綿羊腹腔鏡定時輸精技術(shù)操作規(guī)程2022-07-01實施2022-07-01實施新疆維吾爾自治區(qū)市場監(jiān)督管理局發(fā)布I本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定本文件由新疆農(nóng)墾科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所提出。本文件由新疆維吾爾自治區(qū)畜牧獸醫(yī)局歸口并組織實施。本文件起草單位：新疆農(nóng)墾科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所。本文件主要起草人：萬鵬程、石國慶、倪建宏、劉長彬、盧守亮、傅祥偉、郭延華、代蓉、劉昱成、張振良、王晶晶。本文件實施應(yīng)用中的疑問，請咨詢新疆農(nóng)墾科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所。對本文件的修改意見建議，請反饋至新疆維吾爾自治區(qū)畜牧獸醫(yī)局(烏魯木齊市新華南路408號)、新疆農(nóng)墾科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所(石河子市烏伊公路221號)、新疆維吾爾自治區(qū)市場監(jiān)督管理局(烏魯木齊市新華南路167號)。新疆維吾爾自治區(qū)畜牧獸醫(yī)局聯(lián)系電話傳真郵編：830004新疆農(nóng)墾科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所聯(lián)系電話傳真郵編：832000新疆維吾爾自治區(qū)市場監(jiān)督管理局聯(lián)系電話傳真郵編：8300041綿羊腹腔鏡定時輸精技術(shù)操作規(guī)程本文件規(guī)定了綿羊腹腔鏡定時輸精技術(shù)操作的術(shù)語和定義、母羊同期發(fā)情處理、精液準(zhǔn)備、腹腔鏡輸精程序、母羊術(shù)后管理、妊娠診斷、信息記錄的要求。本文件適用于綿羊腹腔鏡定時輸精技術(shù)推廣應(yīng)用的規(guī)范化操作。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。NY/T3186羊冷凍精液生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程DB65/T4119綿羊細管冷凍精液操作規(guī)程3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。通過對性成熟母羊進行同期發(fā)情處理后，人為控制母羊排卵并準(zhǔn)時進行人工授精的技術(shù)方法。同期發(fā)情synchronizationofestrus利用促性腺激素處理性成熟母羊，集中對整群繁殖母羊進行人工誘導(dǎo)發(fā)情排卵的技術(shù)方法。利用腹腔內(nèi)窺鏡觀察發(fā)情母羊卵巢排卵狀況，配合專用輸精設(shè)備將合格公羊的精液直接輸入母羊排卵一側(cè)子宮角，從而提高母羊受胎率的一種人工輸精技術(shù)。4母羊同期發(fā)情處理4.1母羊的選擇也可選擇空懷或斷奶4周后，且泌乳、育羔性能良好的經(jīng)產(chǎn)母羊。4.2母羊的同期發(fā)情4.2.1.1適用于大群母羊，采用公羊試情法，根據(jù)母羊?qū)υ嚽楣虻姆磻?yīng)行為來判斷其是否發(fā)情。24.2.1.2每天試情2次(上午8:00～9:00,下午20:00～21:00各1次),將試情公羊放入母羊群中，4.2.2.2孕激素陰道栓+孕馬血清促性腺激素(PMSG)方法，在母羊發(fā)情周期的任意一天，將孕激素陰道栓放置在母羊的陰道深部，放置當(dāng)天記為0d,第1IU),撤栓24h～48h前后母羊集中表現(xiàn)發(fā)情，母羊發(fā)情后12h～24h進行腹腔鏡輸精。5.1.4采精頻率，宜采精2d,每天采精2次，休息1d或隔日采精，在采精當(dāng)天，宜連采2次(每次b)呈直線運動的精子≥70%;d)精子畸形率≤10%。3自然發(fā)情的母羊以發(fā)情日為0d,在母羊發(fā)情后12h～18h進行腹腔鏡輸精1次。輸精操作間應(yīng)干凈明亮，光線充足、無塵。室內(nèi)溫度保持在20℃~25℃。早、晚用3%~5%煤酚皂(來蘇兒)或石炭酸溶液噴灑消毒。輸精前后用紫外燈(1W/m3)照射消毒1h～2h。操作過程中不6.5.1手術(shù)用的金屬器械置于含0.5%亞硫酸鈉(作為防銹劑)的0.1%新潔爾滅液中浸泡30min。6.5.3精液稀釋液置于37℃水浴加溫，玻璃器皿置于38℃培養(yǎng)箱內(nèi)或恒溫?zé)崤_待用。6.5.4輸精槍、搪瓷盤、細管剪刀用75%酒精棉球擦拭消毒、晾干。輸精槍套管內(nèi)用75%酒精沖洗，外壁用75%酒精棉球擦拭消毒，使用前0.9%氯化鈉溶液沖洗擦拭晾干，置于紫外線燈下照射消毒305%碘酊消毒，待干后再用75%酒精脫碘。4術(shù)者用0.1%新潔爾滅溶液清洗手臂擦干，進入輸精操作室，穿戴無菌手術(shù)服、工作帽和口罩，用75%酒精棉球擦拭消毒手臂，戴醫(yī)用乳膠手套。6.8手術(shù)操作6.8.1基本要求手術(shù)操作要求無菌、細心、謹(jǐn)慎、熟練，無菌操作應(yīng)在30min內(nèi)完成。6.8.2腹腔鏡及輸精槍套管打孔注意要點6.8.2.1腹腔鏡和輸精槍套管在母羊腹部手術(shù)部位打孔。6.8.2.2避開腹部皮下較大血管和神經(jīng)。6.8.2.3穿透腹壁后應(yīng)立刻停止用力，以免刺穿胃、腸、膀胱等器官。6.8.2.4腹腔鏡觀察兩側(cè)卵巢排卵情況。6.8.2.5將精液正確輸入排卵一側(cè)或兩側(cè)的子宮角內(nèi)。6.9腹腔鏡輸精操作6.9.1.1細管凍精解凍后用消毒紙巾或紗布擦干水分。6.9.1.2剪去封口端，棉塞一端套到輸精槍鋼芯上。6.9.1.3將鋼芯拉到底套上輸精槍外套管。6.9.1.4細管切口端與套管針頭端頂緊。6.9.1.5外套管后端與輸精槍后螺紋旋轉(zhuǎn)卡緊。6.9.1.6輕推鋼芯有精液從套管針孔溢出。6.9.1.7遞給術(shù)者進行輸精操作。6.9.2穿刺6.9.2.1術(shù)者站立或坐在輸精母羊左后側(cè)。6.9.2.2從0.1%新潔爾滅液消毒桶中取出穿刺套管和穿刺針，穿刺腹腔鏡觀察孔，將穿刺針插入穿刺套管中。6.9.2.3右手抓起手術(shù)部位皮膚和肌肉組織錯開。6.9.2.4左手食指和中指握住穿刺套管，手心頂住穿刺針柄，以握拳狀將針以向內(nèi)45°進行穿刺。6.9.2.5當(dāng)前端刺入皮膚后，將穿刺針撤出，使用套管向腹腔內(nèi)進行鈍性穿刺。按此方法，將1.0cm和0.5cm直徑穿刺針分別刺入腹中線兩側(cè)。6.9.3確定輸精部位6.9.3.1打開二氧化碳鋼瓶減壓閥門，通過腹腔鏡套管的進氣閥向母羊腹部充氣5s～10s。6.9.3.2在0.5cm直徑套管中插入長鉗，1cm直徑套管中插入腹腔內(nèi)窺鏡。6.9.3.3通過長鉗輕挑子宮輕輕向右側(cè)方向帶動輸卵管，可通過腹腔內(nèi)窺鏡觀察到卵巢，觀察卵泡發(fā)育情況。6.9.3.4觀察卵巢狀況時，不應(yīng)用腹腔鏡冷光源探頭或輸精槍觸碰卵巢。56.9.5.2在穿刺孔及周圍用5%的碘酊消毒。6.9.5.3每只羊肌內(nèi)注射青霉素2萬U/kg～3萬U/kg,鏈霉素10mg/kg~15mg/kg。7.22h后投喂適量青干草和飲水，飲水中可添加1%的電解多維，12h后恢復(fù)正常飼喂，第1次采食6根據(jù)信息記錄內(nèi)容，同期發(fā)情率按公式(1)計算，受胎率按公式(2)計算，產(chǎn)羔率按公式(3)C——受胎率，單位為%;B——配種母羊數(shù)，單位為只。7(資料性)表A.1羊腹腔鏡定時輸精主要器械與設(shè)備1個2個3(4×10)倍臺14帶氣孔穿剌套管支15穿刺針套管支16專用支17專用支28專用支9專用把1消毒桶個1臺套1硬膠質(zhì)m2個1專用個2專用節(jié)6臺1支把2圓頭、尖