ICS?11.100T/CSBTXXX—XXXX可經(jīng)輸血傳播感染病原體核酸篩查技術(shù)要求Requirementsfornucleicacidscreeningtechnologyfortransfusiontransmittedpathogens征求意見稿XXXX-XX-XX發(fā)布XXXX-XX-XX實(shí)施中國輸血協(xié)會(huì)發(fā)布T/CSBT可經(jīng)輸血傳播感染病原體核酸篩查技術(shù)要求范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了可經(jīng)輸血傳播感染病原體核酸篩查技術(shù)的關(guān)鍵影響因素和性能驗(yàn)證要求，包括核酸篩查試劑的性能要求以及應(yīng)用中常見問題分析。核酸篩查方法包含聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）技術(shù)與轉(zhuǎn)錄介導(dǎo)擴(kuò)增（TMA）技術(shù)。本標(biāo)準(zhǔn)適用于核酸篩查試劑的驗(yàn)證評(píng)價(jià)及日常檢測的質(zhì)量控制。規(guī)范性引用文件下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。EP17-A2EvaluationofDetectionCapabilityforClinicalLaboratoryMeasurementProcedures;ApprovedGuideline—SecondEdition術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。聚合酶鏈反應(yīng)polymerasechainreaction，PCR一種用于放大擴(kuò)增特定的DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù)。在特異性核酸模板、引物、DNA聚合酶、dNTP等必要條件存在時(shí)，通過變性、退火、延伸不同溫度變化的重復(fù)循環(huán)，使模板片段擴(kuò)增放大數(shù)百萬倍。轉(zhuǎn)錄介導(dǎo)的擴(kuò)增transcription-mediatedamplification，TMA一種目的核酸的等溫?cái)U(kuò)增方法，使用RNA轉(zhuǎn)錄（RNA聚合酶）和DNA合成（反轉(zhuǎn)錄），按照目標(biāo)核酸序列產(chǎn)生RNA擴(kuò)增子。RNA和DNA都可以使用TMA方法擴(kuò)增。信噪比signal-to-noiseratio,SNRorS/N核酸檢測過程中，目的核酸的靶信號(hào)與背景噪音信號(hào)的比值。通常PCR反應(yīng)的信噪比在2-5:1時(shí)，可以將靶信號(hào)與背景信號(hào)區(qū)分開。分析靈敏度analyticalsensitivity檢測系統(tǒng)或方法可檢測的最低分析物濃度。在核酸檢測中，分析靈敏度常用檢出限（LoD）表示。檢出限limitofdetection，LOD樣本中可被檢測到的分析物的最低濃度。注1：也被稱為“最低檢出限”或“最小可檢O濃度（劑量或量值）”，有時(shí)也代表“分析靈敏度”；注2：分析物可被穩(wěn)定檢出（通常在常規(guī)實(shí)驗(yàn)條件下，>=95%的樣本）的最低濃度。分析特異性analyticalspecificity在定性檢測中，分析特異性是指檢測方法檢測出特定核酸分子的能力。分析特異性通常取決于檢測系統(tǒng)的抗干擾能力。影響檢測結(jié)果的關(guān)鍵因素核酸純化方法對(duì)核酸純化方法的評(píng)估應(yīng)考慮以下幾個(gè)因素：每一步驟試劑殘留對(duì)結(jié)果的影響，提取過程發(fā)生污染的風(fēng)險(xiǎn)，提取反應(yīng)的體積，樣本混合過程的影響，樣本提取過程是否有分管提取最后合并的步驟，操作過程中溶液是否有氣泡產(chǎn)生（是否有表面活性劑），是否有高溫加熱步驟，設(shè)備移液的準(zhǔn)確性，移液步驟是否有滴液的現(xiàn)象。引物探針的設(shè)計(jì)和驗(yàn)證因?yàn)橐锏脑O(shè)計(jì)是產(chǎn)品研發(fā)過程的一個(gè)重要環(huán)節(jié)，上市后不能隨意變更，產(chǎn)品使用者只能對(duì)產(chǎn)品的引物和探針的設(shè)計(jì)是否合理進(jìn)行驗(yàn)證。對(duì)于PCR反應(yīng)體系，驗(yàn)證主要參數(shù)包括擴(kuò)增效率，常見亞型的檢出能力，檢出限時(shí)的信噪比。對(duì)于TMA反應(yīng)體系，驗(yàn)證參數(shù)主要包括不同濃度的信噪比，常見亞型的檢出能力。反應(yīng)抑制物和干擾物核酸擴(kuò)增的效率有賴于酶的活性和離子濃度等條件。影響核酸擴(kuò)增檢測效率（包括逆轉(zhuǎn)錄效率）的因素包括內(nèi)源性的，即樣本本身有抑制物；同時(shí)也包括外源性的，例如采血管里的某些成分、純化過程中引入的鰲合劑、表面活性劑、有機(jī)溶劑等。此外樣本裂解純化方法設(shè)計(jì)不合理或操作不當(dāng)，也有可能造成在樣本提取過程中核酸的降解，從而導(dǎo)致假陰性的結(jié)果。內(nèi)源性抑制因素內(nèi)源性抑制物是指樣本本身含有的可以抑制核酸擴(kuò)增過程中酶活性，降低擴(kuò)增效率的物質(zhì)。在血液樣本中最常見的是血清或血漿中人基因組DNA、血紅素及其代謝產(chǎn)物，因此在啟用核酸檢測系統(tǒng)前，應(yīng)對(duì)不同溶血程度的溶血樣本對(duì)檢測的干擾進(jìn)行評(píng)估。外源性抑制因素外源性抑制因素主要來自于兩個(gè)途徑：一是采血管；二是提取純化過程。采血管不能采用肝素作為抗凝劑，因?yàn)楦嗡厥荄NA聚合酶的抑制劑；但采用EDTA抗凝的采血管時(shí)，應(yīng)考慮到EDTA有鰲合反應(yīng)體系中的錳離子和鎂離子的作用，同時(shí)采血管可能還有其他干擾反應(yīng)的成分或采血管材料可能會(huì)對(duì)病原體有吸附作用，應(yīng)該在做檢測系統(tǒng)的確認(rèn)時(shí)，對(duì)采血管的適用性做出評(píng)估。純化過程有可能引入的包括試劑EDTA、去垢劑如十二烷基硫酸鹽(SDS)、異硫氰酸胍和鹽酸胍以及一些有機(jī)溶劑，核酸純化如果不能有效去除這些溶劑，勢(shì)必影響擴(kuò)增檢測效率。提取方法和操作因素有效的核酸提取純化方法應(yīng)該是使病毒充分裂解釋放出病毒核酸序列，同時(shí)又能保證該序列在后續(xù)步驟中不被降解或極少降解；最后得到純化核酸不應(yīng)含有內(nèi)源和外源性抑制物。檢測試劑適用設(shè)備對(duì)于使用開放設(shè)備的產(chǎn)品，對(duì)混樣和核酸純化的設(shè)備要進(jìn)行抗污染能力驗(yàn)證（即高濃度樣本和陰性樣本交錯(cuò)放置），對(duì)熒光PCR儀要定期進(jìn)行校準(zhǔn)，對(duì)可以使用不同型號(hào)熒光PCR儀的試劑，要對(duì)不同型號(hào)的熒光PCR儀的等效性進(jìn)行評(píng)估（算法，通道干擾等因素）。對(duì)于封閉式設(shè)備，要定期對(duì)設(shè)備內(nèi)部關(guān)鍵部位進(jìn)行污染監(jiān)測，也可定期做交叉污染驗(yàn)證。檢測耗材對(duì)結(jié)果的影響耗材（吸頭，深孔板，PCR反應(yīng)板，封口膜等）對(duì)核酸篩查產(chǎn)品的結(jié)果重復(fù)性影響很大。使用非指定耗材，應(yīng)對(duì)耗材進(jìn)行評(píng)估測試（靈敏度，重復(fù)性，抑制物，批間差），可由試劑生產(chǎn)廠家或耗材生產(chǎn)廠家提供評(píng)估報(bào)告或提供評(píng)估檢測方法（不能采用抽檢的方式來測試耗材）。核酸檢測試劑性能產(chǎn)品基本性能指標(biāo)產(chǎn)品基本性能指標(biāo)應(yīng)由產(chǎn)品生產(chǎn)方建立并驗(yàn)證，將數(shù)據(jù)提供給使用方。應(yīng)驗(yàn)證的指標(biāo)主要包括：分析靈敏度產(chǎn)品試劑盒說明書中或補(bǔ)充材料中應(yīng)提供基于國際標(biāo)準(zhǔn)品或國際標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)定的標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行的建立分析靈敏度的方案，包括陽性樣本的來源，濃度稀釋梯度的信息，以及最終的針對(duì)每個(gè)靶標(biāo)95%檢出最低檢出限（LOD95%）的均值及95%置信區(qū)間。建議選擇濃度梯度時(shí)應(yīng)參考EP17中的要求（附錄A）。基因型/亞型的分析靈敏度和檢出限試劑說明書中或補(bǔ)充材料中應(yīng)提供可覆蓋的基因型/亞型，并提供相應(yīng)的驗(yàn)證數(shù)據(jù)（我國主要的病毒基因型/亞型，表1）。我國主要的HBV/HCV/HIV基因型/亞型HBVHCVHIV-1M組B1bCRF07_BCC2aCRF01_AEC/D3aCRF08_BCD3bB’6aB1aBC早期檢出能力試劑說明書中或補(bǔ)充材料中應(yīng)提供該產(chǎn)品基于血清轉(zhuǎn)換盤的針對(duì)早期感染檢出能力的評(píng)估。特異性1）潛在的交叉反應(yīng)性和干擾性微生物產(chǎn)品試劑盒說明書中或補(bǔ)充材料中應(yīng)提供可能產(chǎn)生交叉反應(yīng)性的病原微生物（包括細(xì)菌，病毒等）清單以及驗(yàn)證的結(jié)果。2）內(nèi)源性干擾物質(zhì)產(chǎn)品試劑盒說明書中或補(bǔ)充材料中應(yīng)提供內(nèi)源性干擾物質(zhì)驗(yàn)證的數(shù)據(jù)，如過高水平的甘油三酯、血紅蛋白、非結(jié)合性膽紅素、白蛋白及人類基因組DNA等。3）外源性干擾物質(zhì)如果可能，產(chǎn)品試劑盒說明書中或補(bǔ)充材料宜提供外源性干擾物質(zhì)的驗(yàn)證數(shù)據(jù)。例如血液中有可能出現(xiàn)的高濃度撲熱息痛、乙酰水楊酸、抗壞血酸、阿伐他汀、布洛芬、枸櫞酸鈉等。核酸檢測系統(tǒng)性能驗(yàn)證血站血液檢測實(shí)驗(yàn)室在將核酸檢測系統(tǒng)在投入常規(guī)使用前，應(yīng)對(duì)其性能進(jìn)行驗(yàn)證，以確定檢測系統(tǒng)安裝調(diào)試到位，確保在血站實(shí)驗(yàn)室環(huán)境中運(yùn)行的性能與廠家聲明的性能一致。分析靈敏度驗(yàn)證用可溯源的質(zhì)控品或標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行驗(yàn)證。驗(yàn)證方案：選擇病毒濃度為3倍檢測試劑LOD濃度的樣本，在同一套檢測系統(tǒng)上，由同一個(gè)操作員每天進(jìn)行不少于6個(gè)重復(fù)檢測，連續(xù)三天進(jìn)行檢測，獲得不少于20個(gè)檢測結(jié)果。所有重復(fù)檢測結(jié)果均為反應(yīng)性，并滿足每一批試劑的質(zhì)量檢測報(bào)告、產(chǎn)品試劑盒說明書中或補(bǔ)充材料中有關(guān)3倍LOD的要求。內(nèi)源性干擾物質(zhì)驗(yàn)證收集產(chǎn)品說明書聲稱的不存在內(nèi)源性干擾的相應(yīng)濃度的血漿樣本（如過高水平的甘油三酯、血紅蛋白、非結(jié)合性膽紅素）并在不加入HBV、HCV和HIV和加入HBV、HCV和HIV至濃度為每種病毒LOD的3倍的情況下，使用試劑進(jìn)行檢測，檢測結(jié)果沒有顯著差異。重復(fù)性將陰性血漿和3倍最低檢出限濃度的HBV、HCV和HIV核酸陽性血漿各3份組成樣本盤，使用同一名操作人員在同一臺(tái)設(shè)備上，連續(xù)檢測5天，統(tǒng)計(jì)樣本的檢測情況。若實(shí)驗(yàn)室有多臺(tái)設(shè)備的，可由不同的操作人員各在一臺(tái)設(shè)備上實(shí)驗(yàn)，連續(xù)檢測5天，統(tǒng)計(jì)不同人員、不同設(shè)備下各濃度樣本的檢測情況。檢測結(jié)果應(yīng)均為反應(yīng)性，對(duì)信號(hào)值進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，其變異應(yīng)小于試劑批間變異。穩(wěn)定性驗(yàn)證包括實(shí)時(shí)穩(wěn)定性，開瓶穩(wěn)定性，模擬日常檢測過程試劑測試穩(wěn)定性。開瓶有效期內(nèi)檢測性能和日常檢測過程中處于不同排序樣本的檢測性能應(yīng)與產(chǎn)品生產(chǎn)方聲稱的性能相符。檢測樣本量較大的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)采用檢出限濃度的樣本進(jìn)行日常檢測可能的最大通量檢測，進(jìn)行加樣穩(wěn)定性評(píng)估。穩(wěn)定性應(yīng)確保檢測通量最大時(shí)達(dá)到要求的分析靈敏度。試劑批質(zhì)檢試劑批質(zhì)量報(bào)告試劑生產(chǎn)廠商應(yīng)提供每一批試劑的質(zhì)量檢測報(bào)告，至少應(yīng)包括包裝規(guī)格，外觀狀況以及分析靈敏度驗(yàn)證數(shù)據(jù)。其中分析靈敏度驗(yàn)證數(shù)據(jù)至少應(yīng)包括0.5倍、1倍LOD驗(yàn)證數(shù)據(jù)中的1個(gè)和2-3倍LOD的驗(yàn)證數(shù)據(jù)。PCR檢測方法應(yīng)提供CT值的變異范圍，TMA方法應(yīng)提供S/CO值的比值變異范圍。實(shí)驗(yàn)室試劑驗(yàn)收實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況，選擇適合的檢測試劑和檢測系統(tǒng)，除了試劑參數(shù)外，還要考慮場地環(huán)境、檢測量、人員、實(shí)驗(yàn)室流程等因素。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)廠家說明書或補(bǔ)充材料中提供的技術(shù)參數(shù)來確認(rèn)驗(yàn)收方法和流程。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)對(duì)每個(gè)運(yùn)輸批次的試劑進(jìn)行驗(yàn)收。驗(yàn)收內(nèi)容應(yīng)包括外觀包裝的完整性、生產(chǎn)日期、效期、運(yùn)輸?shù)臏囟鹊龋贿€應(yīng)進(jìn)行至少包括陰性樣本、陽性樣本、室內(nèi)質(zhì)控品在內(nèi)的檢測實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)，以確保試劑的有效使用。驗(yàn)收的指標(biāo)還應(yīng)包括分析靈敏度以及室內(nèi)質(zhì)控檢測信號(hào)比值，信號(hào)比指標(biāo)變化應(yīng)控制在30%以內(nèi)或參考試劑生產(chǎn)廠商提供的技術(shù)參數(shù)。應(yīng)用常見問題結(jié)果分析對(duì)于封閉檢測體系，應(yīng)對(duì)內(nèi)標(biāo)和弱陽質(zhì)控品信號(hào)的變化進(jìn)行監(jiān)測。如果是開放式體系，則要考慮軟件的設(shè)定對(duì)結(jié)果的影響，同時(shí)還要考慮到是否用參比熒光或者背景熒光作為參照，消除光路和耗材對(duì)結(jié)果的影響。假陽性產(chǎn)生的原因及處理措施假陽性結(jié)果主要有三方面原因1）樣本間的交叉污染陽性樣本、陽性對(duì)照和陽性質(zhì)控都有可能成為交叉污染的污染源。由于交叉污染經(jīng)常是偶然發(fā)生的事件，發(fā)生后很難被發(fā)現(xiàn)。2）擴(kuò)增產(chǎn)物（擴(kuò)增子）的污染擴(kuò)增產(chǎn)物是很小的核酸片段，它們可以存在于空氣中，也可以附著在儀器或操作臺(tái)表面。3）非特異擴(kuò)增檢測系統(tǒng)也可能會(huì)出現(xiàn)非特異的擴(kuò)增，原因有可能是檢測體系本身的問題，如檢測系統(tǒng)不同熒光通道間的干擾，也可能是樣本中存在的干擾物質(zhì)造成。此外基線波動(dòng)，當(dāng)信號(hào)超過閾值時(shí)也會(huì)出現(xiàn)非特異反應(yīng)性，原因包括反應(yīng)體系未充分混勻、熒光探針質(zhì)量等。假陽性結(jié)果解決措施樣本交叉污染應(yīng)重新審核檢測過程。措施應(yīng)包括對(duì)開蓋、樣本匯集、加樣、核酸純化等環(huán)節(jié)進(jìn)行交叉污染風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估；在操作要求中應(yīng)該有避免上述污染產(chǎn)生的措施，包括陽性對(duì)照開蓋后應(yīng)更換手套、使用帶濾芯的吸頭等。發(fā)生擴(kuò)增產(chǎn)物污染，應(yīng)對(duì)污染區(qū)域用含氯消毒液進(jìn)行徹底消毒，連續(xù)做三次沉降和擦拭測試均合格后，方可以繼續(xù)進(jìn)行檢測。對(duì)于非特異擴(kuò)增應(yīng)分析來源，即樣本、試劑、設(shè)備等，然后采取相應(yīng)的解決措施。污染監(jiān)測方法樣本交叉污染監(jiān)測棉簽沾去離子水（無RNA酶和DNA酶）分別擦拭生物安全柜外延左、中、右及中央4個(gè)位置、樣本架隨機(jī)位置4個(gè)，開蓋機(jī)接觸采血管部位、樣本處理區(qū)冰箱門等，將棉簽浸泡于2mL陰性漿3min，旋渦震蕩混勻后進(jìn)行核酸檢測。確定出現(xiàn)樣本污染，暫停相關(guān)實(shí)驗(yàn)，對(duì)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行清潔。清潔完成后，重復(fù)上述監(jiān)測步驟，直至實(shí)驗(yàn)結(jié)果均呈陰性。氣溶膠污染監(jiān)測將裝有陰性血漿或去離子水（無RNA酶和DNA酶）的離心管敞口放置于試劑準(zhǔn)備區(qū)臺(tái)面、生物安全柜（開風(fēng)機(jī)）內(nèi)、樣本處理區(qū)實(shí)驗(yàn)臺(tái)面、核酸提取設(shè)備內(nèi)部、核酸擴(kuò)增儀放置的臺(tái)面等處。放置離心管包括兩種方式，一是在核酸檢測過程中放置，即動(dòng)態(tài)放置，一般放置6-8小時(shí)；二是靜態(tài)放置，即非檢測時(shí)間放置，一般不少于16個(gè)小時(shí)。將放置后的離心管旋渦震蕩混勻后進(jìn)行核酸檢測。確認(rèn)出現(xiàn)氣溶膠污染時(shí)，暫停相關(guān)實(shí)驗(yàn)，對(duì)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行清潔和/或通風(fēng)。重復(fù)上述監(jiān)測實(shí)驗(yàn)，直至實(shí)驗(yàn)結(jié)果呈陰性。

（規(guī)范性附錄）

分析靈敏度建立和驗(yàn)證的基本方案根據(jù)EP17的建議，產(chǎn)品生產(chǎn)方建立分析靈敏度的實(shí)驗(yàn)方案至少應(yīng)包括：1）2個(gè)批號(hào)試劑；2）1套檢測系統(tǒng)；3）預(yù)期LOD值附近的4個(gè)低濃度水平樣本(0.25倍LOD,0.5倍LOD,1倍LOD,2倍LOD,4倍LOD中的至少4個(gè))4）實(shí)驗(yàn)應(yīng)至少在不同的3天進(jìn)行；5）樣本在每套檢測系統(tǒng)中，每天使用每個(gè)批號(hào)的試劑重復(fù)檢測2次；6）最終整個(gè)實(shí)驗(yàn)應(yīng)獲得至少20個(gè)分析靈敏度水平的重復(fù)值。評(píng)估時(shí)也可評(píng)估影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的因素后，在基本實(shí)驗(yàn)方案的基礎(chǔ)上，增加更多的潛在影響因素（如操作人員、試劑開瓶時(shí)間、儀器維護(hù)等），以增加重復(fù)檢測次數(shù)，獲得更多的檢測結(jié)果，建立客觀的性能驗(yàn)證方案，準(zhǔn)確進(jìn)行分析靈敏度驗(yàn)證。實(shí)驗(yàn)結(jié)果可通過計(jì)算的檢出率來判斷性能驗(yàn)證是否通過。檢出率，即檢出結(jié)果與預(yù)計(jì)結(jié)果一致的樣本個(gè)數(shù)占總樣本數(shù)的比值。檢出率應(yīng)達(dá)到相應(yīng)水平的臨界值。檢出率的臨界值與重復(fù)檢測次數(shù)密切相關(guān)。通常，隨著實(shí)驗(yàn)次數(shù)的增加，檢出率臨界值呈上升趨勢(shì)。CLSI推薦的當(dāng)采用分析靈敏度及LOD95%濃度的樣本進(jìn)行重復(fù)檢測時(shí)，檢出率臨界值與重復(fù)檢測次數(shù)關(guān)系見表A.1。如果實(shí)驗(yàn)測得檢出率低于表中相應(yīng)的臨界值，即可判斷性能驗(yàn)證失敗，需要及時(shí)分析、查找影響結(jié)果的因素。檢出率臨界值與重復(fù)檢測次數(shù)關(guān)系實(shí)驗(yàn)檢測次數(shù)檢出比臨界值2085%3087%4088%5088%6090%7090%8090%9091%10091%15092%20092%25092%30093%40093%50093%100094%血液檢測實(shí)驗(yàn)室也可以根據(jù)自身情況，增加更多的評(píng)估因素，以獲得更多的檢測結(jié)果，最后通過Probit分析，建立實(shí)驗(yàn)室核酸檢測體系常規(guī)使用情況下的LOD和95%置信區(qū)間。參?考?文?獻(xiàn)[1]中華人民共和國衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì).《血站技術(shù)操作規(guī)程（2019版）》.2019年4月.[2]CLSI.MolecularDiagnosticMethodsforInfectiousDiseases;ApprovedGuideline—3rdEdition.CLSIdocumentMM03.Wayne,PA:ClinicalandLaboratoryStandardsInstitute;2015.[3]LiHM,WangJQ,WangR,etal.HepatitisBvirusgenotypesandgenomecharacteristicsinChina.WorldJGastroenterol,2015,21(21):6684-6697.[4]GuopingD,XiaoshanL,MusaTH,etal.TheNationwideDistributionandTrendsofHepatitisCVirusGenotypesinMainlandChina.JMedVirol,2019,91(3):401-410.[5]HeX,XingH,RuanY,etal.AcomprehensivemappingofHIV-1genotypesinvariousriskgroupsandregionsacrossChinabasedonanationwidemolecularepidemiologicsurvey.PLoSOne,2012,7(10):e47289.[6]中華人民共和國衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)醫(yī)政醫(yī)管局《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》第4版._________________________________《可經(jīng)輸血傳播感染病原體核酸篩查技術(shù)要求》編制說明任務(wù)來源與項(xiàng)目編號(hào)、各起草單位和起草人承擔(dān)的工作、起草過程等團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)《可經(jīng)輸血傳播感染病原體核酸篩查技術(shù)產(chǎn)品要求》（T/CSBT009—2019）于2018年5月24日經(jīng)中國輸血協(xié)會(huì)血液質(zhì)量專業(yè)委員會(huì)批準(zhǔn)立項(xiàng)，并于2019年4月12日正式發(fā)布和實(shí)施。北京醫(yī)院/國家衛(wèi)生健康委臨床檢驗(yàn)中心、北京市紅十字血液中心、河北省血液中心、深圳市血液中心和廣州血液中心共計(jì)5家單位承擔(dān)編寫工作。主要參與人員及其承擔(dān)的工作如下：姓名職稱職務(wù)專業(yè)單位任務(wù)分工王露楠研究員室主任臨床檢驗(yàn)北京醫(yī)院/國家衛(wèi)生健康委臨床檢驗(yàn)中心整體框架編寫常樂副研究員臨床檢驗(yàn)北京醫(yī)院/國家衛(wèi)生健康委臨床檢驗(yàn)中心適用范圍、規(guī)范性引用和術(shù)語定義葛紅衛(wèi)主任技師科主任臨床檢驗(yàn)北京市紅十字血液中心通用技術(shù)要求王素玲副主任技師臨床檢驗(yàn)河北省血液中心檢測性能要求鄭優(yōu)榮主任技師檢驗(yàn)部主任臨床檢驗(yàn)廣州血液中心通用技術(shù)要求曾勁峰主任技師科主任醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)深圳市血液中心性能驗(yàn)證方法黃力勤副主任技師臨床檢驗(yàn)臨床檢驗(yàn)北京市紅十字血液中心性能驗(yàn)證方法鄭欣主管技師細(xì)胞生物學(xué)深圳市血液中心性能驗(yàn)證方法根據(jù)《中國輸血協(xié)會(huì)團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)管理辦法（2019）》規(guī)定，2023年11月，經(jīng)輸血傳播疾病專業(yè)委員會(huì)組織專家評(píng)審。2024年8月，北京醫(yī)院/國家衛(wèi)生健康委臨床檢驗(yàn)中心牽頭承擔(dān)該標(biāo)準(zhǔn)的修訂工作，編寫組成員充分考慮專家評(píng)審意見結(jié)合現(xiàn)實(shí)情況對(duì)該標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了修訂。二、與相關(guān)規(guī)范性文件和其他標(biāo)準(zhǔn)的關(guān)系本標(biāo)準(zhǔn)是《血站質(zhì)量管理規(guī)范》、《血站實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理規(guī)范》（以下簡稱“兩規(guī)”）、《血站技術(shù)操作規(guī)程》在血液檢測方面的補(bǔ)充。國家藥監(jiān)局分別于2013年5月7日頒布《乙型肝炎病毒脫氧核糖核酸定量檢測試劑注冊(cè)技術(shù)審查指導(dǎo)原則》和《人類免疫缺陷病毒檢測試劑臨床研究注冊(cè)技術(shù)審查指導(dǎo)原則》，2015年11月26日《丙型肝炎病毒核糖核酸測定試劑技術(shù)審查指導(dǎo)原則》，這幾個(gè)指導(dǎo)原則均是從技術(shù)審批的角度，范圍僅涵蓋臨床使用的核酸檢測試劑。因此目前針對(duì)核酸血液篩查試劑還沒有明確的技術(shù)要求，血站在選擇和使用核酸檢測試劑是缺乏依據(jù)，不能全面地考量核酸試劑的質(zhì)量，本團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)明確核酸血液篩查試劑的技術(shù)要求，更好地保證血液篩查質(zhì)量。三、國外相關(guān)規(guī)定和標(biāo)準(zhǔn)情況的比對(duì)說明本標(biāo)準(zhǔn)在編寫時(shí)部分參考美國臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(huì)（CLSI）MM03《MolecularDiagnosticMethodsforInfectiousDiseases》文件要求，并充分考慮了我國的國情和現(xiàn)有技術(shù)水平。MM03文件有樣本采集、運(yùn)輸和處理、假陰性結(jié)果原因和控制、核酸檢測方法和選擇、建立和評(píng)估分子診斷試驗(yàn)的性能特點(diǎn)、質(zhì)量保證、結(jié)果報(bào)告、生產(chǎn)廠家和臨床實(shí)驗(yàn)室的建議等部分。本標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)我國相關(guān)法規(guī)要求、血站實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有檢測技術(shù)和檢測項(xiàng)目，結(jié)合實(shí)驗(yàn)室特點(diǎn)，對(duì)實(shí)驗(yàn)室管理和技術(shù)人員關(guān)心的影響檢測結(jié)果的關(guān)鍵因素、核酸檢測試劑性能、試劑批質(zhì)檢及常見問題等方面進(jìn)行詳細(xì)闡述，并提供了可供參考的分析靈敏度建立和驗(yàn)證的基本方案，可供血站核酸檢測實(shí)驗(yàn)室直接使用。四、各項(xiàng)技術(shù)內(nèi)容的依據(jù)（一）影響檢測結(jié)果的關(guān)鍵因素本部分內(nèi)容本部分內(nèi)容參照CLSIMM03等文件，強(qiáng)調(diào)了影響檢測結(jié)果的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，包括核酸純化、引物探針、反應(yīng)抑制物和干擾物等，明確