唐山市中醫(yī)院蛋白電泳技術(shù)考核一、單項(xiàng)選擇題（每題2分，共20題）說明：每題只有一個正確答案。1.蛋白電泳技術(shù)中，最常用于分離血清蛋白質(zhì)的是哪種電泳方法？A.等電聚焦電泳B.聚丙烯酰胺凝膠電泳（PAGE）C.瓊脂糖凝膠電泳D.毛細(xì)管電泳2.血清蛋白質(zhì)電泳中，α1-球蛋白的泳動速度通常位于：A.最快位置B.次快位置C.中間位置D.最慢位置3.蛋白電泳結(jié)果中，出現(xiàn)異常條帶可能提示哪種情況？A.患者蛋白質(zhì)含量正常B.患者存在單克隆免疫球蛋白增高C.實(shí)驗(yàn)操作無異常D.電泳緩沖液配制正確4.聚丙烯酰胺凝膠電泳（PAGE）的主要優(yōu)勢是：A.分辨率低B.操作復(fù)雜C.分辨率較高，適用于復(fù)雜樣品分離D.成本過高5.蛋白電泳前，血清樣品需要預(yù)處理，以下哪項(xiàng)是錯誤的？A.離心去除脂血B.煮沸變性蛋白質(zhì)C.加入抗凝劑防止凝固D.直接上樣無需處理6.血清蛋白質(zhì)電泳中，β-球蛋白的相對分子質(zhì)量范圍約是：A.5萬-7萬道爾頓B.1萬-3萬道爾頓C.20萬-30萬道爾頓D.50萬-70萬道爾頓7.蛋白電泳后，染色常用的試劑是：A.蘇木精-伊紅（H&E）染色B.考馬斯亮藍(lán)G-250染色C.甲基藍(lán)染色D.硝酸銀染色8.等電聚焦電泳（IEF）的原理基于：A.蛋白質(zhì)分子大小差異B.蛋白質(zhì)電荷差異C.蛋白質(zhì)疏水性差異D.蛋白質(zhì)溶解度差異9.蛋白電泳結(jié)果中，γ-球蛋白的主要成分是：A.IgG、IgA、IgMB.IgE、IgDC.C3、C4補(bǔ)體蛋白D.α-1抗胰蛋白酶10.電泳過程中，凝膠溫度過高可能導(dǎo)致：A.蛋白質(zhì)泳動速度加快B.蛋白質(zhì)變性失活C.凝膠穩(wěn)定性增強(qiáng)D.分辨率提高二、多項(xiàng)選擇題（每題3分，共10題）說明：每題有多個正確答案，錯選、漏選均不得分。1.蛋白電泳技術(shù)的主要應(yīng)用包括：A.肝功能檢測B.腎功能檢測C.多發(fā)性骨髓瘤篩查D.血型鑒定2.影響蛋白電泳結(jié)果的因素有：A.電泳緩沖液pH值B.凝膠濃度C.電壓設(shè)置D.樣品前處理方法3.血清蛋白質(zhì)電泳圖譜中，常見的異常模式包括：A.M蛋白峰增高B.α1-球蛋白減少C.β-球蛋白增多D.白/球蛋白比例倒置4.蛋白電泳前的樣品準(zhǔn)備步驟包括：A.離心去除黃疸或脂血B.加入還原劑使蛋白質(zhì)變性C.調(diào)節(jié)pH值至等電點(diǎn)附近D.加入防腐劑防止腐敗5.聚丙烯酰胺凝膠電泳（PAGE）的優(yōu)點(diǎn)是：A.分辨率高，適用于微量蛋白分析B.操作簡便，適合常規(guī)實(shí)驗(yàn)室C.可通過SDS使蛋白質(zhì)變性，按分子量分離D.成本低廉，適合大批量檢測6.蛋白電泳后，定量的常用方法有：A.比色法（如考馬斯亮藍(lán)染色后光度測定）B.顯色法（如銀染后肉眼觀察）C.電腦圖像分析系統(tǒng)D.免疫印跡法（WesternBlot）7.等電聚焦電泳（IEF）的適用范圍包括：A.分離等電點(diǎn)差異較大的蛋白質(zhì)B.分析復(fù)雜蛋白質(zhì)混合物C.用于酶學(xué)活性測定D.定量分析低豐度蛋白8.蛋白電泳中，凝膠類型的選擇依據(jù)有：A.分離范圍（如瓊脂糖、聚丙烯酰胺）B.樣品濃度（如濃縮膠、分離膠）C.檢測需求（如染色法、熒光法）D.電泳時間（長程或短程電泳）9.血清蛋白質(zhì)電泳圖譜中，正常成人各組分比例大致為：A.白蛋白占50%-60%B.α1-球蛋白占5%-10%C.α2-球蛋白占5%-10%D.β-球蛋白占10%-15%E.γ-球蛋白占15%-25%10.蛋白電泳操作中，需注意的細(xì)節(jié)包括：A.預(yù)冷凝膠和電泳槽B.檢查電極連接是否正確C.上樣量需標(biāo)準(zhǔn)化D.電泳結(jié)束后立即染色三、判斷題（每題2分，共20題）說明：對的打“√”，錯的打“×”。1.血清蛋白質(zhì)電泳圖譜中，白蛋白泳動速度最快。（√）2.蛋白電泳前無需離心，直接上樣即可。（×）3.聚丙烯酰胺凝膠電泳（PAGE）適用于高濃度樣品分離。（×）4.等電聚焦電泳（IEF）基于蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)差異分離。（√）5.蛋白電泳結(jié)果中，M蛋白位于γ-球蛋白區(qū)域。（×）6.電泳緩沖液pH值越高，蛋白質(zhì)泳動速度越快。（√）7.血清蛋白質(zhì)電泳可區(qū)分IgG、IgA、IgM等免疫球蛋白。（√）8.蛋白電泳后，染色時間越長，結(jié)果越清晰。（×）9.瓊脂糖凝膠電泳適用于分離大分子蛋白質(zhì)。（×）10.蛋白電泳圖譜中，α1-球蛋白位于α2-球蛋白之前。（√）11.電泳過程中，凝膠溫度控制在15-25℃即可。（×）12.蛋白電泳可用于篩查肝功能異常。（√）13.蛋白電泳前需加入抗凝劑，防止樣品凝固。（×）14.聚丙烯酰胺凝膠電泳（PAGE）分辨率高于瓊脂糖凝膠。（√）15.血清蛋白質(zhì)電泳圖譜中，β-球蛋白泳動速度介于α1和α2之間。（×）16.蛋白電泳后，白/球蛋白比例正常為1.5-2.5。（√）17.等電聚焦電泳（IEF）適用于分離堿性蛋白。（×）18.電泳緩沖液電導(dǎo)率過高會影響泳動速度。（√）19.蛋白電泳結(jié)果中，異常條帶需結(jié)合臨床診斷。（√）20.蛋白電泳操作無需嚴(yán)格遵守標(biāo)準(zhǔn)化流程。（×）四、簡答題（每題5分，共4題）說明：需簡明扼要地回答問題。1.簡述血清蛋白質(zhì)電泳圖譜中各組分的主要成分及臨床意義。答案：-白蛋白（ALB）：占50%-60%，反映肝合成功能及營養(yǎng)不良；-α1-球蛋白：占5%-10%，含α1-抗胰蛋白酶等，與感染、炎癥相關(guān)；-α2-球蛋白：占5%-10%，含銅藍(lán)蛋白等，反映肝功能及代謝；-β-球蛋白：占10%-15%，含IgM、C3補(bǔ)體等，與免疫及腎功能相關(guān)；-γ-球蛋白：占15%-25%，主要為免疫球蛋白（IgG、IgA、IgM），反映免疫功能。2.簡述聚丙烯酰胺凝膠電泳（PAGE）的操作要點(diǎn)。答案：-凝膠配制：選擇合適濃度的分離膠（如5%-12%）；-樣品處理：煮沸變性（SDS）或直接上樣（非變性）；-電泳條件：控制電壓（100-200V）和時間（1-4小時）；-染色定量化：考馬斯亮藍(lán)染色后用光度計分析。3.簡述蛋白電泳中，如何判斷實(shí)驗(yàn)結(jié)果異常。答案：-出現(xiàn)M蛋白峰（多發(fā)性骨髓瘤）；-白/球蛋白比例倒置（肝功能異常）；-異常條帶或蛋白條帶缺失（感染、營養(yǎng)不良）；-電泳圖譜模糊或泳動速度異常（緩沖液問題或操作失誤）。4.簡述等電聚焦電泳（IEF）的原理及優(yōu)勢。答案：-原理：利用蛋白質(zhì)在pH梯度凝膠中按等電點(diǎn)差異分離；-優(yōu)勢：分辨率高，適用于復(fù)雜混合物分析，特別適合堿性或酸性蛋白分離。五、論述題（每題10分，共2題）說明：需系統(tǒng)、完整地回答問題。1.結(jié)合唐山市中醫(yī)院臨床需求，論述蛋白電泳技術(shù)在肝病和腎病的應(yīng)用價值。答案：-肝病應(yīng)用：-白蛋白降低：反映肝合成功能減退（如肝硬化、營養(yǎng)不良）；-γ-球蛋白增高：提示慢性肝炎或自身免疫性肝??；-M蛋白：協(xié)助診斷原發(fā)性硬化性膽管炎（PSC）。-腎病應(yīng)用：-β-球蛋白增高：提示膜性腎病或糖尿病腎?。?α1-球蛋白增高：與急性腎損傷相關(guān)；-微量白蛋白尿：早期糖尿病腎病篩查指標(biāo)。-臨床意義：蛋白電泳可輔助診斷肝病、腎病，并動態(tài)監(jiān)測病情變化。2.論述蛋白電泳技術(shù)操作中，如何避免常見誤差并提高結(jié)果可靠性。答案：-樣品前處理：離心去除脂血，避免黃疸干擾；-凝膠制備：嚴(yán)格控制濃度和pH梯度，確保分離效果；-電泳條件：穩(wěn)定電壓、溫度，防止過熱或過冷；-標(biāo)準(zhǔn)化操作：上樣量一致，染色時間標(biāo)準(zhǔn)化；-質(zhì)量控制：使用標(biāo)準(zhǔn)品校準(zhǔn)，定期驗(yàn)證儀器；-結(jié)果分析：結(jié)合臨床數(shù)據(jù)綜合判斷，避免誤診。答案與解析一、單項(xiàng)選擇題答案1.B2.C3.B4.C5.B6.A7.B8.B9.A10.B二、多項(xiàng)選擇題答案1.ABCD2.ABCD3.ABD4.ABD5.ABC6.AC7.AB8.ABCD9.ABCDE10.ABCD三、判斷題答案1.√2.×3.×4.√5.×6.