA）C.麥康凱瓊脂（MAC）D.哥倫比亞血瓊脂答案：A解析：TSA（胰酪大豆胨瓊脂）是需氧菌總數(shù)檢測(cè)的通用培養(yǎng)基，可支持大多數(shù)需氧菌生長(zhǎng)；SDA用于真菌檢測(cè)，MAC用于腸道桿菌選擇性培養(yǎng)。7.無(wú)菌檢查時(shí)，若供試品有抑菌性，需采用的處理方法是：A.增加培養(yǎng)基體積B.加入中和劑（如聚山梨酯80）C.延長(zhǎng)培養(yǎng)時(shí)間至21天D.減少供試品接種量答案：B解析：抑菌性供試品需通過(guò)中和劑（如聚山梨酯80中和表面活性劑，硫代硫酸鈉中和含氯消毒劑）或稀釋法消除抑菌作用，確保微生物能正常生長(zhǎng)。8.醫(yī)療器械生產(chǎn)環(huán)境中，C級(jí)潔凈區(qū)的浮游菌標(biāo)準(zhǔn)為：A.≤100CFU/m3B.≤500CFU/m3C.≤2000CFU/m3D.≤10000CFU/m3答案：B解析：根據(jù)《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（2010年修訂）》附錄，C級(jí)潔凈區(qū)浮游菌標(biāo)準(zhǔn)為≤500CFU/m3，A級(jí)為≤1CFU/m3，B級(jí)為≤10CFU/m3，D級(jí)為≤5000CFU/m3。9.以下哪種微生物是醫(yī)療器械初始污染菌檢測(cè)中需重點(diǎn)關(guān)注的“指示菌”？A.銅綠假單胞菌B.表皮葡萄球菌C.產(chǎn)氣莢膜梭菌D.白色念珠菌答案：B解析：初始污染菌指器械出廠前攜帶的微生物，表皮葡萄球菌是人體皮膚正常菌群，常作為環(huán)境清潔度的指示菌；銅綠假單胞菌和產(chǎn)氣莢膜梭菌是控制菌，白色念珠菌為真菌指示菌。10.濕熱滅菌的驗(yàn)證參數(shù)中，F(xiàn)?值的定義是：A.121℃下殺滅全部微生物所需時(shí)間B.以嗜熱脂肪芽孢桿菌為生物指示劑，將不同溫度下的滅菌時(shí)間折算為121℃下的等效時(shí)間C.100℃下濕熱滅菌的累積時(shí)間D.250℃下干熱滅菌的等效時(shí)間答案：B解析：F?值是濕熱滅菌的重要參數(shù)，指在121℃下，以嗜熱脂肪芽孢桿菌（D???=1.5～3.0分鐘）為參考微生物，將實(shí)際滅菌過(guò)程中不同溫度下的滅菌時(shí)間折算為121℃的等效滅菌時(shí)間，通常要求F?≥8分鐘。11.醫(yī)療器械包裝材料的微生物屏障性能測(cè)試方法是：A.粒子泄漏試驗(yàn)B.無(wú)菌挑戰(zhàn)性試驗(yàn)（ASTMF1980）C.透氣性測(cè)試（ISO5636）D.拉力強(qiáng)度測(cè)試（ISO527）答案：B解析：ASTMF1980標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了無(wú)菌包裝材料的加速老化和無(wú)菌挑戰(zhàn)性試驗(yàn)方法，通過(guò)將包裝暴露于微生物氣溶膠后進(jìn)行無(wú)菌檢查，驗(yàn)證其屏障性能。12.以下哪種情況會(huì)導(dǎo)致醫(yī)療器械初始污染菌計(jì)數(shù)結(jié)果偏低？A.供試液制備時(shí)未充分振蕩B.使用營(yíng)養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基C.培養(yǎng)溫度高于微生物最適生長(zhǎng)溫度D.延長(zhǎng)培養(yǎng)時(shí)間至72小時(shí)答案：A解析：供試液制備時(shí)振蕩不充分會(huì)導(dǎo)致微生物未完全從器械表面洗脫，造成計(jì)數(shù)偏低；營(yíng)養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基、適宜溫度和延長(zhǎng)培養(yǎng)時(shí)間（需氧菌通常培養(yǎng)48小時(shí)，真菌72小時(shí)）可提高計(jì)數(shù)準(zhǔn)確性。13.微生物限度檢查中，“陰性對(duì)照”的目的是：A.驗(yàn)證供試品是否無(wú)菌B.確認(rèn)試驗(yàn)環(huán)境和操作未被污染C.檢測(cè)供試品的抑菌性D.校準(zhǔn)培養(yǎng)箱溫度答案：B解析：陰性對(duì)照指不加入供試品的培養(yǎng)基，用于確認(rèn)試驗(yàn)過(guò)程中環(huán)境、設(shè)備或操作未引入外源性污染，若陰性對(duì)照長(zhǎng)菌則試驗(yàn)無(wú)效。14.以下哪種滅菌方法屬于“冷滅菌”？A.濕熱滅菌B.干熱滅菌C.環(huán)氧乙烷滅菌D.等離子體滅菌答案：C解析：環(huán)氧乙烷滅菌溫度通常為37～63℃，屬于低溫滅菌（冷滅菌）；等離子體滅菌也屬于低溫滅菌，但題干選項(xiàng)中C為正確答案。15.醫(yī)療器械無(wú)菌檢查的樣本量應(yīng)至少為：A.2件B.5件C.10件D.20件答案：B解析：根據(jù)ISO11737-1:2019，無(wú)菌檢查的最小樣本量為5件（若每件體積≤100mL），體積更大時(shí)需按比例增加。二、填空題（每空1分，共20分）1.醫(yī)療器械按接觸人體的風(fēng)險(xiǎn)程度分為三類(lèi)，其中與人體無(wú)菌組織、血液系統(tǒng)直接接觸的為_(kāi)___類(lèi)器械。答案：三2.微生物限度檢查中，需氧菌總數(shù)培養(yǎng)條件為_(kāi)___℃培養(yǎng)____小時(shí)。答案：30～35；483.潔凈區(qū)（室）的沉降菌測(cè)試應(yīng)在____（靜態(tài)/動(dòng)態(tài)）條件下進(jìn)行，測(cè)試前需關(guān)閉____。答案：靜態(tài)；空氣凈化系統(tǒng)（或“空調(diào)系統(tǒng)”）4.環(huán)氧乙烷滅菌的關(guān)鍵參數(shù)包括____、____、____和相對(duì)濕度。答案：溫度；濃度；時(shí)間5.生物指示劑（BI）的D值是指在特定條件下，殺滅____%微生物所需的時(shí)間。答案：906.醫(yī)療器械初始污染菌檢測(cè)時(shí)，若供試品具有疏水性，需加入____（如吐溫80）幫助微生物洗脫。答案：表面活性劑7.無(wú)菌檢查的培養(yǎng)基需進(jìn)行____試驗(yàn)，以確認(rèn)其促生長(zhǎng)能力、抑制能力和指示特性。答案：靈敏度8.干熱滅菌的標(biāo)準(zhǔn)條件是____℃維持____分鐘（適用于除熱原）。答案：250；309.醫(yī)療器械包裝的“無(wú)菌屏障系統(tǒng)”需滿足____、____和微生物屏障三大功能。答案：物理保護(hù)；化學(xué)相容性10.控制菌檢查中，銅綠假單胞菌的特征性生化反應(yīng)是____（如氧化酶試驗(yàn)陽(yáng)性）。答案：產(chǎn)生綠膿菌素（或“氧化酶陽(yáng)性”）三、判斷題（每題1分，共10分）1.所有醫(yī)療器械均需進(jìn)行無(wú)菌檢查。（）答案：×解析：僅無(wú)菌醫(yī)療器械需進(jìn)行無(wú)菌檢查，非無(wú)菌器械需進(jìn)行微生物限度檢查。2.濕熱滅菌的效果優(yōu)于干熱滅菌，因水蒸氣的穿透性和潛熱更高。（）答案：√解析：濕熱滅菌中，水蒸氣遇冷凝聚釋放潛熱，且水的導(dǎo)熱性?xún)?yōu)于空氣，故滅菌效率更高。3.潔凈區(qū)的浮游菌測(cè)試可使用沉降菌法替代。（）答案：×解析：浮游菌測(cè)試需用空氣采樣器主動(dòng)采集空氣，沉降菌法是被動(dòng)沉降，兩者原理不同，不可替代。4.微生物限度檢查中，若供試品含防腐劑，需通過(guò)離心-洗滌法去除抑菌成分。（）答案：√解析：離心后棄去上清液，用稀釋液重新懸浮供試品，可減少防腐劑殘留，消除抑菌性。5.生物指示劑的抗力應(yīng)高于產(chǎn)品中常見(jiàn)微生物的抗力。（）答案：√解析：生物指示劑需作為“最難殺滅的微生物”代表，其抗力高于實(shí)際污染菌，以確保滅菌工藝的有效性。6.無(wú)菌檢查時(shí)，若陽(yáng)性對(duì)照管未長(zhǎng)菌，說(shuō)明試驗(yàn)失敗。（）答案：√解析：陽(yáng)性對(duì)照管應(yīng)加入已知陽(yáng)性菌（如金黃色葡萄球菌），若未長(zhǎng)菌，說(shuō)明培養(yǎng)基或培養(yǎng)條件失效，試驗(yàn)無(wú)效。7.醫(yī)療器械初始污染菌計(jì)數(shù)結(jié)果需報(bào)告“CFU/件”或“CFU/g”。（）答案：√解析：初始污染菌需根據(jù)器械特性（體積、重量）報(bào)告單位，通常為CFU/件、CFU/g或CFU/cm2。8.環(huán)氧乙烷滅菌后，需進(jìn)行解析以降低EO殘留，解析條件僅與溫度有關(guān)。（）答案：×解析：解析條件與溫度、時(shí)間、通風(fēng)量均有關(guān)，溫度越高、通風(fēng)越好，解析時(shí)間越短。9.潔凈區(qū)的塵埃粒子數(shù)和微生物數(shù)需同時(shí)符合要求，前者達(dá)標(biāo)則后者必然達(dá)標(biāo)。（）答案：×解析：塵埃粒子數(shù)反映顆粒物污染，微生物可能附著于粒子或獨(dú)立存在，兩者無(wú)必然正相關(guān)，需分別監(jiān)測(cè)。10.真菌檢測(cè)的培養(yǎng)基（如SDA）需添加抗生素（如氯霉素）以抑制細(xì)菌生長(zhǎng)。（）答案：√解析：氯霉素可抑制革蘭陽(yáng)性菌和部分革蘭陰性菌，避免細(xì)菌過(guò)度生長(zhǎng)影響真菌計(jì)數(shù)。四、簡(jiǎn)答題（每題6分，共30分）1.簡(jiǎn)述醫(yī)療器械無(wú)菌檢查與微生物限度檢查的區(qū)別。答案：（1）適用對(duì)象：無(wú)菌檢查針對(duì)無(wú)菌醫(yī)療器械（如植入式器械、手術(shù)器械）；微生物限度檢查針對(duì)非無(wú)菌醫(yī)療器械（如普通敷料、血壓計(jì)）。（2）檢測(cè)目的：無(wú)菌檢查確認(rèn)產(chǎn)品中無(wú)存活微生物；微生物限度檢查控制微生物總量（需氧菌、真菌）及特定控制菌（如金黃色葡萄球菌）不得檢出。（3）方法差異：無(wú)菌檢查需在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行，使用硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基（厭氧菌）和胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基（需氧菌）；微生物限度檢查需計(jì)數(shù)需氧菌、真菌，并進(jìn)行控制菌鑒別。（4）結(jié)果判定：無(wú)菌檢查結(jié)果為“無(wú)菌”或“有菌”；微生物限度檢查需報(bào)告具體CFU值，并判斷是否符合標(biāo)準(zhǔn)（如≤100CFU/件）。2.列舉3種常見(jiàn)的醫(yī)療器械滅菌方法，并說(shuō)明其適用范圍及局限性。答案：（1）濕熱滅菌（高壓蒸汽滅菌）：適用范圍：耐高溫高濕的醫(yī)療器械（如金屬手術(shù)器械、玻璃制品）。局限性：不適用于不耐濕（如電子元件）、不耐高溫（如塑料）的器械；可能導(dǎo)致部分材料氧化或變形。（2）環(huán)氧乙烷（EO）滅菌：適用范圍：不耐高溫高濕的醫(yī)療器械（如塑料導(dǎo)管、橡膠手套）。局限性：滅菌周期長(zhǎng)（需4～16小時(shí)）；EO具有毒性，需解析殘留（通常7天以上）；可能與含氨基的材料（如尼龍）發(fā)生反應(yīng)。（3）輻射滅菌（γ射線或電子束）：適用范圍：需快速滅菌、不耐熱的醫(yī)療器械（如一次性注射器、縫合線）。局限性：設(shè)備成本高；可能導(dǎo)致高分子材料降解（如聚氯乙烯變色、脆化）；需嚴(yán)格控制劑量（通常25kGy）。3.簡(jiǎn)述潔凈區(qū)（室）微生物監(jiān)測(cè)的關(guān)鍵要點(diǎn)。答案：（1）監(jiān)測(cè)項(xiàng)目：浮游菌、沉降菌、表面微生物（接觸碟法）。（2）監(jiān)測(cè)頻率：動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)（生產(chǎn)過(guò)程中）至少每班次1次，靜態(tài)監(jiān)測(cè)（清潔后）至少每月1次。（3）采樣點(diǎn)布局：按潔凈區(qū)級(jí)別設(shè)置，A級(jí)區(qū)（關(guān)鍵操作區(qū)）采樣點(diǎn)≥5個(gè)，B級(jí)區(qū)≥4個(gè)，C/D級(jí)區(qū)≥2個(gè)，需覆蓋人員活動(dòng)區(qū)、設(shè)備表面、物料傳遞口等。（4）培養(yǎng)基選擇：沉降菌和浮游菌使用TSA（需氧菌）和SDA（真菌），表面微生物使用TSA接觸碟。（5）結(jié)果判定：需同時(shí)符合浮游菌、沉降菌的靜態(tài)/動(dòng)態(tài)標(biāo)準(zhǔn)（如C級(jí)動(dòng)態(tài)浮游菌≤500CFU/m3），超標(biāo)時(shí)需啟動(dòng)偏差調(diào)查（如人員操作不當(dāng)、空調(diào)系統(tǒng)故障）。4.醫(yī)療器械初始污染菌檢測(cè)的主要步驟及注意事項(xiàng)。答案：主要步驟：（1）樣本制備：取代表性樣本（至少5件），若為包裝產(chǎn)品需在無(wú)菌環(huán)境下拆包。（2）供試液制備：將樣本放入含稀釋液（如0.9%氯化鈉溶液）的容器中，加入表面活性劑（如0.1%吐溫80），通過(guò)振蕩、超聲或機(jī)械沖洗使微生物洗脫。（3）微生物計(jì)數(shù)：取供試液梯度稀釋?zhuān)謩e接種TSA（30～35℃，48小時(shí)）和SDA（20～25℃，72小時(shí)），計(jì)數(shù)需氧菌和真菌總數(shù)。（4）結(jié)果計(jì)算：以CFU/件（或CFU/g、CFU/cm2）表示，取平均值。注意事項(xiàng)：（1）避免外源性污染：操作需在生物安全柜中進(jìn)行，所有器具需滅菌。（2）洗脫效率驗(yàn)證：若樣本表面復(fù)雜（如多孔材料），需通過(guò)回收率試驗(yàn)（添加已知量的微生物）確認(rèn)洗脫方法有效性（回收率應(yīng)≥50%）。（3）抑菌性處理：若樣本含抑菌成分（如銀離子涂層），需使用中和劑（如硫代硫酸鈉）或稀釋法消除影響。（4）培養(yǎng)條件控制：需氧菌和真菌的培養(yǎng)溫度、時(shí)間需嚴(yán)格符合標(biāo)準(zhǔn)，避免漏檢。5.簡(jiǎn)述滅菌工藝驗(yàn)證（PQ）的主要內(nèi)容。答案：滅菌工藝驗(yàn)證（性能確認(rèn)，PQ）是確認(rèn)滅菌工藝在實(shí)際生產(chǎn)條件下能持續(xù)滿足要求的過(guò)程，主要內(nèi)容包括：（1）裝載方式驗(yàn)證：確認(rèn)不同裝載模式（如滿載、半載）下，滅菌腔內(nèi)溫度/濃度分布均勻性（通過(guò)溫度探頭或EO濃度傳感器）。（2）生物指示劑挑戰(zhàn)試驗(yàn)：在最難滅菌位置（如裝載中心、包裝內(nèi)部）放置生物指示劑（BI），滅菌后培養(yǎng)BI，確認(rèn)全部殺滅（陽(yáng)性對(duì)照長(zhǎng)菌，試驗(yàn)組無(wú)菌生長(zhǎng)）。（3）物理參數(shù)驗(yàn)證：記錄滅菌過(guò)程中的關(guān)鍵參數(shù)（如濕熱滅菌的溫度、壓力、F?值；EO滅菌的濃度、時(shí)間、濕度），確認(rèn)其符合設(shè)定范圍。（4）產(chǎn)品性能影響驗(yàn)證：檢測(cè)滅菌前后產(chǎn)品的物理、化學(xué)、生物性能（如材料強(qiáng)度、藥物釋放速率），確認(rèn)無(wú)顯著變化。（5）微生物挑戰(zhàn)試驗(yàn)：人為污染產(chǎn)品至最大允許初始污染菌水平（如10?CFU/件），滅菌后進(jìn)行無(wú)菌檢查，確認(rèn)滅菌工藝的“過(guò)度殺滅”能力。五、案例分析題（共10分）某企業(yè)生產(chǎn)的一次性靜脈留置針（無(wú)菌醫(yī)療器械）在出廠前無(wú)菌檢查中發(fā)現(xiàn)1件陽(yáng)性（長(zhǎng)菌），其余4件陰性。經(jīng)調(diào)查，該批次產(chǎn)品采用環(huán)氧乙烷滅菌，滅菌記錄顯示溫度55℃、EO濃度600mg/L、時(shí)間4小時(shí)、相對(duì)濕度60%，均符合工藝要求；BI（枯草芽孢桿菌黑色變種）培養(yǎng)后全部無(wú)菌生長(zhǎng)。問(wèn)題：1.分析可能導(dǎo)致無(wú)菌檢查陽(yáng)性的原因。（5分）2.提出后續(xù)的處理措施。（5分）答案：1.可能原因：（1）包裝完整性破壞：留置針包裝（如紙塑袋）在運(yùn)輸或儲(chǔ)存過(guò)程中被刺破，導(dǎo)致微生物侵入。（2）初始污染菌過(guò)高：滅菌前產(chǎn)品初始污染菌數(shù)量超過(guò)工藝設(shè)計(jì)的最大耐受水平（如＞10?CFU/件），雖BI殺滅，但個(gè)別產(chǎn)品的污染菌可能因位置隱蔽