醫(yī)療器械無菌檢驗培訓考核試題(含答案)一、單項選擇題（每題2分，共40分）1.醫(yī)療器械無菌檢驗中，需氧菌、厭氧菌的培養(yǎng)基應選擇（）A.胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基（TSB）B.硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基（FTM）C.沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基（SDB）D.麥康凱液體培養(yǎng)基答案：B解析：硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基（FTM）用于需氧菌和厭氧菌培養(yǎng)，TSB主要用于真菌和需氧菌，SDB用于真菌，麥康凱用于腸道菌。2.無菌檢驗的環(huán)境潔凈度要求為（）A.B級背景下的局部A級B.C級背景下的局部A級C.D級背景下的局部B級D.A級背景下的局部A級答案：B解析：根據(jù)《中國藥典》2020年版四部1101無菌檢查法，無菌檢查應在C級背景下的局部A級潔凈環(huán)境中進行。3.無菌檢驗中，陽性對照菌應選擇（）A.銅綠假單胞菌（ATCC9027）B.白色念珠菌（ATCC10231）C.枯草芽孢桿菌（ATCC6633）D.金黃色葡萄球菌（ATCC6538）答案：C解析：需氧菌陽性對照為枯草芽孢桿菌，厭氧菌為生孢梭菌，真菌為白色念珠菌（用于真菌培養(yǎng)基的陽性對照）。4.薄膜過濾法中，沖洗液的選擇應優(yōu)先使用（）A.0.9%無菌氯化鈉溶液B.磷酸鹽緩沖液（pH7.0）C.含0.1%聚山梨酯80的0.9%無菌氯化鈉溶液D.純化水答案：A解析：沖洗液首選0.9%無菌氯化鈉溶液，若樣品有抑菌性，可添加表面活性劑（如0.1%聚山梨酯80）。5.無菌檢驗中，培養(yǎng)溫度要求為（）A.需氧菌20-25℃，厭氧菌30-35℃B.需氧菌30-35℃，厭氧菌20-25℃C.需氧菌和厭氧菌均為30-35℃D.需氧菌20-25℃，真菌30-35℃答案：C解析：需氧菌、厭氧菌培養(yǎng)溫度為30-35℃，真菌培養(yǎng)溫度為20-25℃（使用SDB培養(yǎng)基時）。6.以下哪種情況可判定樣品無菌（）A.陽性對照管渾濁，樣品管澄清B.陽性對照管澄清，樣品管渾濁C.陽性對照管渾濁，樣品管渾濁D.陽性對照管澄清，樣品管澄清答案：A解析：陽性對照必須渾濁（證明培養(yǎng)基有效），樣品管澄清則判定無菌；若樣品管渾濁需復核。7.無菌檢驗前，樣品的預處理應避免（）A.75%乙醇擦拭外表面B.火焰灼燒金屬器械C.直接剪取樣品至培養(yǎng)基D.使用無菌工具拆分包裝答案：B解析：火焰灼燒可能破壞樣品材質（如塑料），應使用75%乙醇消毒或其他無殘留方法。8.培養(yǎng)基促生長試驗中，接種菌量應控制在（）A.1-10CFUB.10-100CFUC.100-1000CFUD.1000-10000CFU答案：A解析：促生長試驗需接種少量菌（1-10CFU），以驗證培養(yǎng)基能否支持低濃度菌生長。9.無菌檢驗記錄應至少保存（）A.1年B.2年C.3年D.5年答案：D解析：根據(jù)《醫(yī)療器械生產質量管理規(guī)范》，無菌檢驗記錄需保存至產品有效期后1年，至少5年。10.薄膜過濾法中，濾膜的孔徑應為（）A.0.22μmB.0.45μmC.0.8μmD.1.2μm答案：A解析：0.22μm濾膜可截留細菌，確保過濾后培養(yǎng)基無菌。11.以下不屬于無菌檢驗用設備的是（）A.生物安全柜B.恒溫培養(yǎng)箱C.高壓蒸汽滅菌器D.高效液相色譜儀答案：D解析：HPLC用于化學分析，無菌檢驗需生物安全柜（操作）、培養(yǎng)箱（培養(yǎng)）、滅菌器（滅菌）。12.無菌檢查時，若樣品具有強抑菌性，應采用（）A.直接接種法B.薄膜過濾法C.增加培養(yǎng)基體積D.延長培養(yǎng)時間答案：B解析：薄膜過濾法可通過沖洗去除抑菌成分，適用于有抑菌性的樣品。13.陽性對照的目的是（）A.確認檢驗環(huán)境無菌B.確認培養(yǎng)基促生長能力C.確認樣品無抑菌性D.確認操作人員無菌操作規(guī)范答案：B解析：陽性對照接種少量菌，若生長說明培養(yǎng)基有效；若不生長則檢驗無效。14.無菌檢驗中，樣品的最小檢驗數(shù)量應符合（）A.每批至少2件B.每批至少3件C.每批至少5件D.按產品標準或藥典規(guī)定答案：D解析：檢驗數(shù)量需根據(jù)產品標準（如ISO11737-1）或《中國藥典》要求，通常為每批至少2件，但特殊產品可能更多。15.培養(yǎng)時間要求為（）A.需氧菌、厭氧菌5天，真菌7天B.需氧菌、厭氧菌7天，真菌14天C.需氧菌、厭氧菌14天，真菌14天D.需氧菌、厭氧菌14天，真菌7天答案：C解析：《中國藥典》規(guī)定，需氧菌、厭氧菌和真菌培養(yǎng)時間均為14天。16.以下哪種情況會導致檢驗結果無效（）A.陽性對照管未渾濁B.樣品管未渾濁C.環(huán)境沉降菌檢測為1CFU/皿D.操作人員未戴無菌手套答案：A解析：陽性對照未渾濁說明培養(yǎng)基失效，檢驗結果無效，需重新檢驗。17.無菌檢驗用培養(yǎng)基的pH值應控制在（）A.6.0-6.5B.6.5-7.0C.7.0-7.5D.7.5-8.0答案：C解析：FTM和TSB的pH值通常為7.0-7.5，適合多數(shù)微生物生長。18.薄膜過濾法中，沖洗次數(shù)一般不超過（）A.2次B.3次C.4次D.5次答案：D解析：為避免濾膜損傷，沖洗次數(shù)通常不超過5次，總沖洗量不超過1000ml。19.無菌檢驗前，生物安全柜需運行（）A.10分鐘B.20分鐘C.30分鐘D.60分鐘答案：C解析：生物安全柜需提前30分鐘運行，確保內部氣流穩(wěn)定，環(huán)境潔凈。20.以下哪種微生物可能導致無菌檢驗假陽性（）A.樣品攜帶的金黃色葡萄球菌B.環(huán)境中的枯草芽孢桿菌C.培養(yǎng)基本身污染的大腸埃希菌D.操作人員手部的表皮葡萄球菌答案：D解析：操作人員未嚴格無菌操作，手部微生物可能污染樣品管，導致假陽性。二、判斷題（每題1分，共10分）1.無菌檢驗是證明樣品絕對無菌的試驗。（）答案：×解析：無菌檢驗是基于統(tǒng)計學的概率性試驗，不能證明絕對無菌，僅表明在檢驗條件下未檢出微生物。2.直接接種法適用于所有醫(yī)療器械。（）答案：×解析：直接接種法適用于無抑菌性的樣品，有抑菌性的樣品需用薄膜過濾法。3.培養(yǎng)基滅菌后需進行無菌檢查，合格后方可使用。（）答案：√解析：培養(yǎng)基滅菌后需隨機抽取部分進行無菌培養(yǎng)（30-35℃培養(yǎng)7天，20-25℃培養(yǎng)7天），無渾濁方可使用。4.陽性對照菌液應在使用前1小時內制備。（）答案：√解析：菌液放置時間過長可能導致菌量變化，影響促生長試驗結果。5.無菌檢驗時，樣品與陽性對照可在同一生物安全柜中操作。（）答案：×解析：陽性對照需在獨立區(qū)域操作（或使用專用生物安全柜），避免交叉污染。6.培養(yǎng)箱溫度波動應控制在±1℃以內。（）答案：√解析：溫度波動過大可能影響微生物生長，需定期校準培養(yǎng)箱。7.濾膜轉移時，可用鑷子直接夾取濾膜邊緣。（）答案：√解析：夾取濾膜邊緣不會破壞過濾區(qū)域，避免污染濾膜表面。8.無菌檢驗記錄只需記錄結果，無需記錄環(huán)境監(jiān)測數(shù)據(jù)。（）答案：×解析：記錄需包括環(huán)境溫濕度、沉降菌/浮游菌檢測結果、設備運行狀態(tài)等關鍵信息。9.若樣品管在培養(yǎng)第7天出現(xiàn)渾濁，可立即判定為陽性。（）答案：×解析：需觀察至14天，若第7天渾濁但后續(xù)澄清（可能為氣泡或沉淀），需復核；若持續(xù)渾濁需進行陽性菌確認。10.無菌檢驗人員需每年進行健康檢查，手部不得有開放性傷口。（）答案：√解析：人員健康是避免污染的關鍵，手部傷口可能攜帶微生物，需嚴格管控。三、簡答題（每題6分，共30分）1.簡述無菌檢驗的基本原理。答案：無菌檢驗通過將樣品接種于適合需氧菌、厭氧菌和真菌生長的培養(yǎng)基中，在適宜溫度下培養(yǎng)足夠時間（14天），觀察培養(yǎng)基是否渾濁（微生物生長跡象）。若培養(yǎng)基澄清，表明在檢驗條件下未檢出微生物；若渾濁需進一步確認是否為微生物生長（如涂片鏡檢、轉種固體培養(yǎng)基）。核心是通過培養(yǎng)基的促生長能力和嚴格的無菌操作，驗證樣品的無菌狀態(tài)。2.培養(yǎng)基的質量控制包括哪些內容？答案：（1）外觀檢查：澄清無沉淀，顏色符合規(guī)定（如FTM為淡黃色）；（2）pH值檢測：FTM和TSB的pH應為7.0-7.5；（3）無菌檢查：滅菌后隨機抽取培養(yǎng)基，30-35℃培養(yǎng)7天，20-25℃培養(yǎng)7天，應無渾濁；（4）促生長試驗：接種1-10CFU的需氧菌（枯草芽孢桿菌）、厭氧菌（生孢梭菌）、真菌（白色念珠菌），培養(yǎng)后應渾濁；（5）抑制性試驗（僅需氧/厭氧菌培養(yǎng)基）：接種少量真菌（白色念珠菌），培養(yǎng)后應無生長（TSB除外）。3.簡述薄膜過濾法的操作步驟。答案：（1）樣品處理：無菌操作拆分包裝，剪取樣品至無菌容器；（2）安裝濾器：將0.22μm濾膜置于濾器中，連接抽濾裝置；（3）過濾樣品：將樣品溶液（或溶解后的樣品）倒入濾器，抽濾至干；（4）沖洗濾膜：用無菌沖洗液（如0.9%氯化鈉溶液）沖洗濾膜3-5次（總沖洗量≤1000ml），去除抑菌成分；（5）轉移濾膜：無菌操作將濾膜剪成兩半，分別放入FTM（需氧/厭氧菌）和TSB（真菌）培養(yǎng)基中；（6）培養(yǎng)：FTM30-35℃培養(yǎng)14天，TSB20-25℃培養(yǎng)14天；（7）結果觀察：培養(yǎng)期間每日觀察，若渾濁需鏡檢確認是否為微生物生長。4.無菌檢查失敗（樣品管渾濁）的處理流程是什么？答案：（1）初步確認：觀察陽性對照是否渾濁（若陽性對照未渾濁，檢驗無效，重新檢驗）；（2）鏡檢：取渾濁培養(yǎng)基涂片，革蘭染色鏡檢，觀察是否有微生物；（3）轉種驗證：將渾濁培養(yǎng)基轉種至固體培養(yǎng)基（如營養(yǎng)瓊脂、沙氏瓊脂），30-35℃（需氧菌/厭氧菌）或20-25℃（真菌）培養(yǎng)，觀察是否有菌落生長；（4）原因分析：若確認為微生物生長，需排查樣品污染（生產過程）、操作污染（環(huán)境/人員）、培養(yǎng)基污染（滅菌不徹底）；（5）處理措施：若為樣品污染，判定該批產品不合格；若為操作或培養(yǎng)基問題，重新檢驗并改進操作流程。5.無菌檢驗環(huán)境的監(jiān)測項目及標準是什么？答案：（1）潔凈度級別：C級背景下的局部A級；（2）沉降菌：局部A級區(qū)域≤1CFU/Φ90mm皿·4小時，C級區(qū)域≤100CFU/Φ90mm皿·4小時；（3）浮游菌：局部A級區(qū)域≤5CFU/m3，C級區(qū)域≤1000CFU/m3；（4）換氣次數(shù)：C級區(qū)域≥20次/小時；（5）溫濕度：溫度18-26℃，相對濕度45-65%；（6）壓差：相鄰潔凈區(qū)壓差≥10Pa，與非潔凈區(qū)≥15Pa。四、案例分析題（每題10分，共20分）案例1：某企業(yè)對一批手術縫合線（含抑菌成分）進行無菌檢驗，采用薄膜過濾法，沖洗液為0.9%氯化鈉溶液（未添加表面活性劑）。培養(yǎng)第10天，樣品管（FTM）出現(xiàn)渾濁，陽性對照管（接種枯草芽孢桿菌）渾濁，真菌管（TSB）澄清。問題：（1）可能導致樣品管渾濁的原因有哪些？（2）應如何處理？答案：（1）可能原因：①沖洗不充分，樣品殘留抑菌成分未完全去除，導致濾膜上的微生物未被殺死，培養(yǎng)后生長；②沖洗液未添加表面活性劑（如聚山梨酯80），無法有效去除樣品表面的抑菌成分；③操作過程中污染（如生物安全柜氣流異常、人員未嚴格無菌操作）；④樣品本身被污染（生產過程中微生物侵入）。（2）處理步驟：①鏡檢渾濁的FTM培養(yǎng)基，觀察是否有細菌（如革蘭陽性桿菌）；②將渾濁培養(yǎng)基轉種至營養(yǎng)瓊脂平板，30-35℃培養(yǎng)24-48小時，觀察是否有菌落生長；③若確認有微生物生長，需排查：a.沖洗液是否應添加表面活性劑（因樣品含抑菌成分）；b.沖洗次數(shù)和總沖洗量是否足夠（是否需增加至5次，總沖洗量1000ml）；c.環(huán)境監(jiān)測數(shù)據(jù)（如沉降菌是否超標）；d.樣品生產過程的無菌控制（如包裝密封性、滅菌效果）。若確認為樣品污染，判定該批產品不合格；若為沖洗液問題，重新檢驗時更換含0.1%聚山梨酯80的沖洗液。案例2：某實驗室進行骨科植入物無菌檢驗時，發(fā)現(xiàn)生物安全柜沉降菌檢測結果為3CFU/皿（Φ90mm，4小時），超過局部A級標準（≤1CFU/皿）。問題：（1）沉降菌超標的可能原因是什么？（2）應采取哪些糾正措施？答案：（1）可能原因：①生物安全柜過濾器（HEPA）老化或破損，導致過濾效率下降；②操作時未關閉安全柜前門至規(guī)定高度（如超過20cm），影響氣流穩(wěn)定性；③人員操作時頻繁進出，帶入外