生化試劑產(chǎn)品及臨床意義介紹_第1頁(yè)
生化試劑產(chǎn)品及臨床意義介紹_第2頁(yè)
生化試劑產(chǎn)品及臨床意義介紹_第3頁(yè)
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生化試劑產(chǎn)品及臨床意義介紹演示文稿第1頁(yè),共92頁(yè)。(優(yōu)選)生化試劑產(chǎn)品及臨床意義介紹第2頁(yè),共92頁(yè)。國(guó)內(nèi)臨床生化試劑最齊全之一含已注冊(cè)和正在申報(bào)中:

已注冊(cè)ALTASTALPGGTCHEAFU(試)TBA-ITBA-VTPALBTBILDBILPAADA(試)CR-苦CR-酶BUNUAB2-MG(試)GLU-HKGLU-OXGSPAMYTGTCHHDL-CLDL-CAPOA1APOBLPaCKCKMBLDHHBDHCaMgPCu(試)ZnFeCO2ASO(試)CRP(試)RF(試)申報(bào)中5’-NTGPDAAFPNAGCSFCYS-CMALBHbA1cD3-HACELDH1C3C4IgAIgGIgMTRF第3頁(yè),共92頁(yè)。生化試劑分類:酶類:

AMY,CK,CK-MB,HBDH,LDH,LDH1,ALT,AST,ALP,GGT,AFU,CHE,5’-NT,ADA,NAG,ACE,GPDA基質(zhì)類:

TP,ALB,GLU,GSP,TBIL,DBIL,UA,BUN,CR,TBA1,5-AG,D3-H,CSF,CYS-C,TRP,血脂類:

TG,TCH,HDL-C,LDL-C,APOA1,APOB,LP(a)電解質(zhì):

Ca,Mg,P,Cl,Cu,F(xiàn)e,Zn,CO2免疫類:

ASO,RF,CRP,B2-MG,HBA1C,C3,C4,IgA,IgG,IgM,PA,MALB,AFP第4頁(yè),共92頁(yè)。生化試劑臨床應(yīng)用肝功能TP,ALB,TBIL,DBIL,ALT,AST,ALP,GGT;TBA,AFU,AFP,ADA,CHE,5’-NT,GPDA,PA腎功能UA,BUN,CR,B2-MG,NAG,mALB,UP,CSF,CYC心肌酶譜LDH-L,HBDH,CK,CK-MB,LDH1血脂TG,TCH,HDL-C,LDL-C,APOA1,APOB,LP(a)風(fēng)濕三項(xiàng)ASO,RF,CRP血糖GLU,GSP,HBA1C,1,5-AG,D3-H心血管HS-CRP,ACE電解質(zhì)CA,MG,P,CL,CU,F(xiàn)E,ZN,CO2胰腺AMY其他C3,C4,IgA,IgG,IgM第5頁(yè),共92頁(yè)。肝膽疾病

的生物化學(xué)檢測(cè)第6頁(yè),共92頁(yè)。1.肝臟的生理功能1.代謝功能:三大物質(zhì)(糖、蛋白質(zhì)和脂類)的同化、儲(chǔ)存和異化;核酸代謝、維生素的活化和儲(chǔ)藏;激素的滅活及排泄;膽紅素、膽酸的生成;鐵、銅等金屬的代謝2.排泄功能:對(duì)膽紅素和某些染料的排泄3.解毒功能:生物轉(zhuǎn)化功能(同化、異化)4.物質(zhì)合成功能:凝血和纖溶因子、纖溶抑制因子的生成及對(duì)活性凝血因子的滅活清除第7頁(yè),共92頁(yè)。2.肝功能實(shí)驗(yàn)的內(nèi)容蛋白質(zhì)代謝功能檢查(TP、ALB、PA、AFP)膽紅素代謝檢查(TBIL、DBIL)膽汁酸代謝檢查(TBA)攝取、排泄功能檢查血清肝酶譜的檢查(ALT、AST、ALP、GGT、)第8頁(yè),共92頁(yè)。蛋白質(zhì)代謝功能檢查肝臟是蛋白質(zhì)代謝的主要的器官,許多蛋白質(zhì)如白蛋白、糖蛋白、凝血因子、纖溶因子及各種轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白等都由肝細(xì)胞合成,當(dāng)肝細(xì)胞受損時(shí),合成上述蛋白的功能降低,蛋白質(zhì)的合成量就減少;

-球蛋白雖然不是肝細(xì)胞合成,但當(dāng)肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞受損,間質(zhì)細(xì)胞增生時(shí),球蛋白的生成增加;因此,在肝臟疾病時(shí),可表現(xiàn)出血液中蛋白質(zhì)質(zhì)和量的改變;其主要表現(xiàn)為白蛋白減少,纖維蛋白原減少,球蛋白的增多等;因此,測(cè)定血清中蛋白質(zhì)含量和分析其組分的變化,可以了解肝臟蛋白質(zhì)代謝的功能。第9頁(yè),共92頁(yè)。1.總蛋白、白蛋白的檢測(cè)總蛋白的檢測(cè)雙縮脲法蛋白質(zhì)是由許多氨基酸通過(guò)肽鍵相互結(jié)合而成的,二價(jià)銅離子在堿性溶液中與蛋白中的肽發(fā)生反應(yīng)形成紫紅色絡(luò)合物,在540nm有吸收峰,并與蛋白含量成正比。蛋白+Cu2+→Cu–蛋白絡(luò)合物(紫紅色)第10頁(yè),共92頁(yè)。白蛋白的檢測(cè)溴甲酚綠終點(diǎn)法血清中白蛋白與溴甲酚綠(BCG)在pH4.15環(huán)境中結(jié)合生成綠色復(fù)合物,溶液由黃色變?yōu)榫G色,在600nm有吸收峰,其顏色深淺與白蛋白濃度成正比,從而測(cè)出白蛋白含量。白蛋白+溴甲酚綠→白蛋白-BCG復(fù)合物第11頁(yè),共92頁(yè)。與溴甲酚紫法的比較溴甲酚綠法操作簡(jiǎn)單、快速,既可手工操作,也能自動(dòng)化分析,是目前國(guó)內(nèi)最常用方法。溴甲酚綠法除與白蛋白結(jié)合外,還與部分球蛋白結(jié)合,對(duì)血清白蛋白特異性較溴甲酚紫法稍差溴甲酚綠法測(cè)定白蛋白具有高靈敏度第12頁(yè),共92頁(yè)。臨床意義血清總蛋白與白蛋白升高急性失水、腎上腺皮質(zhì)功能亢進(jìn)血清總蛋白與白蛋白降低肝細(xì)胞損害合成減少:肝炎、肝硬化、肝癌總蛋白<60g/L,白蛋白<25g/L,低蛋白血癥營(yíng)養(yǎng)不良:攝入不足丟失過(guò)多:腎病、燒傷、大出血消耗增加:結(jié)核、甲亢、惡性腫瘤第13頁(yè),共92頁(yè)。血清總蛋白與白蛋白升高

TP>80g/L(高蛋白血癥)A>35g/L(高球蛋白血癥)慢性肝病、M蛋白血癥、自身免疫性疾病、慢性炎癥和感染如結(jié)核、麻風(fēng)、慢性血吸蟲病血清TP降低生理性減少(e.g.<3y)、免疫功能抑制、先天性低TPA/G倒置肝功能損傷、M蛋白血癥。如慢性肝炎、肝硬化、肝癌、多發(fā)性骨髓瘤第14頁(yè),共92頁(yè)。血清前白蛋白測(cè)定免疫比濁法標(biāo)本中PAB與特異性抗體反應(yīng)形成不溶性復(fù)合物,可在340nm測(cè)定該復(fù)合物的濁度,與同樣處理的標(biāo)準(zhǔn)品比較,得出標(biāo)本中PAB的含量。第15頁(yè),共92頁(yè)。臨床意義降低:見于慢性感染、腫瘤、肝炎、肝硬化、肝癌,(因?yàn)榘胨テ诒華LB短,PA的變化遠(yuǎn)較ALB敏感),故對(duì)早期肝炎、急性重肝具有特殊診斷價(jià)值升高:Hodgkin?。◥盒粤馨土龅囊环N獨(dú)特類型)第16頁(yè),共92頁(yè)。膽紅素代謝檢查膽紅素主要是在網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)中,由衰老RBC的血紅蛋白分解后形成生成后在血液中與白蛋白聚合,此時(shí)尚未與其它化合物結(jié)合,稱為非結(jié)合膽紅素(間接膽紅素IBIL或游離膽紅素)非結(jié)合膽紅素被轉(zhuǎn)運(yùn)到肝臟,經(jīng)肝細(xì)胞攝取后,通過(guò)肝臟的生物轉(zhuǎn)化作用,與葡萄糖醛酸結(jié)合后稱為結(jié)合膽紅素(直接膽紅素DBIL)第17頁(yè),共92頁(yè)。膽紅素代謝檢查結(jié)合膽紅素由膽道排入腸腔,被細(xì)菌還原成尿膽原尿膽原一部分被腸粘膜吸收進(jìn)入體內(nèi)被肝細(xì)胞攝取,其中大部分又轉(zhuǎn)變成膽紅素隨膽汁排入腸腔,形成“肝腸循環(huán)”殘留腸腔的尿膽原氧化后,以糞膽素排出因此,當(dāng)膽紅素生成過(guò)多或肝細(xì)胞的攝取、結(jié)合、轉(zhuǎn)運(yùn)、排泄等過(guò)程發(fā)生障礙,可導(dǎo)致血中膽紅素增高,形成黃疸。第18頁(yè),共92頁(yè)??偰懠t素(T-BIL)改良化學(xué)氧化法總膽紅素在表面活性劑存在下,被化學(xué)氧化劑氧化,生成膽綠素,測(cè)定450nm處吸光度的減少與總膽紅素的濃度成正比。

化學(xué)氧化劑pH8.2膽紅素————————→膽綠素表面活性劑第19頁(yè),共92頁(yè)。直接膽紅素(D-BIL)改良化學(xué)氧化法直接膽紅素在間膽抑制劑和表面活性劑的存在下,被化學(xué)氧化劑氧化,生成膽綠素,測(cè)定450nm處吸光度的減少與直接膽紅素的濃度成正比。

化學(xué)氧化劑pH3.0膽紅素——————————→膽綠素間膽抑制劑第20頁(yè),共92頁(yè)。與重氮鹽法的比較重氮法中的改良J-G法有較高的靈敏度、精密度和較寬的線性,但試劑無(wú)法長(zhǎng)期穩(wěn)定,溶血有負(fù)干擾,且疊氮鈉作為防腐劑時(shí)能破壞偶氮試劑,導(dǎo)致呈色不完全;改良化學(xué)氧化法與J-G法有很好的相關(guān)性(R=0.994);抗溶血(Hb≤7.4);不受脂肪乳、VitC、肝素等干擾因素的影響;雙試劑可以長(zhǎng)期保持穩(wěn)定第21頁(yè),共92頁(yè)。臨床意義

增高:見于肝臟疾病,如原發(fā)性膽汁性肝硬化、急性黃疸性肝炎、慢性活動(dòng)性肝炎、病毒性肝炎、阻塞性黃疸、肝硬化;

肝外疾病如溶血性黃疸、新生兒黃疸、膽石癥、胰頭癌、輸血錯(cuò)誤等也可見總膽紅素也增高。第22頁(yè),共92頁(yè)。膽汁酸測(cè)定酶循環(huán)法(第五代膽汁酸測(cè)定方法學(xué))膽汁酸被3

-羥基類固醇脫氫酶及Thio-NAD特異性地氧化,生成3-酮類固醇及Thio-NADH,3-酮類固醇在3

-羥基類固醇脫氫酶及NADH存在下,生成膽汁酸和NAD+,循環(huán)往復(fù)從而放大微量的膽汁酸量,測(cè)定生成的Thio-NADH的吸光度與標(biāo)準(zhǔn)比較,得出膽汁酸含量。第23頁(yè),共92頁(yè)。酶循環(huán)法測(cè)定反應(yīng)式Thio-NAD+Thio-NADH+H+

膽汁酸3α-羥基類固醇脫氫酶

3-酮類固醇

NAD+NADH+H+第24頁(yè),共92頁(yè)。臨床意義總膽汁酸升高肝損害:肝炎、肝硬化、肝癌膽道阻塞:膽管梗阻引起的膽汁淤積小腸污濁綜合癥

與第一代膽汁酸測(cè)定試劑相比成倍提高了測(cè)定靈敏度,克服了第一代酶比色法試劑在測(cè)定低值標(biāo)本時(shí)的重復(fù)性差的問(wèn)題。同時(shí)由于靈敏度提高的原因,循環(huán)酶法試劑更加容易受到其他試劑中所含膽酸鹽的交叉污染。應(yīng)該在通道或者測(cè)定順序設(shè)置上與那些試劑隔離開來(lái)。第25頁(yè),共92頁(yè)。血清酶學(xué)檢查肝臟是酶含量最豐富的器官,肝細(xì)胞損傷時(shí),許多酶如ALT、AST、GGT、ALP釋放入血,導(dǎo)致血漿酶水平升高1.肝臟疾病時(shí)酶活力改變的機(jī)制酶合成異常肝細(xì)胞釋放增加第26頁(yè),共92頁(yè)。2.對(duì)肝臟疾病診斷意義的分類反映肝細(xì)胞病變和壞死的酶(ALT,AST)反映肝、膽淤滯的酶反映肝纖維化的酶反映肝細(xì)胞合成功能的酶(CHE)第27頁(yè),共92頁(yè)。反映肝細(xì)胞病變和壞死的酶

谷氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(谷丙轉(zhuǎn)氨酶,ALT)連續(xù)監(jiān)測(cè)法(IFCC)ALT催化L-丙氨酸的氨基轉(zhuǎn)移,生成丙酮酸。丙酮酸與NADH在LDH的催化下反應(yīng)生成乳酸和NAD+。NADH在340nm處有特異吸收峰,其被氧化的速率與血清中ALT的活性成正比,在340nm處測(cè)定NADH下降速率,即可測(cè)出ALT活性。第28頁(yè),共92頁(yè)。

天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(谷草轉(zhuǎn)氨酶,AST)連續(xù)監(jiān)測(cè)法(IFCC)AST催化L-天冬氨酸的氨基轉(zhuǎn)移與MDH催化的反應(yīng)偶聯(lián),使NADH氧化生成NAD+。NADH在340nm處有特異吸收峰,其被氧化的速率與血清中AST的活性成正比,在340nm處測(cè)定NADH下降速率,即可測(cè)出AST活性。第29頁(yè),共92頁(yè)。與賴氏法的比較連續(xù)監(jiān)測(cè)法多用于自動(dòng)化生化分析儀,準(zhǔn)確性好、精密度高。賴氏法多用于手工操作,實(shí)驗(yàn)條件要求不高,便于基層醫(yī)療單位開展,但重復(fù)性差,準(zhǔn)確性差。第30頁(yè),共92頁(yè)。臨床意義急性病毒肝炎ALT:500-1000U/L,并且AST<ALT慢性肝炎、脂肪肝ALT輕度升高100-200U/L肝硬化、肝癌,AST、ALT輕度升高或正常,以AST>ALT多見一些藥物或毒物所致升高:氯丙嗪、異煙肼、奎寧和酒精、鉛、汞、四氯化碳、有機(jī)磷中毒第31頁(yè),共92頁(yè)。腺苷脫氨酶(ADA)酶比色法

ADA腺嘌呤核苷+H2O————→次黃嘌呤核苷+NH3PN次黃嘌呤核苷+Pi————→次黃嘌呤+磷酸核糖

XOD次黃嘌呤+2H2O+2O2———→2H2O2+尿酸

POD2H2O2+4-AAP+TOOS————→醌化合物

在波長(zhǎng)546nm處測(cè)定醌化合物生成速率,計(jì)算出ADA活力。

第32頁(yè),共92頁(yè)。臨床意義類似ALT,對(duì)反映急性肝損害的殘存病變和慢性肝損害比ALT為先,(并且ADA在鑒別結(jié)核性和非結(jié)核性胸腹腔積液上也有應(yīng)用)。

第33頁(yè),共92頁(yè)。反映肝細(xì)胞合成功能的酶膽堿酯酶(CHE)硫代丁酰膽堿法

硫代丁酰膽堿在膽堿酯酶的作用下生成丁酸和硫代膽堿,硫代膽堿再與5、5二硫代-2-硝基苯甲酸反應(yīng)生成5-巰基-2-硝基苯甲酸,通過(guò)在405nm處測(cè)定5-巰基-2-硝基苯甲酸的增高速率,可以計(jì)算出膽堿酯酶的活力。

臨床意義

CHE活力降低:肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞損害第34頁(yè),共92頁(yè)。反映膽道梗阻的酶

堿性磷酸酶(ALP)的測(cè)定連續(xù)監(jiān)測(cè)法(IFCC)無(wú)色的對(duì)-硝基苯磷酸二鈉在ALP作用下,生成在405nm處有特異吸收峰的淡黃色對(duì)-硝基苯酚,通過(guò)測(cè)定在405nm處吸光度的變化速率計(jì)算ALP活性。第35頁(yè),共92頁(yè)。臨床意義肝膽系統(tǒng)疾病:阻塞性黃疸、急、慢性黃疸肝炎、肝癌黃疸的鑒別骨骼疾?。豪w維性骨炎、佝僂病、骨軟化病、骨轉(zhuǎn)移癌、骨折愈合期生理性升高:生長(zhǎng)期的兒童和青少年第36頁(yè),共92頁(yè)。

γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(GGT)連續(xù)監(jiān)測(cè)法

-谷氨酰-3-羧基-對(duì)硝基苯胺和雙甘肽在

-GT作用下,生成對(duì)硝基苯胺及

-谷氨酰雙甘肽,所釋放出的對(duì)硝基苯胺與

-GT活性成正比,通過(guò)在405nm處測(cè)定對(duì)硝基苯胺的變化,可求出

-GT活力。第37頁(yè),共92頁(yè)。臨床意義膽道阻塞性疾病急、慢性病毒性肝炎、肝硬化酒精性肝炎其他:脂肪肝、胰腺炎、前列腺腫瘤第38頁(yè),共92頁(yè)。其它酶類酶類腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)

-L-巖藻糖苷酶(AFU)與原發(fā)性肝癌診斷標(biāo)志(81.2%),與甲胎蛋白(AFP)聯(lián)合檢測(cè)可提高肝癌檢出率肝纖維化的酶學(xué)檢查單氨氧化酶腺苷脫氨酶(ADA)第39頁(yè),共92頁(yè)。思考題1.肝損害蛋白檢查的意義。2.血清酶學(xué)在肝膽疾病檢查的意義。名詞解釋1.結(jié)合膽紅素2.非結(jié)合膽紅素第40頁(yè),共92頁(yè)。腎臟疾病

的生物化學(xué)檢測(cè)第41頁(yè),共92頁(yè)。腎臟的生理功能排泄水分、代謝產(chǎn)物、廢物,保留有用物質(zhì)調(diào)節(jié)水分和滲透壓調(diào)節(jié)電解質(zhì)及酸堿平衡制造某些重要的生理活性物質(zhì)第42頁(yè),共92頁(yè)。第一節(jié)腎小球功能檢查腎小球?yàn)V過(guò)率(GFR)

是反映腎小球?yàn)V過(guò)功能的客觀指標(biāo),用單位時(shí)間內(nèi)兩腎生成的超濾液量即原尿的生成量來(lái)表示腎清除率

是指雙腎于單位時(shí)間(min)內(nèi),能將多少毫升血漿所含的某物質(zhì)全部清除,結(jié)果以ml/min或L/24H表示第43頁(yè),共92頁(yè)。腎清除率第44頁(yè),共92頁(yè)。腎清除率可分別測(cè)定腎小球?yàn)V過(guò)率、腎血流量、腎小管對(duì)各種物質(zhì)的重吸收和分泌作用全部由腎小球?yàn)V出,腎小管不吸收、不分泌,如菊粉:可作為腎小球?yàn)V過(guò)率測(cè)定的理想物質(zhì),能完全反映腎小球?yàn)V過(guò)率由腎小球?yàn)V出,腎小管也排泌,如尿素、肌酐等:反映腎小球?yàn)V過(guò)率不如菊粉準(zhǔn)確全部由腎小球?yàn)V出,又被腎小管全部吸收,如葡萄糖,可作為腎小管最大吸收率的測(cè)定除腎小球?yàn)V過(guò)外,大部分通過(guò)腎小管分泌排出,如對(duì)氨馬尿酸等,可作為腎血流量的測(cè)定第45頁(yè),共92頁(yè)。1.內(nèi)生肌酐清除率(Ccr)

肌酐為肌肉中磷酸肌酸的代謝產(chǎn)物,是反映腎小球的濾過(guò)功能的較好指標(biāo)原理血漿肌酐種類:內(nèi)源性和外源性血漿肌酐的代謝:大部分從腎小球?yàn)V過(guò),不被腎小管重吸收,且腎小管的排泌量很少條件:在嚴(yán)格控制飲食和肌肉活動(dòng)相對(duì)穩(wěn)定的情況下,血漿肌酐的生成量和在尿中的排出量較恒定,其含量的變化主要受內(nèi)源性肌酐的影響內(nèi)生肌酐清除率(Ccr):指腎單位時(shí)間內(nèi),清除多少毫升血漿中的內(nèi)生肌酐第46頁(yè),共92頁(yè)。病人檢查前的準(zhǔn)備病人連續(xù)進(jìn)食低蛋白食物3天,每天蛋白質(zhì)攝入量<40g,禁食肉類,禁飲濃茶、咖啡,避免劇烈運(yùn)動(dòng)標(biāo)本采集第四天早晨8時(shí)開始收集24小時(shí)尿液(加入甲苯防腐),當(dāng)日內(nèi)任何時(shí)間抽血2ml與尿液(測(cè)量尿液的總體積)同時(shí)送檢計(jì)算公式每分鐘肌酐清除率=尿肌酐濃度×每分鐘尿量/血漿肌酐濃度(單位:ml/min)正常參考值80-120ml/min第47頁(yè),共92頁(yè)。臨床意義判斷腎小球損害的敏感指標(biāo),可較早判斷腎小球損害對(duì)腎功能的初步估價(jià),可作為觀察腎移植成功與否的客觀指標(biāo),移植成功,該指標(biāo)逐步回升,發(fā)生排斥,則下降

慢性腎炎臨床分型的參考對(duì)臨床治療的指導(dǎo)意義藥物使用的參考第48頁(yè),共92頁(yè)。2.血尿素氮和血肌酐的測(cè)定原理血尿素氮(BUN)和血肌酐(CREA)主要經(jīng)腎小球?yàn)V過(guò)而隨尿液排出,在腎實(shí)質(zhì)受損時(shí),腎小球?yàn)V過(guò)率降低,導(dǎo)致BUN和Scr在血中的濃度增加。參考值BUN1.4—7.1mmol/LCERA男性44—97

mol/L

女性35—80

mol/L第49頁(yè),共92頁(yè)。尿素氮(BUN/UREA)的測(cè)定臨床實(shí)驗(yàn)室常采用脲酶速率法、離子選擇電極法等。脲酶速率法脲酶催化尿素水解產(chǎn)生NH3和CO2。在谷氨酸脫氫酶催化下,NH3與

-酮戊二酸和NADH反應(yīng)生成NAD+。NADH在340nm處有特異性吸收峰,通過(guò)測(cè)定NADH下降速率與同樣處理的標(biāo)準(zhǔn)比較,得出尿素含量。第50頁(yè),共92頁(yè)。肌酐(CREA)的測(cè)定氧化酶比色法肌肝+H2O→

肌酸肌酸+H2O→肌氨酸+尿素肌氨酸+H2O+O2→氨基乙酸+H2O2+HCHOH2O2+笨酚+4-氨基安替比林→醌亞胺(紅色)+4H2O醌亞胺在546nm處有最大吸收峰,其吸光度值與CREA含量成正比。第51頁(yè),共92頁(yè)。與堿性苦味酸法(Jaffe法)比較氧化酶法測(cè)定血肌酐的特異性大大提高,可消除假肌酐如VitC、丙酮酸、丙酮、乙酰乙酸等物質(zhì)的正干擾。因此在測(cè)得值上會(huì)較Jaffe法偏低(參考值應(yīng)作相應(yīng)調(diào)整)。氧化酶法試劑同時(shí)還能抗膽紅素和半胱氨酸等Jaffe法的抑制物。酶法試劑也克服了苦味酸法中色素對(duì)自動(dòng)生化分析儀比色杯和管路的污染,適合于臨床自動(dòng)化分析儀使用。與Jaffe法相比,酶法試劑的開蓋穩(wěn)定性也大大提高。避免了頻繁地定標(biāo)操作。第52頁(yè),共92頁(yè)。臨床意義

各種嚴(yán)重腎臟疾病引起腎功能不全時(shí)可增高;上消化道出血、嚴(yán)重感染和飲食中蛋白質(zhì)過(guò)多,也可導(dǎo)致BUN暫時(shí)升高;由于血肌酐受其他影響較小,能反映患者腎功能情況,CREA明顯升高,提示預(yù)后差。第53頁(yè),共92頁(yè)。3.血尿酸(UA)的測(cè)定原理

UA是體內(nèi)嘌呤代謝終產(chǎn)物,小部分經(jīng)肝分解破壞,大部分經(jīng)腎小球?yàn)V過(guò),在近端腎小管中98-100%被重吸收,故正常情況下UA的清除率較低第54頁(yè),共92頁(yè)。尿酸酶法尿酸酶催化UA氧化生成尿囊素和H2O2,過(guò)氧化氫在過(guò)氧化物酶的存在下與笨酚、4-氨基安替比林氧化縮和成紅色醌式化合物,在546nm處有最大吸收峰,其吸光度值與UA含量成正比。臨床意義血液尿酸增高常見于腎臟疾病、痛風(fēng)、子癇、白血病與腫瘤及其他疾病如慢性鉛中毒引起的腎損害、長(zhǎng)期禁食等第55頁(yè),共92頁(yè)。4.β2-微球蛋白原理

2-M在體內(nèi)主要由淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的一種小分子蛋白,正常人血中2-M濃度很低,可自由通過(guò)腎小球,然后在近端腎小管幾乎被全部重吸收第56頁(yè),共92頁(yè)。免疫比濁法

β2-MG與特異性抗體反應(yīng)形成不溶性復(fù)合物,可在540nm測(cè)定該復(fù)合物的濁度,與同樣處理的標(biāo)準(zhǔn)品比較,得出血清中β2-MG的含量。臨床意義

尿液β2-M升高是反映近端小管受損的非常靈敏和特異的指標(biāo)

腎小球?yàn)V過(guò)功能下降時(shí),血β2-M水平升高

第57頁(yè),共92頁(yè)。第二節(jié)

腎小管功能試驗(yàn)第58頁(yè),共92頁(yè)。腎小管的功能較多,除了具有強(qiáng)大的重吸收水份與一些物質(zhì)的能力外,還具有選擇分泌和排泄一些物質(zhì)的能力目前為止沒有理想的功能試驗(yàn)適用于臨床以尿液濃縮-稀釋試驗(yàn)和酚紅排泄試驗(yàn)作為腎小管的功能試驗(yàn)近年來(lái)尿酶和自由水清除值等的測(cè)定使腎小管功能試驗(yàn)變得簡(jiǎn)單、靈敏、快速第59頁(yè),共92頁(yè)。1.濃縮稀釋試驗(yàn)評(píng)價(jià)腎小管的重吸收功能在日?;蛱囟ǖ娘嬍硹l件下,觀察病人的尿量和尿比重的變化,用以判斷腎濃縮與稀釋功能的方法稱為濃縮稀釋試驗(yàn)(concentration-dilutiontest)第60頁(yè),共92頁(yè)。原理腎臟調(diào)節(jié)水份和滲透壓的功能決定機(jī)體的尿量和尿比重的變化。當(dāng)大量飲水后,遠(yuǎn)曲小管和集合管對(duì)水的吸收減少,排尿增多,比重降低,表示其稀釋功能良好;限制飲水后,對(duì)水的吸收增加,排尿減少,表示其濃縮功能良好。在腎臟疾病時(shí),由于遠(yuǎn)曲小管和集合管的損傷,對(duì)水的重吸收功能減退,其濃縮-稀釋功能發(fā)生障礙第61頁(yè),共92頁(yè)。方法莫氏(Mosenthal)試驗(yàn):病人正常飲食,日食三餐,每餐含水量不超過(guò)500-600ml,此外不再進(jìn)食和飲水;注意飲食,其中要求水含量在500-600ml之間,早晨8時(shí)到晚上8時(shí),每2小時(shí)收集一次,晚8時(shí)到次晨8時(shí)12小時(shí)全部收集在清潔的標(biāo)本瓶中第62頁(yè),共92頁(yè)。正常參考值24h尿量1000-2000ml晝夜尿量之比3-4:112h夜尿<750ml晝尿最高比重>1.020最高與最低尿比重>0.009臨床意義腎功能不全時(shí),夜間尿量可超過(guò)750ml最高比重小于1.018表示腎濃縮功能不全尿比重相差很小,比重固定在1.010左右,表示腎濃縮功能嚴(yán)重障礙第63頁(yè),共92頁(yè)。2.尿滲量(滲透壓)的測(cè)定原理液體的滲透壓是由溶液中溶質(zhì)的毫摩爾濃度決定的。尿液滲透壓反映尿中物質(zhì)的摩爾數(shù)。而與物質(zhì)微粒的種類及性質(zhì)無(wú)關(guān),測(cè)定尿滲量比測(cè)定尿比重更好地反映腎濃縮和稀釋能力正常參考值尿液為600-1000mOsm/kgH2O,平均800mOsm/kgH2O,血漿平均值為275-305mOsm/kgH2O

尿滲量與血漿滲量比值為3~4:1第64頁(yè),共92頁(yè)。3.尿液酶的測(cè)定尿液中含有數(shù)十種酶血清酶進(jìn)入尿液:當(dāng)腎小球?yàn)V過(guò)增加而腎小管重吸收功能紊亂,血清酶進(jìn)入尿液,活性增強(qiáng)細(xì)胞酶釋放入尿液:腎小球病變、腎小管細(xì)胞破壞,間質(zhì)炎癥等使細(xì)胞破壞,細(xì)胞酶釋放入尿液使溶酶體酶增加泌尿生殖系統(tǒng)腫瘤、炎癥、紅細(xì)胞、細(xì)菌等也可使尿酶增加常見的測(cè)定酶N-乙酰-β氨基葡萄糖(NAG)、LDH、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶、溶菌酶第65頁(yè),共92頁(yè)。血清脂類的生物化學(xué)檢測(cè)第66頁(yè),共92頁(yè)。概述血漿脂類包括游離膽固醇(FC)、膽固醇酯(CE)、磷脂(PL)、甘油三酯(TG)、糖脂和游離脂肪酸(FFA)等血漿中最多的脂質(zhì)為膽固醇、PL和TG,游離膽固醇和膽固醇酯稱為總膽固醇血漿脂類以脂蛋白復(fù)合體的形式存在血漿脂蛋白分類:CM、VLDL、IDL、LDL、HDL和Lp(a)第67頁(yè),共92頁(yè)。1.血清總膽固醇測(cè)定TCH酶比色法膽固醇酯在膽固醇酯酶的作用下分解生成膽固醇,膽固醇在膽固醇氧化酶及過(guò)氧化物酶作用下最終生成醌亞胺,醌亞胺的顏色深淺與膽固醇的濃度成正比。第68頁(yè),共92頁(yè)。臨床意義

膽固醇的監(jiān)測(cè)用于評(píng)估罹患動(dòng)脈硬化的風(fēng)險(xiǎn)以及對(duì)脂類/脂蛋白的代謝紊亂進(jìn)行診斷和監(jiān)測(cè)治療。增高見于糖尿病昏迷患者,還常見于原發(fā)性高膽固醇血癥、動(dòng)脈粥樣硬化、腎病綜合征、總膽管阻塞、粘液性水腫、肥大性骨關(guān)節(jié)炎、老年性白內(nèi)障、牛皮癬等。降低見于惡性貧血、溶血性貧血、甲狀腺功能亢進(jìn)、感染、營(yíng)養(yǎng)不良、肝硬化、急性肝壞死等。第69頁(yè),共92頁(yè)。2.甘油三脂TG磷酸甘油氧化酶法甘油三脂在脂肪酶、甘油激酶等酶的作用下,生成3-磷酸甘油,再經(jīng)磷酸甘油氧化酶(GPO)氧化生成磷酸二羥丙酮和過(guò)氧化氫,過(guò)氧化氫與4-氨基安替比林在過(guò)氧化物酶作用下生成紅色醌類化合物。546nm下其顯色程度與TG成正比。第70頁(yè),共92頁(yè)。臨床意義

血中的甘油三酯以乳糜微粒和前

-脂蛋白中含量最高,它與動(dòng)脈粥樣硬化的形成密切相關(guān),甘油三酯的升高與冠心病的發(fā)生也有很大關(guān)系。增高:脂肪肝、阻塞性黃疸、動(dòng)脈粥樣硬化、高脂血癥等降低:嚴(yán)重肝衰、甲狀腺功能減退等第71頁(yè),共92頁(yè)。3.高密度脂蛋白膽固醇(HDL)一般通過(guò)HDL-C亞型含量間接反映HDL水平化學(xué)修飾酶法膽固醇酯酶(CHER)和膽固醇氧化酶(CHOD)經(jīng)化學(xué)修飾后,對(duì)LDL、VLDL、乳糜微粒中的膽固醇反應(yīng)性降低,僅對(duì)高密度脂蛋白中的膽固醇起作用。第72頁(yè),共92頁(yè)。臨床意義HDL-膽固醇參與體內(nèi)膽固醇酯逆轉(zhuǎn)運(yùn),起到抗動(dòng)脈粥樣硬化作用,所以是冠心病的保護(hù)因子。HDL-膽固醇水平與AS性心、腦血管疾病發(fā)病率成負(fù)相關(guān)。HDL-C:CHOL能更好的預(yù)測(cè)心、腦動(dòng)脈粥樣硬化的危險(xiǎn)性。肝損害和腎病綜合征時(shí),HDL-C降低第73頁(yè),共92頁(yè)。4.低密度脂蛋白膽固醇(LDL)LDL是血清中攜帶膽固醇的主要顆粒LDL向組織及細(xì)胞內(nèi)運(yùn)送膽固醇,直接促使動(dòng)脈粥樣硬化選擇性溶解法試劑中添加僅使LDL溶解的表面活性劑,LDL之外的脂蛋白(HDL、VLDL、乳糜微粒)由于受表面活性劑和糖化合物的阻礙而不能參與反應(yīng),在反應(yīng)液中以脂蛋白形式殘存。第74頁(yè),共92頁(yè)。臨床意義低密度脂蛋白(LDL)從肝臟攜帶膽固醇到周圍血管,特別是到心臟上的血管(醫(yī)學(xué)上稱冠狀動(dòng)脈),可造成過(guò)多的膽固醇在血管壁上存積,引起動(dòng)脈粥樣硬化。LDL水平升高與冠心病的發(fā)生呈正相關(guān)第75頁(yè),共92頁(yè)。5.載脂蛋白A1Apo-A1是HDL的主要載脂蛋白成分(90%)Apo-A1有清除組織內(nèi)脂質(zhì)和抗粥樣動(dòng)脈樣硬化作用臨床意義Apo-A1血清水平與冠心病發(fā)病率負(fù)相關(guān)第76頁(yè),共92頁(yè)。6.載脂蛋白BApo-B是LDL的主要載脂蛋白(98%)是動(dòng)脈粥樣硬化的風(fēng)險(xiǎn)指標(biāo)臨床意義Apo-B水平與動(dòng)脈粥樣硬化和冠心病正相關(guān)膽汁淤積也可使血清Apo-B升高第77頁(yè),共92頁(yè)。載脂蛋白的測(cè)定方法免疫透射比濁法血清中載脂蛋白的與試劑中相應(yīng)單克隆抗體相結(jié)合,形成抗原抗體復(fù)合物,產(chǎn)生混濁,其濁度的高低與血清中APOA-1成正比。第78頁(yè),共92頁(yè)。7.脂蛋白aLp(a)免疫透射比濁法人血清中Lp(a)與試劑中相應(yīng)的特異性單克隆抗體在適當(dāng)?shù)慕橘|(zhì)中,形成抗原-抗體復(fù)合物,產(chǎn)生一定的濁度,濁度的高低在足量抗體存在時(shí)與抗原的含量成正比。臨床意義:Lp(a)動(dòng)脈粥樣硬化的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。第79頁(yè),共92頁(yè)。風(fēng)濕三項(xiàng)的檢測(cè)第80頁(yè),共92頁(yè)。1.抗鏈球菌溶血素O(ASO)免疫透射比濁法將抗人抗鏈球菌溶血素O抗體包被在膠乳顆粒上,可與血清中的抗鏈球菌溶血素O產(chǎn)生凝集反應(yīng),產(chǎn)生一定的濁度,濁度的高低在足量抗體存在時(shí)與抗原的含量成正比。

第81頁(yè),共92頁(yè)。臨床意義A.對(duì)協(xié)助風(fēng)濕熱有一定價(jià)值。風(fēng)濕熱病人在感染后4-6周60-80%可見ASO增高,并伴有血沉增快及白細(xì)胞增多;若疑活動(dòng)風(fēng)濕,但ASO多次檢查均在正常范圍內(nèi)則有助于排除該病。

B.急性腎小球腎炎病人ASO也常有增高。

C.確已感染溶血性鏈球菌,但ASO一直不見增高,可見于1.該溶血性鏈球菌不產(chǎn)生或很少產(chǎn)生很少量ASO.

2感染早期即應(yīng)用大量糖皮質(zhì)激素。

第82頁(yè),共92頁(yè)。2.類風(fēng)濕因子RF免疫透射比濁法將人r-球蛋白包被在膠乳顆粒上,可與血清中的類風(fēng)濕因子產(chǎn)生凝集反應(yīng),該反應(yīng)所產(chǎn)生的凝集成一定的濁度,濁度的高低在足量抗體存在時(shí)與抗原的含量成正比。第83頁(yè),共92頁(yè)。臨床意義類風(fēng)濕因子陽(yáng)性是診斷類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的重要依據(jù),但有些正常人也可出現(xiàn)類風(fēng)濕因子陽(yáng)性,稱為化驗(yàn)引起的假陽(yáng)性。

另外許多其他疾病也可出現(xiàn)類風(fēng)濕因子陽(yáng)性,如干燥綜合癥、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、各種肝病、慢性支氣管炎、肺氣腫、梅毒、皮肌炎等。因此類風(fēng)濕因子陽(yáng)性不一定是類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。

診斷類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎要綜合判斷。類風(fēng)濕因子滴度還可反應(yīng)類風(fēng)濕活動(dòng)度,正常值1:20,大于它則為陽(yáng)性,比值越大,活動(dòng)度越高第84頁(yè),共92頁(yè)。3.C反應(yīng)蛋白(CRP)免疫透射比濁法將抗人C反應(yīng)蛋白抗體包被在膠乳顆粒上,可與血清中的C反應(yīng)蛋白發(fā)生凝集反應(yīng),該反應(yīng)所產(chǎn)生的凝集形成一定的濁度,濁度的高低在足量抗體存在時(shí)與抗原的含量成正比。第85頁(yè),共92頁(yè)。臨床意義C-反應(yīng)蛋白(CRP)是最有名的急

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