ICS65.020.20DB34DB34/T2820—2017中草藥中330種農(nóng)藥殘留量的測定液相色譜四極桿飛行時間串聯(lián)質(zhì)譜法Determinationof330pesticidesresiduesintraditionalchinesemedicinesLC-QTOFmethod2017-03-30發(fā)布2017-04-30實施安徽省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布IDB34/T2820—2017本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1-2009給出的規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)由安徽省檢驗檢疫科學(xué)技術(shù)研究院提出。本標(biāo)準(zhǔn)由安徽省動植物檢驗檢疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：安徽省檢驗檢疫科學(xué)技術(shù)研究院、阜陽市食品藥品檢驗中心。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：韓芳、宋偉、呂亞寧、伊芳、丁磊、周典兵、胡艷云、鄭平、盛旋。DB34/T2820—20171中草藥中330種農(nóng)藥殘留量的測定液相色譜四極桿飛行時間串聯(lián)質(zhì)譜法本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了中草藥中330種農(nóng)藥殘留量的液相色譜-四級桿飛行時間串聯(lián)質(zhì)譜法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于人參、枸杞、川芎、菊花和枇杷葉中330種農(nóng)藥殘留量的測定。2規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法3方法原理樣品中多種農(nóng)藥經(jīng)乙腈提取，采用快速樣品前處理技術(shù)QuEChERS方法凈化，液相色譜四級桿飛行時間串聯(lián)質(zhì)譜法測定，標(biāo)準(zhǔn)加入法定量。4試劑和材料4.1除另有說明外，所用試劑均為分析純，水為符合GB/T6682規(guī)定的一級水。4.2乙腈：色譜純。4.3丙酮：色譜純。4.6乙酸銨：分析純。4.7氯化鈉：分析純。4.8無水硫酸鎂（MgSO4）：分析純。4.9石墨化炭黑（GCB）。4.10十八烷基硅烷(ODS)鍵合相吸附劑（C18）：粒徑40μm～60μm。4.11檸檬酸鈉：分析純。4.12檸檬酸二鈉倍半水合物：分析純。4.13基質(zhì)分散固相萃取劑：900mgMgSO4、150mgN-丙基乙二胺（PSA）和120mg石墨化炭黑（GCB）。4.14農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：純度≥95參見附錄A。4.15標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液——分別稱取適量（精確至0.1mg）各種農(nóng)藥化學(xué)污染物標(biāo)準(zhǔn)物分別于10mL容量瓶中，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)物的溶解性選擇甲醇、乙腈、丙酮等溶劑溶解并定容至刻度，標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液避光0-4℃保存，可使用一年。2DB34/T2820—20174.16混合標(biāo)準(zhǔn)溶液（混合標(biāo)準(zhǔn)溶液A、B、C、D和E）——按照農(nóng)藥的性質(zhì)和保留時間，將330種農(nóng)藥化學(xué)污染物分成五組。本標(biāo)準(zhǔn)對330種農(nóng)藥化學(xué)污染物的分組及其混合標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度參見附錄A?！鶕?jù)每種農(nóng)藥的分組、混合標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度及其標(biāo)準(zhǔn)儲備液的濃度，移取一定量的單個農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液于100mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度。混合標(biāo)準(zhǔn)溶液避光0-4℃保存，可使用一個月。5儀器和設(shè)備5.1液相色譜-四級桿飛行時間質(zhì)譜儀：配有電噴霧離子源(ESI)。5.2色譜柱：C18,3.5μm,100mm×2.1mm。5.3分析天平：感量0.1mg和0.01g。5.4勻漿機(jī)：轉(zhuǎn)速不低于20000r/min。5.5離心機(jī)：轉(zhuǎn)速不低于4500r/min。5.6氮吹濃縮儀。5.7渦旋混合器。5.8水平振蕩器。6試樣制備與保存在制樣的操作過程中，應(yīng)防止樣品污染或發(fā)生殘留物含量的變化。6.1試樣制備從原始樣品中取出有代表性樣品約500g，用組織搗碎機(jī)充分搗碎混勻，均分成兩份，分別裝入潔凈容器作為試樣，密封，并標(biāo)明標(biāo)記。6.2試樣保存將試樣置于-18℃以下冷凍避光保存。7分析步驟稱取10g（精確至0.01g）樣品于50mL離心管中，先加入10mL水，靜置30min，渦旋振蕩后加入10mL乙腈，13500r/min均質(zhì)提取1min，加入4.0gMgSO4、1.0gNaCl、1.0g檸檬酸鈉、0.5g檸檬酸二鈉倍半水合物，渦旋1min后，8000r/min離心5min，吸取5mL上清液于含有900mgMgSO4、150mgN-丙基乙二胺（PSA）和120mg石墨化炭黑（GCB）的凈化管中，渦旋1min后靜置，4000r/min離心5min，取上清于另一干凈試管中，在40℃水浴中氮氣吹干，用1mL乙腈+0.1％甲酸水（2+8，v/v）定容液溶解，過0.22μm濾膜，濾液供儀器測定。8測定8.1色譜條件液相色譜條件參考如下：DB34/T2820—20173a)色譜柱：SB-C18,3.5μm,100mm×2.1mm或相當(dāng)者；b)流動相：A為0.1％甲酸水（含0.5mmol的乙酸銨），B為乙腈；c)柱溫：40℃;d)進(jìn)樣量：10μL；e)流動相梯度洗脫條件見表1。表1流動相梯度洗脫條件A%B%01118.2質(zhì)譜條件質(zhì)譜參考條件如下：a)電噴霧電離正離子模式（ESI+）和負(fù)離子模式（ESI-）；b)毛細(xì)管電壓：4.0kV；c)干燥氣溫度：325℃;d)干燥氣流量：10L/min；e)鞘流氣溫度：325℃;f)鞘流氣流速：11L/min；g)霧化氣壓力：40psi；h)錐孔電壓：60V；i)碎裂電壓：140V。8.3定性測定以各化合物標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行質(zhì)譜掃描獲得330種目標(biāo)化合物的特征碎片離子和、保留時間等信息，計算各化合物的精確質(zhì)量數(shù)，建立基于精確質(zhì)量數(shù)、保留時間和質(zhì)譜圖信息的篩查列表，同時設(shè)置質(zhì)量數(shù)偏差、保留時間偏差范圍等判定標(biāo)準(zhǔn)，建立330種農(nóng)藥精確質(zhì)量數(shù)據(jù)庫。通過分子離子的精確質(zhì)量偏差、同位素分布、同位素比例和保留時間對農(nóng)藥殘留進(jìn)行定性測定。8.4定量測定按照液相色譜四級桿飛行時間串聯(lián)質(zhì)譜條件測定樣品和基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液?；|(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作液和待測液中檢測農(nóng)藥的響應(yīng)值應(yīng)在儀器線性響應(yīng)范圍內(nèi)。若響應(yīng)值超出線性范圍，應(yīng)用空白基質(zhì)樣液將其稀釋至線性范圍內(nèi)進(jìn)行定量測定。測定結(jié)果按公式（1）計算樣品中待測物的含量。8.5空白試驗DB34/T2820—20174除不加試樣外，按上述分析步驟進(jìn)行。9結(jié)果計算和表述按公式（1）計算試樣中農(nóng)藥殘留的含量，計算結(jié)果需扣除空白值。.....................................(1)Ci——試樣溶液中待測物的含量，單位為毫克每千克（mg/kgCx——標(biāo)準(zhǔn)溶液中被測組分的含量，單位為毫克每千克（mg/kgAx——標(biāo)樣的峰面積；Ai——待測樣品的出峰面積。10定量限、回收率本標(biāo)準(zhǔn)中330種農(nóng)藥的定量限參見附錄A；本標(biāo)準(zhǔn)的回收率數(shù)據(jù)參見附錄B。DB34/T2820—20175（資料性附錄）330種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)信息表A.1330種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)信息序號分組1CHNOA2CHClNOA3CHClNOPSA4CHNOA5CHNOPSA6CHNOA7CHINOA8CHNOPSA9CHNOACHBrClOPACHNOSACHNOACHOPSACHNOACHNOACHClNOACHNOSACHClNOACHClNOACHClNACHNOACHNOPSACHClNOACHClNOSACHOPSACHNOSACHCNOACHNOSACHNOPSACHCNOACHOPSADB34/T2820—20176序號分組CHFNOACHClFNOACHFNOACHClFNOACHClNOSACHClNOACHClFNOACHNOACHNOSACHNOACHNOACHNOAlCHNOSACHNOSACHNOSACHClNOACHClNOACHClNACHNOACHNOACHNOACHClNOACHNSACHClNOACHOPSACHClNOACHNACHNSACHClFNOSACHNOACHClNOACHClNOACHClNOACHClNACHClFNOACHNOPSADB34/T2820—20177序號分組CHNOPSACHNOBCHNOSBCHClNOBCHClNOPSBCHNSBCHNOBCHClNOBCHNBCHNOBCHNOSBCHNOPSBCHNOBCHClOPSBCHNOSBlCHClFNOBCHClNOPSBCHClNOSBCHO2BCHClNOSBCHClNOPBCHClNOBCHNOBCHNSBCHClNOBCHOPSBCHClNOBCHOPSBCHNOPSBCHNOBCHClNOBCHNOB酯CHClFNOBCHClFNOBCHFNOSBCHFNOBDB34/T2820—20178序號分組CHClFNOSBCHFNOBCHClNOBCHNOBCHOPSBCHNOBCHNOBCHNOPSBCHNOBCHNOSBCHClNOBCHNOPBCHClNOPBCHNOPSBCHFNOBCHNOPSBCHBrClOPSBCHClNOBCHOSBCHClNBCHClNOBCHClNOBCHNOBCHClNOBCHNOBCHNOBCHNOBCHOPBCHClOPBCHClNSBCHClNOSBCHNOSBCHNOPSBCHOPSBCHClOPBCHFNOBCHClNOBCHClNCCHOPSCDB34/T2820—20179序號分組CHClNOCCHBrNOCCHClFNOCCHNOCCHClOPCCHClNOSCCHClNOPSCCHClNOSCCHClFNOCCHClFNOSCCHNOSC威CHNOCCHNOSCCHNOPCCHNOCCHNSCCHNOPSCCHNOCCHOPSCCHF5NOSCCHClNOCCHClFNOCCHNOSCCHOPSCCHNOPSCCHNOCCHNOCCHClNOCCHClNOCCHNOCCHNOCCHOPSCCHFNOSCCHFNOSCCHClFNOCDB34/T2820—2017序號分組CHFNOCCHFNOCCHOPSCCHNOPSCCHClFNOCCHClOPCCHNOCCHClNOCCHNOCCHClNOCCHNOPSCCHNOPCCHOSCCHNOCCHNCCHClNOCCHNOPSCCHNOSCCHNOPCCHClNOCCHClNOCCHNOSCCHClNOPSCCHClNOCCHOCCHNOPSCCHNOCCCHClFNOCCHNCCHClNOCCHClNCCHNOCCHNOCCHClOCCHOPSCCHNOPSCCHClNOCDB34/T2820—2017序號分組CHNSDCHNOSDCHNOPSDCHClNOD酯CHNOSDCHClNODCHNOSDCHClNODCHCPDCHClNDCHNODCHNODCHNODCHClNODCHClNODCHNSDCHNOSDCHNOD靈CHNOSDCHNODCHFNODCHFNOSDlCHClNOSDCHNODlCHINOSDCHNODCHNODCHClNODCHOPSDCHNOPSDCHNOSDCHNODCHNODCHClNODCHNOSDDB34/T2820—2017序號分組CHOPDCHClNDCHNODCHOPSDCHOPSDCHNOPSDCHClNODCHNODCHNOSDCHNODCHClNOPSDCHNOSDCHNOPSDCHClNOSDCHNOPSDCHClNDCHFNOSiDCHOPSDCHOPSDCHClNODCHNOPSDCHNODCHNOSDCHNODCHCFNODCHFNOSDCHClNOSDCHNOSDCHNOSDCHNODCHClNODCHNSDCHNOSECHNOECHClNOECHClNECHNOEDB34/T2820—2017序號分組CHNOSECHNOSECHClNECHOPSE砜CHOPSECHNSECHClOPSECHClFNOSECHClNOECHNOECHNOPSECHNOSECHFNOECHNOSECHNECHOPSECHOPSECHClFNOECHClFNOECHFNSiECHNOSECHNOECHNOSECHClFNOECHClNOECHClNOSECHClNSECHClNOPSECHNOECHNOPSECHNOPSECHNOECHClNOSECHClNOECHClFNOEDB34/T2820—2017序號分組CHNOPSECHClNOSECHClNOECHFNOE隆CHFNOSECHClNOECHNOSECHClNOSEDB34/T2820—2017（資料性附錄）表B.1人參中添加水平分別為10μg/kg、20μg/kg、100μg/kg的330農(nóng)藥回收率和RSD值（n=6）%%%%%%123456789DB34/T2820—2017%%%%%%威DB34/T2820—2017%%%%%%DB34/T2820—2017%%%%%%DB34/T2820—2017%%%%%%DB34/T2820—2017%%%%%%DB34/T2820—2017%%%%%%DB34/T2820—2017%%%%%%DB34/T2820—2017%%%%%%DB34/T2820—2017表B.2枸杞中添加水平分別為10μg/kg、20μg/kg、100μg/kg的330農(nóng)藥回收率和RSD值（n=6）%%%%%%123456789DB34/T2820—2017%%%%%%DB34/T2820—2017%%%%%%DB34/T2820—2017%%%%%%DB34/T2820—2017%%%%%%DB34/T2820—2017%%%%%%DB34/T2820—2017%%%%%%DB34/T2820—2017%%%%%%DB34/T2820—2017%%%%%%DB34/T2820—2017表B.3川芎中添加水平分別為10μg/kg、20μg/kg、100μg/kg的330農(nóng)藥回收率和RSD值（n=6）%%%%%%123456789DB34/T2820—2017%%%%%%DB34/T2820—2017%%%%%%DB34/T2820—2017%%%%%%DB34/T2820—2017%%%%%%DB34/T2820—2017%%%%%%DB34/T2820—2017%%%%%%DB