CCSB05DB6108榆榆林市市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布DB6108/T20.3—2021前言 12規(guī)范性引用文件 13術(shù)語(yǔ)和定義 14生產(chǎn)技術(shù) 25記錄與留樣 46標(biāo)簽、標(biāo)志、包裝和運(yùn)輸 4附錄A（規(guī)范性附錄）常用母種培養(yǎng)基及其配方 6附錄B（規(guī)范性附錄）常用原種、栽培種培養(yǎng)基及其配方 7附錄C（規(guī)范性附錄）常用液體菌種培養(yǎng)基及其配方 附錄D（規(guī)范性附錄）羊肚菌菌種生產(chǎn)記錄表 DB6108/T20.3—2021本文件按照GB/T1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草?！堆蚨蔷鷺?biāo)準(zhǔn)綜合體》分為7個(gè)部分：——第1部分：生產(chǎn)環(huán)境；——第2部分：菌種；——第3部分：菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程；——第4部分：液體菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程；——第5部分：設(shè)施栽培技術(shù)規(guī)程；——第6部分：產(chǎn)品分級(jí)與加工；——第7部分：病蟲(chóng)害防控技術(shù)規(guī)程。本文件為《羊肚菌標(biāo)準(zhǔn)綜合體》的第3部分。請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。本文件由榆林市農(nóng)墾服務(wù)中心提出。本文件由榆林市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局歸口。本文件起草單位：榆林市農(nóng)墾服務(wù)中心、榆林市馬合農(nóng)場(chǎng)。本文件主要起草人：郝哲、張彥飛、趙琪、杜雙田、雷萍、張鋒、薛浩、景仰平、霍冬霞、朱硯沉、梁海燕、李紅、李惠霞、思瑞琳、高悅、薛舒尹、張宏靜。本文件由榆林市農(nóng)墾服務(wù)中心負(fù)責(zé)解釋。本文件首次發(fā)布。聯(lián)系信息如下：?jiǎn)挝唬河芰质修r(nóng)墾服務(wù)中心電話址：榆林市榆陽(yáng)區(qū)保寧西路廣德巷1號(hào)郵編：719000DB6108/T20.3—2021羊肚菌標(biāo)準(zhǔn)綜合體第3部分：菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程本文件規(guī)定了羊肚菌菌種生產(chǎn)的術(shù)語(yǔ)和定義、生產(chǎn)技術(shù)、記錄與留樣及標(biāo)簽、標(biāo)志、包裝、運(yùn)輸?shù)募夹g(shù)要求。本文件適用于榆林及同類地區(qū)羊肚菌各級(jí)菌種生產(chǎn)。2規(guī)范性引用文件下列引用的文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的，凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。NY5099無(wú)公害食品食用菌栽培基質(zhì)安全技術(shù)要求NY/T528食用菌菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程N(yùn)Y/T1935食用菌栽培基質(zhì)質(zhì)量安全要求3術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。3.1品種variety經(jīng)各種方法選育出來(lái)的具特異性、一致性和穩(wěn)定性可用于商業(yè)栽培的羊肚菌純培養(yǎng)物。3.2種性charactersofvariety指羊肚菌的品種特性，包括生理特性、農(nóng)藝性狀和商品性狀。3.3批次spawnbatch同一來(lái)源、同一品種、同一培養(yǎng)基配方、同一天接種、同一培養(yǎng)條件和質(zhì)量基本一致的符合規(guī)定數(shù)量的菌種。3.4采用高壓或常壓方法殺滅一切微生物，使羊肚菌培養(yǎng)料不含有任何活菌體的過(guò)程。3.5接種inoculation將羊肚菌菌種移植到培養(yǎng)基物中的操作過(guò)程。3.6DB6108/T20.3—20212培養(yǎng)culture創(chuàng)造適宜的環(huán)境條件，使羊肚菌菌絲生長(zhǎng)的過(guò)程。4生產(chǎn)技術(shù)4.1場(chǎng)區(qū)設(shè)置與設(shè)施設(shè)備羊肚菌菌種生產(chǎn)場(chǎng)區(qū)設(shè)置布局與設(shè)施設(shè)備應(yīng)符合NY/T528的相關(guān)規(guī)定。4.2菌種來(lái)源選用經(jīng)過(guò)農(nóng)作物品種審定委員會(huì)登記的羊肚菌品種；或者是種性清楚的六妹羊肚菌、七妹羊肚菌和梯棱羊肚菌，并經(jīng)出菇試驗(yàn)性狀穩(wěn)定的菌種方可用于生產(chǎn)。調(diào)用菌種必須選擇具有食用菌育種和菌種生產(chǎn)資質(zhì)的科研院所和企業(yè)。4.3母種生產(chǎn)4.3.1容器符合GB/T528相關(guān)規(guī)定，宜使用規(guī)格為18mm×180mm或20mm×200mm的玻璃試管，試管采用硅膠塞封口。4.3.2工藝流程培養(yǎng)基配制→分裝→滅菌→擺斜面冷卻→接種→培養(yǎng)→成品。4.3.3培養(yǎng)基配制按附錄A中A.1或A.2配制4.3.4分裝將配制好的培養(yǎng)基立即分裝，裝量為試管長(zhǎng)度的1/4～1/5。試管口應(yīng)保持干凈，隨后塞入硅膠塞，并用牛皮紙包扎。4.3.5滅菌將分裝包扎好的試管直立放在高壓滅菌鍋內(nèi)121℃~126℃滅菌25min～30min。4.3.6斜面擺放滅菌結(jié)束，自然冷卻，壓力表指針降至0Mpa時(shí)，打開(kāi)排氣閥，在培養(yǎng)基溫度降到60℃左右時(shí)取出試管擺斜面，斜面長(zhǎng)度不超過(guò)試管長(zhǎng)度的2/3。4.3.7接種接種設(shè)施設(shè)備消毒流程按照NY/T528的規(guī)定執(zhí)行。接種時(shí)嚴(yán)格按照無(wú)菌操作進(jìn)行，接種后及時(shí)貼好標(biāo)簽，標(biāo)簽應(yīng)注明菌株名稱及接種時(shí)間。1支母種轉(zhuǎn)接原種不超過(guò)6瓶。4.3.8培養(yǎng)接種后置于培養(yǎng)箱或培養(yǎng)室培養(yǎng)，設(shè)置溫度（16±2）℃,避光培養(yǎng)5d～7d，菌絲長(zhǎng)滿試管斜面，即可用于原種生產(chǎn)。DB6108/T20.3—202134.4原種生產(chǎn)4.4.1容器符合GB/T528相關(guān)規(guī)定。宜使用容量為750ml的塑料瓶，瓶口采用密封較好且有一定透氣功能的塑料瓶蓋封口。4.4.2工藝流程基質(zhì)配制→裝瓶→滅菌→冷卻→接種→培養(yǎng)→成品。4.4.3基質(zhì)配制4.4.3.1配料按附錄B中B.1配方配制。木屑、小麥、腐殖土、麩皮、石膏、石灰等培養(yǎng)料質(zhì)量應(yīng)符合NY5099和NY/T1935的規(guī)定要求。木屑為闊葉樹(shù)硬雜木屑，小麥要求新鮮無(wú)霉變、無(wú)蟲(chóng)害、顆粒度飽滿；腐殖土是植物枝葉在土壤中經(jīng)過(guò)微生物分解發(fā)酵后形成的營(yíng)養(yǎng)土或草炭土。4.4.3.2預(yù)濕拌料木屑、腐殖土提前預(yù)濕，小麥漂洗干凈后用清水浸泡至里面沒(méi)有“白芯”時(shí)撈出與木屑拌勻，加入配方中其它原料，攪拌均勻，使其含水率達(dá)60%～65%、pH值6～7.5。4.4.4裝瓶培養(yǎng)料分裝要求做到松緊適度，料面平整，將瓶口和瓶外壁擦干凈后蓋好瓶口。裝瓶后立即滅菌。4.4.5滅菌采用高壓蒸汽滅菌，設(shè)置溫度121℃~126℃,3h～4h。4.4.6冷卻滅菌結(jié)束，自然冷卻，壓力表指針降至0Mpa時(shí)，打開(kāi)排氣閥自然降溫20min～30min，取出菌種瓶冷卻至瓶?jī)?nèi)溫度在25℃以下時(shí)接種。4.4.7接種接種設(shè)施設(shè)備消毒流程按照NY/T528的規(guī)定執(zhí)行。接種時(shí)嚴(yán)格按無(wú)菌操作要求操作，接種后貼好標(biāo)簽。4.4.8培養(yǎng)接種后的原種放入培養(yǎng)室進(jìn)行培養(yǎng)。培養(yǎng)溫度12℃~20℃,以（16±2）℃為宜；相對(duì)濕度50%~70%；避光；保持培養(yǎng)室通風(fēng)良好，每天通風(fēng)1次～2次，每次25min～30min。15d～20d菌絲可長(zhǎng)滿全瓶，繼續(xù)培養(yǎng)3d～5d，即可用于栽培種生產(chǎn)。種培養(yǎng)期間應(yīng)定期檢查，及時(shí)揀出不合格菌種。4.5栽培種生產(chǎn)4.5.1容器符合GB/T528相關(guān)規(guī)定。宜使用15cm×28cm×0.005cm或17cm×35cm×0.005cm規(guī)格的聚丙烯（高壓滅菌）或聚乙烯（常壓滅菌）塑料袋。DB6108/T20.3—202144.5.2工藝流程基質(zhì)配制→裝袋→滅菌→冷卻→接種→培養(yǎng)→成品。4.5.3基質(zhì)配制按附錄B中B.2配方配制，培養(yǎng)料質(zhì)量應(yīng)符合NY5099和NY/T1935的規(guī)定，并按照4.4.3.2預(yù)濕拌料。4.5.4裝袋培養(yǎng)料分裝在塑料袋內(nèi)，松緊適度，并將袋口和袋外壁擦干凈。當(dāng)天拌好的料當(dāng)天必須裝完。4.5.5滅菌采用高壓蒸汽滅菌時(shí)，溫度121℃~126℃,時(shí)間3h～4h；常壓滅菌時(shí)溫度升至100℃,保持24h~36h。4.5.6冷卻采用高壓滅菌時(shí)，滅菌結(jié)束自然降壓至0Mpa時(shí)，打開(kāi)排氣閥降溫20min～30min取出料袋；采用常壓滅菌時(shí)，滅菌結(jié)束后再燜8h～10h后取出料袋。冷卻至25℃以下即可接種。4.5.7接種接種設(shè)施設(shè)備消毒流程按照NY/T528的規(guī)定執(zhí)行。嚴(yán)格按照無(wú)菌操作規(guī)程將原種接到菌袋內(nèi)封口并貼好標(biāo)簽。1瓶原種轉(zhuǎn)接栽培種不超過(guò)60袋。4.5.8培養(yǎng)按照4.4.8培養(yǎng)。5記錄與留樣5.1記錄建立獨(dú)立、完整的母種、原種、栽培種三級(jí)菌種的生產(chǎn)記錄檔案，按照附錄D要求對(duì)生產(chǎn)單位、菌種來(lái)源、生產(chǎn)時(shí)間、生產(chǎn)數(shù)量及生產(chǎn)過(guò)程中各環(huán)節(jié)具體農(nóng)事活動(dòng)進(jìn)行有效記錄。菌種檔案保留2年以上。5.2留樣各級(jí)菌種都應(yīng)按生產(chǎn)批次隨機(jī)抽取樣品留存?zhèn)洳?，留樣的?shù)量每個(gè)批次應(yīng)不少于3支（瓶、袋1℃~4℃條件下保存，直到本次栽培種播種后正常出菇結(jié)束。6標(biāo)簽、標(biāo)志、包裝和運(yùn)輸符合NY/T528關(guān)于標(biāo)簽、標(biāo)志、包裝和運(yùn)輸?shù)南嚓P(guān)規(guī)定。DB6108/T20.3—20215（規(guī)范性附錄）常用母種培養(yǎng)基及其配方A.1PDA培養(yǎng)基馬鈴薯200g（用浸出液），葡萄糖20g，瓊脂20g，水1000mL，pH自然。A.2CPDA加富培養(yǎng)基DB6108/T20.3—20216（規(guī)范性附錄）常用原種、栽培種培養(yǎng)基及其配方B.1原種培養(yǎng)基配方小麥90%，稻殼3%，腐殖土5%，生石灰1%，石膏1%。小麥80%，木屑8%，麥麩5%，腐殖土5%，生石灰1%，石膏1%。B.2栽培種培養(yǎng)基配方小麥60%～70%，木屑20%～30%，腐殖土5%～10%，生石灰1%，石膏1%。小麥40%～50%，木屑30%～40%，麥麩5%～10%，腐殖土5%～10%，生石灰1%，石膏1%。小麥40%～50%，玉米芯40%～50%，腐殖土5%～10%，生石灰1%，石膏1%。DB6108/T20