免疫學(xué)實驗技術(shù)測試題及答案一、選擇題（每題2分，共20題）1.下列哪種免疫球蛋白主要參與體液免疫？A.IgGB.IgAC.IgDD.IgE2.ELISA實驗中，辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的抗體用于：A.檢測抗原B.檢測抗體C.顯色反應(yīng)D.封閉非特異性結(jié)合位點3.下列哪種方法常用于檢測細(xì)胞表面標(biāo)志物？A.WesternBlotB.FlowCytometryC.ELISAD.PCR4.體外培養(yǎng)淋巴細(xì)胞時，通常需要添加哪種細(xì)胞因子以促進(jìn)其增殖？A.IL-4B.IL-2C.TNF-αD.IFN-γ5.免疫熒光技術(shù)中，熒光素標(biāo)記的抗體的主要作用是：A.激發(fā)熒光B.顯示細(xì)胞形態(tài)C.結(jié)合目標(biāo)抗原D.消除背景熒光6.下列哪種試劑常用于固定細(xì)胞或組織樣本？A.TritonX-100B.ParaformaldehydeC.SDSD.甲醇7.體外細(xì)胞毒性實驗中，MTT法的原理是：A.檢測細(xì)胞凋亡B.檢測細(xì)胞增殖C.檢測細(xì)胞毒性D.檢測細(xì)胞分化8.下列哪種方法常用于檢測細(xì)胞因子？A.WesternBlotB.ELISAC.RIAD.PCR9.免疫印跡（WesternBlot）實驗中，抗體孵育步驟的目的是：A.檢測抗原B.封閉非特異性結(jié)合位點C.加熱固定蛋白D.電泳分離蛋白10.下列哪種技術(shù)常用于檢測核酸序列？A.WesternBlotB.FlowCytometryC.ELISAD.PCR二、填空題（每空1分，共10空）1.免疫球蛋白的鉸鏈區(qū)具有__________，使其具有可變性。2.ELISA實驗中，__________是指樣品中目標(biāo)物質(zhì)的真實含量。3.流式細(xì)胞術(shù)（FCM）利用__________檢測細(xì)胞不同參數(shù)。4.體外細(xì)胞培養(yǎng)時，__________是維持細(xì)胞正常生理功能的關(guān)鍵。5.免疫熒光技術(shù)中，__________是指熒光信號強度與抗原濃度成正比的關(guān)系。6.免疫印跡（WesternBlot）實驗中，__________是分離蛋白質(zhì)的主要方法。7.體外細(xì)胞毒性實驗中，MTT法的原理是活細(xì)胞線粒體中的__________能將MTT還原為藍(lán)紫色結(jié)晶。8.免疫熒光技術(shù)中，__________是指熒光染料直接標(biāo)記抗原。9.流式細(xì)胞術(shù)（FCM）中，__________是分析細(xì)胞群體特征的重要參數(shù)。10.PCR實驗中，__________是指擴增產(chǎn)物的大小。三、判斷題（每題2分，共10題）1.IgE是參與體液免疫的主要免疫球蛋白。（×）2.ELISA實驗中，辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的抗體用于顯色反應(yīng)。（√）3.免疫熒光技術(shù)中，熒光素標(biāo)記的抗體的主要作用是結(jié)合目標(biāo)抗原。（√）4.體外培養(yǎng)淋巴細(xì)胞時，通常需要添加IL-4以促進(jìn)其增殖。（×）5.免疫印跡（WesternBlot）實驗中，抗體孵育步驟的目的是檢測抗原。（√）6.流式細(xì)胞術(shù)（FCM）利用激光檢測細(xì)胞不同參數(shù)。（√）7.體外細(xì)胞毒性實驗中，MTT法的原理是檢測細(xì)胞凋亡。（×）8.免疫熒光技術(shù)中，熒光染料直接標(biāo)記抗體的方法稱為直接免疫熒光法。（√）9.流式細(xì)胞術(shù)（FCM）中，F(xiàn)SC是指細(xì)胞的前向散射光強度。（√）10.PCR實驗中，擴增產(chǎn)物的大小取決于引物長度。（×）四、簡答題（每題5分，共5題）1.簡述ELISA實驗的基本原理。2.簡述流式細(xì)胞術(shù)（FCM）的基本原理。3.簡述免疫印跡（WesternBlot）實驗的基本步驟。4.簡述體外細(xì)胞毒性實驗（MTT法）的基本原理。5.簡述免疫熒光技術(shù)的基本原理。五、論述題（每題10分，共2題）1.比較ELISA和WesternBlot兩種方法的優(yōu)缺點。2.詳細(xì)說明流式細(xì)胞術(shù)（FCM）在免疫學(xué)實驗中的應(yīng)用。答案及解析一、選擇題答案1.A2.C3.B4.B5.C6.B7.B8.B9.A10.D二、填空題答案1.彈性2.真實含量3.激光4.培養(yǎng)基5.比例關(guān)系6.電泳7.NADH8.直接免疫熒光法9.FSC10.引物三、判斷題答案1.×2.√3.√4.×5.√6.√7.×8.√9.√10.×四、簡答題答案1.ELISA實驗的基本原理：ELISA（酶聯(lián)免疫吸附測定）是一種基于抗原抗體特異性結(jié)合的免疫分析方法?；驹硎抢妹笜?biāo)記的抗體或抗原，通過酶促反應(yīng)產(chǎn)生可測量的信號（如顯色反應(yīng)），從而檢測樣品中目標(biāo)物質(zhì)的含量。ELISA實驗通常包括包被、封閉、孵育、洗滌、顯色等步驟。2.流式細(xì)胞術(shù)（FCM）的基本原理：流式細(xì)胞術(shù)是一種通過激光照射細(xì)胞，檢測細(xì)胞不同參數(shù)的快速、精確的細(xì)胞分析方法?；驹硎抢眉す庹丈鋯渭?xì)胞懸液，通過檢測細(xì)胞散射光和熒光信號，分析細(xì)胞的大小、顆粒度、細(xì)胞內(nèi)成分等參數(shù)。流式細(xì)胞術(shù)可以用于細(xì)胞計數(shù)、細(xì)胞分類、細(xì)胞功能分析等。3.免疫印跡（WesternBlot）實驗的基本步驟：免疫印跡實驗是一種將蛋白質(zhì)進(jìn)行電泳分離后，轉(zhuǎn)移到膜上，通過抗體檢測目標(biāo)蛋白的方法?；静襟E包括：蛋白質(zhì)提取、SDS電泳分離、蛋白轉(zhuǎn)移、封閉、抗體孵育、洗滌、顯色或化學(xué)發(fā)光檢測。4.體外細(xì)胞毒性實驗（MTT法）的基本原理：MTT（3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazoliumbromide）法是一種檢測細(xì)胞增殖或毒性的方法。基本原理是活細(xì)胞線粒體中的NADH能將MTT還原為藍(lán)紫色結(jié)晶，死細(xì)胞或失去活性的細(xì)胞無法進(jìn)行此反應(yīng)。通過測定藍(lán)紫色結(jié)晶的吸光度，可以評估細(xì)胞的增殖能力或毒性程度。5.免疫熒光技術(shù)的基本原理：免疫熒光技術(shù)是一種利用熒光染料標(biāo)記抗體或抗原，通過熒光顯微鏡檢測細(xì)胞或組織樣本中目標(biāo)物質(zhì)的方法?；驹硎抢每贵w與目標(biāo)抗原特異性結(jié)合，然后通過熒光染料標(biāo)記抗體，在熒光顯微鏡下觀察熒光信號，從而檢測目標(biāo)物質(zhì)的存在和分布。五、論述題答案1.比較ELISA和WesternBlot兩種方法的優(yōu)缺點：ELISA（酶聯(lián)免疫吸附測定）：-優(yōu)點：操作簡便、快速、靈敏度高、可定量檢測、應(yīng)用范圍廣。-缺點：特異性相對較低、易受干擾因素影響、難以檢測小分子物質(zhì)。WesternBlot（免疫印跡）：-優(yōu)點：特異性高、可檢測小分子物質(zhì)、可進(jìn)行半定量分析。-缺點：操作復(fù)雜、耗時較長、靈敏度相對較低、難以進(jìn)行高通量分析。2.詳細(xì)說明流式細(xì)胞術(shù)（FCM）在免疫學(xué)實驗中的應(yīng)用：流式細(xì)胞術(shù)（FCM）是一種強大的細(xì)胞分析技術(shù)，在免疫學(xué)實驗中具有廣泛的應(yīng)用。主要應(yīng)用包括：-細(xì)胞計數(shù)：快速準(zhǔn)確地計數(shù)細(xì)胞數(shù)量，如外周血淋巴細(xì)胞計數(shù)。-細(xì)胞分類：根據(jù)細(xì)胞大小、顆粒度、細(xì)胞內(nèi)成分等參數(shù)，對細(xì)胞進(jìn)行分類，如T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞的分類。-細(xì)胞功能分析：檢測細(xì)胞表面標(biāo)志物和細(xì)胞內(nèi)成分