吳茱萸和制吳茱萸炮制前后的成分變化吳茱萸和制吳茱萸炮制前后成分變化[摘要]目的：通過一系列試驗，對吳茱萸炮制前后主要成分的變化進行探究，并對我省流通領域中的吳茱萸飲片進行風險監(jiān)測。方法：采用薄層色譜法，對吳茱萸及制吳茱萸飲片中的有效成分吳茱萸堿、吳茱萸次堿進行定性鑒別；采用高效液相色譜法測定吳茱萸及制吳茱萸飲片中吳茱萸堿、吳茱萸次堿、檸檬苦素等化合物的含量。結果：測得吳茱萸內主要生物堿含量排序為甘草制品＜生品，我省流通領域中的吳茱萸飲片存在偽品。[關鍵詞]吳茱萸；炮制；毒性；生物堿；風險監(jiān)測ChangesofComponentsofEvodiaeFructusafterProcessing[Abstract]Objective:toexploringthechangesofcomponentsofevodiaefructusafterprocessingandmonitoringthecirculatingsituationofevodiaefructusbetweenGuangdong.Methods:IdentifytheevodiamineandrutaecarpineinevodiaefructusbyTLC;measurethecontentofevodiamine，rutaecarpineandlimoninofevodiaefructusbyHPLC.Results:thesequenceofthecontentofthemainalkaloidindifferentdecoctionsofevodiaefructusisprocessingbysaltwater<cleansing<processingbylicorice<stri-bakingsimply.TherearespuriousbreedinGuangdong.[Keywords]Evodiaefructus;Processing;Alkaloid;Toxicity;Riskmonitoring

目錄TOC\o"1-3"\h\u引言 引言吳茱萸為蕓香科植物吳茱萸、石虎、疏毛吳茱萸干燥將近成熟的果實，也被稱為左力純幽子、米辣子等。最早記載于《神農本草經(jīng)》，性熱味苦辛，具有多重功效，如散寒止痛、疏肝下氣、溫中散寒、燥濕助陽等，有降逆止嘔之功，有小毒。常用于治療頭痛、肝胃虛寒或胃脘疼痛等病癥。吳茱萸具有多種藥理作用，但同時也具有一定的毒性，其毒性在傳統(tǒng)醫(yī)藥文獻中就有記載，近年亦有相關報道。吳茱萸現(xiàn)行的主要炮制方法是甘草制，其炮制目的主要為降低毒性、緩和燥性，但《中國藥典》2015年版中吳茱萸的質量標準中尚無對吳茱萸是否經(jīng)過炮制進行鑒別的方法。隨著吳茱萸的應用日益增加，近年來,由于受經(jīng)濟利益驅動,市場上常有混偽品出現(xiàn)，因此需要對流通領域內的吳茱萸進行安全風險監(jiān)測。本次研究中，除針對吳茱萸炮制前后的成分變化進行探索性研究，以自制樣品為參照，對流通領域的吳茱萸炮制情況進行初步探討外，還對此批樣品按標準規(guī)定項目進行檢驗。

1文獻綜述1.1選題依據(jù)及研究背景吳茱萸作為一種常用中散寒藥，所含化學成分類型較多，其主要有效成分是檸檬苦素類化合物和生物堿［1-2］。藥理研究表明，吳茱萸具有降血壓、抗腫瘤、保護心臟等作用［3-5］。吳茱萸的藥理作用主要由其中的檸檬苦素及生物堿產(chǎn)生，同時，吳茱萸不同活性成分的共存也可使藥效增強［6］。對吳茱萸毒性的認識，傳統(tǒng)醫(yī)藥文獻早有記載。如:《本草綱目》記載其“走氣動火，昏目發(fā)瘡”，“多食傷神，令人起伏氣，咽喉不通?！?。近年來有關吳茱萸的臨床不良反應亦時有報道，如患者自覺腹痛、腹瀉、視力障礙、錯覺、脫發(fā)、胸悶等［7-11］。為了降低這種小毒中藥的毒性并增加療效，人們通常會對吳茱萸進行炮制，因此衍生出多種炮制方法。吳茱萸的炮制歷史悠久，早在漢代《金匱玉函經(jīng)》中就有“洗，湯洗七遍”的方法［12］，《唐本草》首提宜陳久入藥。其炮制方法除凈制外，還有甘草汁制、鹽水制、姜汁制、黑豆汁制、黃連汁制等。服用方法有入煎劑、散劑及用酒煮服、生姜汁飲等。隨著現(xiàn)代科技的發(fā)展和知識領域的開拓，吳茱萸的炮制發(fā)展為多種炮制方法和工藝水平,尤其在輔料的應用上有較多發(fā)展，熟知的有甘草制法、姜制法等方法［13-19］。不同的炮制方法會使吳茱萸的活性成分產(chǎn)生不同的變化，然而目前對吳茱萸的研究主要側重于其藥理作用方面，由于其有多種炮制方法，不同炮制方法后的成分變化導致藥理活性和毒性都有所差異，為了更好地對其藥理作用進行研究，對其炮制方法進行改進或摒棄，對其不同炮制方法前后成分變化進行研究非常有必要。除此之外，中藥飲片行業(yè)以次充好、染色、增重等質量問題頻發(fā)，嚴重影響了中醫(yī)藥的發(fā)展和人民群眾的用藥安全。中藥飲片質量關系到中醫(yī)的療效、群眾的信賴、事業(yè)的興衰[20-21]。如何提高中藥飲片的質量，促進中藥產(chǎn)業(yè)持續(xù)、健康、規(guī)范發(fā)展成為亟待解決的問題。為澄清藥源,保證臨床用藥安全有效，本次研究隨機從省內各地購買十批吳茱萸或制吳茱萸飲片作為實驗樣品對吳茱萸炮制前后成分變化進行檢測，對其甘草炮制的鑒別方法進行探究，并對流通領域的吳茱萸飲片進行質量摸查。按《中國藥典》2015年版規(guī)定，吳茱萸除凈制外，還有用甘草水炒制的炮制方法。根據(jù)臨床用藥經(jīng)驗，吳茱萸有小毒，生品一般為外用，需炮制后才能用于內服制劑的調劑[22-25]。本次研究課題，從廣州、佛山、江門、韶關和湛江等7家零售藥店購買吳茱萸飲片，樣品均為吳茱萸，消費者在不具備專業(yè)知識的情況下，購買生品吳茱萸飲片用于內服，發(fā)生中毒的風險較高。根據(jù)中國藥典規(guī)定，制吳茱萸的炮制方法是用甘草汁悶潤凈吳茱萸并干燥，用量比例為吳茱萸：甘草=100：6[26-27]。因此，可以通過對制吳茱萸飲片進行甘草的特征成分鑒別，進而判斷該飲片是否經(jīng)甘草炮制，通過高效液相色譜法對吳茱萸及制吳茱萸飲片主要成分含量進行測定，進而判斷炮制是否對其含量有所影響[28]，本次研究也會對甘草汁制吳茱萸飲片的鑒別方法進行探究。1.2相關研究進展吳茱萸的藥理研究進展主要集中在活性成分對消化系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)腫瘤抑制等方面。吳茱萸的主要有效成分是內酯、喹諾酮類生物堿和吲哚生物堿。不同成分的藥理作用不同，并且具有互相推進的協(xié)同作用。目前，吳茱萸主要活性成分的藥理研究相對比較充分，但研究指出不同生物堿對血壓的影響有所不同，有必要進行深一步研究［29］。眾所周知，中藥飲片現(xiàn)代化是中藥現(xiàn)代化進程中的重要一環(huán)。在加工研究方面，我們不僅要開展標準化研究，而且要遵循中醫(yī)辨證論治的原則，結合古至今來的加工經(jīng)驗，通過對傳統(tǒng)中藥的研究和臨床驗證，選擇出最好的最合適的加工方法。吳茱萸是一種常用的中藥，用途廣泛。吳茱萸的炮制研究應與其用途相結合，擴大吳茱萸的治療范圍，豐富加工產(chǎn)品的品種，使其成為一種多用途，高藥效，低毒性的藥物，更好地用于臨床，治療疾病[30]。

2儀器與試劑2.1儀器實驗儀器見下表。表SEQ表\*ARABIC1實驗儀器列表序號儀器型號1高效液相色譜儀ShimadzuLC-20A3薄層色譜數(shù)碼成像系統(tǒng)TLCVISUALIZER4電熱恒溫水浴鍋HWS-265加熱板DLABHP380-Pro6電子分析天平METTLEXS205DU7自動純水機MilliPoreAdvantageA108數(shù)控超聲波清洗器KQ-700DE9離心機DLABDM063610打粉機CF-500K2.2試劑及對照品實驗試劑、溶液及對照品見下表。表SEQ表\*ARABIC2試劑、溶劑及對照品列表序號試劑說明195%乙醇分析純3石油醚（60-90℃）分析純4乙酸乙酯分析純5三乙胺分析純6四氫呋喃色譜純7乙腈色譜純8甲醇分析純9正丁醇分析純10冰醋酸分析純11甲酸分析純序號試劑說明1210%硫酸乙醇溶液取3mL硫酸，加入乙醇至30mL，裝瓶備用。130.2%磷酸溶液取2mL磷酸，加入超純水1000mL，裝瓶備用。14吳茱萸堿對照品含量：＞99.6%15吳茱萸次堿對照品含量：＞99.7%16檸檬苦素對照品含量：＞97.9%17甘草次酸對照品含量：＞99.5%18甘草酸銨對照品含量：＞98.6%19甘草對照藥材含量：＞99%2.3試樣樣品批號為2018A07677，樣品流通信息如下表。表SEQ表\*ARABIC3樣品流通信息表編號品種名稱銷售商生產(chǎn)商炮制方法1吳茱萸康美康美凈制2制吳茱萸至信甘草水制（1號加工）3制吳茱萸自制甘草水制4吳茱萸二天堂藥店鄭州瑞龍凈制5吳茱萸真和堂藥店凈制6吳茱萸佛山仁參緣凈制7吳茱萸湛江益民大藥房凈制8吳茱萸韶關鄉(xiāng)親大藥房凈制9吳茱萸江門大參林凈制10吳茱萸林芝參藥店凈制3實驗3.1吳茱萸的薄層色譜鑒別3.1.1實驗方法：供試品溶液：取吳茱萸粉末（過二號篩）0.4g→加乙醇l0ml→靜置30min→超聲處理30min→濾過→取濾液作為供試品溶液對照品溶液：取吳茱萸次堿對照品（批號：110801-201608）、吳茱萸堿對照品（批號：110802-201710）→加入乙醇→制得每1ml含0.2mg和1.5mg的溶液作為對照品溶液鑒別：吸取供試品級對照品溶液各2μl→點板（硅膠G板）→展開（展開劑：石油醚(60-90℃)-乙酸乙酯-三乙胺=7：3：0.1）→晾干→置紫外光燈(365nm)下檢視。標準規(guī)定：供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，應顯相同顏色的熒光斑點。3.1.2檢驗結果：按標準規(guī)定的方法操作，薄層色譜圖見圖1，由圖可得，5號樣品不符合規(guī)定，其余批次樣品均符合規(guī)定。123456789101112（1：吳茱萸堿；2：吳茱萸次堿；3~12：吳茱萸樣品1~10）圖SEQ圖\*ARABIC1吳茱萸薄層鑒別檢驗結果3.2制吳茱萸中甘草的鑒別3.2.1方法13.2.1.1實驗步驟供試品溶液：取吳茱萸粉末（過二號篩）lg→加乙醚40ml→加熱回流1h→濾過→棄去醚液→藥渣加甲醇30ml→加熱回流1h→濾過→濾液蒸干→殘渣加水40ml→溶解→正丁醇提取3次（每次20ml）→合并正丁醇液→水洗3次→正丁酵液蒸干→殘渣加甲醇5ml→溶解→供試品溶液。對照品溶液：甘草對照藥材（批號：140689-201404）lg→加乙醚40ml→加熱回流1h→濾過→棄去醚液→藥渣加甲醇30ml→加熱回流1h→濾過→濾液蒸干→殘渣加水40ml→溶解→正丁醇提取3次（每次20ml）→合并正丁醇液→水洗3次→正丁酵液蒸干→殘渣加甲醇5ml→溶解→制成對照藥材溶液。取甘草酸銨對照品（批號：110731-201116）→加甲醇→制成每lml含2mg的溶液，作為對照品溶液。鑒別：吸取供試品及對照品溶液各1~2μ1→點板（用1%氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板）→展開（展開劑：乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水=15:1:1:2）→晾干→噴以10%硫酸乙醇溶液→105°C加熱至斑點顯色淸晰→置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；在與對照品色譜相應的位置上，顯相同的橙黃色熒光斑點。3.2.1.2檢驗結果檢驗結果見圖2，由圖可得，此十個樣品的薄層色譜均無出現(xiàn)與甘草對照藥材對照品及甘草酸銨對照品相同的斑點。123456789101112（2、3為制吳茱萸飲片，11為甘草對照藥材，12為甘草酸銨對照品，其余為吳茱萸飲片）圖SEQ圖\*ARABIC2甘草鑒別方法1檢驗結果3.2.2方法23.2.2.1實驗步驟供試品溶液：吳茱萸粉末（過二號篩）2g→加入水30ml→超聲處理20min→離心→取上清液→水飽和正丁醇萃取2次（每次20ml）→合并正丁醇液→用正丁醇飽和水洗2次（每次20ml）→供試品溶液。對照品溶液：取甘草對照藥材1g→加入水30ml→超聲處理20min→離心→取上清液→水飽和正丁醇萃取2次（每次20ml）→合并正丁醇液→用正丁醇飽和水洗2次（每次20ml）→對照藥材溶液。鑒別：吸取供試品溶液3μL，對照品1μL→點板（硅膠G薄層板）→展開（展開劑：以乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水15：1:1:2）→晾干→噴以10%硫酸乙醇溶液→在105°C加熱至斑點顯色淸晰→置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，應顯相同顏色的熒光斑點；在與對照品色譜相應的位置上，顯相同的熒光斑點。3.2.2.2檢驗結果檢驗結果見圖3~9，由圖可得，此十個樣品的薄層色譜均無出現(xiàn)與甘草對照藥材對照品相同的斑點。1234567891011（2、3為制吳茱萸飲片，11為甘草對照藥材，其余為吳茱萸飲片）圖SEQ圖\*ARABIC3甘草鑒別方法2檢驗結果123456789101112（2、3為制吳茱萸飲片，11、12為甘草對照藥材，其余為吳茱萸飲片）圖SEQ圖\*ARABIC4甘草鑒別方法2檢驗結果123456789101112（2、3為制吳茱萸飲片，11、12為甘草對照藥材，其余為吳茱萸飲片）圖SEQ圖\*ARABIC5甘草鑒別方法2檢驗結果123456789101112（3、4為制吳茱萸飲片，1、11為甘草對照藥材，其余為吳茱萸飲片）圖SEQ圖\*ARABIC6甘草鑒別方法2檢驗結果123456789101112（3、4為制吳茱萸飲片，1、11為甘草對照藥材，其余為吳茱萸飲片）圖SEQ圖\*ARABIC7甘草鑒別方法2檢驗結果123456789101112（3、4為制吳茱萸飲片，1、12為甘草對照藥材，其余為吳茱萸飲片）圖SEQ圖\*ARABIC8甘草鑒別方法2檢驗結果123456789101112（3、4為制吳茱萸飲片，1、12為甘草對照藥材，其余為吳茱萸飲片）圖SEQ圖\*ARABIC9甘草鑒別方法2檢驗結果3.2.3方法33.2.3.1實驗步驟供試品溶液：吳茱萸粉末（過二號篩）2g→加鹽酸2ml，三氯甲烷20ml→加熱回流1h→放冷→濾過→濾液蒸干→加無水乙醇0.5ml→溶解→供試品溶液。對照品溶液：取甘草對照藥材2g→加鹽酸2ml，三氯甲烷20ml→加熱回流1h→放冷→濾過→濾液蒸干→加無水乙醇0.5ml→溶解→對照藥材溶液。取甘草次酸對照品→無水乙醇→每1ml含1mg的溶液。鑒別：吸取供試品溶液和對照藥材溶液各5μl、對照品溶液2μl→點板（GF254薄層板）→展開（展開劑：石油醚（30~60℃）-乙酸乙酯-丙酮-甲酸30：6：5：0.5）→晾干→置紫外光燈（254nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜和對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。3.2.3.2檢驗結果檢驗結果見圖10~14，由圖可得，此十個樣品的薄層色譜均無出現(xiàn)與甘草對照藥材對照品相同的斑點。123456789101112（2、3為制吳茱萸飲片，11為甘草對照藥材，12為甘草次酸對照品，其余為吳茱萸飲片）圖SEQ圖\*ARABIC10甘草鑒別方法3檢驗結果123456789101112（2、3為制吳茱萸飲片，11為甘草對照藥材，12為甘草次酸對照品，其余為吳茱萸飲片）圖SEQ圖\*ARABIC11甘草鑒別方法3檢驗結果123456789101112（2、3為制吳茱萸飲片，11為甘草對照藥材，12為甘草次酸對照品，其余為吳茱萸飲片）圖SEQ圖\*ARABIC12甘草鑒別方法3檢驗結果123456789101112（2、3為制吳茱萸飲片，11為甘草對照藥材，12為甘草次酸對照品，其余為吳茱萸飲片）圖SEQ圖\*ARABIC13甘草鑒別方法3檢驗結果123456789101112（2、3為制吳茱萸飲片，11為甘草對照藥材，12為甘草次酸對照品，其余為吳茱萸飲片）圖SEQ圖\*ARABIC14甘草鑒別方法3檢驗結果3.3含量測定照高效液相色譜法（中國藥典2015年版通則0512)測定。3.3.1色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗見表4,。表SEQ表\*ARABIC4色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗色譜條件色譜柱Kromasil100-5C18（250×4.6mm）流動相乙腈-四氫呋喃(25:15)-0.02%磷酸溶液=(35：65)檢測波長215nm理論板數(shù)（按檸檬苦素峰計算）≥30003.3.2對照品溶液的制備精密稱取取吳茱萸次堿對照品（批號：110801-201608，含量：99.7%）、吳茱萸堿對照品（批號：110802-201710，含量：99.6%）、檸檬苦素對照品（批號：110800-201707，含量：97.9%），加甲醇制成每1ml含吳茱萸次堿50μg和吳茱萸堿80μg、檸檬苦素0.1mg的混合溶液，即得。3.3.3供試品溶液的制備精密稱定供試品粉末（過三號篩）0.3g→置具塞錐形瓶中→精密加入70%乙醇25mL→稱重→浸泡1h→超聲處理40h→70%乙醇補重→搖勻→濾過→取續(xù)濾液。3.3.4測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各l0μl，注入液相色譜儀，測定，即得。3.3.5水分測定3.3.5.1檢驗方法采用《中國藥典》2015版第四部中水分測定法的第二法，烘干法。3.3.5.2檢驗結果按標準規(guī)定對10批吳茱萸樣品進行水分測定，結果見表2。表SEQ表\*ARABIC5水分測定結果序號樣品名稱檢驗結果1吳茱萸11.0%2制吳茱萸11.2%3制吳茱萸11.4%4吳茱萸11.2%5吳茱萸5.3%6吳茱萸5.6%7吳茱萸10.6%8吳茱萸10.7%9吳茱萸9.3%10吳茱萸8.9%3.3.6含量限度規(guī)定本品按干燥品用下式計算，含吳茱萸堿(C19H17N3O)和吳茱萸次堿(C18H13N30)的總量不得少于0.15%，檸檬苦素(C26H3008)不得少于0.20%。式①式中f——校正因子；mr——稱取對照品的質量；——對照品的百分含量；——對照品稀釋倍數(shù)；Ar——對照品峰面積。式②式中——樣品中待測成分的百分含量；Ax——樣品中待測成分的峰面積；DX——樣品稀釋倍數(shù)；mx——稱取樣品的質量。0.12——樣品水分。3.3.7含量測定結果3.3.7.1HPLC色譜圖及數(shù)據(jù)檸檬次堿和吳茱萸次堿對照品色譜見圖15~18，吳茱萸堿對照品色譜圖見圖19~22，吳茱萸及制吳茱萸飲片色譜圖見圖23~42。（圖中峰1為檸檬苦素，峰2為吳茱萸次堿）圖SEQ圖\*ARABIC15檸檬苦素和吳茱萸次堿對照品圖譜（圖中峰1為檸檬苦素，峰2為吳茱萸次堿）圖SEQ圖\*ARABIC16檸檬苦素和吳茱萸次堿對照品圖譜（圖中峰1為檸檬苦素，峰2為吳茱萸次堿）圖SEQ圖\*ARABIC17檸檬苦素和吳茱萸次堿對照品圖譜（圖中峰1為檸檬苦素，峰2為吳茱萸次堿）圖SEQ圖\*ARABIC18檸檬苦素和吳茱萸次堿對照品圖譜（圖中峰1為檸檬苦素，峰2為吳茱萸次堿）圖SEQ圖\*ARABIC19吳茱萸堿對照品圖譜圖SEQ圖\*ARABIC20吳茱萸堿對照品圖譜圖SEQ圖\*ARABIC21吳茱萸堿對照品圖譜圖SEQ圖\*ARABIC22吳茱萸堿對照品圖譜（圖中峰1為檸檬苦素，峰2為吳茱萸堿，峰3為吳茱萸次堿）圖SEQ圖\*ARABIC23樣品1-1（圖中峰1為檸檬苦素，峰2為吳茱萸堿，峰3為吳茱萸次堿）圖SEQ圖\*ARABIC24樣品1-2（圖中峰1為檸檬苦素，峰2為吳茱萸堿，峰3為吳茱萸次堿）圖SEQ圖\*ARABIC25樣品2-1（圖中峰1為檸檬苦素，峰2為吳茱萸堿，峰3為吳茱萸次堿）圖SEQ圖\*ARABIC26樣品2-2（圖中峰1為檸檬苦素，峰2為吳茱萸堿，峰3為吳茱萸次堿）圖SEQ圖\*ARABIC27樣品3-1（圖中峰1為檸檬苦素，峰2為吳茱萸堿，峰3為吳茱萸次堿）圖SEQ圖\*ARABIC28樣品3-2（圖中峰1為檸檬苦素，峰2為吳茱萸堿，峰3為吳茱萸次堿）圖SEQ圖\*ARABIC29樣品4-1（圖中峰1為檸檬苦素，峰2為吳茱萸堿，峰3為吳茱萸次堿）圖SEQ圖\*ARABIC30樣品4-2（圖中峰1為檸檬苦素）圖SEQ圖\*ARABIC31樣品5-1（圖中峰1為檸檬苦素）圖SEQ圖\*ARABIC32樣品5-2（圖中峰1為吳茱萸堿，峰2為吳茱萸次堿）圖SEQ圖\*ARABIC33樣品6-1（圖中峰1為吳茱萸堿，峰2為吳茱萸次堿）圖SEQ圖\*ARABIC34樣品6-2（圖中峰1為檸檬苦素，峰2為吳茱萸堿，峰3為吳茱萸次堿）圖SEQ圖\*ARABIC35樣品7-1（圖中峰1為檸檬苦素，峰2為吳茱萸堿，峰3為吳茱萸次堿）圖SEQ圖\*ARABIC36樣品7-2（圖中峰1為檸檬苦素，峰2為吳茱萸堿，峰3為吳茱萸次堿）圖SEQ圖\*ARABIC37樣品8-1（圖中峰1為檸檬苦素，峰2為吳茱萸堿，峰3為吳茱萸次堿）圖SEQ圖\*ARABIC38樣品8-2（圖中峰1為檸檬苦素，峰2為吳茱萸堿，峰3為吳茱萸次堿）圖SEQ圖\*ARABIC39樣品9-1（圖中峰1為檸檬苦素，峰2為吳茱萸堿，峰3為吳茱萸次堿）圖SEQ圖\*ARABIC40樣品9-2（圖中峰1為檸檬苦素，峰2為吳茱萸堿，峰3為吳茱萸次堿）圖SEQ圖\*ARABIC41樣品10-1（圖中峰1為檸檬苦素，峰2為吳茱萸堿，峰3為吳茱萸次堿）圖SEQ圖\*ARABIC42樣品10-23.3.6.2計算結果按標準規(guī)定對10批吳茱萸樣品進行含量測定，結果見表5。表SEQ表\*ARABIC6吳茱萸含量測定結果序號樣品名稱檢驗結果結論檸檬苦素吳茱萸堿和吳茱萸次堿總量1吳茱萸0.91%1.15%符合規(guī)定2制吳茱萸0.79%1.06%符合規(guī)定序號樣品名稱檢驗結果結論檸檬苦素吳茱萸堿和吳茱萸次堿總量3制吳茱萸0.76%1.13%符合規(guī)定4吳茱萸0.90%1.13%符合規(guī)定5吳茱萸0.10%0.00不符合規(guī)定6吳茱萸0.002.80%不符合規(guī)定7吳茱萸0.59%0.64%符合規(guī)定8吳茱萸1.60%0.19%符合規(guī)定9吳茱萸1.11%0.15%符合規(guī)定10吳茱萸0.17%4.10%符合規(guī)定4討論該十批樣品中除5號樣品外其余樣品的薄層色譜鑒別均能能顯示出與對照品相同的斑點。對甘草汁制吳茱萸的鑒別中，本次研究用3種不同的提取和展開方法，分別在紫外光（254nm），紫外光（365nm）和10%硫酸乙醇顯色后，分別在紫外光（365nm）和日光下檢視，制吳茱萸飲片，即2號樣品（自制）及3號樣品（委托炮制）在相應的位置上均無與甘草對照藥材顯相同的斑點。通過實驗數(shù)據(jù)的計算可得，第5、6.批中的檸檬苦素含量及吳茱萸堿和吳茱萸次堿總量不符合規(guī)定；第2、3批為制吳茱萸飲片，其檸檬苦素含量及吳茱萸和吳茱萸次堿總量小于凈制吳茱萸。

結論本次實驗結果表明吳茱萸炮制后檸檬苦素及吳茱萸和吳茱萸次堿幾個吳茱萸內具有毒性我化合物總量相較于凈制吳茱萸有所減少，說明吳茱萸用甘草汁炮制后能降低毒性。對甘草汁制吳茱萸的三種鑒別方法均無法做出理論上的實驗結果，可能各種方法均存在干擾，需進一步對方法進行優(yōu)化。吳茱萸質量標準收載于中國藥典2015年版一部，其項下規(guī)定了3個基原。此外，吳茱萸同屬近緣物種較多，在藥材的性狀上較難區(qū)別，誤采誤用的情況較為常見。吳茱萸在中國藥典中明確記載有小毒，在現(xiàn)代藥理實驗與臨床報道也證實吳茱萸有一定的毒性，過量服用或配伍不當，會產(chǎn)生腹痛，頭暈，心率減慢，血壓降低等現(xiàn)象，但吳茱萸的有毒成分和中毒機理尚未明確，故臨床使用時，一般生品僅供外用，內服需經(jīng)甘草水炒制，減毒后服用。結合吳茱萸的性狀觀察、顯微鑒別、雜質檢查、浸出物檢查、薄層鑒別及含量測定的實驗結果可判斷第5、6、7批樣品為假冒偽劣產(chǎn)品，其中第5批疑似為蕓香科植物青椒ZanthoxylumschinifoliumSieb.etZucc.的干燥成熟果實；第6批樣品果梗等雜質達15.7%（標準規(guī)定：不得過7%），且檸檬苦素及吳茱萸堿和吳茱萸次堿含量偏低；第7批樣品為成熟果實，而按中國藥典2015年版一部規(guī)定，吳茱萸應為近成熟的果實入藥，需在8~11月采收尚未開裂的果實。本次風險監(jiān)測實驗結果表明，我省流通領域中的吳茱萸飲片仍存在假冒偽劣產(chǎn)品，仍需加強監(jiān)管。參考文獻：龔慕辛,王智民,張啟偉,李建榮,宋亞芳,趙暉,陳云華.吳茱萸有效成分的藥理研究進展[J].中藥新藥與臨床藥理,2009,20(02):183-187.王雅蟳,龔慕辛,王智民,張啟偉,高慧敏,宋亞芳.吳茱萸屬植物化學成分研究概述[J].中國藥學雜志,2010,45(09):641-646.袁志堅,何文涓,胡晶.吳茱萸次堿藥理學研究進展[J].中國醫(yī)藥導報,2018,15(36):40-43.SuXL,XuS,ShanY,etal.ThreenewquinazolinesfromEvodiarutaecarpaandtheirbiologicalactivity.[J]Fitoterapia,2018,127:186-192.楊志欣,孟永海,王秋紅,楊炳友,匡海學.吳茱萸藥理作用及其物質基礎研究概況[J].中華中醫(yī)藥學刊,2011,29(11):2415-2417.李春梅.吳茱萸甲醇提取物及其生物堿成分對血液循環(huán)的影響[J].國外醫(yī)學(中醫(yī)中藥分冊),1999(05):9-11.劉彥昌.吳茱萸生物堿的提取及其生物活性研究[D].湖北工業(yè)大學,2009.王君偉.吳茱萸生物堿的提取、純化、結構及抗氧化性能的研究[D].華中農業(yè)大學,2009.徐子芳.吳茱萸化學成分、水提取物及主要成分的藥理作用研究進展[A].中華中醫(yī)藥學會中藥炮制分會、武漢馬應龍藥業(yè)集團股份有限公司.中華中醫(yī)藥學會中藥炮制分會2009年學術研討會論文集[C].中華中醫(yī)藥學會中藥炮制分會、武漢馬應龍藥業(yè)集團股份有限公司:中華中醫(yī)藥學會,2009:6.劉舒凌,張晟瑞,韋慧,陳奔,黃艷婷,鐘振國.炮制降低吳茱萸肝毒性作用的初步研究[J].中藥材,2018,41(03):570-575.ParkE,LeeMY,SeoCS,etal.EthanolExtractofEvodiarutaecarpaAttenuatesCellGrowththroughCaspase-DependentApoptosisinBenignProstaticHyperplasia-1Cells[J]Nutrients,2018,10.3390.于鷹,平靜,王均寧,張成博.有毒中藥吳茱萸的本草學考證[J].現(xiàn)代中醫(yī)藥,2013,33(05):100-102.楊磊,黃開顏,陳興,楊暉,李康,張志國.吳茱萸炮制歷史與現(xiàn)狀[J].中國藥業(yè),2011,20(08):65-66.SuXL,XuS,ShanY,etal.ThreenewquinazolinesfromEvodiarutaecarpaandtheirbiologicalactivity.[J]Fitoterapia,2018,127:186-192.陳洋,董嘉皓,李斐,袁金斌.吳茱萸毒性概述與思考[J].時珍國醫(yī)國藥,2017,28(09):2215-2217.李文蘭,孫向明,宋輝,王靖雅,胡楊.基于成分及作用的小毒中藥吳茱萸的研究[J].哈爾濱商業(yè)大學學報(自然科學版),2018,34(02):151-154.張曉鳳,劉紅玉,譚鵬,李飛.炮制對吳茱萸主要成分溶出的影響[J].解放軍藥學學報,2012,28(02):133-135.馬青青,許文清,張欣燁.不同炮制方法對吳茱萸脂溶性成分的影響[J].化工管理,2016(35):101.馬青青,許文清,張利鋒.不同炮制方法對吳茱萸水溶性成分的影響[J].化工管理,2016(35):103.劉學平,王春艷,高珣,劉婷婷,徐凱.我國中藥飲片質量問題及強化監(jiān)管的對策[J].實用藥物與臨床,