獸醫(yī)微生物學(xué)作業(yè)習(xí)題庫及答案一、名詞解釋1.革蘭氏染色：通過結(jié)晶紫初染、碘液媒染、乙醇脫色及沙黃復(fù)染的復(fù)合染色法，可將細菌分為革蘭氏陽性菌（保留紫色）和革蘭氏陰性菌（呈現(xiàn)紅色），是細菌分類鑒定的重要方法。2.正常菌群：存在于健康動物體表及與外界相通的腔道（如消化道、呼吸道）內(nèi)，在長期進化中與宿主形成共生關(guān)系的微生物群體，通常對宿主無害甚至有益。3.外毒素：多數(shù)革蘭氏陽性菌及少數(shù)革蘭氏陰性菌在代謝過程中分泌至菌體外的蛋白質(zhì)類毒性物質(zhì)，具有強毒性、高特異性及免疫原性，可被甲醛脫毒制成類毒素。4.噬菌體：感染細菌、放線菌等原核生物的病毒，由蛋白質(zhì)衣殼包裹核酸（DNA或RNA）構(gòu)成，通過吸附、侵入、增殖、裝配及釋放完成復(fù)制周期。5.轉(zhuǎn)化：供體菌裂解后釋放的DNA片段被受體菌直接攝取，并整合到自身基因組中，導(dǎo)致受體菌遺傳性狀改變的過程，是細菌水平基因轉(zhuǎn)移的方式之一。6.條件致病菌：正常情況下不致病，但在宿主免疫力下降、菌群失調(diào)或異位定植時可引起疾病的正常菌群成員（如大腸桿菌）。7.熱原質(zhì)：多數(shù)革蘭氏陰性菌及少數(shù)革蘭氏陽性菌合成的脂多糖（LPS），注入動物體內(nèi)可引起發(fā)熱反應(yīng)，需通過高溫（250℃30分鐘）或特殊過濾去除。8.朊病毒：僅由異常折疊的朊蛋白（PrPSc）構(gòu)成的感染性因子，無核酸，可誘導(dǎo)宿主正常朊蛋白（PrPc）發(fā)生構(gòu)象改變，導(dǎo)致中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病（如瘋牛?。?。9.莢膜：某些細菌細胞壁外包裹的黏液性物質(zhì)（主要成分為多糖或多肽），具有抗吞噬、黏附宿主細胞及抵抗體液中殺菌物質(zhì)的作用，是重要毒力因子。10.干擾素：宿主細胞受病毒等誘導(dǎo)物刺激后產(chǎn)生的糖蛋白，通過激活鄰近細胞的抗病毒基因，抑制病毒復(fù)制，具有廣譜抗病毒、免疫調(diào)節(jié)及抗腫瘤作用。二、填空題1.細菌細胞壁的基本成分是______，革蘭氏陽性菌特有的成分是______，革蘭氏陰性菌特有的結(jié)構(gòu)是______。（肽聚糖；磷壁酸；外膜）2.病毒的基本結(jié)構(gòu)是______，部分病毒還具有______，其主要成分為______。（核衣殼；包膜；脂類、蛋白質(zhì)和糖）3.細菌的繁殖方式是______，多數(shù)細菌代時約為______分鐘；病毒的增殖方式是______，分為______、______、______、______、______五個階段。（二分裂；20-30；復(fù)制；吸附；侵入；脫殼；生物合成；裝配與釋放）4.支原體缺乏______，故形態(tài)呈多形性；立克次體需在______內(nèi)寄生，以______傳播為主；衣原體具有獨特的______，包括______和______兩種形態(tài)。（細胞壁；活細胞；節(jié)肢動物；發(fā)育周期；原體；始體）5.外毒素的化學(xué)本質(zhì)是______，可被甲醛脫毒為______；內(nèi)毒素的化學(xué)本質(zhì)是______，主要毒性成分是______。（蛋白質(zhì)；類毒素；脂多糖；脂質(zhì)A）6.真菌的繁殖方式包括______（如芽殖、裂殖）和______（產(chǎn)生孢子）；淺部真菌主要感染______，深部真菌可侵犯______。（無性繁殖；有性繁殖；皮膚、毛發(fā)、指（趾）甲；內(nèi)臟器官）7.細菌基因轉(zhuǎn)移的方式包括______（供體菌DNA片段直接被受體菌攝?。_____（通過噬菌體介導(dǎo)）、______（通過性菌毛傳遞質(zhì)粒）。（轉(zhuǎn)化；轉(zhuǎn)導(dǎo)；接合）8.動物源性病原體的主要傳播途徑包括______（如接觸患病動物分泌物）、______（如蚊媒傳播乙腦病毒）、______（如攝入被污染的飼料）、______（如空氣飛沫傳播結(jié)核分枝桿菌）。（直接接觸傳播；蟲媒傳播；經(jīng)口傳播；呼吸道傳播）三、簡答題1.簡述革蘭氏染色的步驟及原理。步驟：①初染：涂片固定后用結(jié)晶紫染色1分鐘，水洗；②媒染：用碘液覆蓋1分鐘，水洗；③脫色：用95%乙醇沖洗30秒，至無紫色脫落為止，水洗；④復(fù)染：用沙黃染色1分鐘，水洗后干燥鏡檢。原理：革蘭氏陽性菌細胞壁肽聚糖層厚（占干重50%-80%），交聯(lián)緊密，乙醇脫色時因脫水導(dǎo)致孔徑縮小，結(jié)晶紫-碘復(fù)合物被保留，故呈紫色；革蘭氏陰性菌細胞壁肽聚糖層?。▋H5%-10%），外膜含脂多糖，乙醇溶解脂類后孔徑增大，復(fù)合物被洗脫，復(fù)染后呈紅色。2.正常菌群對宿主的生理作用有哪些？①生物拮抗：通過競爭黏附位點、營養(yǎng)物質(zhì)及產(chǎn)生抗菌物質(zhì)（如大腸桿菌產(chǎn)生的大腸菌素）抑制致病菌定植；②營養(yǎng)作用：合成維生素（如腸道菌群合成維生素B、K）、參與糖和蛋白質(zhì)代謝；③免疫調(diào)節(jié)：刺激宿主產(chǎn)生分泌型IgA，促進免疫器官發(fā)育（如無菌動物淋巴組織發(fā)育不良）；④抗衰老：通過抑制腐敗菌增殖，減少有毒代謝產(chǎn)物（如胺類、吲哚）的積累。3.比較外毒素與內(nèi)毒素的主要區(qū)別。|特性|外毒素|內(nèi)毒素||-------------|-------------------------|-------------------------||來源|革蘭氏陽性菌及少數(shù)革蘭氏陰性菌|革蘭氏陰性菌細胞壁（裂解后釋放）||化學(xué)本質(zhì)|蛋白質(zhì)|脂多糖（LPS）||毒性|強（如肉毒毒素1mg可殺死2000萬只小鼠）|較弱（引起發(fā)熱、休克等全身反應(yīng)）||特異性|強（作用于特定組織細胞）|無特異性（普遍作用）||免疫原性|強（可刺激產(chǎn)生高效價抗毒素）|弱（僅產(chǎn)生低效價抗體）||熱穩(wěn)定性|不耐熱（60-80℃30分鐘破壞）|耐熱（160℃2-4小時破壞）||能否制成類毒素|能（甲醛脫毒）|不能|4.簡述病毒的結(jié)構(gòu)及其功能。病毒的基本結(jié)構(gòu)為核衣殼，由核心（核酸）和衣殼（蛋白質(zhì)）組成；部分病毒有包膜（源于宿主細胞膜或核膜）。①核心：含DNA或RNA（單鏈或雙鏈），是遺傳物質(zhì)，決定病毒的復(fù)制、遺傳及致病性；②衣殼：由殼粒組成，保護核酸，介導(dǎo)病毒吸附宿主細胞，具有抗原性；③包膜：表面有糖蛋白刺突（如流感病毒的血凝素和神經(jīng)氨酸酶），參與病毒吸附與釋放，也是重要抗原（誘導(dǎo)中和抗體產(chǎn)生）。5.簡述細菌毒力的構(gòu)成因素。細菌毒力由侵襲力和毒素兩部分構(gòu)成：①侵襲力：包括黏附素（如菌毛、莢膜黏附蛋白）介導(dǎo)的黏附定植；莢膜、微莢膜抵抗吞噬；侵襲性酶（如鏈球菌的透明質(zhì)酸酶分解細胞間質(zhì)）促進擴散；②毒素：外毒素（如破傷風(fēng)痙攣毒素阻斷神經(jīng)遞質(zhì)釋放）直接損傷靶細胞；內(nèi)毒素（如脂質(zhì)A激活巨噬細胞釋放TNF-α）引起發(fā)熱、DIC等全身反應(yīng)。6.簡述真菌的致病機制。①致病性真菌感染：外源性真菌（如皮膚癬菌）通過黏附、穿透表皮角質(zhì)層，分泌角質(zhì)酶分解角蛋白，導(dǎo)致皮膚病變；②條件致病性真菌感染：內(nèi)源性真菌（如白色念珠菌）在免疫力低下時（如長期使用抗生素、免疫抑制劑）大量增殖，引起深部感染（如念珠菌性肺炎）；③真菌毒素中毒：某些真菌（如黃曲霉）產(chǎn)生毒素（如黃曲霉毒素B1），經(jīng)口攝入后損傷肝臟（致癌、致畸）；④超敏反應(yīng)：真菌孢子或代謝產(chǎn)物作為變應(yīng)原，引發(fā)Ⅰ型（如哮喘）或Ⅳ型（如農(nóng)民肺）超敏反應(yīng)。7.簡述噬菌體在獸醫(yī)微生物學(xué)中的應(yīng)用。①細菌鑒定與分型：利用噬菌體對宿主菌的高度特異性（如傷寒沙門菌的噬菌體分型），輔助傳染病溯源；②噬菌體治療：針對多重耐藥菌感染（如豬源大腸桿菌?。?，使用特異性噬菌體裂解致病菌，避免抗生素濫用；③分子生物學(xué)工具：作為載體用于基因克?。ㄈ绂耸删w載體），或利用噬菌體展示技術(shù)篩選抗原表位；④檢測致病菌：通過噬菌體標記（如熒光標記）快速檢測食品或環(huán)境中的病原微生物（如檢測牛布魯氏菌）。8.簡述動物微生物學(xué)檢測的常用方法。①形態(tài)學(xué)檢查：革蘭氏染色或特殊染色（如抗酸染色查結(jié)核分枝桿菌）后鏡檢；②分離培養(yǎng)：根據(jù)細菌生長需求（如需氧/厭氧）選擇培養(yǎng)基（如血瓊脂分離鏈球菌），觀察菌落特征；③生化試驗：利用細菌代謝產(chǎn)物差異（如糖發(fā)酵試驗、吲哚試驗）鑒定菌種；④血清學(xué)試驗：用已知抗體檢測抗原（如ELISA檢測豬瘟病毒抗原）或已知抗原檢測抗體（如凝集試驗檢測布魯氏菌抗體）；⑤分子生物學(xué)檢測：PCR擴增特定基因（如檢測禽流感病毒HA基因）、核酸雜交（如FISH技術(shù)）或測序分析；⑥動物試驗：接種敏感動物（如小鼠接種疑似狂犬病病毒）觀察致病表現(xiàn)，驗證病原致病性。四、論述題1.試比較細菌、病毒、真菌的主要生物學(xué)特性及致病特點。生物學(xué)特性比較：①大?。杭毦?.5-5μm）＞真菌（單細胞真菌2-10μm，多細胞真菌菌絲寬2-10μm）＞病毒（20-300nm）；②結(jié)構(gòu)：細菌有細胞壁（含肽聚糖）、細胞膜、細胞質(zhì)（含質(zhì)粒、核糖體）及擬核；病毒僅含核衣殼（或包膜），無細胞結(jié)構(gòu)；真菌有細胞壁（含幾丁質(zhì)）、細胞膜、細胞質(zhì)（含線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細胞器）及典型細胞核（真核）；③繁殖方式：細菌為二分裂；病毒為復(fù)制（吸附→侵入→脫殼→生物合成→裝配釋放）；真菌為無性繁殖（芽殖、裂殖、產(chǎn)生孢子）或有性繁殖（形成有性孢子）；④培養(yǎng)特性：細菌可在人工培養(yǎng)基（如營養(yǎng)瓊脂）生長；病毒需在活細胞（如雞胚、細胞培養(yǎng)）中增殖；真菌可在沙保弱培養(yǎng)基生長（需較高濕度和溫度）。致病特點比較：①細菌：多通過產(chǎn)生毒素（外毒素/內(nèi)毒素）或侵襲力致病，如金黃色葡萄球菌產(chǎn)生腸毒素引起食物中毒，結(jié)核分枝桿菌通過胞內(nèi)寄生導(dǎo)致慢性肉芽腫；②病毒：通過侵入宿主細胞，破壞細胞結(jié)構(gòu)（如新城疫病毒引起細胞融合）或抑制細胞功能（如豬繁殖與呼吸綜合征病毒抑制巨噬細胞吞噬），部分病毒可整合宿主基因組（如禽白血病病毒）導(dǎo)致腫瘤；③真菌：淺部真菌（如毛癬菌）主要侵犯角質(zhì)化組織（皮膚、毛發(fā)），引起癬病；深部真菌（如隱球菌）多為條件致病，在免疫抑制宿主中引發(fā)系統(tǒng)性感染（如犬隱球菌性腦膜炎），部分真菌產(chǎn)生毒素（如赭曲霉毒素）導(dǎo)致中毒性疾病。2.試述動物源性病原體的傳播途徑及防控策略。傳播途徑：①直接接觸傳播：通過患病動物或帶菌者的分泌物（如唾液、精液）、排泄物（如糞便、尿液）直接接觸健康動物黏膜或皮膚傷口，如豬瘟病毒通過接觸病豬分泌物傳播；②間接接觸傳播：通過被污染的飼料、飲水（如沙門菌污染的仔豬料）、用具（如被口蹄疫病毒污染的注射器）或環(huán)境（如炭疽芽胞污染的土壤）間接感染；③蟲媒傳播：節(jié)肢動物（如蚊傳播乙腦病毒、蜱傳播巴貝斯蟲）或吸血昆蟲（如虻傳播伊氏錐蟲）作為媒介機械攜帶或生物性傳播病原體；④呼吸道傳播：病原體通過飛沫（如豬支原體肺炎）或氣溶膠（如牛結(jié)核分枝桿菌）經(jīng)呼吸道吸入感染；⑤垂直傳播：病原體通過胎盤（如豬細小病毒）、產(chǎn)道（如犬皰疹病毒）或哺乳（如牛白血病病毒通過乳汁）由母體傳給子代。防控策略：①生物安全管理：建立養(yǎng)殖場隔離區(qū)，限制人員、車輛流動；定期消毒（如用戊二醛殺滅環(huán)境中的病毒），處理糞污（如堆肥發(fā)酵殺滅寄生蟲卵）；②免疫預(yù)防：根據(jù)流行病學(xué)制定疫苗接種程序（如豬瘟兔化弱毒疫苗首免25-30日齡），監(jiān)測抗體水平（如用ELISA檢測口蹄疫抗體效價），及時補免；③病原監(jiān)測：定期采樣檢測（如PCR檢測藍耳病病毒），淘汰陽性個體（如布魯氏菌病陽性牛），建立無疫種群；④媒介控制：定期驅(qū)蟲（如用阿維菌素防治蜱蟲），清除蚊蠅孳生地（如清理積水），減少蟲媒傳播風(fēng)險；⑤合理用藥：針對細菌感染進行藥敏試驗（如用紙片擴散法檢測大腸桿菌對恩諾沙星的敏感性），避免濫用抗生素導(dǎo)致耐藥性；對病毒病早期使用干擾素或中藥（如黃芪多糖）增強免疫力；⑥公共衛(wèi)生教育：向養(yǎng)殖戶普及生物安全知識（如禁止混養(yǎng)不同動物），規(guī)范屠宰、運輸環(huán)節(jié)（如運輸車輛需徹底清洗消毒），防止人獸共患病傳播（如禽流感病毒從禽到人的跨種傳播）。3.試述微生物在動物疫病診斷中的應(yīng)用進展。隨著分子生物學(xué)與免疫學(xué)技術(shù)的發(fā)展，微生物檢測從傳統(tǒng)培養(yǎng)鑒定向快速、精準、高通量方向邁進：①分子診斷技術(shù)：-實時熒光定量PCR（qPCR）：通過監(jiān)測擴增過程中熒光信號變化，定量檢測病原體載量（如檢測豬圓環(huán)病毒2型拷貝數(shù)），具有靈敏度高（可檢測10拷貝/μL）、特異性強（引物針對保守基因）的特點；-數(shù)字PCR（dPCR）：將反應(yīng)體系分割為數(shù)萬個微滴，單分子擴增后統(tǒng)計陽性微滴數(shù)，實現(xiàn)絕對定量（無需標準曲線），適用于低豐度病原體（如早期感染的非洲豬瘟病毒）檢測；-宏基因組測序（mNGS）：無需培養(yǎng)，直接提取樣本中所有微生物核酸進行高通量測序，通過比對數(shù)據(jù)庫鑒定未知病原體（如2019年豬急性腹瀉綜合征冠狀病毒的發(fā)現(xiàn)），尤其適用于混合感染或新發(fā)病原的診斷；-環(huán)介導(dǎo)等溫擴增（LAMP）：在恒溫（60-65℃）下通過鏈置換反應(yīng)快速擴增靶基因（15-60分鐘完成），產(chǎn)物可通過濁度或熒光肉眼觀察，適合基層實驗室或現(xiàn)場檢測（如口蹄疫