獸醫(yī)檢驗(yàn)測(cè)試題(附參考答案)一、單項(xiàng)選擇題（每題2分，共30分）1.犬血常規(guī)檢測(cè)中，中性粒細(xì)胞核左移（出現(xiàn)桿狀核及晚幼粒細(xì)胞）最可能提示：A.慢性感染B.寄生蟲(chóng)感染C.急性化膿性炎癥D.淋巴細(xì)胞性白血病2.檢測(cè)牛布魯氏菌病時(shí)，最常用的血清學(xué)方法是：A.間接血凝試驗(yàn)（IHA）B.虎紅平板凝集試驗(yàn)（RBPT）C.酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）D.補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)（CFT）3.雞新城疫病毒核酸檢測(cè)的金標(biāo)準(zhǔn)方法是：A.病毒分離培養(yǎng)B.反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RT-PCR）C.免疫熒光試驗(yàn)（IFA）D.血凝抑制試驗(yàn)（HI）4.奶牛隱性乳房炎檢測(cè)中，體細(xì)胞計(jì)數(shù)（SCC）超過(guò)多少可判定為感染？A.50×10?個(gè)/mLB.100×10?個(gè)/mLC.200×10?個(gè)/mLD.500×10?個(gè)/mL5.犬瘟熱病毒抗原快速檢測(cè)試紙條的檢測(cè)原理是：A.膠體金免疫層析技術(shù)B.熒光定量PCRC.間接ELISAD.補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)6.羊痘病毒的實(shí)驗(yàn)室診斷中，電鏡觀察可見(jiàn)典型的：A.球形顆粒B.磚形病毒粒子C.桿狀結(jié)構(gòu)D.子彈狀形態(tài)7.豬鏈球菌2型的鑒定需檢測(cè)其特異性毒力因子，最關(guān)鍵的是：A.溶血素（SLY）B.莢膜多糖（CPS）C.毒力相關(guān)蛋白（MRP）D.胞外蛋白因子（EF）8.馬傳染性貧血的特異性血清學(xué)診斷方法是：A.瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)（AGID）B.中和試驗(yàn)（NT）C.免疫印跡試驗(yàn)（WB）D.間接免疫熒光試驗(yàn)（IIF）9.貓弓形蟲(chóng)病的實(shí)驗(yàn)室確診依據(jù)是：A.糞便中檢出卵囊B.血清中IgM抗體陽(yáng)性C.組織涂片發(fā)現(xiàn)滋養(yǎng)體D.血常規(guī)顯示嗜酸性粒細(xì)胞升高10.檢測(cè)豬偽狂犬病病毒（PRV）野毒感染與疫苗毒感染的關(guān)鍵區(qū)別是：A.gB蛋白抗體B.gE蛋白抗體C.gD蛋白抗體D.gC蛋白抗體11.牛結(jié)核病的皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)（PPD試驗(yàn)）注射部位是：A.頸部皮內(nèi)B.尾根皮內(nèi)C.耳內(nèi)側(cè)皮內(nèi)D.肩胛部皮下12.犬細(xì)小病毒（CPV）的主要檢測(cè)靶基因是：A.VP1基因B.VP2基因C.NS1基因D.E基因13.雞白痢沙門氏菌的分離培養(yǎng)常用培養(yǎng)基是：A.麥康凱瓊脂B.SS瓊脂C.血瓊脂D.伊紅美藍(lán)瓊脂14.奶牛酮病的生化檢測(cè)指標(biāo)中，最具特異性的是：A.血糖降低B.血酮（β-羥丁酸）升高C.血尿素氮升高D.血清總蛋白降低15.兔球蟲(chóng)病的糞便檢查中，最常用的蟲(chóng)卵濃縮方法是：A.飽和鹽水漂浮法B.自然沉淀法C.離心沉淀法D.蔗糖溶液漂浮法二、判斷題（每題1分，共10分，正確打“√”，錯(cuò)誤打“×”）1.瑞氏染色主要用于血液細(xì)胞形態(tài)觀察，對(duì)細(xì)菌染色效果較差。（）2.熒光抗體技術(shù)中，直接法是用熒光標(biāo)記的一抗檢測(cè)抗原，間接法是用熒光標(biāo)記的二抗檢測(cè)一抗。（）3.PCR反應(yīng)中，退火溫度過(guò)高會(huì)導(dǎo)致引物與模板結(jié)合不充分，擴(kuò)增效率降低。（）4.牛傳染性胸膜肺炎（牛肺疫）的病原是支原體，可通過(guò)普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)分離。（）5.犬巴貝斯蟲(chóng)病的血液涂片檢查應(yīng)選擇耳尖血，采用姬姆薩染色觀察紅細(xì)胞內(nèi)蟲(chóng)體。（）6.豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）的RT-PCR檢測(cè)需提取病毒DNA作為模板。（）7.馬鼻疽的鼻疽菌素點(diǎn)眼試驗(yàn)陽(yáng)性反應(yīng)表現(xiàn)為結(jié)膜紅腫、流淚或膿性分泌物。（）8.羊泰勒蟲(chóng)病的淋巴結(jié)穿刺涂片檢查可見(jiàn)柯赫氏藍(lán)體（石榴體）。（）9.雞傳染性法氏囊?。↖BD）的典型病理變化是法氏囊腫大、出血，實(shí)驗(yàn)室可通過(guò)瓊擴(kuò)試驗(yàn)檢測(cè)病毒抗原。（）10.奶牛血磷降低常見(jiàn)于乳熱癥（生產(chǎn)癱瘓），血鈣降低常見(jiàn)于酮病。（）三、簡(jiǎn)答題（每題6分，共30分）1.簡(jiǎn)述革蘭氏染色的操作步驟及結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)。2.列舉3種動(dòng)物病毒核酸檢測(cè)的常用分子生物學(xué)方法，并說(shuō)明各自特點(diǎn)。3.簡(jiǎn)述間接ELISA檢測(cè)動(dòng)物血清中抗體的基本原理及主要操作步驟。4.犬糞便寄生蟲(chóng)檢查中，飽和鹽水漂浮法與沉淀法的適用蟲(chóng)種及操作差異。5.牛結(jié)核病的實(shí)驗(yàn)室診斷方法包括哪些？請(qǐng)至少列出4種，并說(shuō)明其應(yīng)用場(chǎng)景。四、案例分析題（每題10分，共30分）案例1：某豬場(chǎng)保育豬群出現(xiàn)發(fā)熱（40.5-42℃）、咳嗽、呼吸困難，部分豬出現(xiàn)耳尖、腹下皮膚發(fā)紺；剖檢可見(jiàn)間質(zhì)性肺炎、淋巴結(jié)腫大、脾臟邊緣梗死。實(shí)驗(yàn)室采集病豬肺臟、淋巴結(jié)樣本，需進(jìn)行哪些檢測(cè)項(xiàng)目？請(qǐng)寫(xiě)出具體檢測(cè)方法及結(jié)果判讀依據(jù)。案例2：某寵物醫(yī)院接診1只3月齡未免疫幼犬，主訴嘔吐、腹瀉3天，糞便呈番茄汁樣血便，精神沉郁，體溫37.5℃（正常38-39℃）。臨床懷疑犬細(xì)小病毒感染，需進(jìn)行哪些實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)？若快速試紙條檢測(cè)陽(yáng)性，是否可直接確診？需注意哪些干擾因素？案例3：某奶牛場(chǎng)多頭發(fā)情期母牛出現(xiàn)流產(chǎn)（妊娠4-6個(gè)月），流產(chǎn)胎兒皮下水腫、肝臟壞死灶；母牛乳汁中可見(jiàn)絮狀物，血清學(xué)檢測(cè)虎紅平板試驗(yàn)陽(yáng)性。請(qǐng)分析可能的病原，需進(jìn)一步進(jìn)行哪些實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)以確診？并說(shuō)明該病原的主要實(shí)驗(yàn)室特性。參考答案一、單項(xiàng)選擇題1.C（核左移常見(jiàn)于急性感染，尤其是化膿性炎癥）2.B（虎紅平板試驗(yàn)是牛布魯氏菌病的初篩方法）3.B（RT-PCR是核酸檢測(cè)的金標(biāo)準(zhǔn)，快速且特異）4.C（SCC＞200×10?個(gè)/mL提示隱性乳房炎）5.A（犬瘟熱試紙條多采用膠體金免疫層析技術(shù)）6.B（痘病毒為磚形大顆粒，電鏡下特征明顯）7.B（莢膜多糖是豬鏈球菌2型的關(guān)鍵毒力因子）8.A（馬傳貧的瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)是OIE推薦方法）9.C（組織中找到滋養(yǎng)體可確診，糞便卵囊檢出率低）10.B（gE蛋白是野毒特有，疫苗株缺失gE）11.A（牛PPD試驗(yàn)注射于頸部皮內(nèi)）12.B（VP2基因是CPV的主要衣殼蛋白基因，用于檢測(cè)）13.B（SS瓊脂是沙門氏菌選擇性培養(yǎng)基）14.B（血酮升高是酮病的特異性指標(biāo)）15.A（球蟲(chóng)卵囊較輕，適合飽和鹽水漂浮法）二、判斷題1.√（瑞氏染色主要染細(xì)胞，細(xì)菌需革蘭氏或姬姆薩染色）2.√（直接法標(biāo)記一抗，間接法標(biāo)記二抗，放大信號(hào)）3.√（退火溫度過(guò)高影響引物結(jié)合，過(guò)低導(dǎo)致非特異性擴(kuò)增）4.×（牛肺疫病原為絲狀支原體，需特殊培養(yǎng)基）5.√（耳尖血含蟲(chóng)量高，姬姆薩染色效果好）6.×（PRRSV是RNA病毒，需提取RNA進(jìn)行RT-PCR）7.√（鼻疽菌素點(diǎn)眼試驗(yàn)陽(yáng)性表現(xiàn)為結(jié)膜炎癥反應(yīng)）8.√（泰勒蟲(chóng)在淋巴細(xì)胞內(nèi)形成柯赫氏藍(lán)體）9.√（瓊擴(kuò)試驗(yàn)可檢測(cè)IBD病毒抗原或抗體）10.×（乳熱癥血鈣降低，酮病血酮升高）三、簡(jiǎn)答題1.革蘭氏染色步驟：①涂片固定；②結(jié)晶紫初染1min；③碘液媒染1min；④95%乙醇脫色30s（至無(wú)紫色脫落）；⑤稀釋石碳酸復(fù)紅復(fù)染30s；⑥水洗干燥鏡檢。結(jié)果判斷：革蘭氏陽(yáng)性菌呈紫色（細(xì)胞壁肽聚糖厚，保留結(jié)晶紫-碘復(fù)合物），革蘭氏陰性菌呈紅色（細(xì)胞壁脂類多，脫色后被復(fù)紅染色）。2.常用分子生物學(xué)方法：①PCR/RT-PCR：針對(duì)DNA/RNA病毒，快速、靈敏，需設(shè)計(jì)特異性引物；②熒光定量PCR（qPCR）：可定量檢測(cè)病毒載量，通過(guò)Ct值判斷感染程度；③環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增（LAMP）：無(wú)需PCR儀，恒溫?cái)U(kuò)增，適合基層快速檢測(cè)；④核酸探針雜交：特異性高，用于病毒分型或確認(rèn)，但操作較復(fù)雜。3.間接ELISA原理：將已知抗原包被固相載體，加入待測(cè)血清（含特異性抗體），抗體與抗原結(jié)合；再加酶標(biāo)二抗（抗動(dòng)物IgG抗體），形成“抗原-一抗-酶標(biāo)二抗”復(fù)合物；最后加底物顯色，顏色深淺與抗體含量正相關(guān)。步驟：①包被抗原（4℃過(guò)夜）；②封閉（37℃1h）；③加待測(cè)血清（37℃1h）；④加酶標(biāo)二抗（37℃1h）；⑤加底物顯色（避光15-30min）；⑥終止反應(yīng)，測(cè)OD值。4.飽和鹽水漂浮法適用于比重小于飽和鹽水（1.20）的蟲(chóng)卵（如球蟲(chóng)卵囊、鉤蟲(chóng)卵、蛔蟲(chóng)卵），利用浮力使蟲(chóng)卵上浮，操作：糞便與飽和鹽水混合，過(guò)濾后液面覆蓋載玻片，靜置15min后取玻片鏡檢。沉淀法適用于比重大的蟲(chóng)卵（如吸蟲(chóng)卵、棘頭蟲(chóng)卵），利用重力使蟲(chóng)卵沉淀，操作：糞便加水稀釋、過(guò)濾，離心后取沉渣鏡檢。5.牛結(jié)核病診斷方法：①結(jié)核菌素皮內(nèi)試驗(yàn)（PPD）：初篩，檢測(cè)細(xì)胞免疫反應(yīng)；②γ-干擾素試驗(yàn)（IGRA）：檢測(cè)全血中IFN-γ，避免交叉反應(yīng)；③細(xì)菌分離培養(yǎng)：接種羅氏培養(yǎng)基，培養(yǎng)3-8周，觀察菌落形態(tài)；④PCR檢測(cè)：擴(kuò)增MPB64等特異性基因，快速診斷；⑤血清學(xué)試驗(yàn)（ELISA）：檢測(cè)抗結(jié)核抗體，用于輔助診斷。四、案例分析題案例1：檢測(cè)項(xiàng)目及方法：①病毒檢測(cè)：取肺臟、淋巴結(jié)做RT-PCR檢測(cè)豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）、豬瘟病毒（CSFV）；②細(xì)菌檢測(cè)：肺臟觸片革蘭氏染色鏡檢，分離培養(yǎng)（血瓊脂）鑒定是否為豬鏈球菌或副豬嗜血桿菌；③病理組織學(xué)檢查：肺臟、脾臟做HE染色，觀察間質(zhì)性肺炎、梗死灶等病變；④血清學(xué)檢測(cè)：采集急性期和恢復(fù)期血清做豬瘟抗體（CFS）、PRRSV抗體（ELISA），觀察抗體滴度變化。結(jié)果判讀：若PRRSV-PCR陽(yáng)性，結(jié)合間質(zhì)性肺炎可診斷藍(lán)耳??；若CSFV-PCR陽(yáng)性且脾臟梗死，支持豬瘟；若鏈球菌分離陽(yáng)性，考慮混合感染。案例2：實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)項(xiàng)目：①快速試紙條檢測(cè)（膠體金法）：檢測(cè)糞便中CPV抗原；②血常規(guī)：白細(xì)胞顯著降低（尤其淋巴細(xì)胞）；③生化檢測(cè)：檢測(cè)電解質(zhì)（K?、Na?）、血?dú)夥治觯ㄅ袛嗨嶂卸荆虎躌T-PCR：若試紙條陰性但臨床癥狀典型，進(jìn)一步檢測(cè)病毒核酸。試紙條陽(yáng)性可初步確診，但需注意：①發(fā)病早期（＜24h）病毒載量低可能假陰性；②疫苗免疫后7天內(nèi)可能出現(xiàn)弱陽(yáng)性（疫苗毒排出）；③混合感染（如冠狀病毒）可能干擾結(jié)果；需結(jié)合臨床癥狀（血便、低體溫）和血常規(guī)（白細(xì)胞＜3×10?/L）綜合判斷。案例3：可能病原：布魯氏菌