2025兒童醫(yī)院免疫熒光技術(shù)考核一、單選題（共10題，每題2分，合計(jì)20分）1.免疫熒光技術(shù)中，常用的熒光素標(biāo)記抗體不包括以下哪一種？A.異硫氰酸熒光素（FITC）B.藻紅蛋白（TRITC）C.堿性磷酸酶（AP）D.熒光素二抗（AF488）2.在兒童醫(yī)院進(jìn)行免疫熒光檢測(cè)時(shí)，以下哪種方法不屬于間接免疫熒光法？A.直接法B.間接法C.雙標(biāo)記法D.苂光偏振法3.觀(guān)察兒童自身免疫性肝病時(shí)，免疫熒光技術(shù)最常檢測(cè)的抗體是？A.ANAB.ASMAC.LKM-1D.RF4.免疫熒光技術(shù)在兒童川崎病診斷中，主要檢測(cè)的抗體是？A.EBV-VCAIgMB.CRPC.ASOD.α-平滑肌肌動(dòng)蛋白（α-SMA）5.免疫熒光顯微鏡下，兒童腎病綜合征患者腎小球的典型熒光模式是？A.節(jié)段性顆粒樣熒光B.彌漫性顆粒樣熒光C.彌漫性線(xiàn)狀熒光D.節(jié)段性線(xiàn)狀熒光6.兒童系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）中，抗雙鏈DNA抗體最常用的檢測(cè)方法是？A.ELISAB.免疫熒光法C.WesternBlotD.流式細(xì)胞術(shù)7.免疫熒光技術(shù)中，以下哪種熒光顯微鏡光源最常用于觀(guān)察綠色熒光信號(hào)？A.激光光源B.氙燈C.LED光源D.鹵素?zé)?.在兒童醫(yī)院，免疫熒光技術(shù)用于檢測(cè)兒童病毒性心肌炎時(shí)，最常檢測(cè)的病毒抗體是？A.CoxsackieB病毒抗體B.HCV抗體C.HIV抗體D.HBsAg9.免疫熒光技術(shù)中，以下哪種試劑用于封閉非特異性結(jié)合位點(diǎn)？A.胰蛋白酶B.甘氨酸C.牛血清白蛋白（BSA）D.山羊血清10.兒童甲狀腺功能異常時(shí)，免疫熒光技術(shù)常用于檢測(cè)的抗體是？A.TPOAbB.TgAbC.TRAbD.以上都是二、多選題（共10題，每題3分，合計(jì)30分）1.免疫熒光技術(shù)操作中，以下哪些步驟屬于標(biāo)本制備過(guò)程？A.固定B.封閉C.免疫染色D.脫水2.兒童自身免疫性肝病中，免疫熒光技術(shù)可檢測(cè)的抗體包括？A.LKM-1B.AMA-M2C.ANAD.IgG43.免疫熒光技術(shù)在兒童腎病綜合征中的應(yīng)用場(chǎng)景包括？A.檢測(cè)GBM抗體B.評(píng)估腎小管損傷C.診斷IgA腎病D.檢測(cè)系膜區(qū)免疫沉積4.兒童川崎病免疫熒光檢測(cè)中，以下哪些指標(biāo)具有診斷意義？A.動(dòng)脈壁免疫沉積B.肌肉組織免疫染色C.心肌細(xì)胞抗體檢測(cè)D.血管內(nèi)皮細(xì)胞抗體5.免疫熒光技術(shù)中，以下哪些光源可用于激發(fā)熒光信號(hào)？A.激光B.鹵素?zé)鬋.LEDD.氙燈6.兒童系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）免疫熒光檢測(cè)中，以下哪些抗體可導(dǎo)致核抗原熒光？A.ANAB.dsDNA抗體C.Ro/SSA抗體D.Sm抗體7.免疫熒光技術(shù)在兒童病毒性心肌炎中的應(yīng)用包括？A.檢測(cè)病毒包膜蛋白B.評(píng)估心肌細(xì)胞損傷C.檢測(cè)宿主免疫反應(yīng)D.定位病毒感染部位8.免疫熒光技術(shù)操作中，以下哪些試劑屬于封閉劑？A.BSAB.非特異性抗體C.山羊血清D.甘氨酸9.兒童甲狀腺功能異常時(shí)，免疫熒光技術(shù)可檢測(cè)的抗體包括？A.TPOAbB.TgAbC.TRAbD.TSH受體抗體10.免疫熒光技術(shù)在兒童風(fēng)濕免疫性疾病中的應(yīng)用包括？A.檢測(cè)關(guān)節(jié)滑膜免疫沉積B.評(píng)估血管炎C.診斷皮肌炎D.檢測(cè)神經(jīng)肌肉抗體三、判斷題（共10題，每題1分，合計(jì)10分）1.免疫熒光技術(shù)只能檢測(cè)細(xì)胞表面抗原，無(wú)法檢測(cè)組織內(nèi)的可溶性抗原。（×）2.兒童川崎病中，免疫熒光檢測(cè)主要觀(guān)察主動(dòng)脈弓血管壁的免疫沉積。（√）3.免疫熒光顯微鏡下，兒童系統(tǒng)性紅斑狼瘡的核熒光模式為均質(zhì)型時(shí)，提示病情較嚴(yán)重。（√）4.免疫熒光技術(shù)中，熒光淬滅劑用于增強(qiáng)熒光信號(hào)亮度。（×）5.兒童腎病綜合征中，免疫熒光檢測(cè)的顆粒樣熒光主要位于腎小球基底膜。（√）6.免疫熒光技術(shù)操作中，PBS緩沖液主要用于清洗標(biāo)本。（√）7.兒童病毒性心肌炎中，免疫熒光檢測(cè)主要觀(guān)察心肌細(xì)胞漿內(nèi)的病毒包膜蛋白。（√）8.免疫熒光技術(shù)中，熒光顯微鏡的放大倍數(shù)越高，分辨率越高。（√）9.兒童甲狀腺功能異常時(shí)，免疫熒光檢測(cè)的抗體主要為T(mén)POAb和TgAb。（√）10.免疫熒光技術(shù)只能檢測(cè)IgG類(lèi)抗體，無(wú)法檢測(cè)其他免疫球蛋白。（×）四、簡(jiǎn)答題（共5題，每題5分，合計(jì)25分）1.簡(jiǎn)述免疫熒光技術(shù)在兒童系統(tǒng)性紅斑狼瘡診斷中的應(yīng)用及原理。2.兒童腎病綜合征免疫熒光檢測(cè)的典型結(jié)果及臨床意義是什么？3.免疫熒光技術(shù)操作中，封閉非特異性結(jié)合位點(diǎn)的目的是什么？4.兒童川崎病免疫熒光檢測(cè)的陽(yáng)性結(jié)果如何判讀？5.免疫熒光技術(shù)中，熒光淬滅劑的作用是什么？五、論述題（共2題，每題10分，合計(jì)20分）1.詳細(xì)描述免疫熒光技術(shù)在兒童自身免疫性肝病診斷中的應(yīng)用流程及注意事項(xiàng)。2.結(jié)合臨床案例，分析免疫熒光技術(shù)在兒童病毒性心肌炎診斷中的價(jià)值及局限性。答案與解析一、單選題答案1.C2.A3.C4.A5.D6.B7.C8.A9.C10.D解析：1.堿性磷酸酶（AP）不屬于熒光素標(biāo)記抗體，而是酶聯(lián)標(biāo)記物。3.LKM-1是兒童自身免疫性肝?。ㄈ鏟BC）的特異性抗體，免疫熒光技術(shù)常用于檢測(cè)。5.兒童腎病綜合征典型熒光模式為腎小球彌漫性線(xiàn)狀熒光（IgG沉積在GBM）。8.CoxsackieB病毒是兒童病毒性心肌炎的常見(jiàn)病原體，免疫熒光技術(shù)可檢測(cè)其包膜蛋白。二、多選題答案1.ABC2.ABC3.ABD4.AD5.ABCD6.ABCD7.ABCD8.AC9.ABCD10.ABCD解析：1.固定、封閉、免疫染色屬于標(biāo)本制備過(guò)程，脫水屬于脫水過(guò)程。3.免疫熒光檢測(cè)可評(píng)估GBM抗體、系膜區(qū)沉積，但I(xiàn)gA腎病主要用免疫熒光染色I(xiàn)gA沉積。6.ANA、dsDNA、Ro/SSA、Sm抗體均可導(dǎo)致SLE的核熒光。三、判斷題答案1.×2.√3.√4.×5.√6.√7.√8.√9.√10.×解析：1.免疫熒光可檢測(cè)可溶性抗原，如血清中的自身抗體。4.熒光淬滅劑用于降低非特異性熒光，增強(qiáng)信號(hào)。四、簡(jiǎn)答題答案1.免疫熒光技術(shù)在兒童SLE診斷中的應(yīng)用及原理免疫熒光技術(shù)通過(guò)檢測(cè)細(xì)胞核或細(xì)胞漿的自身抗體（如ANA、dsDNA），觀(guān)察熒光模式（均質(zhì)型、核仁型等），輔助SLE診斷。原理是抗體與熒光標(biāo)記的二抗結(jié)合后，在顯微鏡下呈現(xiàn)特定熒光信號(hào)，反映體內(nèi)自身免疫反應(yīng)強(qiáng)度。2.兒童腎病綜合征免疫熒光檢測(cè)的典型結(jié)果及臨床意義典型結(jié)果為彌漫性線(xiàn)狀熒光（GBM沉積）或顆粒樣熒光（系膜區(qū)沉積）。線(xiàn)狀熒光提示IgG在GBM沉積，與膜性腎病相關(guān)；顆粒樣熒光提示系膜區(qū)或毛細(xì)血管壁免疫復(fù)合物沉積，與IgA腎病相關(guān)。3.封閉非特異性結(jié)合位點(diǎn)的目的封閉非特異性結(jié)合位點(diǎn)（如細(xì)胞表面受體、內(nèi)源性蛋白）可防止抗體非特異性吸附，提高檢測(cè)特異性，避免假陽(yáng)性結(jié)果。常用封閉劑包括BSA、羊血清等。4.兒童川崎病免疫熒光檢測(cè)的陽(yáng)性結(jié)果判讀陽(yáng)性結(jié)果表現(xiàn)為主動(dòng)脈弓、冠狀動(dòng)脈等血管壁免疫沉積（IgG、IgM為主），提示血管炎。熒光強(qiáng)度越高，血管損傷越嚴(yán)重。5.熒光淬滅劑的作用熒光淬滅劑通過(guò)吸收或散射熒光信號(hào)，降低背景熒光，提高圖像對(duì)比度，使目標(biāo)信號(hào)更清晰。常用淬滅劑包括暗視野顯微鏡技術(shù)。五、論述題答案1.免疫熒光技術(shù)在兒童自身免疫性肝病診斷中的應(yīng)用流程及注意事項(xiàng)流程：①標(biāo)本制備（肝活檢固定、脫水、包埋）；②免疫熒光染色（標(biāo)記抗體如LKM-1、AMA-M2）；③顯微鏡觀(guān)察熒光模式；④結(jié)果判讀（如LKM-1呈肝腎小管著色，提示PBC）。注意事項(xiàng)：①避免交叉污染；②選擇特異性抗體；③控制染色時(shí)間；④注意熒光淬滅。2.免疫熒