2018-0775272018.04.13JP2018-1887702018.10.04JP地址日本(72)發(fā)明人福澤拓原谷健太何偉雄艾德里安高橋德行公司11021特異性和C1q取代功能。還顯示了抗體的時(shí)賴性補(bǔ)體中和功能以及與天然和截短的C1s21.抑制C1q和C1r2s2復(fù)合物之間的相互作用的分離的抗體，其中所述抗體具有取代功標(biāo))測(cè)定所確定的，存在所述抗體時(shí)響應(yīng)單位(RU)的值低于不存在所述抗體時(shí)響應(yīng)單位3.權(quán)利要求2所述的抗體，其中在BIACORE(注冊(cè)商標(biāo))測(cè)定中的交叉的時(shí)間點(diǎn)是在抗體注射開始的時(shí)間點(diǎn)之后的1000s內(nèi)，如通過(guò)BIACORE(注冊(cè)商標(biāo))測(cè)定使用以下條件所4.權(quán)利要求2所述的抗體，其中幾乎所有的C1q在抗體注射開始的時(shí)間點(diǎn)后2000s內(nèi)從和C1q的捕獲水平分別為200個(gè)共振單位(RU)和200個(gè)共振單位(RU),作為分析物的抗體以對(duì)人血清補(bǔ)體具有至少70%的中和活性。6.權(quán)利要求1至5中任一項(xiàng)所述的抗體，其中所述抗體是與C1s特異性結(jié)合的抗體或與其中所述抗體與C1s的CUB1-EGF-CUB2結(jié)構(gòu)域內(nèi)的表位特異性結(jié)合，并與選自由以下其中所述抗體與C1r的CUB1-EGF-CUB2結(jié)構(gòu)域內(nèi)的表位特異性結(jié)合，并與選自由以下311.權(quán)利要求8至10中任一項(xiàng)所述的抗體，其中所述抗體包含F(xiàn)c區(qū)域，所述Fc區(qū)域在所述區(qū)域內(nèi)具有至少一個(gè)氨基酸修飾，從而增強(qiáng)血漿抗原濃度的降低和/或改善所述抗體的4a)對(duì)活化的Fcgamma受體的結(jié)合活性強(qiáng)于天然人IgG1的Fc區(qū)的結(jié)合活性，b)對(duì)抑制性Fcgamma受體的結(jié)合活性強(qiáng)于對(duì)活化的Fcgamma受體的結(jié)合活性，并且c)在中性pH下對(duì)FcRn的結(jié)合活性強(qiáng)于天然人IgG1的Fc區(qū)的結(jié)合活性。13.權(quán)利要求1至12中任一項(xiàng)所述的抗體，其中所述抗體與食蟹猴C1s和人C1s兩者，或與食蟹猴C1r和人Clr兩者結(jié)合。14.藥物制劑，其包含權(quán)利要求1至13中任一項(xiàng)所述的抗體和藥學(xué)上可接受的載體。15.治療患有補(bǔ)體介導(dǎo)的疾病或病癥的個(gè)體的方法，包括向所述個(gè)體施用有效量的權(quán)利要求1至13中任一項(xiàng)所述的抗體。16.分離的抗補(bǔ)體成分1s(Cls)抗體，所述抗體與在涵蓋CUB1-EGF-CUB2結(jié)構(gòu)域的區(qū)域內(nèi)的表位特異性結(jié)合，所述CUB1-EGF-CUB2結(jié)構(gòu)域由Cls的CUB1、EGF和CUB2組成。17.根據(jù)權(quán)利要求16所述的抗體，其不與C1s的CCP1-CCP2-SP結(jié)構(gòu)域結(jié)合。18.根據(jù)權(quán)利要求16所述的抗體，其中所述抗體結(jié)合的表位是不位于C1s的beta結(jié)構(gòu)域中的表位。19.根據(jù)權(quán)利要求16所述的抗體，其中所述抗體結(jié)合的表位是位于C1s的alpha結(jié)構(gòu)域20.根據(jù)權(quán)利要求16所述的抗體，其中所述抗體結(jié)合的表位是線性表位。21.根據(jù)權(quán)利要求16所述的抗體，其中所述抗體結(jié)合的表位是以下各項(xiàng)內(nèi)的表位：C1s的氨基酸16-291,C1s的氨基酸16-172,C1s的氨基酸16-210,C1s的氨基酸16-111,C1s的氨基酸112-210,C1s的氨基酸131-172或C1s的氨基酸16-130。22.根據(jù)權(quán)利要求16所述的抗體，其中所述抗體結(jié)合的表位是人C1s的表位，或人C1s的表位和食蟹猴C1s的表位。23.根據(jù)權(quán)利要求16所述的抗體，其包含(a)包含SEQIDNO:32,38,44,50或56的氨基酸序列的HVR-H1;(b)包含SEQIDNO:33,39,45,51或57的氨基酸序列的HVR-H2;和(c)包含SEQIDNO:34,40,46,52或58的氨基酸序列的HVR-H3,其中所述抗體包含人類或靈長(zhǎng)類動(dòng)物來(lái)源的框架區(qū)。24.根據(jù)權(quán)利要求16所述的抗體，其包含(a)包含SEQIDNO:35,41,47,53或59的氨基酸序列的HVR-L1;(b)包含SEQIDNO:36,42,48,54或60的氨基酸序列的HVR-L2;和(c)包含SEQIDNO:37,43,49,55或61的氨基酸序列的HVR-L3,其中所述抗體包含人類或靈長(zhǎng)類動(dòng)物來(lái)源的框架區(qū)。25.根據(jù)權(quán)利要求16所述的抗體，其包含(a)與SEQIDNO:19,20,21,23或24的氨基酸序列具有至少95%序列同一性的VH序列；(b)與SEQIDNO:26,27,28,30或31的氨基酸序列具有至少95%序列同一性的VL序列；或(c)(a)的VH序列和(b)的VL序列。26.根據(jù)權(quán)利要求16所述的抗體，其包含SEQIDN27.根據(jù)權(quán)利要求16所述的抗體，其包含SEQIDN:26,27,28,30或31的VL序列。28.根據(jù)權(quán)利要求25所述的抗體，其包含SEQIDNO:19,20,21,23或24的VH序列和29.根據(jù)權(quán)利要求28所述的抗體，其包含VH和VL序列的以下組合中的任一種：530.分離的抗補(bǔ)體成分1r(Clr)抗體，其與在涵蓋CUB1-EGF-CUB2結(jié)構(gòu)域的區(qū)域內(nèi)的表位特異性結(jié)合，所述CUB1-EGF-CUB231.根據(jù)權(quán)利要求30所述的抗體，其不與C1r的CCP1-CCP2-SP結(jié)構(gòu)域結(jié)合。32.根據(jù)權(quán)利要求30所述的抗體，其中所述抗體結(jié)合的表位是線性表位或構(gòu)象表位。33.根據(jù)權(quán)利要求30所述的抗體，其中所述抗體結(jié)合的表位是人C1r的表位，或人C1r的表位和食蟹猴C1r的表位。34.根據(jù)權(quán)利要求30所述的抗體，其包含(a)包含SEQIDNO:119,120,121,122,123,124,125或126的氨基酸序列的HVR-H1;(b)包含SEQIDNO:127,128,129,130,131,132,133或134的氨基酸序列的HVR-H2;和(c)包含SEQIDNO:135,136,137,138,139,140,141或142的氨基酸序列的HVR-H3,其中所述抗體包含人類或靈長(zhǎng)類動(dòng)物來(lái)源的框架區(qū)。35.根據(jù)權(quán)利要求30所述的抗體，其包含(a)包含SEQNO:143,144,145,146,147,148,149或150的氨基酸序列的HVR-L1;(b)包含SEQNO:151,152,153,154,155,156,157或158的氨基酸序列的HVR-L2;和(c)包含SEQIDNO:159,160,161,162,163,164,165或166的氨基酸序列的HVR-L3,其中所述抗體包含人類或靈長(zhǎng)類動(dòng)物來(lái)源的框架區(qū)。36.根據(jù)權(quán)利要求30所述的抗體，其包含(a)與SEQIDNO:103,104,105,106,107,108,109或110的氨基酸序列具有至少95%序列同一性的VH序列；(b)與SEQIDNO:111,112,113,114,115,116,117或118的氨基酸序列具有至少95%序列同一性的VL37.根據(jù)權(quán)利要求30所述的抗體，其包含SEQIDNO:103,104,105,106,107,108,109或110的VH序列。38.根據(jù)權(quán)利要求30所述的抗體，其包含SEQIDNO:111,112,113,114,115,116,117或118的VL序列。39.根據(jù)權(quán)利要求36所述的抗體，其包含SEQIDNO:103,104,105,106,107,108,109或110的VH序列和SEQIDNO:111,112,113,114,115,116,117或118的VL序列。40.根據(jù)權(quán)利要求39所述的抗體，其包含VH和VL序列的以下組合中的任一種：6[0001]本申請(qǐng)是申請(qǐng)日為2019年4月12日，中國(guó)專利申請(qǐng)?zhí)枮?01980038684.5,發(fā)明名稱為“抗補(bǔ)體組分抗體及使用方法”的專利申請(qǐng)技術(shù)領(lǐng)域[0002]本發(fā)明涉及抗補(bǔ)體組分抗體，例如抗C1s抗體和抗C1r抗體，及其使用方法。背景技術(shù)[0003]C1復(fù)合物是一種大的蛋白質(zhì)復(fù)合物，其起到作為經(jīng)典途徑級(jí)聯(lián)反應(yīng)的關(guān)鍵引發(fā)劑的作用。C1復(fù)合物由摩爾比分別為1:2:2的三個(gè)組分Clq,C1r和C1物結(jié)合至抗體結(jié)合的靶標(biāo)時(shí)，經(jīng)典途徑引發(fā)。具有6個(gè)球狀頭的C1q通過(guò)與Fc區(qū)的親合力相互作用介導(dǎo)C1復(fù)合物與抗體的結(jié)合。一旦緊密結(jié)合至靶標(biāo)，C1復(fù)合物中的C1r會(huì)自動(dòng)激活并變得有酶活性。然后，活化的C1r切割并活化C1復(fù)合物中的酶原C1s(NPL2)。隨后，活性C1s將其底物補(bǔ)體組分C2和C4分別切割為C2a/C2b,和C4a/C4b片段。這導(dǎo)致在靶標(biāo)表面上C3轉(zhuǎn)化酶C4b2a的裝配，其切割C3形成C3b。C3b進(jìn)而切割C5以引發(fā)終末膜攻擊復(fù)合物，C5b,C6,[0004]C1s和C1r蛋白都具有相同的結(jié)構(gòu)域構(gòu)造，即CUB1-EGF-CUB2-CCP1-CCP2-絲氨酸蛋白酶(NPL3)。CUB1-EGF-CUB2結(jié)構(gòu)域介導(dǎo)C1r和C1s之間的相互作用以形成C1r2s2四聚體CCP1-CCP2-絲氨酸蛋白酶結(jié)構(gòu)域負(fù)責(zé)各自底物的蛋白水解切割(NPL6,NPL7)。Clr2s2四聚體通過(guò)四聚體的CUB1-EGF-CUB2結(jié)構(gòu)域中的六個(gè)結(jié)合位點(diǎn)與C1q中的六個(gè)莖相互作用[0005]雖然正常功能的補(bǔ)體系統(tǒng)可以防御宿主針對(duì)病原體的侵害，但經(jīng)典途徑的失調(diào)或不適當(dāng)活化會(huì)導(dǎo)致多種補(bǔ)體介導(dǎo)的病癥，諸如但不限于，自身免疫性溶血性貧血(AIHA),白塞氏病，大皰性天皰瘡(BP),免疫血小板減少性紫癜(ITP)等。因此，經(jīng)典途徑的過(guò)度或不受控制的活化的抑制可以為患有此類病癥的患者提供臨床益處。[0006]一種與C1s的β結(jié)構(gòu)域結(jié)合的抗體HI532據(jù)報(bào)道能夠抑制C1r2s2與Clq的相互作用(NPL8)。然而，該抗體不能完全中和人血清的溶血活性，并且即使將血清與該抗體一起溫育24小時(shí)后，仍保留30%的活性。[0007]抗體是高度有吸引力的藥物，因?yàn)樗鼈冊(cè)谘獫{中穩(wěn)定，對(duì)其靶標(biāo)具有高度特異性，并且通常表現(xiàn)出良好的藥代動(dòng)力學(xué)特征。然而，由于它們的大的分子大小，治療性抗體的劑量通常很高。在高豐度存在靶標(biāo)的情況下，抗體的所需治療劑量甚至更高。結(jié)果，改善抗體藥代動(dòng)力學(xué)，藥效學(xué)和抗原結(jié)合特性的方法是減少與治療性抗體相關(guān)的劑量和高生產(chǎn)成本的有吸引力的方法。[0008]據(jù)報(bào)道，以pH依賴性方式結(jié)合抗原的抗體(下文也稱為“pH依賴性抗體”或“pH依賴性結(jié)合抗體”)能夠使單個(gè)抗體分子中和多個(gè)抗原分子(NPL9,PTL1)。pH依賴性抗體在血漿中在中性pH條件下與其抗原牢固結(jié)合，但是在酸性pH條件下在細(xì)胞內(nèi)體中與抗原解離。7一旦與抗原解離，抗體便通過(guò)FcRn受體循環(huán)回血漿，而解離的抗原則在細(xì)胞的溶酶體內(nèi)降解。然后，循環(huán)的抗體再次自由結(jié)合并中和抗原分子，并且只要抗體保持循環(huán)，該過(guò)程就會(huì)繼續(xù)重復(fù)。[0009]引用列表[0010]專利文獻(xiàn)[0012]非專利文獻(xiàn)[0019][NPL7]L[0021][NPL9]Igawaet.al.NatBiotech發(fā)明內(nèi)容[0022]發(fā)明概述[0024]本發(fā)明提供抗補(bǔ)體組分抗體，例如抗C1s抗體和抗C1r抗體，及其使用方法。[0025]問(wèn)題的解決方案[0026]在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的抑制C1q和C1r2s2復(fù)合物之間的相互作用的分離的抗體是具有取代功能的抗體，所述取代功能使得該抗體與Clqrs復(fù)合物結(jié)合并促進(jìn)Clq從Clqrs復(fù)合物解離。[0027]在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的抑制C1q和C1r2s2復(fù)合物之間的相互作用的分離的抗體是與BIACORE(注冊(cè)商標(biāo))芯片上的Clqrs復(fù)合物結(jié)合并促進(jìn)C1q從Clqrs復(fù)合物解離的抗體。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，當(dāng)經(jīng)過(guò)足夠的時(shí)間后，如由BIACORE(注冊(cè)商標(biāo))測(cè)定確定的，當(dāng)存在抗體時(shí)響應(yīng)單位(Ru)的值低于不存在抗體時(shí)響應(yīng)單位(RU)的值時(shí)，可以將本發(fā)明的抗體確定為具有取代功能的抗體。[0028]在一些實(shí)施方案中，當(dāng)交叉的時(shí)間點(diǎn)在抗體注射開始的時(shí)間點(diǎn)后60s,100s,150s,200s,500s,700s,1000s,1500s或2000s內(nèi)時(shí)，可以將本發(fā)明的抑制Clq和C1r2s2復(fù)合物之間的相互作用的分離的抗體確定為具有取代功能的抗體，如通過(guò)BIACORE(注冊(cè)商標(biāo))測(cè)定使用以下條件確定的：C1r2s2復(fù)合物和C1q的捕獲水平分別為200個(gè)共振單位(RU)和200個(gè)共振單位(RU),作為分析物的抗體以500nM,10微升(μL)/min注射。[0029]在一些實(shí)施方案中，當(dāng)幾乎所有的C1q在抗體注射開始的時(shí)間點(diǎn)后100s,300s,500s,700s,1000s,1500s,2000s,3000s,5000s,7000s,或10000s內(nèi)從Clqrs復(fù)合物8分離時(shí)，可以將本發(fā)明的抑制C1q和C1r2s2復(fù)合物之間的相互作用的分離的抗體確定為具有取代功能的抗體，如通過(guò)BIACORE(注冊(cè)商標(biāo))測(cè)定使用以下條件確定的：C1r2s2復(fù)合物和C1q的捕獲水平分別為200個(gè)共振單位(RU)和200個(gè)共振單位，作為分析物的抗體以500[0030]在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的抑制C1q和C1r2s2復(fù)合物之間相互作用的分離的抗體是在RBC測(cè)定中對(duì)人血清補(bǔ)體具有至少70%的中和活性的抗體。[0031]在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的抑制C1q和C1r2s2復(fù)合物之間的相互作用的分離的抗體是特異性結(jié)合C1s的抗體或特異性結(jié)合Clr的抗體。[0032]在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的抑制C1q和C1r2s2復(fù)合物之間相互作用的分離的抗體是特異性結(jié)合在C1s的CUB1-EGF-CUB2結(jié)構(gòu)域內(nèi)的表位的抗體。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體與選自由以下的1)-5)組成的組的抗體競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合所述表位：SEQIDNO:61的HVR-L3序列。[0038]在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的抑制C1q和C1r2s2復(fù)合物之間相互作用的分離的抗體是特異性結(jié)合在C1r的CUB1-EGF-CUB2結(jié)構(gòu)域內(nèi)的表位的抗體。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體與選自由以下的6)-13)組成的組的抗體競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合所述表位：9[0047]在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的抑制C1制C1q和C1r2s2復(fù)合物之間的相互作用的分離的抗體是具有依賴離子濃度而變化的C1s結(jié)[0048]在一些實(shí)施方案中[0049]在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的抑制C1q和C1r2s2施方案中，本發(fā)明的抑制C1q和C1r2s2復(fù)合物之間相互作用的分離的抗體是在高鈣濃度條抑制C1q和C1r2s2復(fù)合物之間相互作用的分離的抗體是在高鈣濃度條件下以比在低鈣濃度條件下更高的親和力與C1r結(jié)合的抗體。[0050]在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的抑制C1q和C1r2s2體是在中性pH和高鈣濃度兩者的條件下以比在酸性pH和低鈣濃度兩者的條件下更高的親用的分離的抗體是在中性pH和高鈣濃度兩者的條件下以比在酸性pH和低鈣濃度兩者的條物之間相互作用的分離的抗體是在中性pH和高鈣濃度兩者的條件下以比在酸性pH和低鈣[0051]在某些實(shí)施方案中，在本發(fā)明的抑制C1q和C1r2s2復(fù)合物之間的相互作用的分離[0052]在一些實(shí)施方案中，在本發(fā)明[0053]在某些實(shí)施方案中，在本發(fā)明的抑制C1q和C1r2s2復(fù)合物之間的相互作用的分離H52a,H53,H54,H55,H57,H58,H59,H60,H61,H62,H63,H64,H65,H9H95,H96,H97,H98,H99,H100,H100a,H101,和H102;和L51,L52,L53,L54,L55,L56L91,L92,L93,L94,L95,L95a,L96,和L97。包含在一個(gè)或更多個(gè)以下Kabat編號(hào)系統(tǒng)位置上的組氨H52a,H53,H54,H55,H57,H58,H59,H60,H61,H62,H63,H64,H65,H9H95,H96,H97,H98,H99,H100,H100a,H101,和H102;和L51,L52,L53,L54,L55,L56L91,L92,L93,L94,L95,L95a,L96,和L97。H52a,H53,H54,H55,H57,H58,H59,H60,H61,H62,H63,H64,H65,H9H95,H96,H97,H98,H99,H100,H100a,H101,和H102;和L51,L52,L53,L54,L55,L56L91,L92,L93,L94,L95,L95a,L96,和L97。11包含至少一個(gè)在一個(gè)或更多個(gè)以下Kabat編號(hào)系統(tǒng)位置上被置換的組氨酸：H52a,H53,H54,H55,H57,H58,H59,H60,H61,H62,H63,H64,H65,HH95,H96,H97,H98,H99,H100,H100a,H101,和H102;和L51,L52,L53,L54,L55,L56L91,L92,L93,L94,L95,L95a,L96,和L97。[0066]在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，本發(fā)明的抑制C1q與C1r2s2復(fù)合物之間的相互作用的具有pH依賴性的抗C1s抗體在中性pH條件下與選自以下1)-5)的抗體競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合Cls:[0072]在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，本發(fā)明的抑制C1q與C1r2s2復(fù)合物之間的相互作用的具有pH依賴性的抗C1r抗體在中性pH條件下與選自以下6)-13)的抗體競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合Clr:[0081]在一些實(shí)施方案中，本公開提供了分離的抗C1s抗體，所述抗體與在涵蓋CUB1-EGF-CUB2結(jié)構(gòu)域(也稱為相互作用結(jié)構(gòu)域或CUB結(jié)構(gòu)域)的區(qū)域內(nèi)的表位特異性結(jié)合，所述C1s抗體結(jié)合的表位是不位于C1s的bet分離的抗C1s抗體結(jié)合的表位是位于C1s的alpha結(jié)構(gòu)域或C1s一些實(shí)施方案中，由本公開的分離的抗C1s抗體結(jié)合的表位是線性表位。在一些實(shí)施方案16-291,補(bǔ)體C1s蛋白的氨基酸16-172,補(bǔ)體C1s蛋白的氨基酸16-210,補(bǔ)體C1s蛋白的氨基酸16-111,補(bǔ)體C1s蛋白的氨基酸112-210,補(bǔ)體C1s蛋白的氨基酸131-172或補(bǔ)體C1s蛋白的[0082]在一些實(shí)施方案中，本公開提供了分離的抗C1r抗體，所述抗體與在涵蓋CUB1- 44,50,或56的氨基酸序列的HVR-H1;(b)包含SEQIDNO:33,39,45,51,或57的氨基酸抗體包含(a)包含SEQIDNO:35,41,47,53,或59的氨基酸序列的HVR-L1;(b)包含SEQIDNO:36,42,48,54,或60的氨基酸序列的HVR-L2;和(c)包含SEQIDNO:37,43,49,55,或61的氨基酸序列的HVR-L3,其中所述抗體包含人類或靈長(zhǎng)類動(dòng)物來(lái)源的框架區(qū)。[0084]在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的分離的抗C1r抗體包含(a)包含SEQIDNO:119,120,121,122,123,124,125,或126的氨基酸序列的HVR-H1;(b)包含SEQIDNO:127,128,129,130,131,132,133,或134的氨基酸序列的HVR-H2;和(c)包含SEQIDNO:135,136,137,138,139,140,141,L1;(b)包含SEQIDNO:151,152,153,154,155,156,157,或158的氨基酸序列的HVR-L2;和(c)包含SEQIDNO:159,160,1或24的氨基酸序列具有至少95%序列同一性的VH序列；(b)與SEQIDNO:26,27,28,106,107,108,109或110的氨基酸序列具有至少95%序列同一性的VH序列；(b)與SEQIDNO:111,112,113,114,115,116,117或118的氨基酸序列具有至少95%序列同一107,108,109或110的VH序列和SEQIDNO:111,112,113,114,115,116,117,或抗C1s抗體是人抗體、人源化抗體或嵌合抗體。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，本發(fā)明的抑制Clq和C1r2s2復(fù)合物之間的相互作用的抗C1s抗體是全長(zhǎng)IgG1,IgG2,IgG3或IgG4抗體。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，本發(fā)明的抑制C1q和C1r2s2復(fù)合物之間的相互作用的抗C1s抗體是與C1s結(jié)合的抗體片段。在一些具體的實(shí)施方案中，本發(fā)明的抑制C1q和C1r2s2復(fù)合物之間的相互作用的抗C1s抗體是人IgG1或人源化IgG1。[0088]在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的抑制C1q和C1r2s2復(fù)合物之間的相互作用的抗C1r抗體是單克隆抗體。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的抑制C1q和C1r2s2復(fù)合物之間的相互作用的抗C1r抗體是人抗體、人源化抗體或嵌合抗體。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，本發(fā)明的抑制Clq和C1r2s2復(fù)合物之間的相互作用的抗C1r抗體是全長(zhǎng)IgG1,IgG2,IgG3或IgG4抗體。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，本發(fā)明的抑制C1q和C1r2s2復(fù)合物之間的相互作用的抗C1r抗體是與C1r結(jié)合的抗體片段。在一些具體的實(shí)施方案中，本發(fā)明的抑制C1q和C1r2s2復(fù)合物之間的相互作用的抗C1r抗體是人IgG1或人源化IgG1。[0089]在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的抑制C1q和C1r2s2復(fù)合物之間的相互作用的分離的抗體是包含F(xiàn)c區(qū)的抗體，所述Fc區(qū)在該區(qū)域具有至少一個(gè)氨基酸修飾，從而增強(qiáng)血漿抗原濃度的降低和/或改善抗體的藥代動(dòng)力學(xué)。[0090]在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的抑制C1q和C1r2s2復(fù)合物之間的相互作用的分離的抗體具有人Fc區(qū)，所述人Fc區(qū)具有選自以下各項(xiàng)組成的組的結(jié)合活性：[0091]a)對(duì)活化的Fcgamma受體的結(jié)合活性強(qiáng)于天然人IgG1的Fc區(qū)的結(jié)合活性，[0092]b)對(duì)抑制性Fcgamma受體的結(jié)合活性強(qiáng)于對(duì)活化的Fcgamma受體的結(jié)合活性，并且[0093]c)在中性pH下對(duì)FcRn的結(jié)合活性強(qiáng)于天然人IgG1的Fc區(qū)的結(jié)合活性。[0094]在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的抑制C1q和C1r2s2復(fù)合物之間的相互作用的分離的抗體至少與人C1s結(jié)合或優(yōu)選地與食蟹猴C1s和人C1s兩者結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的抑制C1q和C1r2s2復(fù)合物之間的相互作用的分離的抗體至少與人C1r結(jié)合或優(yōu)選地與食蟹猴C1r和人Clr兩者結(jié)合。[0095]本發(fā)明還提供了編碼本發(fā)明抗C1s抗體的分離的核酸。本發(fā)明還提供了編碼本發(fā)明抗C1r抗體的分離的核酸。本發(fā)明還提供了包含本發(fā)明核酸的宿主細(xì)胞。本發(fā)明還提供了產(chǎn)生抗體的方法，包括培養(yǎng)本發(fā)明的宿主細(xì)胞以產(chǎn)生所述抗體。[0096]本發(fā)明還提供包含本發(fā)明的抗體和其藥物上可接受的載體的藥物制劑。[0097]本發(fā)明的抗C1s抗體可以用作藥物。本發(fā)明的抗C1s抗體可用于治療或預(yù)防補(bǔ)體介導(dǎo)的疾病或病癥。本發(fā)明的抗C1s抗體可用于增強(qiáng)C1s從血漿中的清除(或去除)。本發(fā)明的抗C1s抗體可用于增強(qiáng)C1r2s2從血漿中的清除(或去除)。本發(fā)明的抗C1s抗體可以用于增強(qiáng)C1r2s2從血漿而不是Clq從血漿中的清除(或去除)。在某些情況下，抗體抑制經(jīng)典補(bǔ)體途徑[0098]本發(fā)明的抗C1r抗體可以用作藥物。本發(fā)明的抗C1r抗體可用于治療或預(yù)防補(bǔ)體介導(dǎo)的疾病或病癥。本發(fā)明的抗C1r抗體可用于增強(qiáng)C1r從血漿中的清除(或去除)。本發(fā)明的抗C1r抗體可用于增強(qiáng)C1r2s2從血漿中的清除(或去除)。本發(fā)明的抗C1r抗體可以用于增強(qiáng)C1r2s2從血漿而不是Clq從血漿中的清除(或去除)。在某些情況下，抗體抑制經(jīng)典補(bǔ)體途徑[0099]本發(fā)明的抗Cls抗體可用于制備藥物。在一些實(shí)施方案中，所述藥物用于治療或預(yù)防補(bǔ)體介導(dǎo)的疾病或病癥。在一些實(shí)施方案中，所述藥物用于增強(qiáng)Cls從血漿中的清除(或除去)。在一些實(shí)施方案中，所述藥物用于增強(qiáng)C1r2s2從血漿中的清除(或除去)。在一些實(shí)施方案中，所述藥物用于增強(qiáng)Clr2s2從血漿而不是Clq從血漿中的清除(或去除)。在這種情況下，從血漿清除C1q的增強(qiáng)水平不一定為空(零)。就是說(shuō)，從血漿清除Clq的增強(qiáng)水平可以為零，或者可以不為零而是接近零，或者可以是不顯著的或者足夠低以至于被本領(lǐng)域技術(shù)人員在技術(shù)上忽略。在某些情況下，所述藥物抑制經(jīng)典補(bǔ)體途徑的組分；在某些情況下，經(jīng)典補(bǔ)體途徑組分是Cls。[0101]通過(guò)LC/ESI-MS/MS測(cè)量小鼠血漿中人C1s和C1q的總濃度。通過(guò)在小鼠血漿中以限定的量混合并稀釋人C1s和C1q制備校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品，分別獲得人C1s濃度0.477,0.954,1.91,3.82,7.64,15.3,30.5微克(μg)/mL和人Clq硫蘇糖醇和0.4μg/mL的溶菌酶(雞蛋白)在50mmol/L碳酸氫銨中混合，并在56℃下溫育45入在50mmol/L碳酸氫銨中的160μL的0.537℃下溫育過(guò)夜。最后，加入5μL的10%的三氟乙酸使任何殘留的胰蛋白酶失活。通過(guò)LC/XevoTQ-S三重四極桿儀器(XevoTQ-Striplequadrupoleinstrument)(Waters)進(jìn)行。通過(guò)所選的反應(yīng)監(jiān)測(cè)(SRM)監(jiān)測(cè)人C1s特異性肽LLEVPEGR和人Clq特異性肽IAFSATR。對(duì)于人C1s,SRM躍遷是[M+2H]2+(m/z456.8)到y(tǒng)6離子(m/z686.3),且對(duì)于人Clq,SRM躍遷是[M+2H]2+(m/z383.2)到y(tǒng)5離子(m/z581.3)。通過(guò)使用相對(duì)于濃度繪制的峰面積，通過(guò)加權(quán)(1/x2)線性回歸構(gòu)建校準(zhǔn)曲線。使用分析軟件MasslynxVer.4.1(Waters)根據(jù)校準(zhǔn)曲線計(jì)算小鼠血漿中的濃度。[0102]如下評(píng)價(jià)在小鼠中施用抗C1s抗體后的總hC1s和hClq的藥代動(dòng)力學(xué)。[0103]在向小鼠(CB17/Icr-Prkdcscid/CrlCrl:CharlesRiverJapan)單獨(dú)施用抗原(hC1q、重組C1r2s2、以及hC1q和rC1r2s2的混合物)或與抗C1s抗體一起施用后評(píng)估hCls、hC1q和抗C1s抗體的體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)。每個(gè)給藥組分配三只小鼠。[0104]首先，以10mL/kg的劑量向小鼠靜脈注射hC1q溶液(0.84mg/mL),rC1r2s2(0.47mg/mL)或包含hClq和rC1r2s2(分別為0.84和0.47mg/mL)的混合物溶液?？乖芤航o藥后，立即以相同方式將抗C1s抗體溶液(2.5mg/mL)施用于同一個(gè)體。[0105]C1q和rC1r2s2的劑量設(shè)定被設(shè)計(jì)為剛施用后的人血漿中的生理濃度。在研究期間，將抗C1s抗體的劑量調(diào)整為超過(guò)兩種抗原的濃度，因此，假定幾乎所有hC1s在循環(huán)中都是結(jié)合形式。血漿樣品。通過(guò)LC/ESI-MS/MS在每個(gè)采樣點(diǎn)測(cè)量hC1s和hClq的血漿濃度。hC1s和hClq的PK參數(shù)通過(guò)非隔室分析(non-compartmentalanalysis)(PhoenixWinNonlin8.0版，[0107]向小鼠施用具有如下的抗體：(i)包含突變以減少C1q和Fcgamma受體結(jié)合的Fc,或(ii)包含突變以減少Clq結(jié)合同時(shí)保持Fcgamma受體結(jié)合的Fc。例如，在本發(fā)明中，“SG136”的Fc含有降低C1q和Fcgamma受體結(jié)合的突變，而“SG1148”的Fc含有降低C而保持Fcgamma受體結(jié)合的突變。[0108]對(duì)測(cè)試抗體(例如CCP1-CCP2-SP或CUB1-EGF-C的ClqCL比(SG1148/SG136)。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體的C1qCL比為1.8或更少、更少。[0109]本發(fā)明的抗Clr抗體可用于制備藥物。在一些實(shí)施方案中，所述藥物用于治療或預(yù)防補(bǔ)體介導(dǎo)的疾病或病癥。在一些實(shí)施方案中，所述藥物用于增強(qiáng)C1r從血漿中的清除(或除去)。在一些實(shí)施方案中，所述藥物用于增強(qiáng)Clr2s2從血漿中的清除(或除去)。在一些實(shí)施方案中，所述藥物用于增強(qiáng)Clr2s2從血漿而不是Clq從血漿中的清除(或去除)。在某些情[0110]本發(fā)明還提供治療或預(yù)防患有補(bǔ)體介導(dǎo)的疾病或病癥的個(gè)體的方法。在一些實(shí)施方案中，該方法包括向個(gè)體施用有效量的本發(fā)明的抗C1s抗體。本發(fā)明還提供了增強(qiáng)C1s在個(gè)體中從血漿中的清除(或去除)的方法。在一些實(shí)施方案中，該方法包括向個(gè)體施用有效量的本發(fā)明的抗C1s抗體，以增強(qiáng)C1s從血漿中的清除(或去除)。本發(fā)明還提供了增強(qiáng)個(gè)體中C1r2s2從血漿中的清除(或去除)的方法。本發(fā)明還提供了增強(qiáng)個(gè)體中C1r2s2從血漿而不是Clq從血漿中的清除(或去除)的方法。在一些實(shí)施方案中，該方法包括向個(gè)體施用有效量的本發(fā)明的抗C1s抗體，以增強(qiáng)C1r2s2從血漿中的清除(或去除)。在一些實(shí)施方案中，該方法包括向個(gè)體施用有效量的本發(fā)明的抗C1s抗體，以增強(qiáng)C1r2s2從血漿而不是Clq從血漿中的清除(或去除)。在某些情況下，抗體抑制經(jīng)典補(bǔ)體途徑的組分；在某些情況下，經(jīng)典補(bǔ)體途徑組分是Cls。[0111]本發(fā)明還提供治療或預(yù)防患有補(bǔ)體介導(dǎo)的疾病或病癥的個(gè)體的方法。在一些實(shí)施方案中，該方法包括向個(gè)體施用有效量的本發(fā)明的抗C1r抗體。本發(fā)明還提供了增強(qiáng)個(gè)體中C1r從血漿中的清除(或去除)的方法。在一些實(shí)施方案中，該方法包括向個(gè)體施用有效量的本發(fā)明的抗C1r抗體，以增強(qiáng)C1r從血漿中的清除(或去除)。本發(fā)明還提供了增強(qiáng)個(gè)體中Clr2s2從血漿中的清除(或去除)的方法。本發(fā)明還提供了增強(qiáng)個(gè)體中C1r2s2從血漿而不是Clq從血漿中的清除(或去除)的方法。在一些實(shí)施方案中，該方法包括向個(gè)體施用有效量的本發(fā)明的抗C1r抗體，以增強(qiáng)C1r2s2從血漿中的清除(或去除)。在一些實(shí)施方案中，該方法包括向個(gè)體施用有效量的本發(fā)明的抗Clr抗體，以增強(qiáng)Clr2s2從血漿而不是Clq從血漿中的清除(或去除)。在某些情況下，抗體抑制經(jīng)典補(bǔ)體途徑的組分；在某些情況下，經(jīng)典補(bǔ)體途徑組分是Clr。[0113][1]抑制C1q和C1r2s2復(fù)合物之間的相互作用的分離的抗體，其中所述抗體具有取代功能，使得所述抗體與Clqrs復(fù)合物結(jié)合并促進(jìn)Clq從Clqrs復(fù)合物解離。[0114][2][1]所述的抗體，其中所述抗體與Biacore芯片上的C1qrs復(fù)合物結(jié)合并促進(jìn)抗體時(shí)響應(yīng)單位(RU)的值低于不存在所述抗體時(shí)響應(yīng)單位(RU)的值。[0115][3][2]所述的抗體，其中在Biacore測(cè)定中交叉的時(shí)間點(diǎn)是在抗體注射開始的時(shí)間點(diǎn)之后的60s,100s,150s,200s,500s,700s,或1000s之內(nèi)，如通過(guò)Biacore測(cè)定使用以下條件所確定的：C1r2s2復(fù)合物和C1q的捕獲水平分別為200個(gè)共振單位(RU)和200個(gè)共振單位(RU),作為分析物的抗體以500nM,10μL/min注射。[0116][4][2]所述的抗體，其中幾乎所有的C1q在抗體注射開始的時(shí)間點(diǎn)后100s,300s,500s,700s,1000s,1500s,或2000s內(nèi)從Clqrs復(fù)合物解離，如通過(guò)Biacore測(cè)定使用以下條件所確定的：C1r2s2復(fù)合物和C1q的捕獲水平分別為200個(gè)共振單位(RU)和200個(gè)共振單位(RU),作為分析物的抗體以500nM,10μL/min注射。[0117][5]抑制C1q和C1r2s2復(fù)合物之間的相互作用的分離的抗體，其中所述抗體在RBC測(cè)定中對(duì)人血清補(bǔ)體具有至少70%的中和活性。[0118][6][1]至[5]中任一項(xiàng)所述的抗體，其中所述抗體是與C1s特異性結(jié)合的抗體或與C1r特異性結(jié)合的抗體。[0119][7]抑制C1q和C1r2s2復(fù)合物之間相互作用的分離的抗體，[0120]其中所述抗體與C1s的CUB1-EGF-CUB2結(jié)構(gòu)域內(nèi)的表位特異性結(jié)合，并與選自由以下1)-5)組成的組的抗體競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合所述表位：SEQIDNO:37的HVR-L3SEQIDNO:49的HVR-L3[0126]其中所述抗體與C1r的CUB1-EGF-CUB2結(jié)構(gòu)域內(nèi)的表位特異性結(jié)合，并與選自由以下6)-13)組成的組的抗體競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合所述表位：[0135][8]抑制C1q和C1r2s2復(fù)合物之間的相互作用的分離的抗體，其中所述抗體在pH5.8下的抗原結(jié)合活性低于其在pH7.4下的抗原結(jié)合活[0137][10][9]所述的抗體，其中該抗體在酸性pH下與C1s或C1r結(jié)合的親和合活性的KD值與中性pH下C1s結(jié)合活性的KD值的比值(KD(酸性pH)/KD(中性pH))為2或更[0140][11][8]至[10]中任一項(xiàng)所述的抗體，其中所述抗體包含F(xiàn)c區(qū)域，所述Fc區(qū)域在所述區(qū)域內(nèi)具有至少一個(gè)氨基酸修飾，從而增強(qiáng)血漿抗原濃度的降低和/或改善所述抗體[0141][12][11]所述的抗體，其中所述Fc區(qū)是具有選自以下各項(xiàng)組成的組的結(jié)合活性[0142]a)對(duì)活化的Fcgamma受體的結(jié)合活性強(qiáng)于[0143]b)對(duì)抑制性Fcgamma受體的結(jié)合活性強(qiáng)于對(duì)活化的Fcgamma受體的結(jié)合活性，并且[0145][13][1]至[12]中任一項(xiàng)所述的抗體，其中所述抗體與食蟹猴C1s和人C1s兩者，[0147][15]治療患有補(bǔ)體介導(dǎo)的疾病或病癥的個(gè)體的方法，包括向所述個(gè)體施用治療上的重組人C1r2s2Flag/His四聚體的取代?？贵w取代天然人C1q是通過(guò)重寫上的重組人C1r2s2Flag/His四聚體的取代?？贵w取代天然人C1q是通過(guò)重寫上的重組人C1r2s2Flag/His四聚體的取代?？贵w取代天然人C1q是通過(guò)重寫上的重組人C1r2s2Flag/His四聚體的取代?？贵w取代天然人C1q是通過(guò)重寫[0154][圖3]圖3示出抗體介導(dǎo)的重組人C1r2s2Flag/His四聚體從生物素化的天然人以監(jiān)測(cè)C1r2s2的解離速率(實(shí)線),或通過(guò)流過(guò)抗體以解離C1r2s2(虛線)。[0155][圖4]圖4示出天然人C1q與重組人C1r2s2Flag/His四聚體結(jié)合的抗體介導(dǎo)的阻[0157][圖6]圖6示出與C1s的CUB1-EGF-CUB2結(jié)構(gòu)域結(jié)合的抗體的競(jìng)爭(zhēng)性表位分箱結(jié)果[0158][圖7]圖7示出在小鼠中施用抗C1s抗體后人Cls和人C1q的藥代動(dòng)力學(xué)。[0159][圖8]圖8示出通過(guò)抗C1s抗體的人血清補(bǔ)體活性的時(shí)間依賴性中和。[0160][圖9]圖9示出在還原和非還原蛋白質(zhì)印跡分析中與天然人酶原C1s結(jié)合的抗體。[0161][圖10]圖10示出在還原蛋白質(zhì)印跡中抗體與截短的C1s蛋白結(jié)合。[0162][圖11A]圖11A示出抗體對(duì)C1r蛋白的CUB1-EGF-CUB2結(jié)構(gòu)域的結(jié)合特異性。針對(duì)[0163][圖11B]圖11B示出抗體對(duì)C1r蛋白的CUB1-EGF-CUB2結(jié)構(gòu)域的結(jié)合特異性。針對(duì)天然人C1r酶的抗C1r抗體的BIACORE(注冊(cè)商標(biāo))傳感圖。[0164][圖12A]圖12A示出抗體介導(dǎo)的天然人C1q從被捕獲在BIACORE(注冊(cè)商標(biāo))傳感器表面上的重組人Clr2s2Flag/His四聚體的取代?？贵w取代天然人C1q是通過(guò)覆蓋3個(gè)傳感圖來(lái)描繪。傳感圖1(小虛線)描述了Clqrs在傳感器表面上的穩(wěn)定捕獲。傳感圖2(大虛線)描述了抗體與Clqrs的結(jié)合以及C1q從C1r2s2的取代。傳感圖3(實(shí)線)描述了在不存在任何Clq時(shí)只有抗體與C1r2s2結(jié)合時(shí)的基線。為了比較這些傳感圖，在圖12A中將時(shí)間0處的RU標(biāo)準(zhǔn)[0165][圖12B]圖12B示出抗體介導(dǎo)的天然人Clq從被捕獲在BIACORE(注冊(cè)商標(biāo))傳感器表面上的重組人C1r2s2Flag/His四聚體的取代?？贵w取代天然人Clq是通過(guò)覆蓋3個(gè)傳感圖來(lái)描繪。傳感圖1(小虛線)描述了Clqrs在傳感器表面上的穩(wěn)定捕獲。傳感圖2(大虛線)描述了抗體與Clqrs的結(jié)合以及C1q從C1r2s2的取代。傳感圖3(實(shí)線)描述了在不存在任何Clq時(shí)只有抗體與C1r2s2結(jié)合時(shí)的基線。為了比較這些傳感圖，在圖12B中將時(shí)間0處的RU標(biāo)準(zhǔn)[0166][圖12C]圖12C示出抗體介導(dǎo)的天然人Clq從被捕獲在BIACORE(注冊(cè)商標(biāo))傳感器表面上的重組人Clr2s2Flag/His四聚體的取代。抗體取代天然人C1q是通過(guò)覆蓋2個(gè)傳感圖來(lái)描繪。傳感圖1(實(shí)線)描述了Clqrs在傳感器表面上的穩(wěn)定捕獲。傳感圖2(虛線)描述了抗體與Clqrs的結(jié)合以及Clq從C1r2s2的取代。為了比較這些傳感圖，在圖12C中將Ab注射處[0167][圖12D]圖12D示出抗體介導(dǎo)的天然人Clq從被捕獲在BIACORE(注冊(cè)商標(biāo))傳感器表面上的重組人C1r2s2Flag/His四聚體的取代?？贵w取代天然人Clq是通過(guò)覆蓋2個(gè)傳感圖來(lái)描繪。傳感圖1(實(shí)線)描述了Clqrs在傳感器表面上的穩(wěn)定捕獲。傳感圖2(虛線)描述了抗體與Clqrs的結(jié)合以及Clq從C1r2s2的取代。為了比較這些傳感圖，在圖12D中將Ab注射處[0168][圖13]圖13示出人血清補(bǔ)體活性的中和。具體實(shí)施方式[0170]本文中描述或引用的技術(shù)和方法是本領(lǐng)域技術(shù)人員使用常規(guī)方法學(xué)通常很好理解并且常規(guī)使用的，如，例如，以下中所述的廣泛使用的方法：Sambrook等，MoleculCloning:ALaboratoryManual3dedition(2001)ColdSpringAusubel等編，(2003));theseriesMethodsinEnzymology(AcademicPress,Inc.):PCR2:APracticalApproach(M.J.MacPherson,B.D.Hames和G.R.TaylorCellCulture(R.I.Freshney編(1987));0ligonucleotideSynthesis(M.J.GaitLaboratoryNotebook(J.E.Cellis編，1998)AcademicPress;AnimalCellCultureMather和P.E.Roberts,1998)PlenumPress;CellandTissueCulture:LaboratoryProcedures(A.Doyle,J.B.Griffiths和D.G.Newell編，1993-8)J.Wiley和Sons;TransferVectorsforMammalianCells(J.M.Miller和M.P.Calos編，1987);PCR:ThePolymeraseChainReaction,(Mullis等編，1994);CurrentProtocolsinImmunology(J.E.Coligan等編，1991);ShortProtocolsinMolecularBiology(Wiley和Sons,1999);Immunobiology(C.A.Janeway和P.Travers,1997);Antibodies(P.Finch,19IRLPress,1988-1989);MonoclonalAntibodies:APracticalApproach(P.LaboratoryManual(E.Harlow和D.Lane,ColdSpringHarborLaborator[0172]除非另外限定，本文中使用的技術(shù)和科學(xué)術(shù)語(yǔ)具有與本發(fā)明所屬技術(shù)領(lǐng)域普通技術(shù)人員的通常理解相同的含義。Singleton等，DictionaryofMicrobiologyandAdvancedOrganicChWiley&Sons(NewYork,N.Y.1992)給本領(lǐng)域技術(shù)人員提供了對(duì)本申請(qǐng)中所用眾多術(shù)語(yǔ)的一般指導(dǎo)。本文中引用的所有文獻(xiàn)(包括專利申請(qǐng)和出版物)通過(guò)引用完整地結(jié)合。[0173]為了解釋本申請(qǐng)，以下定義將適用并且當(dāng)合適時(shí)，單數(shù)使用的術(shù)語(yǔ)也將包括復(fù)數(shù)并且反之亦然。要理解的是，本文中使用的技術(shù)僅是為了描述特別的實(shí)施方案，并且不意在是限制性的。如果以下給出的任何定義與通過(guò)引用結(jié)合在本文中的任何文獻(xiàn)有沖突，以以下給出的定義為準(zhǔn)。[0174]用于本文中的目的的“受體人框架”是包含來(lái)源于人免疫球蛋白框架或人共有框架的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域(VL)框架或重鏈可變結(jié)構(gòu)域(VH)框架的氨基酸序列的框架，如以下所限定。“來(lái)源于”人免疫球蛋白框架或人共有框架的受體人框架可以包含其相同的氨基酸序列，或其可以含有氨基酸序列變化。在一些實(shí)施方案中，氨基[0175]“親和力”是指分子(例如，抗體)的單個(gè)結(jié)合位點(diǎn)及其結(jié)合配偶體(例如，抗原)之親和力，其反映結(jié)合對(duì)的成員(例如，抗體和抗原)之間的1:1相互作用。分子X(jué)對(duì)其配偶體Y的親和力通?？梢杂山怆x常數(shù)(Kd或KD)表示。親和力可以通過(guò)本領(lǐng)域中已知的常規(guī)方法測(cè)量，包括本文中所述的那些。用于測(cè)量結(jié)合親和力的具體說(shuō)明性和示例性實(shí)施方案描述如指分子(例如，抗體)的單個(gè)或更多個(gè)結(jié)合位點(diǎn)與其結(jié)合配偶體(例如，抗原)之間非共價(jià)相互作用的強(qiáng)度總和。在本文中，結(jié)合活性不嚴(yán)格限于反映結(jié)合對(duì)的成員(例如，抗體和抗原)之間1:1相互作用的活性。當(dāng)結(jié)合對(duì)的成員可以以單價(jià)和多價(jià)結(jié)合的方式結(jié)合彼此時(shí)，結(jié)合活性就是這些結(jié)合的強(qiáng)度總和。分子X(jué)對(duì)其配偶體Y的結(jié)合活性通?？梢杂山怆x常數(shù)(KD)表示?；蛘撸梢詫⒕喓虾徒怆x速率(Kon和Koff)用于結(jié)合的評(píng)估。結(jié)合活性可以通過(guò)本領(lǐng)域已知的常規(guī)方法來(lái)測(cè)量，包括本文所述的那些。以下描述用于測(cè)量結(jié)合親和力的具體的說(shuō)明性和示例性實(shí)施方案。[0176]“親和力成熟的”抗體是指在一個(gè)或多個(gè)高變區(qū)(HVR)中具有一個(gè)或多個(gè)改變(相比于不具有此種改變的親本抗體)的抗體，此種改變導(dǎo)致抗體對(duì)抗原的親和力提高。親和力結(jié)合C1s使得所述抗體可用作用于靶向C1s的診斷劑和/或治療劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗-Cls抗體與不相關(guān)的、非C1s蛋白的結(jié)合程度小于所述抗體與C1s結(jié)合的約10%,如例如通過(guò)放射性免疫測(cè)定(RIA)所測(cè)量的。在某些實(shí)施方案中，結(jié)合C1s的抗體的解離常數(shù)至10?13M)。在某些實(shí)施方案中，抗-C1s抗體結(jié)合C1s的表位，所述表位在來(lái)源于不同物種的C1s之間是保守的。親和力結(jié)合C1r使得所述抗體可用作用于靶向C1r的診斷劑和/或治療劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗-Clr抗體與不相關(guān)的、非C1r蛋白的結(jié)合程度小于所述抗體與C1r結(jié)合的約10%,如例如通過(guò)放射性免疫測(cè)定(RIA)所測(cè)量的。在某些實(shí)施方案中，結(jié)合C1r的抗體具有以下解離10?M至10?13M)。在某些實(shí)施方案中，抗C1r抗體與C1r的表位結(jié)合，所述C1r的表位在來(lái)源于不同物種的C1r之間是保守的。[0179]術(shù)語(yǔ)“抗體”在本文中以最廣義使用并且涵蓋各種抗體結(jié)構(gòu)，包括但不限于單克隆抗體，多克隆抗體，多特異性抗體(例如，雙特異性抗體),和抗體片段原結(jié)合活性即可。[0180]“抗體片段”是指不同于完整抗體的分子，其包含與完整的抗體結(jié)合的抗原結(jié)合的完整抗體的一部分。抗體片段的實(shí)例包括但不限于Fv,Fab,Fab’,Fab’-SH,F(ab’)?;雙抗[0181]作為參照抗體的“與相同表位結(jié)合的抗體”指在競(jìng)爭(zhēng)測(cè)定中阻斷參照抗體與其抗原結(jié)合達(dá)50%或更多的抗體，而相反，參照抗體在競(jìng)爭(zhēng)測(cè)定中阻斷抗體與其抗原的結(jié)合達(dá)50%或更多。示例性競(jìng)爭(zhēng)測(cè)定提供在本文中。[0182]術(shù)語(yǔ)“嵌合”抗體是指這樣的抗體，其中重鏈和/或輕鏈的一部分源自特定來(lái)源或物種，而重鏈和/或輕鏈的剩余部分源自不同的來(lái)源或物種。[0183]抗體的“類別”是指其重鏈所具有的恒定結(jié)構(gòu)域或恒定區(qū)的類型。有五種主要類別的抗體：IgA,IgD,IgE,IgG,和IgM,并且這些中的一些可以被進(jìn)一步劃分成亞類(同種型),例如，IgG?,IgG?,IgG?,IgG?,IgA?,和IgA?。對(duì)應(yīng)于不同的類型的免疫球蛋白的重鏈恒定結(jié)構(gòu)[0184]如本文中使用的，術(shù)語(yǔ)“細(xì)胞毒性劑”是指抑制或阻止細(xì)胞功能和/或?qū)е录?xì)胞死亡或破壞的物質(zhì)。細(xì)胞毒性劑包括但不限于放射性同位素(例如，211At,131I,125I,90Y,186Re,188Re,153sm,212Bi,32P,212Pb和Lu的放射性同位素);化療劑或藥物(例如，甲氨蝶比星(doxorubicin),美法侖(melphalan),絲裂霉素C,苯丁酸氮芥(chlorambucil),柔紅霉素(daunorubicin)或其他嵌入劑);生長(zhǎng)抑制劑；酶及其片段諸如溶核酶；分子毒素或細(xì)菌，真菌，植物或動(dòng)物來(lái)源的酶學(xué)活性毒素，包括公開的各種抗腫瘤劑或抗癌劑。[0185]“效應(yīng)子功能”是指可歸因于抗體Fc區(qū)的那些生物學(xué)活性，其隨抗體同種型而變化。抗體效應(yīng)子功能的實(shí)例包括：C1q結(jié)合和補(bǔ)體依賴性細(xì)胞毒性(CDC);Fc受體結(jié)合；抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)性細(xì)胞毒性(ADCC);吞噬作用；細(xì)胞表面受體(例如，B細(xì)胞受體)的下調(diào)；以[0186]試劑(例如，藥物制劑)的“有效量”是指實(shí)現(xiàn)所需的治療或預(yù)防結(jié)果所必要的劑量和時(shí)間的有效量。[0187]術(shù)語(yǔ)“表位”包括任何能夠被抗體結(jié)合的決定簇。表位是抗原的被靶向所述抗原的抗體結(jié)合的區(qū)域，并且包括與抗體直接接觸的特定氨基酸。表位決定簇可以包括分子(諸如氨基酸，糖側(cè)鏈，磷?；蚧酋；?的化學(xué)活性表面簇集，并且可以具有特定的三維結(jié)構(gòu)特征，和/或特定的電荷特征。通常，對(duì)于特別的靶抗原具有特異性的抗體將優(yōu)先識(shí)別蛋白和/或大分子的復(fù)合物混合物中的靶抗原上的表位。[0188]在本文中，術(shù)語(yǔ)“Fc區(qū)”被用于限定含有恒定區(qū)的至少一部分的免疫球蛋白重鏈的C-端區(qū)域。該術(shù)語(yǔ)包括天然序列Fc區(qū)和變體Fc區(qū)。在一個(gè)實(shí)施方案中，人IgG重鏈Fc區(qū)從Cys226或Pro230延伸至重鏈的羧基端。然而，F(xiàn)c區(qū)的C-端賴氨酸(Lys447)或甘氨酸-賴氨酸(殘基446-447)可能存在也可能不存在。除非本文中另外指出，F(xiàn)c區(qū)或恒定區(qū)中的氨基酸殘ImmunologicalInterest,5thEd.PublicHealthService,NationalHealth,Bethesda,MD,1991中所描述的。[0189]“框架”或“FR”是指不同于高變區(qū)(HVR)殘基的可變結(jié)構(gòu)域殘基?？勺兘Y(jié)構(gòu)域的FR所述抗體具有與天然抗體結(jié)構(gòu)基本類似的結(jié)構(gòu)或具有含有如本文中所限定的Fc區(qū)的重鏈。轉(zhuǎn)化的細(xì)胞及來(lái)源于其的后代(不考慮傳代次數(shù))。后代的核酸內(nèi)容可以與親本細(xì)胞不完全相同，但可以含有突變。本文中包括具有與對(duì)于原始轉(zhuǎn)化的細(xì)胞中篩選或選擇的相同的功能或生物學(xué)活性的突變體后代。[0192]“人抗體”是這樣的抗體，其具有的氨基酸序列對(duì)應(yīng)于由人或人細(xì)胞產(chǎn)生的抗體或源自利用人抗體庫(kù)或其他人抗體編碼序列的非人來(lái)源的抗體的氨基酸序列。人抗體的該定義明確排除了包含非人抗原結(jié)合殘基的人源化抗體。[0193]“人共有框架”是這樣的框架，其代表人免疫球蛋白VL或VH框架序列的選擇中最常見(jiàn)的氨基酸殘基。通常，人免疫球蛋白VL或VH序列的選擇來(lái)自可變結(jié)構(gòu)域序列的亞組。通5版，NIH出版91-3242,BethesdaMD(1991),卷1-3中的亞組。在一個(gè)實(shí)施方案中，對(duì)于VL,所述亞組是如以上Kabat等中的亞組kI。在一個(gè)實(shí)施方案中，對(duì)于VH,所述亞組是如以上Kabat等中的亞組III。[0194]“人源化”抗體是指一種嵌合抗體，其包含來(lái)自非人HVR的氨基酸殘基和來(lái)自人FR的氨基酸殘基。在某些實(shí)施方案中，人源化抗體將包含基本上全部的至少一個(gè)(并且典型地，兩個(gè))可變結(jié)構(gòu)域，其中所有或基本上所有的HVR(例如，CDR)對(duì)應(yīng)于非人抗體的HVR,并且所有或基本上所有的FR對(duì)應(yīng)于人抗體的FR。人源化抗體任選地可以包含來(lái)源于人抗體的抗體恒定區(qū)的至少一部分?？贵w的“人源化形式”,例如，非人抗體，抗體。[0195]如本文中使用的術(shù)語(yǔ)“高變區(qū)”或“HVR”是指抗體可變結(jié)構(gòu)域中序列高變(“互補(bǔ)決定區(qū)”或“CDR”)和/或形成結(jié)構(gòu)確定的環(huán)(“高變環(huán)”)和/或[0196](a)出現(xiàn)在氨基酸殘基26-32(L1),50-52(L2),91-96(L3),26-32(H1),53-55(H2),和96-101(H3)處的高變環(huán)(Chothia和Lesk,J.Mol.Biol.196:901-917[0197](b)出現(xiàn)在氨基酸殘基24-34(L1),50-56(L2),89-97(L3),31-35b(H1),50-65(H2),和95-102(H3)處的CDR(Kabat等，SequencesofProteinsofImInterest,5thEd.PublicHealthS[0198](c)出現(xiàn)在氨基酸殘基27c-36(L1),46-55(L2),89-96(L3),30-35b(H1),47-58(H2),和93-101(H3)處的抗原接觸點(diǎn)(MacCallum等，J.Mol.Biol.262:732-745(1996));以及[0199](d)(a)、(b)和/或(c)的組合，包括HVR氨基酸殘基46-56(L2),47-56(L2),48-56(L2),49-56(L2),26-35(H1),26-35b(H1),49-65(H2),93-102(H3),和94-102[0200]除非另外指出，在本文中，HVR殘基和可變結(jié)構(gòu)域中的其他殘基(例如，F(xiàn)R殘基)根據(jù)以上Kabat等編號(hào)。[0201]“免疫綴合物”是與一個(gè)或多個(gè)包括但不限于細(xì)胞毒性劑的異源分子綴合的抗體。貓，狗和馬),靈長(zhǎng)類動(dòng)物(例如，人和非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物如猴子),兔，和嚙齒類動(dòng)物(例如，小[0203]“分離的”抗體是已經(jīng)與其天然環(huán)境的組被純化至大于95%或99%的純度，如由例如電泳(例如，SDS,等電聚焦(IEF),毛細(xì)管電泳)或?qū)游?例如，離子交換或反相HPLC)確定的。對(duì)于用于評(píng)估抗體純度的方法的綜述，參[0204]“分離的”核酸是指已經(jīng)與其天然環(huán)境的組分分離的核酸分子。樣的核酸分子，所述核酸分子被包含在通常含有所述核酸分子的細(xì)胞中，但是所述核酸分子存在于染色體外或存在于不同于其天然染色體位置的染色體位置處。[0205]“編碼抗C1s抗體的分離的核酸”或“編碼抗C1r抗體的分離的核酸”是指一個(gè)或多個(gè)編碼抗體重鏈和輕鏈(或其片段)的核酸分子，包括在單個(gè)載體或在分開的載體中的此種核酸分子，以及存在于宿主細(xì)胞中的一個(gè)或多個(gè)位置處的此種核酸分子。[0206]如本文使用的術(shù)語(yǔ)“單克隆抗體”是指獲自基本上同源的抗體的群體的抗體，即，組成所述群體的個(gè)體抗體是相同的和/或結(jié)合相同的表位，除可能的變體抗體以外，例如，含天然存在的突變或在單克隆抗體制劑的制備過(guò)程中產(chǎn)生，此種變體通常少量存在。對(duì)比于多克隆抗體制劑(通常包括針對(duì)不同的決定簇(表位)的不同抗體),單克隆抗體制劑中的各個(gè)單克隆抗體是針對(duì)抗原上的單個(gè)決定簇。因此，定語(yǔ)“單克隆”指示抗體的性質(zhì)為獲自基本上同源的抗體群體，并且不視為要求通過(guò)任何特定的方法制備所述抗體。例如，根據(jù)本發(fā)明使用的單克隆抗體可以通過(guò)多種技術(shù)制備，包括但不限于雜交瘤方法，重組DNA法，噬菌體展示法，以及利用含有所有或部分的人免疫球蛋白基因座的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的方法，本文中描述了這樣的方法以及其他用于制備單克隆抗體的示例性方法?？贵w可以存在于藥物制劑中。[0208]“天然抗體”是指天然存在的是約150,000道爾頓的異源四聚糖蛋白，由二硫鍵鍵合的兩個(gè)相同的輕鏈和兩個(gè)相同的重鏈組成。從N端到C端，各重鏈具有可變區(qū)(VH),其也被稱為可變重鏈結(jié)構(gòu)域或重鏈可變結(jié)構(gòu)其也被稱為可變輕鏈結(jié)構(gòu)域或輕鏈可變結(jié)構(gòu)域，之后是輕鏈恒定(CL)結(jié)構(gòu)域?？贵w的輕鏈基于其恒定結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列可以被分配至兩種類型之一，被稱為K和λ。[0209]術(shù)語(yǔ)“包裝插頁(yè)”用于指通常包括在治療產(chǎn)品的商業(yè)包裝中的使用說(shuō)明，其含有關(guān)[0210]相對(duì)于參照多肽序列的“百分比(%)氨基酸序列同一性”被定義為在對(duì)序列進(jìn)行比對(duì)并且在必要時(shí)引入空隙(gap)以實(shí)現(xiàn)最大百分比序列同一性，而不將任何保守置換認(rèn)為是序列同一性的一部分后，候選序列中與參照多肽序列中的氨基酸殘基相同的氨基酸殘基的百分比。為了確定百分比氨基酸序列同一性的比對(duì)可以以在本領(lǐng)域中的技術(shù)內(nèi)的多種方于比對(duì)序列的合適參數(shù)，包括在比較的序列的全長(zhǎng)上實(shí)現(xiàn)最大比對(duì)所需的任何算法。[0211]ALIGN-2序列比較計(jì)算機(jī)程序的作者是Genentech,Inc.,并且源代碼已經(jīng)與用戶文件一起被提交于美國(guó)版權(quán)局，WashingtonD.C.,20559,其以美國(guó)版權(quán)登記號(hào)TXU510087被登記。ALIGN-2程序可從Genentech,Inc.,SouthSanFrancisco,操作系統(tǒng)，包括數(shù)字UNIXV4.0D。所有序列比較參數(shù)由ALIGN-2程序設(shè)定并且不需要改變。在采用ALIGN-2進(jìn)行氨基酸序列比較的情況下，給定氨基酸序列A與或相對(duì)給定氨基酸序列B的%氨基酸序列同一性(其可以備選地表述為給定氨基酸序列A與或相對(duì)給定氨基酸序列B具有或包含特定%氨基酸序列同一性)計(jì)算如下：100乘以分?jǐn)?shù)X/Y;其中X是在A和B的程序比對(duì)中由序列比對(duì)程序ALIGN-2評(píng)分為相同匹配的氨基酸殘基的數(shù)目，并且Y是B中氨基酸殘基的總數(shù)。要理解的是，當(dāng)氨基酸序列A的長(zhǎng)度不等于氨基酸序列B的長(zhǎng)度時(shí)，A對(duì)B的%氨基酸序列同一性將不等于B對(duì)A的%氨基酸序列同一性。除非另外明確指出，本文中使用的所有%氨基酸序列同一性值都是如前述段落中所述使用ALIGN-2計(jì)算機(jī)程序獲得的。[0212]術(shù)語(yǔ)“藥物制劑”是指這樣的制劑，其具有的形式允許包含在其中的活性成分的生物學(xué)活性是有效的，并且其不含對(duì)將被施用所述制劑的受試者具有不可接受的毒性的其他組分。[0213]“藥學(xué)上可接受的載體”是指藥物制劑中除活性成分以外的成分，其對(duì)受試者是無(wú)毒性的。藥學(xué)上可接受的載體包括但不限于[0214]如本文所用，短語(yǔ)“特異性結(jié)合”是指抗體以包括背景(即，非特異性)結(jié)合但不包括顯著(即特異性)結(jié)合的結(jié)合水平結(jié)合非目的抗原的活性或特征。換句話說(shuō)，“特異性結(jié)合”是指抗體以包括除背景(即非特異性)結(jié)合以外或代替背景(即非特異性)結(jié)合的顯著(即特異性)結(jié)合的結(jié)合水平結(jié)合目的抗原的活性或特征?？梢酝ㄟ^(guò)本說(shuō)明書中提及的或本領(lǐng)域已知的任何方法來(lái)測(cè)量特異性。非特異性或背景結(jié)合的上述水平可以是零，或者可以不是零而是接近零，或者可以足夠低以至于被本領(lǐng)域技術(shù)人員在技術(shù)上忽略。例如，當(dāng)技術(shù)人員在合適的結(jié)合測(cè)定中不能檢測(cè)或觀察到任何顯著的(或相對(duì)強(qiáng)的)抗體與非目的抗原可以在合適的結(jié)合測(cè)定中檢測(cè)或觀察到任何顯著的(或相對(duì)強(qiáng)的)抗體和目的抗原之間的[0215]除非另有說(shuō)明，本文所用的術(shù)語(yǔ)“C1s”是指來(lái)自任何脊椎動(dòng)物來(lái)源的任何天然C1s,包括哺乳動(dòng)物，諸如靈長(zhǎng)類動(dòng)物(例如，人)和嚙齒動(dòng)物(諸如，小鼠和大鼠)。該術(shù)語(yǔ)涵蓋“全長(zhǎng)”的未加工的C1s以及源自細(xì)胞中的加工的任何形式的C1s。該術(shù)語(yǔ)還涵蓋C1s的天然存在的變體，例如剪接變體或等位變體。示例性人C1s的氨基酸序列示于SEQIDNO:1。示例性食蟹猴和大鼠C1s的氨基酸序列分別示于SEQIDNo:3和2。[0216]除非另有說(shuō)明，本文所用的術(shù)語(yǔ)“C1r”是指來(lái)自任何脊椎動(dòng)物來(lái)源的任何天然Clr,包括哺乳動(dòng)物，諸如靈長(zhǎng)類動(dòng)物(例如，人)和嚙齒動(dòng)物(諸如，小鼠和大鼠)。該術(shù)語(yǔ)涵蓋“全長(zhǎng)”的未加工的C1r以