沉降菌檢測第1頁，共22頁。第2頁，共22頁?；靖拍罹?細(xì)菌培養(yǎng)后,由一個或幾個細(xì)菌繁殖而形成的一細(xì)菌集落,簡稱CFU.通常用個數(shù)表示。沉降菌:用GB/T16292-2010提及的方法收集空氣中的活性微生物粒子,通過專門的培養(yǎng)基在適宜的生長條件下繁殖到可見的菌落數(shù)。

第3頁，共22頁。測試原理本測試方法利用沉降法,即通過自然沉降原理收集在空氣中的生物粒子于培養(yǎng)基平皿,經(jīng)若干時間,在適宜的條件下讓其繁殖到可見的菌落數(shù),以平板培養(yǎng)皿中的菌落數(shù)來評定潔凈環(huán)境內(nèi)的活微生物數(shù),并以此來評定潔凈區(qū)的潔凈度。

第4頁，共22頁。測試方法1、使用的儀器設(shè)備和培養(yǎng)基:（1）高壓消毒鍋:使用時應(yīng)嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行。（2）恒溫培養(yǎng)箱:必須定期對培養(yǎng)箱的溫度計(jì)進(jìn)行檢定。（3）培養(yǎng)皿:一般采用φ90mm×15mm硼硅酸玻璃培養(yǎng)皿。使用前將培養(yǎng)皿置于121℃濕熱滅菌20min。

第5頁，共22頁。測試方法1、使用的儀器設(shè)備和培養(yǎng)基:（4）培養(yǎng)基:胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基。將培養(yǎng)基加熱熔化,冷卻至約45℃在無菌操作條件下將培養(yǎng)基注入培養(yǎng)皿,每皿約15ml。待瓊脂培養(yǎng)基凝固后,將培養(yǎng)基平皿放入32℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72小時若培養(yǎng)基平皿上確無菌落生長即可供采樣用,制備好的培養(yǎng)基平皿應(yīng)在2-8℃的壞境中存放。第6頁，共22頁。測試方法2、測試時間對單向流,如A級凈化房間內(nèi)及層流工作臺,測試應(yīng)在凈化空調(diào)系統(tǒng)正常運(yùn)行不少于10分鐘后開始。對非單向流,如B級、C級、D級以上的凈化房間,測試應(yīng)在凈化空調(diào)系統(tǒng)正常運(yùn)行不少于30分鐘開始。第7頁，共22頁。測試方法3、采樣點(diǎn)數(shù)目及其布置:（1）最少采樣點(diǎn)數(shù)目:沉降菌的最少采樣點(diǎn)可按表1確定。第8頁，共22頁。測試方法3、采樣點(diǎn)數(shù)目及其布置:在滿足最少測點(diǎn)數(shù)的同時,不宜滿足最少培養(yǎng)皿數(shù),見表2第9頁，共22頁。測試方法3、采樣點(diǎn)數(shù)目及其布置:（2）采樣點(diǎn)的布置:除受潔凈區(qū)的設(shè)備限制外,取樣點(diǎn)應(yīng)在潔凈區(qū)均勻布置。在日常監(jiān)控時,那些與產(chǎn)品相鄰近的區(qū)域,以及可能與產(chǎn)品直接接觸的空氣及設(shè)備附近應(yīng)考慮增加取樣點(diǎn)和取樣次數(shù)(與產(chǎn)品非接觸區(qū)相比,這些區(qū)域應(yīng)視為關(guān)鍵區(qū)):人員活動頻繁或人員較集中的區(qū)域也應(yīng)視為關(guān)鍵區(qū),需加強(qiáng)監(jiān)控。第10頁，共22頁。測試方法3、采樣點(diǎn)數(shù)目及其布置:（2）采樣點(diǎn)的布置:取樣點(diǎn)一般在離地面0.8-1.0m之間或操作平臺的高度。取樣設(shè)備會對氣流產(chǎn)生干擾,取樣時應(yīng)避免可能對氣流組織的干擾。盡量避免在回風(fēng)口附近取樣(距離lm以上),且測試人員應(yīng)在取樣口的下風(fēng)側(cè),并盡量少走動。第11頁，共22頁。測試方法4、測試步驟:

（1）采樣方法:用無菌容器(如不銹鋼儲槽)將預(yù)先培養(yǎng)的培養(yǎng)皿(無菌平皿)帶至待測區(qū),將培養(yǎng)皿取出,放置在預(yù)先確定取樣點(diǎn),打開培養(yǎng)皿蓋,使培養(yǎng)基表面暴露0.5小時,再將培養(yǎng)皿蓋上,蓋后倒置。檢測時記下培養(yǎng)皿打開的起始時間和結(jié)束時間。第12頁，共22頁。測試方法4、測試步驟:

（2）培養(yǎng):全部采樣結(jié)束,將培養(yǎng)皿倒置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。32℃培養(yǎng),時間為72小時。每批培養(yǎng)基應(yīng)有對照試驗(yàn),檢查培養(yǎng)基本身是否污染,可每批選定三個培養(yǎng)皿做對照培養(yǎng)。第13頁，共22頁。測試方法4、測試步驟:

（3）菌落計(jì)數(shù):用肉眼直接計(jì)數(shù),然后用5-10倍放大鏡檢查,是否有遺漏。若培養(yǎng)皿上有2個或2個以上菌落重疊,可分辨時仍以2個或2個以上計(jì)數(shù)。

第14頁，共22頁。測試方法5、注意事項(xiàng):

測試用具要做滅菌處理,以確保測試的可靠性、正確性。采取一切措施防止人為對樣本的污染。對培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件及其他參數(shù)作詳細(xì)的記錄。由于細(xì)菌種類繁多,差別甚大,計(jì)數(shù)時一般用透射光于培養(yǎng)皿背面或正面仔細(xì)觀察,不要漏計(jì)培養(yǎng)皿邊緣生長的菌落,必要時用顯微鏡鑒別。第15頁，共22頁。測試方法5、注意事項(xiàng):

采樣前應(yīng)仔細(xì)檢查每個培養(yǎng)皿的質(zhì)量,如發(fā)現(xiàn)變質(zhì)、破損或污染的應(yīng)剔除。測試狀態(tài):沉降菌測試前,被測試潔凈區(qū)的溫濕度須達(dá)到規(guī)定的要求,靜壓差必須控制在規(guī)定值內(nèi)。沉降菌測試前,被測試潔凈區(qū)己經(jīng)過消毒。

第16頁，共22頁。測試方法5、注意事項(xiàng):

測試狀態(tài)有靜態(tài)和動態(tài)兩種,在空調(diào)系統(tǒng)驗(yàn)流時、長期停產(chǎn)恢復(fù)生產(chǎn)前、設(shè)施設(shè)備大修復(fù)產(chǎn)前進(jìn)行靜態(tài)測試,在日常監(jiān)測時進(jìn)行動態(tài)監(jiān)測。測試人員:測試人員必須穿戴符合環(huán)境級別的工作服。靜態(tài)測試時,室內(nèi)測試人員不得多于2個人。

第17頁，共22頁。測試方法6、結(jié)果計(jì)算:

用計(jì)數(shù)方法得出各個培養(yǎng)皿的菌落數(shù)。平均菌落數(shù)的汁算見下式:

第18頁，共22頁。測試方法7、標(biāo)準(zhǔn):

第19頁，共22頁。結(jié)果評定用平均菌落數(shù)判斷潔凈室的空氣中的微生物。潔凈區(qū)內(nèi)的平