ICS65.020.30

CCSB47

12

天津市地方標(biāo)準(zhǔn)

DB12/T1284—2023

蜜蜂人工授精技術(shù)規(guī)程

Technicalregulationsforartificialinseminationofbees

2023-12-14發(fā)布2024-01-15實(shí)施

天津市市場監(jiān)督管理委員會(huì)發(fā)布

DB12/T1284—2023

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定

起草。

本文件由天津市農(nóng)業(yè)農(nóng)村委員會(huì)提出并歸口。

本文件起草單位：天津市正達(dá)蜂業(yè)有限公司、天津市農(nóng)業(yè)發(fā)展服務(wù)中心、西青區(qū)農(nóng)業(yè)農(nóng)村發(fā)展服務(wù)

中心。

本文件主要起草人：李澤青、許繼明、于海霞、王永穎、陳榮榮、唐佩娟、劉群、耿建穎。

I

DB12/T1284—2023

蜜蜂人工授精技術(shù)規(guī)程

1范圍

本文件規(guī)定了蜜蜂人工授精的設(shè)備要求、環(huán)境要求以及操作要求等技術(shù)要求。

本文件適用于蜜蜂的人工繁殖。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB∕T41227-2021蜜蜂飼養(yǎng)管理技術(shù)規(guī)范

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件。

3.1

蜜蜂人工授精artificialinseminationofbees

通過器械裝置把雄蜂精液注射入蜂王體內(nèi)使其受精。

4設(shè)備要求

4.1儀器設(shè)備

蜂王人工授精儀、電子天平、顯微鏡、血球計(jì)數(shù)板、酸度計(jì)、離心機(jī)、紫外線滅菌燈、高壓滅菌鍋、

醫(yī)用方盤、手術(shù)剪刀、鑷子、混精設(shè)備等。

4.2人工授精設(shè)備附件

4.2.1背鉤、腹鉤、探針

打開蜂王背腹板及陰道的附件，均是用（1mm～2mm）不銹鋼絲手工制作而成。

4.2.2精液注射器

使用100μl微量進(jìn)樣器。微量進(jìn)樣器的管身是有機(jī)玻璃材料加工而成的，推桿、針座、針頭均為不

銹鋼材質(zhì)。

4.2.3授精針頭

針頭的外徑不大于0.3mm，內(nèi)徑不小于0.17mm。

4.2.4二氧化碳麻醉系統(tǒng)

由CO2鋼瓶、膠管、氣體洗瓶、蜂王固定器構(gòu)成。蜂王固定器由誘入管、通氣活塞、麻醉管和固定

底座構(gòu)成。

1

DB12/T1284—2023

4.3人工授精試劑

4.3.1常用試劑

75%酒精、滅菌蒸餾水、煤酚皂溶液、氯化鉀、2羥基-檸檬酸三鈉、對氨基苯磺酰胺、碳酸氫鈉等。

4.3.2精子稀釋保護(hù)液配制

2-羥基檸檬酸三鈉2.43g；碳酸氫鈉：0.21g；氯化鉀：0.04g；對氨基苯磺酰胺：0.30g；D-葡萄糖

0.30g，蒸餾水定容至100ml。加熱滅菌時(shí)，溫度不超過90℃。

5環(huán)境要求

地面用5%的煤酚皂溶液噴灑消毒，臺(tái)面用75%的酒精擦拭，空間用紫外線燈滅菌15min。金屬及耐高

溫的器械和附件用消毒鍋煮沸滅菌15～20min，不耐高溫的器械用75%酒精擦拭或灌洗滅菌。塑料注射器

及授精針頭等用酒精消毒滅菌后，再用無菌蒸餾水沖洗4～5次。

6操作要求

6.1前期準(zhǔn)備

6.1.1精子活力檢查

選用優(yōu)質(zhì)雄蜂的精液，采集精液的雄蜂應(yīng)符合GB∕T41227-2021的要求。取1ul新鮮雄蜂精液置于

凹玻片上，使用精子稀釋保護(hù)液進(jìn)行20倍稀釋，放上蓋玻片，在顯微鏡下觀察精子活力。運(yùn)動(dòng)的精子數(shù)

占精子總數(shù)的60%以上方可使用。

6.1.2處女蜂王的麻醉

選取優(yōu)質(zhì)處女蜂王，蜂王的選擇應(yīng)符合GB∕T41227-2021的要求。將蜂王裝入麻醉室后，通過調(diào)

節(jié)閥門以每秒鐘流出約5個(gè)氣泡為宜，等待足須不動(dòng)時(shí)停止麻醉。

6.2操作要求

6.2.1拉開螫針腔

蜂王麻醉的同時(shí)，調(diào)節(jié)顯微鏡的位置及焦距，使處女蜂王的腹部清晰地呈現(xiàn)在視野中央。移動(dòng)背腹

鉤操縱桿,使背腹鉤在探針配合下,分別鉤住背腹板頂端的中央位置,并向外側(cè)拉動(dòng)背腹板,使其間

距為3～4mm,然后再移動(dòng)背鉤,使其“膨大”部分嵌入到螫針腔基部的三角縫內(nèi),再次移動(dòng)背腹鉤縱桿,

把背腹板間距拉至5～6mm。

6.2.2進(jìn)針注射

6.2.2.1螫針腔打開后,調(diào)整蜂王和針頭的角度,使蜂王的縱軸線與注射器縱軸平行，其縱軸線與垂

直線的夾角約30度左右，排除針頭尖中的生理液和氣泡后,使針尖接近陰道口,用探針壓住瓣突,將

針尖徐徐推入陰道,直至中部輸卵管,取出探針,將精液慢慢注入。

6.2.2.2一次性授精通常注入8μl精液;兩次性授精,每次各注