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6103TechnicalspecificationforsemenqualityidentificationofdairygoatI 2 3 3 4 5 8 9本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分:標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定1奶山羊精液品質(zhì)鑒定技術(shù)規(guī)范本文件規(guī)定了奶山羊精液品質(zhì)鑒定的術(shù)語和定義、采精、檢測、結(jié)果判定和鑒定記錄的要323.7前進運動精子數(shù)progressivemo在37℃環(huán)境下,精液中直線前進運動的精子數(shù)占總精子數(shù)的百分3.10精子畸形率abnormal4.1基本要求4.1.1種公羊4.1.2采精員4.1.3采精室4.1.4精液處理室應(yīng)符合NY/T3186-2018中4.1的規(guī)定,地面清潔,室溫控制在18℃~25℃。4.1.5稀釋液商品稀釋液按產(chǎn)品說明書使用。自制稀釋液應(yīng)按附錄A.2.2.1精液4.1.6器械清洗消毒應(yīng)按NY/T3186-2018中附錄A的4.2精液采集4.2.1采精應(yīng)按NY/T3186-2018中第5章的要求執(zhí)34.2.2采精頻次連續(xù)采精2次以上時,中間間隔30min~5檢測5.1精液處理5.2檢測項目5.2.1.1射精量5.2.1.2顏色5.2.1.3云霧狀5.2.1.5pH用玻璃棒蘸取1滴精液于精密pH試紙上,對照比色?;蛴?.2.1.6雜質(zhì)5.2.2.1顯微鏡檢測5.2.2.2精液分析儀檢測46.2.2感官檢測判定為不合格的精液,均不做實驗6.3.1原精液,精子密度≥20×108/mL,精子活力≥70%,精子畸形率%,5A.1精子密度測定A.1.1儀器、試劑藥棉、小試管、試管架、水浴鍋、白綢布;3.A.1.2方法A.1.2.1精液稀釋圍附著的精液,再吸3.0%氯化鈉至“10A.1.2.2精液計數(shù)A.1.2.2.1將蓋好蓋玻片的血球計數(shù)板置于顯微鏡下低倍觀察(顯微鏡恒溫臺溫度37℃),找到清晰動滲入計數(shù)室內(nèi)。要求精液均勻充滿計數(shù)室,無氣泡、不溢出A.1.2.2.2將充滿精液的血球計數(shù)板置于顯微鏡下放A.1.3計算A.1.3.1精子密度A.1.3.2前進運動精子數(shù)按GB20557-2006附錄A.4A.1.3.3精子活力精子活力按式計算式中:M——精子活力;C——直線前進運動精子數(shù),單位為個;6A.2精子活率測定A.2.1儀器、試劑2mL吸管、試管、試管架、水浴鍋、滴管、載玻片、蓋玻片、顯微鏡或顯微電視裝置;5%伊紅、1%A.2.2方法A.2.2.1染色將5%的伊紅和1%苯胺黑按1:1混勻,分裝于1mL~2mL容量的試管中,并在37℃水浴鍋中加溫,隨后加入原精液1滴~3滴,混勻后再放回水浴鍋中,3min后立A.2.2.2抹片A.2.2.3計數(shù)A.2.3計算精子活率按公式(A.3)計算:H=×100……………(A.3)A.3精子畸形率測定A.3.1儀器、試劑管架、過濾紙、漏斗架、漏斗、載玻片、蓋玻片、1ml玻璃管、恒溫箱;復(fù)紅原液、95%的酒精、5%石A.3.2方法A.3.2.1試劑配制7A.3.2.1.3福爾馬林-緩沖液制述緩沖液100mL加40%(V/V)福爾馬林溶液62A.3.2.2頭部畸形精子數(shù)A.3.2.2.1抹片按照GB20557-2006附錄A.5.2.2.1的規(guī)定制作精液抹片,風(fēng)干后浸入無水酒精中固定1min~2min,浸入0.5%氯胺T中1min~2min,用清水沖洗1min~2min,再迅速通過95%的酒精A.3.2.2.3染色放入復(fù)紅染色液中10min~15min。清水中蘸2次。再迅速通過美藍染色液,清水沖洗后A.3.2.2.4計數(shù)將制備好的抹片在顯微鏡油鏡下隨機觀察200個以上的精子(分左、右兩個區(qū)),計數(shù)頭部子數(shù)取兩個片區(qū)的平均值。兩個片區(qū)變異系數(shù)<20%,若>20A.3.2.3尾部畸形精子數(shù)A.3.2.3.1將福爾馬林-緩沖液注入1mL玻璃管,置37℃恒溫箱中備用。A.3.2.3.3取一滴混勻后的精液置于載玻片上,加上蓋玻片靜置A.3.3計算精子畸形率按公式(A.4)計算:A=×100………(A.4)A——精子畸形率,%;8打開電腦,啟動精子分析軟件,在顯示屏中選擇測試參數(shù),吸取一定量原精液和稀釋液,按精子分析軟件說明書的比例在試管將載玻片、蓋玻片或
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